动物细胞培养和核移植技术苗.ppt
《动物细胞培养和核移植技术苗.ppt》由会员分享,可在线阅读,更多相关《动物细胞培养和核移植技术苗.ppt(47页珍藏版)》请在淘文阁 - 分享文档赚钱的网站上搜索。
1、知识回顾植物细胞工程植物细胞工程植物细胞工程技术植物细胞工程技术植物细胞工程应用植物细胞工程应用植植物物组组织织培培养养植植物物体体细细胞胞杂杂交交植植物物繁繁殖殖的的新新途途径径作作物物新新品品种种的的培培育育细细细细胞胞胞胞产产产产物物物物的的的的工工工工厂厂厂厂化化化化生生生生产产产产动物细胞工程常用的技术手段:动物细胞培养技术、动物细胞核移植技术、动物细胞融合技术、生产单克隆抗体技术动物细胞培养技术动物细胞培养技术是其他动物细胞工程技术是其他动物细胞工程技术的基础。的基础。胰蛋白酶胰蛋白酶胶原蛋白酶胶原蛋白酶.培养条件动物动物组织组织分散成分散成单个细胞单个细胞细胞细胞悬液悬液培养培养
2、胰蛋白酶胰蛋白酶胶原蛋白酶胶原蛋白酶原理:原理:原理:原理:细胞增殖(有丝分裂)细胞增殖(有丝分裂)细胞增殖(有丝分裂)细胞增殖(有丝分裂)结果:结果:结果:结果:细胞群,细胞产物细胞群,细胞产物细胞群,细胞产物细胞群,细胞产物原代原代培养培养传代传代培养培养动物细胞培养过程胚胎的细胞或刚出生不久动物的组织胚胎的细胞或刚出生不久动物的组织刀锋课件动物胚胎或幼龄动动物胚胎或幼龄动物的组织、器官物的组织、器官胰蛋白酶胰蛋白酶剪碎剪碎单个细胞单个细胞加培养液加培养液制成制成细胞悬浮液细胞悬浮液原代培养原代培养细胞增殖细胞增殖部分细胞部分细胞无限传代无限传代去掉组织间去掉组织间蛋白蛋白动物细胞培养不能
3、动物细胞培养不能最终培养成生物体最终培养成生物体传代培养传代培养动物细胞培养动物细胞培养刀锋课件思考题思考题1、植物组织培养过程将组织分散成单个细胞的吗?、植物组织培养过程将组织分散成单个细胞的吗?、动物细胞培养过程将组织分散成单个细胞的吗?、动物细胞培养过程将组织分散成单个细胞的吗?、为何动物细胞培养过程将组织分散成单个细胞的呢?、为何动物细胞培养过程将组织分散成单个细胞的呢?、如何将动物组织分散成单个的细胞呢?、如何将动物组织分散成单个的细胞呢?、胰蛋白酶的作用是什么呢?由此可说明细胞间的物质、胰蛋白酶的作用是什么呢?由此可说明细胞间的物质是什么成份?是什么成份?没有没有是是成块的组织细胞
4、靠在一起成块的组织细胞靠在一起,彼此限制了细胞的生长和增殖彼此限制了细胞的生长和增殖先用剪刀剪碎先用剪刀剪碎,后用蛋白酶处理后用蛋白酶处理胰蛋白酶水解蛋白质胰蛋白酶水解蛋白质细胞间的成份是蛋白质细胞间的成份是蛋白质刀锋课件思考题思考题、细胞膜的主要成份是什么?、细胞膜的主要成份是什么?、胰蛋白酶能将细胞消化掉吗?、胰蛋白酶能将细胞消化掉吗?、既然胰蛋白酶能将细胞消化掉,那将动物组织分散、既然胰蛋白酶能将细胞消化掉,那将动物组织分散成单个细胞要注意什么问题呢?成单个细胞要注意什么问题呢?、能够用胃蛋白酶代替胰蛋白酶吗?为什么?、能够用胃蛋白酶代替胰蛋白酶吗?为什么?、动物细胞培养取材时,一般是取
5、胚胎组织或幼、动物细胞培养取材时,一般是取胚胎组织或幼龄动物的组织或器官,请解释原因?龄动物的组织或器官,请解释原因?蛋白质和磷脂蛋白质和磷脂能能注意时间的控制注意时间的控制不能,因为两的最适不能,因为两的最适PH不同,而正常组织细胞的生存环不同,而正常组织细胞的生存环境与胰蛋白酶的最适境与胰蛋白酶的最适PH较接近较接近胚胎组织或幼龄动物的组织或器官分裂、增殖旺盛胚胎组织或幼龄动物的组织或器官分裂、增殖旺盛刀锋课件思考题思考题11、动物细胞培养瓶内表面为何要光滑、无毒?、动物细胞培养瓶内表面为何要光滑、无毒?12、培养瓶中的细胞培养到什么时候就不再分裂、增殖?、培养瓶中的细胞培养到什么时候就不
6、再分裂、增殖?13、如此时细胞数量并未达到人们的需求,应该怎样办?、如此时细胞数量并未达到人们的需求,应该怎样办?易于培养细胞贴壁,进行生长增殖易于培养细胞贴壁,进行生长增殖当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时,细胞分裂当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时,细胞分裂就会停止分裂增殖,这种现象叫接触抑制。就会停止分裂增殖,这种现象叫接触抑制。将贴满细胞壁的细胞用胰蛋白酶处理,然后继续增殖。将贴满细胞壁的细胞用胰蛋白酶处理,然后继续增殖。这样的过程叫做传代培养这样的过程叫做传代培养刀锋课件思考题思考题14、如何理解原代培养和传代培养?、如何理解原代培养和传代培养?15、传代培养的细胞能一直传代下去吗?
7、、传代培养的细胞能一直传代下去吗?16、有些为何能一直传下去吗?、有些为何能一直传下去吗?17、动物细胞培养就是为了得到这些细胞吗?、动物细胞培养就是为了得到这些细胞吗?18、人类一般保存的是哪类细胞呢?为什么?、人类一般保存的是哪类细胞呢?为什么?上述过程中,在第一培养瓶中培养就是原代培养,上述过程中,在第一培养瓶中培养就是原代培养,之后转移到其它培养瓶中培养就是传代培养之后转移到其它培养瓶中培养就是传代培养不都能不都能发生突变,朝着癌细胞方向发展发生突变,朝着癌细胞方向发展不是不是保存保存10代以内的细胞,因为代以内的细胞,因为1050代部分细胞的代部分细胞的细胞核型可能发生变化,有少部分
8、还发生突变向癌细胞核型可能发生变化,有少部分还发生突变向癌细胞方向发展细胞方向发展刀锋课件动物动物胚胎胚胎或或幼龄幼龄动动物的组织、器官物的组织、器官胰蛋白酶胰蛋白酶剪碎剪碎单个细胞单个细胞加培养液加培养液制成制成细胞细胞悬浮悬浮液液原代培原代培养养细胞增殖细胞增殖部分细胞部分细胞无限传代无限传代去掉组织去掉组织间蛋白间蛋白动物细胞培养不能动物细胞培养不能最终培养成生物体最终培养成生物体传代培传代培养养刀锋课件请总结出动物细胞培养的定义请总结出动物细胞培养的定义动物细胞培养就是从动物机体内取出相关的组织,将它分散成单个细胞,然后,放在适宜的培养基中,让这些细胞生长和增殖。刀锋课件刀锋课件相互接
9、触相互接触接触抑制接触抑制单层单层胰蛋白酶胰蛋白酶衰老或死亡衰老或死亡不死性不死性降低降低减少减少刀锋课件活细胞的膜具有活细胞的膜具有选择透过性,大分子染料不能进入细胞,故不染色。选择透过性,大分子染料不能进入细胞,故不染色。中中低温新陈代谢新陈代谢酶抗原抗原刀锋课件思考题思考题多细胞动物和人体的细胞都生活在内环境中,根据你所学的知识,认为体培养细胞应该模拟内环境的哪些内容呢?刀锋课件1、无菌、无毒的环境、无菌、无毒的环境(添加一定量的抗生素,定期更换培养液)(添加一定量的抗生素,定期更换培养液)2、营养(、营养(葡萄糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微葡萄糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微葡萄
10、糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微葡萄糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素、维生素、血清、血浆等。合成培养基)量元素、维生素、血清、血浆等。合成培养基)量元素、维生素、血清、血浆等。合成培养基)量元素、维生素、血清、血浆等。合成培养基)保证细胞顺利的保证细胞顺利的生长增殖生长增殖培养条件:培养条件:刀锋课件动物细胞培养液的主要成分:动物细胞培养液的主要成分:葡萄糖葡萄糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素、维生素、微量元素、维生素、血清、血浆血清、血浆等。等。与植物培养基相比与植物培养基相比其特点是:其特点是:(1 1)液体培养基)液体培养基(2 2)含有血清
11、、血浆)含有血清、血浆动物体细胞大都生动物体细胞大都生活在活在液体液体的环境的环境培养条件:培养条件:刀锋课件3、温度和、温度和pH 36.5+(-)0.5度度4、气体环境:、气体环境:O2和和CO2(95%空气和空气和5%CO2)培养条件:培养条件:1、无菌、无毒的环境、无菌、无毒的环境(添加一定量的抗生素,定期更换培养液)(添加一定量的抗生素,定期更换培养液)2、营养(、营养(葡萄糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微葡萄糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素、维生素、血清、血浆等。合成培养基)量元素、维生素、血清、血浆等。合成培养基)刀锋课件思考题思考题动物细胞培养液的主要成分是什么?动物
12、细胞培养液的主要成分是什么?较植物组培培养基有何独特之处?较植物组培培养基有何独特之处?主要成分:主要成分:葡萄糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、葡萄糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素、维生素、血清、血浆等。微量元素、维生素、血清、血浆等。独特之处有:独特之处有:1、液体培养基、液体培养基 2、成分中有血清、血浆等、成分中有血清、血浆等刀锋课件获得细胞获得细胞 或细胞产物或细胞产物细胞的全能性细胞的全能性细胞数目增多细胞数目增多一般为植物体一般为植物体培养结果培养结果快速繁殖、培育快速繁殖、培育脱毒作物等脱毒作物等培养目的培养目的葡萄糖、动物血清葡萄糖、动物血清促生长因子促生长因子蔗糖、植
13、物激素蔗糖、植物激素培养基特有成分培养基特有成分液体培养基液体培养基固体培养基固体培养基培养基性质培养基性质细胞增殖细胞增殖原理原理动物细胞培养动物细胞培养植物组织培养植物组织培养比较项目比较项目植物细胞和动物细胞培养的比较植物细胞和动物细胞培养的比较.动物细胞培养技术的实际应用1、大量生产细胞或产物。如:病毒疫苗 干扰素 单克隆抗体 胰岛素2、给基因工程提供受体细胞。3、检测有毒物质及毒性。4、用于生理、病理、药理等方面 的研究,为治疗和预防疾病提 供理论依据。动物细胞培养动物细胞培养核移植技术核移植技术将动物的一个细胞的,移入一个已经去掉的细胞中,使其并发育成一个新的,这个新的胚胎最终发育
14、为动物个体。分类胚胎细胞核移植、体细胞核移植胚胎细胞核移植、体细胞核移植细胞核细胞核细胞核细胞核细胞核细胞核细胞核细胞核卵母卵母卵母卵母重组重组重组重组胚胎胚胎胚胎胚胎核移植技术母绵羊母绵羊A 乳腺细胞乳腺细胞(体细胞)(体细胞)母绵羊母绵羊B未受精的未受精的卵细胞卵细胞 母绵羊母绵羊C“多莉多莉”新的卵细胞发育成早期胚胎新的卵细胞发育成早期胚胎去核卵细胞去核卵细胞提取细胞核提取细胞核核移植核移植胚胎移植胚胎移植体细胞核移植技术克隆羊刀锋课件(M卵母细胞)卵母细胞)减数第二次分裂中期减数第二次分裂中期2.2.结合结合P48图图2-21,叙述克隆高产奶牛的培育过程。叙述克隆高产奶牛的培育过程。将
15、供体细胞注入去核卵母细胞将供体细胞注入去核卵母细胞核移植核移植胚胎移植胚胎移植供体细胞培养供体细胞培养胚胎移植胚胎移植胚胎移植胚胎移植胚胎发育胚胎发育胚胎发育胚胎发育供体体细胞供体体细胞供体体细胞供体体细胞细胞培养细胞培养细胞培养细胞培养体细胞群体细胞群体细胞群体细胞群细胞融合细胞融合细胞融合细胞融合细胞细胞细胞细胞胚胎胚胎胚胎胚胎代孕母体代孕母体代孕母体代孕母体生出克隆个体生出克隆个体生出克隆个体生出克隆个体卵巢卵母细胞卵巢卵母细胞卵巢卵母细胞卵巢卵母细胞(减减减减)去核去核去核去核无核卵母细胞无核卵母细胞无核卵母细胞无核卵母细胞体细胞核移植技术过程整个过程用了哪些技术?整个过程用了哪些技术
- 配套讲稿:
如PPT文件的首页显示word图标,表示该PPT已包含配套word讲稿。双击word图标可打开word文档。
- 特殊限制:
部分文档作品中含有的国旗、国徽等图片,仅作为作品整体效果示例展示,禁止商用。设计者仅对作品中独创性部分享有著作权。
- 关 键 词:
- 动物 细胞培养 移植 技术
限制150内