选三222动物细胞融合与单克隆抗体.ppt
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1、单克隆抗体等 动物细胞工程常用的技术动物细胞培养动物细胞核移植动物细胞融合是其他动物细胞工程技术的基础。是其他动物细胞工程技术的基础。是其他动物细胞工程技术的基础。是其他动物细胞工程技术的基础。提问:提问:v植物体细胞杂交技术过程是怎样的?植物体细胞杂交技术过程是怎样的?先用先用 去除两种植物去除两种植物细胞的细胞的 ,使之成为,使之成为 ,再用再用 诱导其融合成诱导其融合成 ,最后用最后用 的方法将其培育成新的的方法将其培育成新的 。纤维素酶、果胶酶纤维素酶、果胶酶 细胞壁细胞壁 原生质体原生质体 聚乙二醇(聚乙二醇(PEGPEG)杂种细胞杂种细胞 植物组织培养植物组织培养 植物体植物体 v
2、动植物细胞在结构上有什么区别?动植物细胞在结构上有什么区别?一一.动物细胞动物细胞融合融合 动物细胞融合,也称细胞杂交,是指两个动物细胞融合,也称细胞杂交,是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。1 1.概念概念P52P52结果:杂交单核细胞2.2.原理:细胞膜的流动性、细胞增殖原理:细胞膜的流动性、细胞增殖细胞细胞A A细胞细胞B B杂种细胞杂种细胞生物法:灭活的病毒生物法:灭活的病毒 (特有)(特有)物理法物理法化学法化学法3.3.过程:过程:离心振动电激离心振动电激聚乙二醇(聚乙二醇(PEG)灭活的病毒颗粒黏附于细胞表面灭活的病毒颗粒黏附于细胞
3、表面细胞膜被病毒颗粒穿通细胞膜被病毒颗粒穿通细胞膜连接细胞膜连接细胞融合,形成杂种细胞细胞融合,形成杂种细胞(细胞膜具有一定的流动性)(细胞膜具有一定的流动性)v为什么能用灭活的病毒促进动物细胞融合?为什么能用灭活的病毒促进动物细胞融合?P52动物细胞动物细胞A A动物细胞动物细胞B B诱导,融合诱导,融合2 2个个完整的完整的杂交细胞杂交细胞ABAB有丝分裂有丝分裂注意:动物细胞的融合也需要把注意:动物细胞的融合也需要把多个多个两种细胞放两种细胞放在一起,让它们随机融合后,再从中在一起,让它们随机融合后,再从中筛选筛选杂交细杂交细胞胞 灭活的病毒有到动物细胞融合的过程灭活的病毒有到动物细胞融
4、合的过程P52P52(膜融合、质融合)(膜融合、质融合)(核融合)(核融合)4.意义:意义:P52突破了有性杂交方法的局限,突破了有性杂交方法的局限,使远缘杂交成为可能使远缘杂交成为可能5.应用:应用:P52利用杂交瘤技术制备单克隆抗利用杂交瘤技术制备单克隆抗体体二二.单克隆抗体单克隆抗体v传统的抗体生产方法有什么缺陷?抗体从何传统的抗体生产方法有什么缺陷?抗体从何而来?而来?v浆细胞有什么特点?浆细胞有什么特点?特异性差、纯度低;特异性差、纯度低;产量低、反应不够灵敏产量低、反应不够灵敏 抗体抗体 抗原抗原 动物体内动物体内刺激刺激浆细胞浆细胞能能产生抗体产生抗体,但每个,但每个B B淋巴细
5、胞最终只淋巴细胞最终只分泌分泌一种一种特异性抗体特异性抗体二二.单克隆抗体单克隆抗体 用单个用单个 进行进行无性繁殖无性繁殖,也就是,也就是通过通过 形成形成 所产生所产生化学性质单一、化学性质单一、特异性强的特异性强的 ,即单克隆抗体。,即单克隆抗体。1.1.概念概念学案学案P42P42B B淋巴细胞淋巴细胞 克隆克隆 细胞系细胞系 抗体抗体 如何让如何让B B淋巴细胞无限增殖?淋巴细胞无限增殖?B淋巴细胞淋巴细胞产生抗体产生抗体骨髓瘤细胞骨髓瘤细胞能无限增殖能无限增殖细胞融合细胞融合杂交瘤细胞杂交瘤细胞思路:思路:2.单克隆抗体制备过程单克隆抗体制备过程 注射抗原注射抗原目的:获得目的:获
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