动物细胞融合和单克隆抗体.pptx

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1、白菜白菜白菜白菜甘蓝甘蓝甘蓝甘蓝白菜甘蓝白菜甘蓝白菜甘蓝白菜甘蓝“白菜甘蓝白菜甘蓝白菜甘蓝白菜甘蓝”同普通白菜相比，具有生同普通白菜相比，具有生同普通白菜相比，具有生同普通白菜相比，具有生长期短、耐热性强和易于贮藏等优点。长期短、耐热性强和易于贮藏等优点。长期短、耐热性强和易于贮藏等优点。长期短、耐热性强和易于贮藏等优点。旧知回顾：旧知回顾：1.通过观察图片、阅读文本，能够了解动物细胞融合的原理、过程和意义。2.通过图像分析，能够理解单克隆抗体制备的过程和应用学习目标：学习目标：动物细胞融合动物细胞融合请同学们阅读课本请同学们阅读课本P52动物细胞融合内容动物细胞融合内容小组讨论完成以下问题：

2、小组讨论完成以下问题：什么是什么是动物细胞融合？融合的动物细胞融合？融合的结果是什么结果是什么？它相当于植物体细胞杂交过程的哪一步？它相当于植物体细胞杂交过程的哪一步？它们的它们的过程、基本原理、诱导融合方法和过程、基本原理、诱导融合方法和意义是否相同？意义是否相同？动动物细胞融合过程物细胞融合过程什什么是灭活的病毒？为什么是灭活的病毒？为什么灭活的病毒能作诱导剂么灭活的病毒能作诱导剂？灭活的病毒灭活的病毒:指用指用物理学或化学手段使病毒物理学或化学手段使病毒失去感染能力，但并不破失去感染能力，但并不破坏病毒的抗原结构坏病毒的抗原结构灭活病毒诱导细胞融合的原灭活病毒诱导细胞融合的原理：病毒表面

3、含有糖蛋白和理：病毒表面含有糖蛋白和一些酶能够与细胞膜上的糖一些酶能够与细胞膜上的糖蛋白发生作用，使细胞互相蛋白发生作用，使细胞互相凝集，细胞膜上的蛋白质分凝集，细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布，细子和脂质分子重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合。胞膜打开，细胞发生融合。融融合合后细后细胞的类型？胞的类型？五五种种 A A 、B B 、AAAA、ABAB、BBBB动物动物细胞融合技术的意义和应用细胞融合技术的意义和应用打破生殖隔离，使远缘杂交成为可能；打破生殖隔离，使远缘杂交成为可能；研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物新研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物新 品种培育等的重要手段。品种培育等

4、的重要手段。重要用途：重要用途：制备单克隆抗体制备单克隆抗体比较项目比较项目植物体细胞杂交植物体细胞杂交动物细胞融合动物细胞融合原理原理促进融合方法促进融合方法用途用途植植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较物体细胞杂交和动物细胞融合的比较细胞膜的流动性细胞膜的流动性细胞的全能性细胞的全能性细胞膜的流动性细胞膜的流动性物理物理法法（电刺激等）（电刺激等）化学化学法法（聚乙二醇）（聚乙二醇）物理法（电刺激等）物理法（电刺激等）化学法化学法（聚乙二醇）聚乙二醇）生物法生物法(灭活的病毒灭活的病毒)获得获得杂种植株杂种植株制备单克隆抗体制备单克隆抗体家人不幸患上森林脑炎，目前病情危急，生命垂危，急需森林

5、脑炎康复者血清问题：什么是抗体？抗体由什么细胞产生？其化学本质是什么？与抗原作用的特点？主要分布在哪里？抗体的传统生产方法从血清中分离抗体该法制备抗体的特点：产量低、纯度低，且抗体的特异性差、灵敏度低。多种效应B细胞动物体内多种抗体抗原 读下面一段文字资料，找出单克隆抗体的概念 人们发现，在动物发生免疫反应的过程中，体内的B细胞可以产生多达百万种以上的特异性抗体，但是每个B细胞只分泌一种化学性质单一、特异性强的抗体。要想获得大量的单一抗体，必须用单个B细胞进行无性繁殖，即克隆。单克隆抗体的概念单:单个细胞 克隆:无性繁殖单克隆抗体:单个细胞克隆产生的化学性质单一特异性强的抗体那么，如何大量获得

6、化学性质单一、特异性强的抗体？（即单克隆抗体）在体外，一个B淋巴细胞是不可能无限增殖的。单克隆抗体 设设 计计 方方 案案单克隆抗体实验目的实验目的:制备单克隆抗体制备单克隆抗体.实验过程：实验过程：1975年英国科学家米尔斯坦和科勒的实验注射抗原B淋巴细胞骨髓瘤细胞融合多种杂交细胞选择性培养基 筛选1专一抗体检测克隆化单克隆抗体有限稀释法培养 筛选2注射抗原的目的是什么？获得产生相应获得产生相应抗体的浆细胞抗体的浆细胞注射抗原B淋巴细胞骨髓瘤细胞融合多种杂交细胞选择性培养基 筛选1专一抗体检测克隆化单克隆抗体有限稀释法培养 筛选2诱导细胞融合的手段有哪些？注射抗原B淋巴细胞骨髓瘤细胞融合多种

7、杂交细胞选择性培养基 筛选1专一抗体检测克隆化单克隆抗体有限稀释法培养 筛选2若细胞融合后，有几种融合情况？浆浆浆浆 、浆浆瘤瘤 、瘤瘤瘤瘤 （浆浆、瘤）、瘤）获得产生相应获得产生相应抗体的浆细胞抗体的浆细胞浆浆浆浆 、浆浆瘤瘤 、瘤瘤瘤瘤 （浆浆、瘤）、瘤）（一选）（一选）选选择性培养基：择性培养基：只有只有杂交瘤杂交瘤细胞细胞才能存才能存活活获得产生相应获得产生相应抗体的浆细胞抗体的浆细胞杂交瘤细胞特杂交瘤细胞特杂交瘤细胞特杂交瘤细胞特点：点：点：点：既能产生既能产生既能产生既能产生特异性抗体，特异性抗体，特异性抗体，特异性抗体，又能大量增殖。又能大量增殖。又能大量增殖。又能大量增殖。注射

8、抗原B淋巴细胞骨髓瘤细胞融合多种杂交细胞选择性培养基 筛选1专一抗体检测克隆化单克隆抗体有限稀释法培养 筛选2.第一次筛选出的杂交瘤细胞为何需进行克隆化培养和专一抗体检测？浆浆浆浆 、浆浆瘤瘤 、瘤瘤瘤瘤 （浆浆、瘤）、瘤）（一选）（一选）选选择性培养基：择性培养基：只有只有杂交瘤杂交瘤细胞细胞才能存才能存活活获得产生相应获得产生相应抗体的浆细胞抗体的浆细胞（二选）（二选）专一抗专一抗体检测：体检测：选出能选出能产生产生所需所需专一抗专一抗体的杂交瘤细胞体的杂交瘤细胞并克隆。并克隆。体外培养体外培养体外培养体外培养小鼠腹腔内培养小鼠腹腔内培养小鼠腹腔内培养小鼠腹腔内培养杂交瘤细胞特杂交瘤细胞特

9、杂交瘤细胞特杂交瘤细胞特点：点：点：点：既能产生既能产生既能产生既能产生特异性抗体，特异性抗体，特异性抗体，特异性抗体，又能大量增殖。又能大量增殖。又能大量增殖。又能大量增殖。单单克隆抗体的应用克隆抗体的应用（1 1）体外诊断试剂）体外诊断试剂最广泛应用最广泛应用准确、高效、简易、快速准确、高效、简易、快速 单克隆抗体最主要的优点：单克隆抗体最主要的优点：特异性强，灵敏度高，并能大量制备。特异性强，灵敏度高，并能大量制备。“生物导弹生物导弹”单克隆抗体药物单克隆抗体药物（2 2）治疗疾病和运载药物）治疗疾病和运载药物 主要用于主要用于癌症治疗癌症治疗，单克隆抗体作为载体，运，单克隆抗体作为载体

10、，运载抗癌药物，形成载抗癌药物，形成“生物导弹生物导弹”，准确杀伤癌变细胞。准确杀伤癌变细胞。导向单克隆抗体导向单克隆抗体弹头药物弹头药物两个过程两个过程动物细胞融合过程动物细胞融合过程单克隆抗体制备过程单克隆抗体制备过程三个三个“一一”一种诱导细胞融合的新方法一种诱导细胞融合的新方法 灭活病毒灭活病毒一种新细胞杂交瘤细胞一种新细胞杂交瘤细胞一个优势单克隆抗体特异性一个优势单克隆抗体特异性 强、灵敏度高、可大量制备的优势强、灵敏度高、可大量制备的优势课后作业 通过报刊、杂志、互联网或其他媒体搜集资料，了解细胞融合技术与单克隆抗体的新进展，就自己感兴趣的领域，自定选题，写一篇综述报告。参考选题：1、1984年诺贝尔生理学或医学奖2、单克隆抗体的种类；3、单克隆抗体与疾病诊断；4、生物导弹；