2013年最新高中生物精品教学课件：分解纤维素的微生物的分离(5)(人教版选修1).ppt

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1、酶酶筛选筛选操作操作结果结果延伸延伸分解纤维素的微生物的分离分解纤维素的微生物的分离酶酶筛选筛选操作操作结果结果延伸延伸资料一：土壤取样资料一：土壤取样1 1、取样的环境是怎样的，作出这种选择的、取样的环境是怎样的，作出这种选择的理由是什么？理由是什么？2 2、实例：树林中多年落叶形成的腐殖土，、实例：树林中多年落叶形成的腐殖土，多年积累的枯枝败叶等。多年积累的枯枝败叶等。3 3、讨论、讨论:如果找不到合适的环境，可以将滤如果找不到合适的环境，可以将滤纸埋在土壤中，将滤纸埋在土壤中有什么作纸埋在土壤中，将滤纸埋在土壤中有什么作用？你认为滤纸应该埋在土壤中多深？用？你认为滤纸应该埋在土壤中多深？

2、三、实验设计三、实验设计酶酶筛选筛选操作操作结果结果延伸延伸资料二：选择培养资料二：选择培养1 1、选择培养的目的、选择培养的目的2 2、制备选择培养基、制备选择培养基a a、旁栏中的配方是液体培养基还是固体培养基？为什么？、旁栏中的配方是液体培养基还是固体培养基？为什么？b b、这个培养基对微生物是否具有选择作用？如果具有，是、这个培养基对微生物是否具有选择作用？如果具有，是如何进行选择的？如何进行选择的？c c、你能否设计一个对照实验，说明选择培养基的作用、你能否设计一个对照实验，说明选择培养基的作用?有选择作用，能够产生纤维素酶的微生物才有选择作用，能够产生纤维素酶的微生物才能分解纤维素

3、作为碳源，并大量繁殖能分解纤维素作为碳源，并大量繁殖用牛肉膏蛋白胨培养基与之对照用牛肉膏蛋白胨培养基与之对照为什么选择培养能够为什么选择培养能够“浓缩浓缩”所需的微生物？所需的微生物？3 3、操作方法、操作方法液体培养基液体培养基酶酶筛选筛选操作操作结果结果延伸延伸方法一：方法一：先培养微生物，再加入刚果先培养微生物，再加入刚果红进行颜色反应红进行颜色反应方法二：方法二：在倒平板时就加入刚果红在倒平板时就加入刚果红资料三：刚果红染色法资料三：刚果红染色法酶酶筛选筛选操作操作结果结果延伸延伸土壤取样土壤取样选择培养选择培养梯度稀释梯度稀释将样品涂布到鉴别纤维将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上

4、素分解菌的培养基上挑选产生透明挑选产生透明圈的菌落圈的菌落三、实验设计三、实验设计酶酶筛选筛选操作操作结果结果延伸延伸思考：思考：这两种方法各有哪些优点与不足这两种方法各有哪些优点与不足 方法一方法一 缺点是操作烦琐，加入刚果红溶液会使菌落之间缺点是操作烦琐，加入刚果红溶液会使菌落之间发发 生混杂；优点是这样显示出的颜色反应基本上是纤维素分解生混杂；优点是这样显示出的颜色反应基本上是纤维素分解菌的作用菌的作用 方法二方法二 优点是操作简便，不存在菌落混杂问题优点是操作简便，不存在菌落混杂问题缺点一是由于培养基中还含有淀粉类物质，可以使能产生淀粉缺点一是由于培养基中还含有淀粉类物质，可以使能产生

5、淀粉酶的微生物出现假阳性反应；缺点二有些微生物具有降解色素酶的微生物出现假阳性反应；缺点二有些微生物具有降解色素的能力，它们在长时间培养过程中会降解刚果红，形成明显的的能力，它们在长时间培养过程中会降解刚果红，形成明显的透明圈，与纤维素分解菌不易区分透明圈，与纤维素分解菌不易区分酶酶筛选筛选操作操作结果结果延伸延伸土壤取样土壤取样取样的环境是怎样的，作出这种选择的理由是什么？取样的环境是怎样的，作出这种选择的理由是什么？选择纤维素丰富的环境，如树林中多选择纤维素丰富的环境，如树林中多年落叶形成的腐殖土，多年积累的枯枝败年落叶形成的腐殖土，多年积累的枯枝败叶等等。叶等等。生物与环境的互相依存关系

6、，在富含生物与环境的互相依存关系，在富含纤维素的环境中纤维素分解菌的含量相对纤维素的环境中纤维素分解菌的含量相对提高，因此从这种土壤中获得目的微生物提高，因此从这种土壤中获得目的微生物的几率要高于普通环境的几率要高于普通环境酶酶筛选筛选操作操作结果结果延伸延伸选择培养选择培养1、选择培养的目的：、选择培养的目的：增加纤维素分解菌的浓度，以确保能够从样品中分离到增加纤维素分解菌的浓度，以确保能够从样品中分离到所需要的微生物所需要的微生物2、制备选择培养基、制备选择培养基参照课本参照课本29页旁栏中的比例配置，回答下列问题页旁栏中的比例配置，回答下列问题a、旁栏中的配方是液体培养基还是固体培养基？

7、为什么？、旁栏中的配方是液体培养基还是固体培养基？为什么？b、这个培养基对微生物是否具有选择作用？如果具、这个培养基对微生物是否具有选择作用？如果具 有，是有，是如何进行选择的？如何进行选择的？c、你能否设计一个对照实验，说明选择培养基的作用、你能否设计一个对照实验，说明选择培养基的作用是液体培养基，原因是配方中无凝固剂是液体培养基，原因是配方中无凝固剂有选择作用，本配方中的碳源是纤维素，所以能有选择作用，本配方中的碳源是纤维素，所以能分解纤维素的分解纤维素的 微生物可以大量繁殖微生物可以大量繁殖用牛肉膏蛋白胨培养基与之对照用牛肉膏蛋白胨培养基与之对照酶酶筛选筛选操作操作结果结果延伸延伸3、操

8、作方法：、操作方法：将土样加入装有将土样加入装有30ml选择培养基的锥形瓶中，将锥选择培养基的锥形瓶中，将锥形瓶固定在摇床上，在一定温度下震荡培养形瓶固定在摇床上，在一定温度下震荡培养12天，天，直至培养液变浑浊。也可重复选择培养直至培养液变浑浊。也可重复选择培养思考：思考：为什么选择培养能够为什么选择培养能够“浓缩浓缩”所需的微生物？所需的微生物？在选择培养的条件下，可以使那些能够适应在选择培养的条件下，可以使那些能够适应这种营养条件的微生物得到迅速繁殖，而那这种营养条件的微生物得到迅速繁殖，而那些不适应这种营养条件的微生物的繁殖被抑些不适应这种营养条件的微生物的繁殖被抑制，因此可以起到制，

9、因此可以起到“浓缩浓缩”的作用的作用酶酶筛选筛选操作操作结果结果延伸延伸梯度稀释梯度稀释 按照课题按照课题1 的稀释操作方法，将选择培的稀释操作方法，将选择培养后的培养基进行等比稀释，稀释最大倍数养后的培养基进行等比稀释，稀释最大倍数到到106酶酶筛选筛选操作操作结果结果延伸延伸将样品涂布到鉴别纤维将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上素分解菌的培养基上1、制备培养基、制备培养基:参照旁栏中的比例参照旁栏中的比例2、涂布平板：将稀释度为、涂布平板：将稀释度为104106的菌悬液的菌悬液各取各取0.1ml涂布在培养基上，涂布在培养基上，30倒置培养倒置培养酶酶筛选筛选操作操作结果结果延伸延伸挑选

10、产生透挑选产生透明圈的菌落明圈的菌落 参照课本参照课本刚果红染色法刚果红染色法，挑选产生透，挑选产生透明圈的菌落，一般即为分解纤维素的菌落明圈的菌落，一般即为分解纤维素的菌落酶酶筛选筛选操作操作结果结果延伸延伸刚果红染色法刚果红染色法方法一：方法一：先培养微生物，再加入刚果先培养微生物，再加入刚果红进行颜色反应红进行颜色反应方法二：方法二：在倒平板时就加入刚果红在倒平板时就加入刚果红思考：思考：这两种方法各有哪些优点与不足这两种方法各有哪些优点与不足 方法一方法一 缺点是操作烦琐，加入刚果红溶液会使菌落之间缺点是操作烦琐，加入刚果红溶液会使菌落之间发发 生混杂；优点是这样显示出的颜色反应基本上

11、是纤维素分解生混杂；优点是这样显示出的颜色反应基本上是纤维素分解菌的作用菌的作用 方法二方法二 优点是操作简便，不存在菌落混杂问题优点是操作简便，不存在菌落混杂问题缺点一是由于培养基中还含有淀粉类物质，可以使能产生淀粉缺点一是由于培养基中还含有淀粉类物质，可以使能产生淀粉酶的微生物出现假阳性反应；缺点二有些微生物具有降解色素酶的微生物出现假阳性反应；缺点二有些微生物具有降解色素的能力，它们在长时间培养过程中会降解刚果红，形成明显的的能力，它们在长时间培养过程中会降解刚果红，形成明显的透明圈，与纤维素分解菌不易区分透明圈，与纤维素分解菌不易区分酶酶筛选筛选操作操作结果结果延伸延伸练一练练一练1、

12、在富含纤维素的环境中寻找纤维素分解菌，符合下列哪一生物、在富含纤维素的环境中寻找纤维素分解菌，符合下列哪一生物学观点？（学观点？（）A、生物结构与功能相适应的观点、生物结构与功能相适应的观点 B、生物结构与功能整体性观、生物结构与功能整体性观点点C、生物与环境相适应的观点、生物与环境相适应的观点 D、生物发展进化的观点、生物发展进化的观点2、从土壤中分离获得某种微生物的步骤是（、从土壤中分离获得某种微生物的步骤是（）土壤取样土壤取样 梯度稀释梯度稀释 选择培养选择培养 菌悬菌悬液涂布平板液涂布平板 挑选出单个菌落挑选出单个菌落A、B、C、D、3、有关选择培养正确的叙述是（、有关选择培养正确的叙

13、述是（）A、可以增加纤维素分解菌的浓度、可以增加纤维素分解菌的浓度B、可以减少纤维素分解菌的浓度、可以减少纤维素分解菌的浓度C、所用培养基是固体培养基、所用培养基是固体培养基D、所用培养基是平板培养基、所用培养基是平板培养基CBA酶酶筛选筛选操作操作结果结果延伸延伸四、结果分析与评价四、结果分析与评价（一）培养基的制作是否合格以及选择培养基是否一）培养基的制作是否合格以及选择培养基是否筛选出菌落筛选出菌落（二）分离的结果是否一致（二）分离的结果是否一致 设置对照，若对照的培养基在培养过程中无菌落生设置对照，若对照的培养基在培养过程中无菌落生长则说明培养基制作合格。如果观察到产生透明圈的菌长则说

14、明培养基制作合格。如果观察到产生透明圈的菌落，则说明可能获得了分解纤维素的微生物。落，则说明可能获得了分解纤维素的微生物。如果不同，分析产生不同结果的原因。如果不同，分析产生不同结果的原因。酶酶筛选筛选操作操作结果结果延伸延伸五、课题延伸五、课题延伸 本课题对分解纤维素的微生物进行了初步的本课题对分解纤维素的微生物进行了初步的筛选，但是这只是分离纯化的第一步。为确定得筛选，但是这只是分离纯化的第一步。为确定得到的是纤维素分解菌，还需要进行发酵产纤维素到的是纤维素分解菌，还需要进行发酵产纤维素酶的实验，纤维素酶的测定方法一般是对纤维素酶的实验，纤维素酶的测定方法一般是对纤维素酶分解滤纸等纤维素后

15、所产生的葡萄糖进行定量酶分解滤纸等纤维素后所产生的葡萄糖进行定量的测定。的测定。酶酶筛选筛选操作操作结果结果延伸延伸作业：作业：完成基础训练完成基础训练19-22页相关题目页相关题目酶酶筛选筛选操作操作结果结果延伸延伸组成组成作用作用实验验证纤维素酶的作用实验验证纤维素酶的作用实验验证纤维素酶的作用实验验证纤维素酶的作用一、纤维素和纤维素酶一、纤维素和纤维素酶1 1、纤维素、纤维素纤维素含量纤维素含量纤维素含量纤维素含量基本单位、简式基本单位、简式基本单位、简式基本单位、简式思考：纤维素是地球上含量最丰富的多糖类物质，思考：纤维素是地球上含量最丰富的多糖类物质，思考：纤维素是地球上含量最丰富的

16、多糖类物质，思考：纤维素是地球上含量最丰富的多糖类物质，植物每年产生的纤维素超过植物每年产生的纤维素超过植物每年产生的纤维素超过植物每年产生的纤维素超过70707070亿吨，但却不会在地球亿吨，但却不会在地球亿吨，但却不会在地球亿吨，但却不会在地球上大量的积累，为什么？上大量的积累，为什么？上大量的积累，为什么？上大量的积累，为什么？应用：应用：应用：应用：纺织、造纸纺织、造纸纺织、造纸纺织、造纸食物中的膳食纤维可刺激胃肠的蠕动和分泌消化液食物中的膳食纤维可刺激胃肠的蠕动和分泌消化液食物中的膳食纤维可刺激胃肠的蠕动和分泌消化液食物中的膳食纤维可刺激胃肠的蠕动和分泌消化液2 2、纤维素酶、纤维素酶酶酶筛选筛选操作操作结果结果延伸延伸二、纤维素分解菌的筛选二、纤维素分解菌的筛选1 1、筛选方法、筛选方法2 2、筛选原理、筛选原理刚果红染色法刚果红染色法3 3、筛选过程、筛选过程