必修一实验复习(Jacky).ppt
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1、必修一必修一 实验专题实验专题四、实验:观察植物细胞的有丝分裂四、实验:观察植物细胞的有丝分裂1实验原理:实验原理:植物体中,有丝分裂常见于植物体中,有丝分裂常见于根尖、茎尖根尖、茎尖等分生区等分生区细胞;细胞核内细胞;细胞核内染色体容易被碱性染料着色染色体容易被碱性染料着色;可以在高倍镜下观察到植物有丝分裂的各个时期。可以在高倍镜下观察到植物有丝分裂的各个时期。2方法步骤:方法步骤:洋葱根尖的培养洋葱根尖的培养装片的制作:装片的制作:取材取材解离解离漂洗漂洗染色染色制片制片观察观察绘图绘图。3注意事项:注意事项:(1)漂洗的目的是洗去根中多余的解离液,以免影响漂洗的目的是洗去根中多余的解离液
2、,以免影响染色并中止解离染色并中止解离,因为解离液中含,因为解离液中含HCl溶液,而用来染溶液,而用来染色的染料呈碱性,另一方面可能会腐蚀显微镜的镜头色的染料呈碱性,另一方面可能会腐蚀显微镜的镜头解离的程度要适当,解离的程度要适当,时间太短,细胞没有分离开时间太短,细胞没有分离开;时间时间太长,细胞被破坏太长,细胞被破坏。(2)本实验观察的重点是染色质、染色体,而染色质)本实验观察的重点是染色质、染色体,而染色质和染色体都容易被碱性染料染色。染色的时间和浓度要和染色体都容易被碱性染料染色。染色的时间和浓度要控制适当。控制适当。(3)用拇指轻轻压载玻片的目的是使组织细胞分散开)用拇指轻轻压载玻片
3、的目的是使组织细胞分散开以便于观察。压片结束后,要将盖玻片上面的载玻片拿以便于观察。压片结束后,要将盖玻片上面的载玻片拿走,然后进行观察。走,然后进行观察。压片要均匀用力压片要均匀用力。(4)在一个视野里不容易找全有丝分裂各个时期的细)在一个视野里不容易找全有丝分裂各个时期的细胞,而在一块装片上一般是可以找全的。因为根尖分生胞,而在一块装片上一般是可以找全的。因为根尖分生区细胞的有丝分裂有一定的周期性,分裂间期的持续时区细胞的有丝分裂有一定的周期性,分裂间期的持续时间比分裂期长得多,在一个视野里绝大多数的细胞处于间比分裂期长得多,在一个视野里绝大多数的细胞处于分裂期;又由于分生组织中细胞的分裂
4、是非同步化的,分裂期;又由于分生组织中细胞的分裂是非同步化的,在一群细胞中,只要仔细找,就可以找到各个时期的细在一群细胞中,只要仔细找,就可以找到各个时期的细胞。胞。(5)在实验中之所以用洋葱(还可用蚕豆、大蒜等)在实验中之所以用洋葱(还可用蚕豆、大蒜等)是因为这些材料容易得到,并且其染色体数目较少,容是因为这些材料容易得到,并且其染色体数目较少,容易观察。易观察。【例例3】以下是几位同学在进符细胞分裂实验操作的情况以下是几位同学在进符细胞分裂实验操作的情况,请分析:,请分析:实验中甲同学从解离液中取出材料,立即染色,结实验中甲同学从解离液中取出材料,立即染色,结果实验效果很差。乙同学将染色好
5、的材料立即放在载玻果实验效果很差。乙同学将染色好的材料立即放在载玻片上观察,也看不清细胞。丙同学将制好的装片直接放片上观察,也看不清细胞。丙同学将制好的装片直接放在高倍镜下,花了很长时间找不到细胞。丁同学在正确在高倍镜下,花了很长时间找不到细胞。丁同学在正确地进行了一系列操作后,镜检时在呈长方形的细胞中无地进行了一系列操作后,镜检时在呈长方形的细胞中无法找到分裂的细胞。法找到分裂的细胞。(1)甲操作上的错误是)甲操作上的错误是 ,实验效果差的,实验效果差的原因是原因是 。(2)乙操作上的错误是)乙操作上的错误是 ,看不清细胞的原,看不清细胞的原因是因是 。(3)丙操作上的错误是)丙操作上的错误
6、是 (4)丁找不到分裂的细胞的原因是)丁找不到分裂的细胞的原因是 没有经过漂洗 盐酸继续解离,染色效果差 没有经过压片 细胞重叠 应先在低倍镜下操作 观察的不是生长点(分生区)细胞 2 用显微镜观察多种多样的细胞用显微镜观察多种多样的细胞关键是显微镜的使用:关键是显微镜的使用:取镜取镜安放安放对光对光压片压片观察观察收放。收放。观察任何标本都必观察任何标本都必须先用低倍镜,且标本应透明。高倍镜使须先用低倍镜,且标本应透明。高倍镜使用:用:先使用低倍镜确定目标先使用低倍镜确定目标移动装片,移动装片,使目标位于视野中央使目标位于视野中央转动转换器,换用转动转换器,换用高倍镜高倍镜调焦(转动细准焦螺
7、旋)调焦(转动细准焦螺旋)(视野较视野较暗暗,可调反光镜或光圈可调反光镜或光圈)。显微镜使用注意显微镜使用注意事项:事项:(1)成像特点成像特点:放大倒立的虚像。:放大倒立的虚像。(2)放大倍数计算:物镜的放大倍数)放大倍数计算:物镜的放大倍数目镜的目镜的放大倍数。放大倍数。放大倍数指的是物体的长、宽放大倍数指的是物体的长、宽。(3)物像的移动方向与装片的移动方向相反。物像的移动方向与装片的移动方向相反。(4)低倍镜下成像特点:物像小、细胞数目)低倍镜下成像特点:物像小、细胞数目多、视野亮。多、视野亮。高倍镜下成像特点:物像大、细胞数目少、高倍镜下成像特点:物像大、细胞数目少、视野暗。视野暗。
8、(5)物镜和目镜的判断方法:物镜有螺纹,)物镜和目镜的判断方法:物镜有螺纹,目镜无螺纹。目镜无螺纹。(6)放大倍数的判断方法:)放大倍数的判断方法:目镜:镜头长放大倍数小,镜头短放大倍目镜:镜头长放大倍数小,镜头短放大倍数大。数大。物镜:镜头长放大倍数大,镜头短放大倍物镜:镜头长放大倍数大,镜头短放大倍数小。数小。物镜与装片之间的距离:距离近放大倍数物镜与装片之间的距离:距离近放大倍数大,距离远放大倍数小。大,距离远放大倍数小。一、观察一、观察DNA和和RNA在细胞中的分布在细胞中的分布原理原理:DNA主要分布在细胞核内,主要分布在细胞核内,RNA大部分存大部分存在细胞质中。在细胞质中。吡罗红
9、甲基绿染色剂是混合染色剂吡罗红甲基绿染色剂是混合染色剂,吡罗红和甲基绿两种染色剂对吡罗红和甲基绿两种染色剂对RNARNA和和DNADNA的亲和力的亲和力不同不同,甲基绿甲基绿使使DNADNA呈现呈现绿色绿色,吡罗红吡罗红使使RNARNA呈现呈现红红色色。盐酸能够改变细胞膜的通透性,加速染色剂盐酸能够改变细胞膜的通透性,加速染色剂进入细胞,同时使染色体中的进入细胞,同时使染色体中的DNADNA与蛋白质分离,与蛋白质分离,有利于有利于DNADNA的染色。的染色。步骤:步骤:取口腔上皮细胞制片取口腔上皮细胞制片水解水解冲洗涂片冲洗涂片染色染色观察观察 重点实验点拨重点实验点拨:显微观察类实验显微观察
10、类实验重点实验点拨重点实验点拨:二、实验二、实验 高倍显微镜的使用和叶绿体的观察高倍显微镜的使用和叶绿体的观察1实验原理:叶绿体存在于叶肉细胞的细胞质实验原理:叶绿体存在于叶肉细胞的细胞质基质中,呈绿色、扁平的椭球形或球形,形态较基质中,呈绿色、扁平的椭球形或球形,形态较大,颜色和形状与细胞其他部分明显不同,可在大,颜色和形状与细胞其他部分明显不同,可在高倍镜下观察。高倍镜下观察。2方法步骤:取材方法步骤:取材制片制片观察。观察。3注意事项:注意事项:(1)装片内的)装片内的叶片应时刻浸润在水滴中,保持叶片应时刻浸润在水滴中,保持细胞的正常形态。细胞的正常形态。(2)必须使用高倍显微镜才能看清
11、,注意高倍)必须使用高倍显微镜才能看清,注意高倍物镜的使用。物镜的使用。(3)使用显微镜观察物体,要强调的原则就是)使用显微镜观察物体,要强调的原则就是先用低倍镜后用高倍镜。先用低倍镜后用高倍镜。显微观察类实验显微观察类实验二、实验二、实验 高倍显微镜的使用和线粒体的观察高倍显微镜的使用和线粒体的观察1实验原理:线粒体普遍存在于植物细胞和动实验原理:线粒体普遍存在于植物细胞和动物细胞中。物细胞中。健那绿染液健那绿染液是专一性染线粒体的活细是专一性染线粒体的活细胞染料,可以使活细胞中的线粒体胞染料,可以使活细胞中的线粒体呈蓝绿色呈蓝绿色,而,而细胞质接近无色。通过染色可在高倍镜下观察生细胞质接近
12、无色。通过染色可在高倍镜下观察生活状态的线粒体的形态和分布。活状态的线粒体的形态和分布。2方法步骤:取口腔上皮细胞制片方法步骤:取口腔上皮细胞制片染色染色观察观察3注意事项:注意事项:(1)必须使用高倍显微镜才能看清,注意高倍)必须使用高倍显微镜才能看清,注意高倍物镜的使用。物镜的使用。(2)使用显微镜观察物体,要强调的原则就是)使用显微镜观察物体,要强调的原则就是先用低倍镜后用高倍镜。先用低倍镜后用高倍镜。三、实验:观察植物细胞的质壁分离与复原三、实验:观察植物细胞的质壁分离与复原1实验原理:实验原理:植物细胞的原生质层具有选择透过性,植物细胞的原生质层具有选择透过性,原生质层比细胞壁伸缩性
13、大;原生质层比细胞壁伸缩性大;当细胞液浓度小于外界当细胞液浓度小于外界溶液浓度时,细胞失水发生质壁分离;当细胞液浓度溶液浓度时,细胞失水发生质壁分离;当细胞液浓度大于外界溶液浓度时,细胞吸水发生质壁分离复原。大于外界溶液浓度时,细胞吸水发生质壁分离复原。2方法步骤:方法步骤:制片制片观察观察浸入溶液浸入溶液观察观察浸入清浸入清水水观察观察结论。结论。3注意事项:注意事项:(1)选择材料时要选用带有颜色的细胞。)选择材料时要选用带有颜色的细胞。(2)不能选择衰老死亡的细胞作实验材料,这将观察)不能选择衰老死亡的细胞作实验材料,这将观察不到实验现象,临时装片的质量非常关键。不到实验现象,临时装片的
14、质量非常关键。(3)蔗糖溶液浓度为)蔗糖溶液浓度为03gmL-l;浓度不能太低或太浓度不能太低或太高,过低效果不明显,过高会使细胞严重失水而死亡高,过低效果不明显,过高会使细胞严重失水而死亡观察类实验应注意的问题观察类实验应注意的问题注意取材;注意取材;根据观察对象采用合适的材料,如观察有根据观察对象采用合适的材料,如观察有丝分裂应选取根尖分生区细胞;观察质壁分离与复原应丝分裂应选取根尖分生区细胞;观察质壁分离与复原应选取成熟的植物细胞等。选取成熟的植物细胞等。注意材料处理注意材料处理:根据不同材料,不同的观察对象,做:根据不同材料,不同的观察对象,做不同的材料处理,如浸泡、染色、解离、保持生
15、活状态不同的材料处理,如浸泡、染色、解离、保持生活状态等。等。注意制片方法:注意制片方法:显微观察实验要用装片,不同材料用显微观察实验要用装片,不同材料用不同的制片方法。装片法(把整个实验材料制成装片,不同的制片方法。装片法(把整个实验材料制成装片,如用葫芦藓观察叶绿体),切片法(把材料切成薄片,如用葫芦藓观察叶绿体),切片法(把材料切成薄片,以便观察,如脂肪鉴定),压片法(把材料压碎成一薄以便观察,如脂肪鉴定),压片法(把材料压碎成一薄层以便观察,如观察根尖有丝分裂)。层以便观察,如观察根尖有丝分裂)。注意光学显微镜的使用方法。注意光学显微镜的使用方法。小结小结生化鉴定类实验生化鉴定类实验此
16、类实验是利用物质的一些特性来鉴定该物此类实验是利用物质的一些特性来鉴定该物质,因此物质的特性及常用的鉴定方法必须牢牢质,因此物质的特性及常用的鉴定方法必须牢牢掌握。高巾生物学教材中相关的实验有:掌握。高巾生物学教材中相关的实验有:生物生物组织中还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定组织中还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定;叶绿体叶绿体中色素的提取和分离中色素的提取和分离;DNADNA的粗提取与鉴定的粗提取与鉴定。中学阶段,最常用的提取、分离方法是利用中学阶段,最常用的提取、分离方法是利用各种物质溶解度的差异进行盐析或层析;最常用各种物质溶解度的差异进行盐析或层析;最常用的鉴别(定)方法是利用各种物质特定的显色反的
17、鉴别(定)方法是利用各种物质特定的显色反应,此法应严格控制样品的量,和排除其他有关应,此法应严格控制样品的量,和排除其他有关物质的干扰,最常用的定量方法是滴定法和比色物质的干扰,最常用的定量方法是滴定法和比色法。法。、实验:生物组织中还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定、实验:生物组织中还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定1 1实验原理实验原理:某些化学试剂能够使生物组织中:某些化学试剂能够使生物组织中的有关化合物,产生特定的颜色反应。的有关化合物,产生特定的颜色反应。还原糖斐林试剂还原糖斐林试剂砖红色沉淀砖红色沉淀 脂肪苏丹脂肪苏丹染液染液橘黄色橘黄色 显色反应脂肪苏丹显色反应脂肪苏丹染液染液红色红色 蛋白质十
18、双缩脲试剂蛋白质十双缩脲试剂紫色反应紫色反应2 2方法步骤方法步骤:还原糖的鉴定:选材还原糖的鉴定:选材制备组织样液制备组织样液鉴定样液鉴定样液脂肪的鉴定:选材脂肪的鉴定:选材切片制作切片制作染色染色镜检鉴定镜检鉴定蛋白质的鉴定:选材蛋白质的鉴定:选材制备样液制备样液鉴定样液。鉴定样液。3 3注意事项:注意事项:(1 1)用于鉴定还原糖的生物组织,最好选含糖量)用于鉴定还原糖的生物组织,最好选含糖量较高,而组织颜色较浅,或近于白色的,如苹果较高,而组织颜色较浅,或近于白色的,如苹果和梨的果实。经试验比较,颜色反应的明显程度,和梨的果实。经试验比较,颜色反应的明显程度,依次为苹果、梨、白色甘蓝叶
19、、白萝卜。依次为苹果、梨、白色甘蓝叶、白萝卜。(2 2)斐林试剂极不稳定,其甲液和乙液需分别配)斐林试剂极不稳定,其甲液和乙液需分别配制、储存,使用时再临时混合均匀用于实验。制、储存,使用时再临时混合均匀用于实验。(3 3)双缩脲试剂的使用,应先加试剂)双缩脲试剂的使用,应先加试剂A A,造成碱,造成碱性环境,再加试剂性环境,再加试剂B B。(4 4)在可溶性糖的鉴定中,对试管中的溶液加热)在可溶性糖的鉴定中,对试管中的溶液加热时,试管底部不要触及烧杯底部;试管口不要朝时,试管底部不要触及烧杯底部;试管口不要朝向实验者,以免溶液沸腾时冲出试管造成烫伤。向实验者,以免溶液沸腾时冲出试管造成烫伤。
20、二、实验:叶绿体中色素的提取和分离二、实验:叶绿体中色素的提取和分离1实验原理实验原理:叶绿体色素能溶解在有机溶剂中,如丙:叶绿体色素能溶解在有机溶剂中,如丙酮;叶绿体色素在层析液中的溶解度不同,随层析液酮;叶绿体色素在层析液中的溶解度不同,随层析液在滤纸上扩散的速度也不同。在滤纸上扩散的速度也不同。2方法步骤方法步骤:提取色素:提取色素制滤纸条制滤纸条滤液画线滤液画线纸上纸上层析层析观察结果。观察结果。3注意事项注意事项:(1)要选取新鲜色深的叶片作实验材料,以便使色素)要选取新鲜色深的叶片作实验材料,以便使色素液中含有较多的色素。液中含有较多的色素。(2)研磨时一定要快速充分。)研磨时一定
21、要快速充分。(3)过滤时要用脱脂棉(或单层尼龙纱布),不能用)过滤时要用脱脂棉(或单层尼龙纱布),不能用滤纸。滤纸。(4)滤液细线画得要细而直,否则,在层析时)滤液细线画得要细而直,否则,在层析时会导致色素带的重叠。要把滤液细线画细画直。会导致色素带的重叠。要把滤液细线画细画直。应该做到:毛细吸管的管口要细要齐,画线时,应该做到:毛细吸管的管口要细要齐,画线时,速度要快且均匀。速度要快且均匀。(5)画滤液细线时,要重复画)画滤液细线时,要重复画23次,以便提次,以便提高色素细线中色素的含量。高色素细线中色素的含量。(6)层析时不能让滤液细线接触到层析液,因)层析时不能让滤液细线接触到层析液,因
22、为色素容易溶解于层析液中,导致色素带不清晰。为色素容易溶解于层析液中,导致色素带不清晰。色素带色素带(橙黄色)橙黄色)胡萝卜素胡萝卜素叶黄素叶黄素(黄色)黄色)(蓝绿色)蓝绿色)叶绿素叶绿素a a叶绿素叶绿素b b(黄绿色)(黄绿色)1 1:2 23 3:1 1最少最少较少较少最多最多较多较多最高最高较高较高较低较低最低最低最快最快较快较快较慢较慢最慢最慢颜色颜色 含量含量 溶解度溶解度 扩散速度扩散速度某些化学物质的鉴别某些化学物质的鉴别化学物质化学物质 化学试剂化学试剂 现象现象 备注备注 还原性糖还原性糖(葡萄糖、麦芽糖)(葡萄糖、麦芽糖)斐林试剂斐林试剂 砖红色沉淀砖红色沉淀 沸水浴、
23、加热沸水浴、加热班氏试剂班氏试剂银氨溶液银氨溶液尿糖试纸尿糖试纸 脂肪脂肪 苏丹苏丹苏丹苏丹桔黄色桔黄色红色红色蛋白质蛋白质 双缩脲试剂双缩脲试剂 紫色紫色 浓硝酸浓硝酸 DNA 二苯胺试剂二苯胺试剂 蓝色蓝色 沸水浴沸水浴 实验中的某些化学试剂实验中的某些化学试剂 实验名称实验名称 化学试剂化学试剂 原理或现象原理或现象 有丝分裂有丝分裂 质量分数质量分数15%HCl15%HCl和体和体积分数积分数95%95%的酒精的酒精 解离解离 0.02g/ml0.02g/ml龙胆紫溶液龙胆紫溶液 染色染色 叶绿素的提取与分离叶绿素的提取与分离 丙酮丙酮 色素溶解色素溶解 少许少许SiOSiO2 2 增
24、大摩擦力、研磨色素增大摩擦力、研磨色素 少许碳酸钙少许碳酸钙 中和细胞中的酸性物质,中和细胞中的酸性物质,避免色素被破坏避免色素被破坏 DNADNA的粗提取与分离的粗提取与分离 柠檬酸钠柠檬酸钠 防止血液凝固防止血液凝固 蒸馏水蒸馏水 使细胞破裂,核中物使细胞破裂,核中物质溢出;质溢出;稀释稀释NaCl,降低降低DNA溶解度溶解度 4.4.问题串策略(在课下回答每个实验中给出的问题)问题串策略(在课下回答每个实验中给出的问题)实验一:生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的实验一:生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定鉴定1.1.举例说明什么是还原糖?举例说明什么是还原糖?2.2.如何配制斐
25、林试剂?如何配制斐林试剂?3.3.鉴定可溶性还原糖时,为什么要选用含糖量较高、鉴定可溶性还原糖时,为什么要选用含糖量较高、白色或近白色的植物组织?白色或近白色的植物组织?4.4.还原糖中加入与斐林试剂后,是什么颜色?加热后还原糖中加入与斐林试剂后,是什么颜色?加热后还原糖中与斐林试剂发生作用的结果如何?还原糖中与斐林试剂发生作用的结果如何?5.5.切花生子叶的薄片时,为什么切得越薄越好?切花生子叶的薄片时,为什么切得越薄越好?6.6.用苏丹用苏丹染液染色后,为什么要在花生子叶的薄片染液染色后,为什么要在花生子叶的薄片上滴加酒精?上滴加酒精?7.7.脂肪可以被苏丹脂肪可以被苏丹染液染成什么颜色?
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