07第七章 芳香胺类药物的分析2.ppt

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1、中国药科大学药中国药科大学药 物分析教研室物分析教研室第二节第二节 苯乙胺类药物苯乙胺类药物Phenethylamine Phenethylamine 中国药科大学中国药科大学 药物分析教研室药物分析教研室结构结构(Structure)拟肾上腺素拟肾上腺素类药物，分子类药物，分子结构中具有苯结构中具有苯乙胺基本结构乙胺基本结构肾上腺素肾上腺素(adrenaline)盐酸克伦特罗盐酸克伦特罗(clenbuterol hydrochloride)硫酸沙丁胺醇硫酸沙丁胺醇(salbutamol sulfate)盐酸麻黄碱盐酸麻黄碱(ephedrine hydrochloride)R1 R2 R3 H

2、X中国药科大学中国药科大学 药物分析教研室药物分析教研室化学性质化学性质(feature)弱弱 碱碱 性：性：烃胺基侧链，仲胺氮弱碱性，游离碱难溶于烃胺基侧链，仲胺氮弱碱性，游离碱难溶于水，易溶于有机溶剂；其盐可溶于水水，易溶于有机溶剂；其盐可溶于水酚羟基特性：酚羟基特性：邻苯二酚（或苯酚）结构，与金属离子络合呈邻苯二酚（或苯酚）结构，与金属离子络合呈色；在空气中或遇光、热易氧化，色泽变深；色；在空气中或遇光、热易氧化，色泽变深；在碱性溶液中更易变色。在碱性溶液中更易变色。光学活性：光学活性：手性碳原子，具有旋光性。手性碳原子，具有旋光性。苯环取代基特性：苯环取代基特性：如盐酸克伦特罗芳伯氨基

3、；如盐酸克伦特罗芳伯氨基；紫外、红外吸收特性进行定性、定量分析。紫外、红外吸收特性进行定性、定量分析。中国药科大学中国药科大学 药物分析教研室药物分析教研室鉴别试验鉴别试验(identification)与三氯化铁反应、与甲醛硫酸反应与三氯化铁反应、与甲醛硫酸反应药物药物三氯化铁三氯化铁甲醛硫酸甲醛硫酸肾上腺素肾上腺素Adrenaline0.1mol/L盐酸液中显翠绿色，盐酸液中显翠绿色，加氨试液显紫色，紫红色加氨试液显紫色，紫红色红色红色重酒石酸去甲肾上腺素重酒石酸去甲肾上腺素Noradrenaline bitartrate翠绿色，加碳酸氢钠试液显蓝翠绿色，加碳酸氢钠试液显蓝色，红色色，红色

4、淡红色淡红色盐酸去氧肾上腺素盐酸去氧肾上腺素Phenylephrine hydrochloride紫色紫色玫瑰红，橙红，深棕红玫瑰红，橙红，深棕红盐酸异丙肾上腺素盐酸异丙肾上腺素Isoprenaline hydrochloride深绿色，滴加新制深绿色，滴加新制5%碳酸氢碳酸氢钠液，显蓝紫色，红色钠液，显蓝紫色，红色棕色，暗紫色棕色，暗紫色盐酸多巴胺盐酸多巴胺Dopamine hydrochloride墨绿色，滴加墨绿色，滴加1%氨溶液，显氨溶液，显紫红色紫红色中国药科大学中国药科大学 药物分析教研室药物分析教研室鉴别试验鉴别试验(identification)氧化反应氧化反应（酚羟基，易被碘

5、、过氧化氢、铁氰化钾氧化呈现不同颜色）（酚羟基，易被碘、过氧化氢、铁氰化钾氧化呈现不同颜色）肾上腺素肾上腺素碘或过氧化氢碘或过氧化氢中性或酸性中性或酸性肾上腺素红肾上腺素红放置放置棕红色多聚体棕红色多聚体棕红色多聚体棕红色多聚体盐酸异丙肾上腺素盐酸异丙肾上腺素偏酸性条件偏酸性条件碘碘异丙肾上腺素红异丙肾上腺素红硫代硫酸钠硫代硫酸钠重酒石酸重酒石酸去甲肾上腺素去甲肾上腺素酒石酸氢钾饱和液酒石酸氢钾饱和液pH 3.56pH 3.56碘试液碘试液放置放置5min硫代硫酸钠硫代硫酸钠溶液为无色溶液为无色或仅显或仅显微红色或微红色或淡紫色淡紫色肾上腺素肾上腺素或盐酸异丙肾上腺素或盐酸异丙肾上腺素明显的明

6、显的红棕色红棕色或紫色或紫色淡红色溶液淡红色溶液淡红色溶液淡红色溶液中国药科大学中国药科大学 药物分析教研室药物分析教研室鉴别试验鉴别试验(identification)紫外特征吸收紫外特征吸收药物药物溶剂溶剂浓度浓度(mg/ml)nm(nm)吸收度吸收度(A)重酒石酸间羟胺重酒石酸间羟胺水水0.10272盐酸异丙肾上腺素盐酸异丙肾上腺素水水0.052800.50盐酸多巴胺盐酸多巴胺0.5%硫酸硫酸0.03280盐酸芬氟拉明盐酸芬氟拉明0.1mol/L盐酸盐酸0.25263,270盐酸苯乙双胍盐酸苯乙双胍水水0.012340.60盐酸克伦特罗盐酸克伦特罗0.1mol/L盐酸盐酸0.03243,

7、296硫酸沙丁胺醇硫酸沙丁胺醇水水0.08274盐酸伪麻黄碱盐酸伪麻黄碱水水0.50251,257,263红外特征吸收：上述药物还可采用红外吸收光谱进行鉴别。红外特征吸收：上述药物还可采用红外吸收光谱进行鉴别。中国药科大学中国药科大学 药物分析教研室药物分析教研室鉴别试验鉴别试验(identification)与亚硝基铁氰化钠反应与亚硝基铁氰化钠反应(Rimini试验试验)重酒石酸间羟胺重酒石酸间羟胺水水溶解溶解亚硝基铁氰化钠试液亚硝基铁氰化钠试液丙酮数滴，碳酸氢钠少量丙酮数滴，碳酸氢钠少量红紫色红紫色红紫色红紫色脂肪伯氨基的专属反应脂肪伯氨基的专属反应丙酮不含有甲醛丙酮不含有甲醛重酒石酸间羟

8、胺的脂肪伯氨基重酒石酸间羟胺的脂肪伯氨基中国药科大学中国药科大学 药物分析教研室药物分析教研室鉴别试验鉴别试验(identification)双缩脲反应双缩脲反应盐酸麻黄碱、盐酸伪麻黄碱，芳环侧链具有盐酸麻黄碱、盐酸伪麻黄碱，芳环侧链具有氨基醇结构，可显双缩脲特征反应。氨基醇结构，可显双缩脲特征反应。例例：Chp2000，鉴别盐酸麻黄碱鉴别盐酸麻黄碱方法：取本品方法：取本品1%水溶液水溶液1ml，加硫酸铜试液加硫酸铜试液2滴与滴与20%氢氧化钠液氢氧化钠液1ml，即显蓝紫色，加乙即显蓝紫色，加乙醚醚1ml振摇、放置，乙醚层显紫红色，水层变为振摇、放置，乙醚层显紫红色，水层变为蓝色。蓝色。中国药

9、科大学中国药科大学 药物分析教研室药物分析教研室特殊杂质检查特殊杂质检查 (Detection of specific impurities)酮体检查酮体检查生产工艺：酮体氢化还原制得，若氢化不完全则引入酮体杂质。生产工艺：酮体氢化还原制得，若氢化不完全则引入酮体杂质。药物药物 检查的杂质检查的杂质 溶剂溶剂样品浓度样品浓度(mg/ml)测定波长测定波长(nm)A肾上腺素肾上腺素 肾上腺酮肾上腺酮HCl(92000)2.0 310不得过不得过0.05盐酸去氧肾上腺素盐酸去氧肾上腺素 酮体酮体 水水 2.0 310不得大于不得大于0.20重酒石酸去甲肾上腺素重酒石酸去甲肾上腺素 去甲肾上腺酮去甲

10、肾上腺酮 水水 2.0 310不得大于不得大于0.05盐酸异丙肾上腺素盐酸异丙肾上腺素 酮体酮体 水水 2.0 310不得大于不得大于0.15盐酸甲氧明盐酸甲氧明 酮胺酮胺 水水 1.5 347不得大于不得大于0.06紫外分光光度法检查酮体的条件及要求紫外分光光度法检查酮体的条件及要求中国药科大学中国药科大学 药物分析教研室药物分析教研室特殊杂质检查特殊杂质检查 (Detection of specific impurities)TLC法检查有关物质法检查有关物质例：例：盐酸去氧肾上腺素盐酸去氧肾上腺素、硫酸沙丁胺醇、硫酸沙丁胺醇检查方法：避光操作。取本品，加甲醇制成每检查方法：避光操作。取本

11、品，加甲醇制成每1ml含含20mg的的溶液，作为供试品溶液；精密量取上述溶液适量，加甲醇稀溶液，作为供试品溶液；精密量取上述溶液适量，加甲醇稀释成每释成每1ml中含中含0.10mg的溶液，作为对照溶液。吸取上述两的溶液，作为对照溶液。吸取上述两种溶液各种溶液各10l，分别点于同一硅胶分别点于同一硅胶G薄层板上，以异丙醇氯薄层板上，以异丙醇氯仿浓氨溶液仿浓氨溶液(80:5:15)为展开剂，展开后，晾干，喷以重氮为展开剂，展开后，晾干，喷以重氮苯磺酸试液使显色。供试品溶液如显杂质斑点，与对照溶液苯磺酸试液使显色。供试品溶液如显杂质斑点，与对照溶液的主斑点比较，不得更深。的主斑点比较，不得更深。中国

12、药科大学中国药科大学 药物分析教研室药物分析教研室特殊杂质检查特殊杂质检查 (Detection of specific impurities)盐酸苯乙双胍中有关双胍的检查（盐酸苯乙双胍中有关双胍的检查（Chp2000版）版）有关双胍有关双胍有关双胍有关双胍 取本品取本品1.00g，置置10ml量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，照纸色谱法（附录匀，照纸色谱法（附录 A）试验，精密吸取上述溶液试验，精密吸取上述溶液0.2ml，分别点于分别点于两张色谱滤纸条两张色谱滤纸条(7.5cm 50cm)上，并以甲醇作空白点于另一色谱滤纸条，上，并以甲醇作空白点于另一色

13、谱滤纸条，样点直径均为样点直径均为0.5 1cm；照下行法，将上述色谱滤纸条同置展开室内，照下行法，将上述色谱滤纸条同置展开室内，以醋酸乙酯乙醇水以醋酸乙酯乙醇水(6:3:1)为展开剂，展开至前沿距下端约为展开剂，展开至前沿距下端约7cm 处，处，取出，晾干，用显色剂（取取出，晾干，用显色剂（取10铁氰化钾溶液铁氰化钾溶液1ml，加加10 亚硝基铁氰亚硝基铁氰化钠溶液与化钠溶液与10氢氧化钠溶液各氢氧化钠溶液各1ml，摇匀，放置摇匀，放置15min，加水加水10ml与丙与丙酮酮 12ml，混匀）喷其中一张点样纸条（有关双胍显红色带，混匀）喷其中一张点样纸条（有关双胍显红色带，Rf值约为值约为0

14、.1），参照此色谱带，在另一张点样及空白纸条上，剪取其相应部分并向），参照此色谱带，在另一张点样及空白纸条上，剪取其相应部分并向外延伸外延伸1cm，并分剪成碎条，精并分剪成碎条，精 密吸取甲醇各密吸取甲醇各20ml分别进行萃取后，照分别进行萃取后，照分光光度法（附录分光光度法（附录 A），），在在232nm 的波长处测定吸收度，不得过的波长处测定吸收度，不得过0.48。中国药科大学中国药科大学 药物分析教研室药物分析教研室含量测定含量测定(Assay)原原 料：非水溶液滴定法、溴量法料：非水溶液滴定法、溴量法制制 剂：剂：比色法比色法提取容量法提取容量法紫外分光光度法紫外分光光度法高效液相色谱

15、法高效液相色谱法中国药科大学中国药科大学 药物分析教研室药物分析教研室含量测定含量测定(Assay)1、非水溶液滴定法弱碱性、非水溶液滴定法弱碱性冰醋酸为溶剂冰醋酸为溶剂醋酸汞消除氢卤酸的干扰醋酸汞消除氢卤酸的干扰结晶紫为指示剂结晶紫为指示剂 （盐酸甲氧明的指示剂为萘酚苯甲（盐酸甲氧明的指示剂为萘酚苯甲醇，也可电位法指示终点）醇，也可电位法指示终点）若碱性较弱则加醋酐使突跃明显若碱性较弱则加醋酐使突跃明显例：例：重酒石酸去甲肾上腺素直接滴定重酒石酸去甲肾上腺素直接滴定 盐酸克伦特罗加醋酸汞消除氢卤酸干扰；盐酸克伦特罗加醋酸汞消除氢卤酸干扰；由于碱性较弱，电位法指示终点由于碱性较弱，电位法指示终

16、点 硫酸沙丁胺醇加入醋酐以增大突跃，结晶紫为指示剂硫酸沙丁胺醇加入醋酐以增大突跃，结晶紫为指示剂注：加入醋酐注意防止氨基被乙酰化，所以在冰醋酸溶解样品后应放冷后再加醋酐。注：加入醋酐注意防止氨基被乙酰化，所以在冰醋酸溶解样品后应放冷后再加醋酐。中国药科大学中国药科大学 药物分析教研室药物分析教研室含量测定含量测定(Assay)2、溴量法、溴量法基本原理：基本原理：测定方法：测定方法：取本品约取本品约0.1g，精密称定，置碘瓶中，加水精密称定，置碘瓶中，加水20ml使溶解，精密加溴使溶解，精密加溴 滴定滴定液液(0.1mol/L)50ml，再加盐酸再加盐酸5ml,立即密塞，放置立即密塞，放置15

17、分钟并时时振摇，注意微开瓶分钟并时时振摇，注意微开瓶 塞，塞，加碘化钾试液加碘化钾试液10ml，立即密塞，振摇后，用硫代硫酸钠滴定液立即密塞，振摇后，用硫代硫酸钠滴定液(0.1mol/L)滴定，至滴定，至 近终点时，加淀粉指示液，继续滴定至蓝色消失，并将滴定的结果用空白试验校正。近终点时，加淀粉指示液，继续滴定至蓝色消失，并将滴定的结果用空白试验校正。每每 1ml溴滴定液溴滴定液(0.1mol/L)相当于相当于3.395mg 的的C9H13NO2HCl。中国药科大学中国药科大学 药物分析教研室药物分析教研室含量测定含量测定(Assay)3、比色法、比色法测定原理：测定原理：注意：注意：由于偶合

18、剂（由于偶合剂（N-(1-萘基萘基)-乙二胺）与亚硝酸也能显色干扰测定，所以乙二胺）与亚硝酸也能显色干扰测定，所以在重氮化后，应加入氨基磺酸铵分解剩余的亚硝酸。在重氮化后，应加入氨基磺酸铵分解剩余的亚硝酸。中国药科大学中国药科大学 药物分析教研室药物分析教研室比色法含量测定比色法含量测定例：例：盐酸克伦特罗栓（盐酸克伦特罗栓（Chp2005）【含量测定】含量测定】对照品溶液的制备对照品溶液的制备 精密称取盐酸克仑特罗对照品适量，加盐酸溶精密称取盐酸克仑特罗对照品适量，加盐酸溶液液(9100)制成每制成每1ml 中含中含7.2g的溶液。的溶液。供试品溶液的制备供试品溶液的制备 取本品取本品20粒

19、，精密称定，切成小片，精密称取适量（约相当粒，精密称定，切成小片，精密称取适量（约相当于于 盐酸克仑特罗盐酸克仑特罗0.36mg），），置分液漏斗中，加温热的氯仿置分液漏斗中，加温热的氯仿20ml使溶解，用盐酸使溶解，用盐酸溶液溶液(9 100)振摇提取振摇提取3 次次(20ml、15ml、10ml)，分取酸提取液，置分取酸提取液，置50ml量瓶量瓶中，用盐酸溶液中，用盐酸溶液(9 100)稀释至刻度，摇匀，滤过，收集续滤液，即得。稀释至刻度，摇匀，滤过，收集续滤液，即得。测定法测定法 精密量取对照品溶液与供试品溶液各精密量取对照品溶液与供试品溶液各15ml，分置分置25ml量瓶中，各加盐酸量

20、瓶中，各加盐酸溶溶 液液(9100)5ml 与与0.1 亚硝酸钠溶液亚硝酸钠溶液1ml，摇匀，放置摇匀，放置3 分钟，各加分钟，各加0.5 氨氨基磺酸基磺酸 铵溶液铵溶液1ml，混匀，时时振摇混匀，时时振摇10分钟，再各加分钟，再各加0.1 盐酸萘乙二胺溶液盐酸萘乙二胺溶液1ml,混匀，放置混匀，放置 10分钟，用盐酸溶液分钟，用盐酸溶液(9100)稀释至刻度，摇匀，照分光光度稀释至刻度，摇匀，照分光光度法（附录法（附录 B），），在在 500 nm的波长处分别测定吸收度，计算，即得。的波长处分别测定吸收度，计算，即得。中国药科大学中国药科大学 药物分析教研室药物分析教研室含量测定含量测定(A

21、ssay)4、提取酸碱滴定法、提取酸碱滴定法原理：原理：溶解性盐酸盐或硫酸盐可溶于水，游离碱不溶于水，溶于有机溶剂。溶解性盐酸盐或硫酸盐可溶于水，游离碱不溶于水，溶于有机溶剂。方法：方法：供试品溶于水或矿酸，加入适量碱性试剂使药物游离，用适当的有机供试品溶于水或矿酸，加入适量碱性试剂使药物游离，用适当的有机溶剂提取，将提取液蒸干，残渣中加中性乙醇溶解，用标准酸滴定液直接滴溶剂提取，将提取液蒸干，残渣中加中性乙醇溶解，用标准酸滴定液直接滴定（或在提取液中加定量过量的标准酸滴定液，蒸去有机溶剂后，再用标准定（或在提取液中加定量过量的标准酸滴定液，蒸去有机溶剂后，再用标准碱滴定液回滴定）。碱滴定液回

22、滴定）。例：例：硫酸苯丙胺硫酸苯丙胺加水溶解加水溶解加氢氧化钠试液加氢氧化钠试液8ml 加氯化钠使饱和加氯化钠使饱和乙醚乙醚多次提取多次提取合并乙醚液合并乙醚液精密加硫酸滴定液（精密加硫酸滴定液（0.05mol/L）25ml振摇振摇低温蒸低温蒸去乙醚去乙醚放冷至室温放冷至室温加甲基红指示液加甲基红指示液2滴滴用氢氧化钠（用氢氧化钠（0.1mol/L）滴定。滴定。每每1ml硫酸滴定液（硫酸滴定液（0.05mol/L）相当于相当于18.42mg的的C18H26N2H2SO4。中国药科大学中国药科大学 药物分析教研室药物分析教研室含量测定含量测定(Assay)5、荧光分光光度法、荧光分光光度法 基本

23、原理：基本原理：肾上腺素含有的邻苯二酚结构，被弱氧化剂氧化，肾上腺素含有的邻苯二酚结构，被弱氧化剂氧化，生成肾上腺素红，发生转位为生成肾上腺素红，发生转位为N-甲基甲基-3,5,6-三羟基吲哚三羟基吲哚（THI）。）。(Tri-Hydroxyl-Indole-)本法还可用于测定微量儿茶酚胺类药物。本法还可用于测定微量儿茶酚胺类药物。中国药科大学中国药科大学 药物分析教研室药物分析教研室含量测定含量测定(Assay)6、高效液相色谱法、高效液相色谱法高效分离，高灵敏度和高选择性可用于制剂常规分析，临床药物监测和体内药物高效分离，高灵敏度和高选择性可用于制剂常规分析，临床药物监测和体内药物动力学研

24、究。动力学研究。例例1 1：重酒石酸去甲肾上腺素注射液分析重酒石酸去甲肾上腺素注射液分析色谱条件：色谱条件：色谱柱：色谱柱：ODS流动相：流动相：0.14%庚烷基磺酸钠溶液甲醇庚烷基磺酸钠溶液甲醇(65:35)，用磷酸调，用磷酸调pH至至3.00.1，流速：，流速：1.0ml/min检测波长：检测波长：280nm测定方法：测定方法：精密量取本品适量（约相当于重酒石酸去甲肾上腺素精密量取本品适量（约相当于重酒石酸去甲肾上腺素4mg），），置置25ml量量瓶中，瓶中，加醋酸溶液（加醋酸溶液（125）稀释至刻度，摇匀，取）稀释至刻度，摇匀，取2l注入液相色谱仪，记录色谱注入液相色谱仪，记录色谱图；另

25、取重酒石图；另取重酒石 酸去甲肾腺素对照品适量，精密称定，加醋酸溶液（酸去甲肾腺素对照品适量，精密称定，加醋酸溶液（125）制成）制成每每1ml中含中含0.16mg的溶液，的溶液，同法测定。按外标法以峰面积计算，即得。同法测定。按外标法以峰面积计算，即得。中国药科大学中国药科大学 药物分析教研室药物分析教研室含量测定含量测定(Assay)6、高效液相色谱法、高效液相色谱法例例1：HPLC-EChD法测定血浆中儿茶酚胺类药物法测定血浆中儿茶酚胺类药物色谱条件：色谱柱：色谱条件：色谱柱：ODS型键合相型键合相 流动相：离子对试剂流动相：离子对试剂 检测器：电化学检测器检测器：电化学检测器供试品溶液

26、的制备：氧化铝吸附洗脱供试品溶液的制备：氧化铝吸附洗脱中国药科大学中国药科大学 药物分析教研室药物分析教研室含量测定含量测定(Assay)7、衍生化气相色谱法、衍生化气相色谱法例：例：盐酸芬氟拉明盐酸芬氟拉明(fenfluramine hydrochloride)由于结构中的仲胺基极性极强，使得气相色谱法测定值波动较由于结构中的仲胺基极性极强，使得气相色谱法测定值波动较大，因此将样品溶解后经碱化乙酸乙酯提取，加入内标，提取大，因此将样品溶解后经碱化乙酸乙酯提取，加入内标，提取液用三氟乙酸酐进行酰化衍生化，将衍生化产物在液用三氟乙酸酐进行酰化衍生化，将衍生化产物在5%SE-30的的色谱柱上分析，

27、用色谱柱上分析，用FID检测器检测。检测器检测。中国药科大学中国药科大学 药物分析教研室药物分析教研室第三节第三节 芳氧丙醇胺类药物芳氧丙醇胺类药物典型药物：典型药物：氧烯洛尔氧烯洛尔(Oxprenolol,别名烯丙氧心胺，心得平，别名烯丙氧心胺，心得平，Tracosal,Trasacor,Trasieor)肾上腺素受体阻滞药肾上腺素受体阻滞药 盐酸卡替洛尔盐酸卡替洛尔(Carteolol hydrochloride)受体阻滞药受体阻滞药 中国药科大学中国药科大学 药物分析教研室药物分析教研室鉴别反应鉴别反应 (identification)化学鉴别化学鉴别氧烯洛尔：取本品氧烯洛尔：取本品0.

28、1g，加乙醇加乙醇2ml溶解后，滴加溶解后，滴加0.1mol/L高锰酸钾高锰酸钾溶液溶液1ml，振振 摇数分钟，高锰酸摇数分钟，高锰酸钾颜色消褪，并产生棕色沉淀。钾颜色消褪，并产生棕色沉淀。盐酸卡替洛尔：取本品约盐酸卡替洛尔：取本品约0.1g，加加水水5ml使溶解，加硫氰酸铬铵试使溶解，加硫氰酸铬铵试液液5滴，即生成淡红色沉淀。滴，即生成淡红色沉淀。紫外吸收峰特征紫外吸收峰特征 氧烯洛尔水溶液氧烯洛尔水溶液(40g/ml):在在275nm 的波长处有最大吸的波长处有最大吸收。收。盐酸卡替洛尔盐酸卡替洛尔(8g/ml):在在215nm 与与252nm的波长处的波长处有最大吸收。有最大吸收。中国药

29、科大学中国药科大学 药物分析教研室药物分析教研室盐酸卡替洛尔的有关物质检查盐酸卡替洛尔的有关物质检查TLC法，自身对照法法，自身对照法检查方法：取本品检查方法：取本品0.20g，加甲醇加甲醇10ml使溶解，作为供试品使溶解，作为供试品溶液；精密量取溶液；精密量取2ml，置置100ml量瓶中，用甲醇稀释至刻度，量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，精密量取摇匀，精密量取1ml，置置10ml量瓶中，用甲醇稀释至刻度，量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，作为对照溶液。照薄层色谱法摇匀，作为对照溶液。照薄层色谱法(附录附录 B)试验，吸取试验，吸取上述两种溶液备上述两种溶液备10l，分别点于同一硅胶分别点于同一

30、硅胶GF254薄层板上，以薄层板上，以氯仿氯仿-甲醇甲醇-浓氨溶液浓氨溶液(50:20:1)为展开剂，展开后，晾干，为展开剂，展开后，晾干，置紫外光灯置紫外光灯(254nm)下检视。供试品溶液如显杂质斑点，与对下检视。供试品溶液如显杂质斑点，与对照溶液的照溶液的 主斑点比较，不得更深。主斑点比较，不得更深。中国药科大学中国药科大学 药物分析教研室药物分析教研室含量测定含量测定 盐酸卡替洛尔原料盐酸卡替洛尔原料取本品约取本品约0.5g，精密称定，加冰醋酸精密称定，加冰醋酸30ml，在水浴上加热溶解，放冷，加醋酐在水浴上加热溶解，放冷，加醋酐70ml，照电位照电位 滴定法滴定法(附录附录 A)，用

31、高氯酸滴定液用高氯酸滴定液(0.1mol/L)滴定，并将滴定的结果用空白试验校正。每滴定，并将滴定的结果用空白试验校正。每1ml高氯酸滴定高氯酸滴定 液液(0.1mol/L)相当于相当于32.88mg的的C16H24N2O3HCl。中国药科大学中国药科大学 药物分析教研室药物分析教研室含量测定含量测定盐酸卡替洛尔滴眼液盐酸卡替洛尔滴眼液 精密量取本品适量，用水定量稀释制成每精密量取本品适量，用水定量稀释制成每1ml中约含盐酸卡替洛尔中约含盐酸卡替洛尔16g的溶液，照分光光的溶液，照分光光度法度法(附录附录 A)，在在252nm的波长处测定吸收的波长处测定吸收度；另取盐酸卡替洛尔对照品适量，精密

32、称定，度；另取盐酸卡替洛尔对照品适量，精密称定，加水溶解并定量稀释制成每加水溶解并定量稀释制成每1ml中约含盐酸卡中约含盐酸卡替洛尔替洛尔16g的溶液，同法测定，计算，即得。的溶液，同法测定，计算，即得。中国药科大学中国药科大学 药物分析教研室药物分析教研室含量测定含量测定人血浆中氧烯洛尔及其异构体的分析人血浆中氧烯洛尔及其异构体的分析色谱条件：色谱条件：预柱：预柱：ODS填料，分析柱：手性填料，分析柱：手性OD-R柱（手性选择剂为柱（手性选择剂为3,5-二甲苯氨基甲酸酯二甲苯氨基甲酸酯纤维素）纤维素）流动相：流动相：NaClO4(0.45mol/L)-乙腈乙腈(70:30)的磷的磷酸盐缓冲溶液酸盐缓冲溶液(pH6.0)检测波长：检测波长：273nm血浆处理方法：血浆处理方法：醋酸纤维膜透析醋酸纤维膜透析用预柱纯化、用预柱纯化、富集富集手性柱分离分析。手性柱分离分析。中国药科大学中国药科大学 药物分析教研室药物分析教研室