思考题总汇.ppt

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1、12/20/20221思考题总汇思考题总汇Q1：DNA双链退火与双链退火与PCR中退火的不同中退火的不同DNA变性是指核酸双螺旋碱基对的氢键断裂，双链变成单链，从而使核酸的天然构象和性质发生改变。变性时维持双螺旋稳定性的氢键断裂，碱基间的堆积力遭到破坏，但不涉及到其一级结构的改变。凡能破坏双螺旋稳定性的因素，如加热、极端的pH、有机试剂甲醇、乙醇、尿素及甲酰胺等，均可引起核酸分子变性。变性DNA常发生一些理化及生物学性质的改变：1）溶液粘度降低。DNA双螺旋是紧密的刚性结构，变性后代之以柔软而松散的无规则单股线性结构，DNA粘度因此而明显下降。?2）溶液旋光性发生改变。变性后整个DNA分子的对

2、称性及分子局部的构性改变，使DNA溶液的旋光性发生变化。3）增色效应(hyperchromic effect)。指变性后DNA溶液的紫外吸收作用增强的效应。DNA分子中碱基间电子的相互作用使DNA分子具有吸收260nm波长紫外光的特性。在DNA双螺旋结构中碱基藏入内侧，变性时DNA双螺旋解开，于是碱基外露，碱基中电子的相互作用更有利于紫外吸收，故而产生增色效应。Q1：DNA双链退火与双链退火与PCR中退火的不同中退火的不同退火在PCR中，是指模板双链DNA经热变性、双螺旋解开成单链后，通过缓慢冷却到55左右，使引物（即具有互补碱基的RNA片段）与该模板DNA单链重新配对，形成新的双链分子的过程

3、。退火能在互补的DNA或RNA之间形成双链DNA分子、双链RNA分子或RNA-DNA杂交分子，受温度、时间、DNA浓度、DNA顺序的复杂性等因素的影响。Q2：在分子水平上解释二次生长现象（乳糖操：在分子水平上解释二次生长现象（乳糖操纵子）纵子）结构：结构：大肠杆菌的乳糖系统操纵子，-半乳糖苷酶，半乳糖苷渗透酶，半乳糖苷转酰酶的结构基因以LacZ（z），Lac Y（y），Lac A（a）的顺序分别排列在染色体上，与z相邻，与y相对的一侧有操纵基因Lac O（o），更前面有启动基因Lac P（p），操纵子（乳糖操纵子）就是这样构成的。决定乳酸系统阻遏物结构的调节基因Lac I（i）处于和p相邻的位

4、置上。Q2：在分子水平上解释二次生长现象（乳糖：在分子水平上解释二次生长现象（乳糖操纵子）操纵子）:1,乳糖操纵子的组成:大肠杆菌乳糖操纵子含Z,Y,A三个结构基因,分别编码半乳糖苷酶,透酶和半乳糖苷乙酰转移酶,此外还有一个操纵序列O,一个启动子P和一个调节基因I.2,阻遏蛋白的负性调节:没有乳糖存在时,I基因编码的阻遏蛋白结合于操纵序列O处,乳糖操纵子处于阻遏状态,不能合成分解乳糖的三种酶;有乳糖存在时,乳糖作为诱导物诱导阻遏蛋白变构,不能结合于操纵序列,乳糖操纵子被诱导开放合成分解乳糖的三种酶.所以,乳糖操纵子的这种调控机制为可诱导的负调控.3,CAP的正性调节:在启动子上游有CAP结合位

5、点,当大肠杆菌从以葡萄糖为碳源的环境转变为以乳糖为碳源的环境时,cAMP浓度升高,与CAP结合,使CAP发生变构,CAP结合于乳糖操纵子启动序列附近的CAP结合位点,激活RNA聚合酶活性,促进结构基因转录,调节蛋白结合于操纵子后促进结构基因的转录,对乳糖操纵子实行正调控,加速合成分解乳糖的三种酶.4,协调调节:乳糖操纵子中的I基因编码的阻遏蛋白的负调控与CAP的正调控两种机制,互相协调,互相制约.Q3：溶源、溶菌的区别：溶源、溶菌的区别溶源性溶源性噬菌体感染细菌后，将自身DNA整合到细菌的染色质中，随细菌的复制而复制。被感染的细菌，原有的染色质改变了。故称“溶原”。病毒（包括噬菌体）进入宿主细

6、胞，其遗传物质整合到宿主遗传物质上，随代遗传，就是溶原性了，而其进入宿主细胞，并进行外壳的装配并最终破菌释放，就是溶菌性反应溶菌性反应。前者不破坏宿主，后者毁灭宿主，前者可在随宿主复制中转变为后者性质。Q4：线粒体中蛋白质的代谢、运输：线粒体中蛋白质的代谢、运输线粒体的蛋白合成能力有限，大量线粒体蛋白在细胞质中合成，定向转运到线粒体。这些蛋白质在在运输以前，以未折叠的前体形式存在，与之结合的分子伴娘（属hsp70家族）保持前体蛋白质处于非折叠状态。通常前体蛋白N端有一段信号序列称为导肽、前导肽或转运肽，完成转运后被信号肽酶切除，就成为成熟蛋白，这种现象就叫做后转译Q4：线粒体中蛋白质的代谢、运

7、输：线粒体中蛋白质的代谢、运输线粒体前体蛋白信号序列的特点是：多位于肽链的N端，由大约20个氨基酸构成；没有带负电荷的氨基酸，形成一个两性螺旋，带正电荷的氨基酸残基和不带电荷的疏水氨基酸残基分别位于螺旋的两侧，现在认为这个螺旋与转位因子的识别有关；对所牵引的蛋白质没有特异性要求，非线粒体蛋白连接上此类信号序列，也会被转运到线粒体。此外有些信号序列位于蛋白质内部，完成转运后不被切除，还有些信号序列位于前体蛋白C端，如线粒体的DNA解旋酶 Hmil。Q5：怎样处理氯化汞废液？：怎样处理氯化汞废液？由于各种价态汞的毒性都很强，在对含汞废液处理时，不能将含汞废液经简单化学处理后直接排入下水道只能采取将

8、离子态汞还原为单质汞后纯化再用的方法。废液中汞的最高容许排放浓度为0.05mg/L(以Hg计）常用的处理方法有：1.硫化物共沉淀法：含汞盐的废液先调至pH810，加入过量硫化钠，使其生成硫化汞沉淀，再加入共沉淀剂硫酸亚铁，生成的硫化铁将水中的悬浮物硫化汞微粒吸附而共沉淀，排出清液，残渣用焙烧法回收汞、或再制成汞盐。2.还原法：用铜屑、铁屑、锌粒、硼氢化钠等作还原剂，可以直接回收金属汞。Q5：怎样处理氯化汞废液？：怎样处理氯化汞废液？3.将5mol/L的硫酸溶液加入剩余的二氯化汞（或溶液）中，生成硫酸汞和盐酸（注意在通风柜中进行），待反应完后，在反应后溶液中加入铁，生成硫酸铁和汞，将汞回收即可。

9、具体反应方程如下：HgCl2+H2SO4=HgSO4+2HClHgSO4+Fe=FeSO4+Hg（回收）4.为了避免含汞废液造成对环境的污染，应将废液中的汞进行处理。方法是：将废液收集在塑料桶中，当废水容量达到20L左右时，以曝气方式混匀废液，同时加入50ml氢氧化钠（400g/L）溶液，再加入50g硫化钠（Na2S9H2O），10min后，慢慢加入200ml市售过氧化氢，静置24h后，抽取上清液弃去。Q6：正交实验设计：正交实验设计正交表是一套规则的设计表格，用L(t)。L为正交表的代号，a为实验的次数也就是处理组合数，t为水平数，c为列数也就是可能安排最多的因素数如L（3）。1确定因素和水

10、平2选用合适正交表原则：既要能安排下实验的全部因素，又要使部分水平组合数（处理数）尽量少。一般情况下，实验因素的水平数应恰好等于正交表中括号内的底数，因素的个数应不大于正交表记号中括号内的指数，各因素及交互作用的自由度之和要小于所选正交表的总自由度，以便估计试验误差。3表头设计和试验方案 表头就是把挑选出的因素和要考察的交互作用分别排入正交表的表头适当的列上 上图为进行矿物质元素对架子猪补饲料试验中，考察补料配方A、用量B、食盐C三个因素（每个因素有三个水平）的正交试验表头列号列号1234因素因素ABC空空极差 R：又称全距，是资料中最大观察值与最小观察值的差数。样本平均和SS=n（X-X）方

11、差为从所有观测数值的样本SS/（n-1）X:各个观测值X：观测值的平均数Q8：固定化酶的类型：固定化酶的类型指经过一定改造后被限制在一定的空间内，能模拟体内酶的作用方式，并可反复连续地进行有效催化反应的酶。固定化酶又称固相酶。在理论研究上，固定化酶可以作为探讨酶在体内作用的模型;在实际使用中,可使生产工艺自动化和连续化，提高酶的使用效率。制备方法制备方法 固定化技术是通过化学或物理等手段将酶分子束缚起来供重复使用的技术。大致可分为载体结合法、交联法和包埋法等。载体结合法 将酶结合到非水溶性的载体上。一般来讲,载体的亲水性基团越多，表面积越大，单位载体结合的酶量也越大。最常用的是共价结合法，此外还有离子结合法、物理吸附法。Q9:补救途径补救途径肌苷发酵时，什么时期加入肌苷发酵时，什么时期加入嘌呤最有效嘌呤最有效补救途径（salvage pathway）：与从头合成途径不同，生物分子，例如核苷酸，可以由该类分子降解形成的中间代谢物，如碱基等来合成，该途径是一个再循环途径。