细菌的生化反应.ppt

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1、细细菌菌生生化化反反应应v概念：用生化的方法来检测细菌对概念：用生化的方法来检测细菌对各种基质的各种基质的代谢作用及代谢产物代谢作用及代谢产物，借以鉴别细菌种类，这，借以鉴别细菌种类，这种生化试验称为细菌的生化反应试验。种生化试验称为细菌的生化反应试验。v意义：是意义：是鉴别细菌鉴别细菌的重要依据。的重要依据。细菌的生化反应细菌的生化反应生生化化反反应应碳水化合物碳水化合物代谢试验代谢试验各种酶类试验各种酶类试验抑菌试验抑菌试验糖发酵试验糖发酵试验甲基红试验甲基红试验V-P试验试验蛋白质和氨基蛋白质和氨基酸代谢试验酸代谢试验硫化氢试验硫化氢试验吲哚试验吲哚试验碳源和氮源碳源和氮源利用试验利用试

2、验枸橼酸盐利用试验枸橼酸盐利用试验IMViC试验试验甲基红试验甲基红试验v大肠杆菌分解葡萄糖产生丙酮酸后进行混合酸发酵，产生乳大肠杆菌分解葡萄糖产生丙酮酸后进行混合酸发酵，产生乳酸、甲酸、乙酸、琥珀酸等多种有机酸酸、甲酸、乙酸、琥珀酸等多种有机酸，使培养液培养液pH小于小于4.5，甲基红指示剂呈红色，为甲基红试验阳性。甲基红指示剂呈红色，为甲基红试验阳性。v产气杆菌分解葡萄糖产生丙酮酸，经脱羧后生成中性乙酰甲产气杆菌分解葡萄糖产生丙酮酸，经脱羧后生成中性乙酰甲基甲醇，培养液的基甲醇，培养液的pHpH大于大于5.45.4，甲基红甲基红指示剂呈橘黄色，为指示剂呈橘黄色，为甲基红试验阴性。甲基红试验

3、阴性。原理原理葡萄糖葡萄糖丙酮酸丙酮酸大量混合酸大量混合酸pH降至降至4.4以下以下甲基红试剂甲基红试剂培养基培养基变红变红甲基红试验甲基红试验乙酰甲基甲醇（中性）乙酰甲基甲醇（中性）pH5.4 甲基红试剂甲基红试剂培养基培养基橘黄色橘黄色方法方法滴加甲基红指示剂数滴，立即观察结果滴加甲基红指示剂数滴，立即观察结果结果结果红色为阳性，红色为阳性，+不出现红色为阴性，不出现红色为阴性，-VP试验试验v产气杆菌利用葡萄糖时产生中性物质之一就是乙酰甲基甲醇，产气杆菌利用葡萄糖时产生中性物质之一就是乙酰甲基甲醇，它在碱性溶液中被空气中的分子氧氧化生成它在碱性溶液中被空气中的分子氧氧化生成二乙酰二乙酰，

4、二乙酰，二乙酰与培养基中的含胍基的化合物反应，生成红色化合物，是与培养基中的含胍基的化合物反应，生成红色化合物，是VPVP试验阳性；而大肠杆菌不能产生乙酰甲基甲醇，为阴性。试验阳性；而大肠杆菌不能产生乙酰甲基甲醇，为阴性。原理原理葡萄糖葡萄糖丙酮酸丙酮酸乙酰甲基甲醇乙酰甲基甲醇二乙酰二乙酰V-P试剂试剂培养基培养基变红变红VP试验试验与蛋白胨培养基精氨酸中的胍基与蛋白胨培养基精氨酸中的胍基反应生成红色化合物反应生成红色化合物方法方法取出试管培养物，加入等量的李氏试剂，摇匀后取出试管培养物，加入等量的李氏试剂，摇匀后不加塞，静置不加塞，静置3030分钟观察结果。分钟观察结果。结果结果红色为阳性，

5、红色为阳性，+无红色为无红色为阴阴性，性，-枸橼酸盐利用试验枸橼酸盐利用试验 某些细菌能力利用培养基中的枸橼酸盐作为唯一的碳源，某些细菌能力利用培养基中的枸橼酸盐作为唯一的碳源，也能利用其中的铵盐作为唯一氮源，细菌生长过程中分解枸也能利用其中的铵盐作为唯一氮源，细菌生长过程中分解枸橼酸盐产生碳酸盐和分解铵盐生成的氨，使培养基变碱性，橼酸盐产生碳酸盐和分解铵盐生成的氨，使培养基变碱性，使指示剂呈碱性反应，使指示剂呈碱性反应，指示剂由绿色变为深蓝色是枸橼酸盐指示剂由绿色变为深蓝色是枸橼酸盐利用试验阳性利用试验阳性（产气杆菌），反之培养基不变色是为阴性（产气杆菌），反之培养基不变色是为阴性（大肠杆菌）。（大肠杆菌）。原理原理枸橼酸盐枸橼酸盐铵盐铵盐碳酸盐碳酸盐氨氨培养基培养基pH下降下降溴麝香草酚蓝溴麝香草酚蓝 呈碱性变色呈碱性变色培养基变蓝培养基变蓝培养基培养基 枸橼酸盐利用试验原理结果结果深蓝色为阳性深蓝色为阳性+绿色为阴性绿色为阴性-谢谢观看