炭疽实验室生物安全操作规范.pdf

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1、炭疽实验室生物安全操作规范炭疽芽胞杆菌按国际生物危险分类属于III 类，按卫生部人间传染的病原微生物名录，我国将该菌列为生物危害二级。根据名录中对不同类别病原微生物进行不同实验要求的生物安全级别实验室的解释，从现场标本中直接进行细菌分离培养、初步鉴定、药物敏感性试验、生化鉴定、免疫学试验、PCR 核酸提取、涂片、显微镜检查等检测活动可在生物安全二级实验室中进行。大量活菌操作和动物感染实验要在生物安全三级实验室中进行。一、通用工作规范1 实验室工作人员，必须经过生物安全培训方可进入实验室工作。2 凡在实验室内进行实验和维护等工作时，应有两人共同参加。3 实验室人员在进入实验室前，要熟悉从事工作的

2、操作程序。4 在进入实验室前，应列出所用物品清单，准备齐全，避免频繁出入实验室。5 实验室的活动应如实记录，记录应由具体实验或工作人员完成。6 实验室所有工作人员有保持实验室内整洁有序的义务，禁止在工作区域内放置无关的东西。7 每次做完实验一定将所使用的设备、实验台面进行消毒、复位。8 对操作产生污染的材料、废弃物品，要及时进行高压消毒灭菌。9 如发生样本、化学品的泄露或培养物的暴露，应及时报告，进行风险评估，对涉及的区域去除污染。10 炭疽芽胞杆菌对含碘和含氯消毒剂敏感，实验室可使用 1%次氯酸钠溶液和碘酒、碘伏等消毒液。11 体温高于 37不应进入实验室工作。12 尽量避免使用利器，如必须

3、使用应小心操作，使用过的针头、刀片等利器，要放置于锐器盒中，锐器盒容量达到三分之二时应及时消毒、更换。二、个人防护操作防护用品穿着顺序：戴一次性帽子，N95 口罩（注意压好鼻夹，深呼吸检查是否漏气），穿防护服，戴手套（手套上缘应套住防护服袖口），穿鞋套。脱衣顺序：在缓冲间内依次除去防护服、鞋套、一次性帽子、口罩，最后除去手套，均放入高压消毒袋内。三、生物安全柜1 安全柜内只能放置本次工作直接需要的材料和设备。多余的物品（例如手套，培养介质）应该存放在安全柜之外。2 在实验操作前，操作者应调整凳子的高度，使操作者的脸部在工作窗口之上。3 将手臂放在安全柜内大约1 分钟之后，才能进行实验操作。停留

4、一分钟的目的是为了使安全柜的气流稳定并能让气流“清扫”手臂表面的微生物污染。4 实验物品的放置：II 级生物安全柜前面的进气格板，不能被纸、仪器设备或其它物品阻挡。5 实验所用的物品、离心机等应尽可能放置在安全柜的后缘位置；盛有生物危险的废物袋或废弃物的盘子及废液瓶等应放在生物安全柜的某一侧。6 消毒：（1）工作结束时，包括仪器设备在内的生物安全柜里的所有物品都应用蘸有消毒液的毛巾擦拭（必要时用75%乙醇清洁），并移出安全柜。（2）生物安全柜使用完毕后，用蘸有消毒液的毛巾擦拭台面，再用75%乙醇进行清洁。7 在生物安全柜内的一般工作流程应该是从“清洁区域到污染区域”，材料和备用品分区放置。8 在生物安全柜内打开试管、小试剂瓶时，应该稍倾斜、用手指夹住瓶盖，以减少向下流动的气流，直接吹到无菌瓶盖内。9 在生物安全柜内发生少量的喷洒时，应该用浸有消毒液的纸巾或纱布覆盖，作用 3060 分钟后，将使用过的纸巾或纱布放到加盖容器内。10 由于菌液溢出、溅落，造成操作台或地面的污染，或细菌培养物容器打破等，应立即覆以浸透消毒液的纸巾。待消毒液彻底浸泡3060 分钟后，对污染的物品进行清理。清理后的物品，高压灭菌。11 当发生大量溢出时除采用以上方法进行消毒方法外，实验室采用甲醛熏蒸消毒。