阿莫西林颗粒中合成色素的含量测定..doc

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1、药学院本科生毕业论文阿莫西林颗粒中合成色素的含量测定年 级 2015级专 业 药物分析学 生 学 号 15011200012学 生 姓 名 刘远导 师 姓 名 刘云导 师 职 称 主任药师研究起止日期 2019.3-2019.6目 录中文摘要1英文摘要2研究论文 阿莫西林颗粒中合成色素的含量测定前言3材料与方法4结果6附图7附表12讨论17结论18参考文献19综述21英文原文和译文25致谢39个人简历40中 文 摘 要阿莫西林颗粒中合成色素的含量测定摘 要目的：建立SPE-HPLC法测定阿莫西林颗粒中合成色素的含量。 方法：使用SPE柱富集提纯阿莫西林颗粒中的合成色素，采用高效液相色谱法测定含

2、量。色谱柱为Waters XBridge Shield RP18柱，规格：（250 mm4.6 mm，5 m），流动相为甲醇-0.02 mol/L醋酸铵溶液，梯度洗脱，进样量10 L，流速1.0 mL/min ，检测波长采用max，柠檬黄：428 nm、日落黄：483 nm、胭脂红：509 nm、苋菜红：521 nm、赤藓红：529 nm、靛蓝：608 nm，柱温30。 结果：6种色素在0.225 g/mL范围内线性关系良好（R0.9998），平均回收率：柠檬黄99.37%，日落黄99.41%，胭脂红99.56%，苋菜红99.58%，赤藓红99.39%，靛蓝99.58%，且RSD均0.40%。

3、结论：该方法专属性强，重现性好，灵敏度高，可用于测定阿莫西林颗粒中合成色素的含量。关键词：合成色素；含量测定；固相萃取；高效液相色谱法2英 文 摘 要Determination of synthetic pigment in amoxicillin granulesAbstractObjective: In order to determine the exact content of synthetic pigment in amoxicillin granules, a method of solid phase extraction and high performance liquid

4、 chromatography was developed. Method: Solid phase extraction column was used to purify synthetic pigment, and HPLC method was used to determine the content. During the experiment, The eluate was measured by high performance liquid chromatography method with Waters XBridge Shield RP18 column(250 mm4

5、.6nmm, 5 m), and methanol-0.02 mol/L ammonium acetate solution was used . Precision absorption of 10 microliters of components to be measured and injection into the HPLC instrument. The whole experimental process was eluted by gradient elution table. The detection wavelengyh(the maximum absorption w

6、avelength of each synthetic pigment) were 428 nm(tartrazine), 483 nm(sunset yellow), 509 nm(ponceau 4R), 521 nm(amaranth), 529 nm(erythrosine), 608 nm(indigo). The column temperature is 30. Results: In the range of 0.225 g/mL, each pigment has a good linear relationship. (All of their R2 can reach 0

7、.9998). The average recovery rates were99.37%(tartrazine), 99.41%(sunset yellow), 99.56%(ponceau 4R), 99.58%(amaranth), 99.39%(erythrosine), 99.58%(indigo) and the RSD of all of them were less than 0.40%. Conclusion: This method is simple, specific and sensitive. It can be used to determine the cont

8、ent . And it can well control the quality of drugs. Key words: synthetic pigment; Content determination; SPE; HPLC研 究 论 文阿莫西林颗粒中合成色素的含量测定前 言阿莫西林是广谱青霉素类-内酰胺类抗生素。1972年时，市面上出现的唯二氨基青霉素类抗菌消炎药物是由英国的比彻姆公司研发上市。在救治肺炎方面，阿莫西林有着其他药物难以企及的治疗效果，故而WHO基本药物目录将其收录在册。当前市售的剂型主要有片剂、颗粒剂、胶囊剂等。该药物可使细菌破裂凋亡，来发挥其强劲有效的杀菌作用1-3。在

9、服药后的相同时间内，阿莫西林的血药浓度可达到口服相对应剂量氨苄西林的两倍左右2,3,8。阿莫西林之所以能够被广泛应用于临床，与其显著的杀菌效果是分不开的。该药物是一种白色固体粉末，其单调的颜色不能很好的引起病人用药积极性。因此药品企业为了能够让病人自主用药，在生产颗粒剂时，往往加入一些合成色素，以便于产生明丽诱人的视觉效果来提高病人自觉主动服药的意愿。 常用的色素无外乎是天然色素和合成色素（合成着色剂），其中合成色素主要是通过一系列的化学反应制备而来的有机色素4。合成色素凭借着色艳易得、性稳价廉等优点常被拿来作为药用辅料来使用1,5。尤其是应用于颗粒剂中时，入水溶解后呈现出来的鲜艳色泽，可以使

10、病人（孩童）积极主动服药。然而合成色素大多以苯 、萘和甲苯等为原料经过磺化、硝化、偶氮化等有机化学反应合成得到，产物多含苯环、氧杂蒽结构6。化学式中含有特征偶氮基团（-N=N-）的合成色素在进入生物体内后，容易被肠道菌群还原形成-氨基萘酚和-苯胺两种芳香胺类化合物，在肝脏内质网形成可能会引起神经毒性、基因毒性或致癌性的物质7，从而危及人体健康。因此，应严格规范药用辅料合成色素的用法用量具有十分深远的意义。我国GB5009.35-2016食品添加剂使用标准-食品中合成着色剂的测定，对各种色素的应用有着严格的明文规定。由于合成色素在药品中的广泛应用，以及阿莫西林在临床上的积极用途，本次实验以阿莫西

11、林颗粒为代表药物检测药品中合成色素的含量。本次课题研究中，采购了市面上已有的不同药品企业生产的阿莫西林颗粒作为样本。采用了SPE-HPLC法，对颗粒中合成色素的含量进行了测定。实验过程中，我们调整找寻最佳富集纯化合成色素的方法，并且优化了相关的色谱条件。材料与方法1材料1.1仪器日本岛津高效液相色谱系统：LC-20AT输液泵，SPD-M20A型DAD，SIL20A进样器，CTO-20A柱温箱，LC-solution工作站；XS105型电子天平（瑞士-梅特勒-托利多）；DT5-2型离心机（北京时代北利有限公司）；固相萃取（SPE）柱：Wechrom RA（1 g:6 mL）。1.2试药 样品为来

12、自4家药品生产企业的4批次的阿莫西林颗粒，具体信息见表1。试验所用对照品、标准溶液见表2。精密称取靛蓝对照品适量，用水配成浓度0.500 mg/mL标准溶液。甲醇为色谱纯，其余试剂为分析纯，水为纯化水。2方法2.1色谱条件色谱柱：Waters XBridge Shield RP18，流动相：甲醇(A)-0.02 mol/L溶液醋酸铵(B)，洗脱方法见表3。进样量10 L，流速1.0 mL/min，柱温30，检测波长见摘要。2.2溶液制备2.2.1供试品溶液制备精密称取阿莫西林颗粒0.4 g置10.0 mL离心管，加5 mL水超声5 min，加水至10 ml，摇匀。5000 r/min离心5 m

13、in，收集上清。向剩余沉淀中加2 mL的水，充分振摇后再次超声5 min，同法离心收集，将两次所得上清液合并。样品的SPE富集纯化可分为以下五个步骤：（1）活化：SPE柱中加4 mL甲醇、6 mL水。（2）上样：将上述收集所得的全部上清液加入到已充分活化的SPE柱中，流速23滴/s。（3）淋洗：加水（甲酸调节pH：4）6 mL，甲醇-甲酸（6:4）2 mL，水10 mL，以23 滴/s进行淋洗。（4）洗脱：无水乙醇-氨水-水（7:2:1）4 mL洗脱至5.0 mL容量瓶。（5）待测液：乙酸中和，加水定容。2.2.2对照品溶液制备精密量取“1.2”项下标准溶液适量，用水配制成各组分浓度均为10

14、g/mL混对溶液。2.3线性精密量取“1.2”项下标准溶液适量，用水配制0.2，2.0，5.0，10.0，25.0 g/mL的系列标准溶液。照“2.1”项测定。以峰面积为Y轴，以浓度为X轴，绘制标准曲线。回归方程见表4。2.4检出限取“2.2.2”项下混对液，逐级稀释测定检测限，按照信噪比S/N=3计。2.5精密度取“2.2.2”项下10.0 g/ml混对液，照“2.1”项下条件连续进样6次，测定峰面积，计算RSD。2.6重复性取阿莫西林颗粒样品（AM-2），按“2.2.1”项，平行制备供试品溶液6份，照“2.1”项下色谱条件测定，以外标法计算。2.7稳定性取同一供试品溶液（AM-2），分别在

15、不同时间段，照“2.1”项下色谱条件测定记录峰面积。2.8回收率精密称取色素空白样品（AM-4）0.4g，分别加6种合成色素的混合对照品溶液进行模拟回收，实验进行了3组水平浓度加标，每个浓度水平平行操作3份，按“2.2.1”项下方法该操作步骤所需供试品溶液，按照“2.1”项注入到HPLC仪中，记录峰面积。2.9耐用性实验过程中分别采用了不同仪器制造厂家所生产的3种色谱柱，分别是：XBridge Shield RP18 柱迪马Diamonsil Plus C18-A柱Thermo Syncyonis C18柱。2.10样品含量取“1.2”项下4家企业生产的阿莫西林颗粒样品，照“2.2.1”项下供

16、试品溶液制备方法，以“2.1”项下色谱条件，检测其中色素的种类，记录峰面积，按外标法求算合成色素的准确含量。结果1对照品及供试品的色谱图对照品溶液中6中合成色素在其特定检测波长（max）下的色谱图见图1，供试品溶液的色谱图见图2。2方法学验证及样品中合成色素的含量经试验，结果显示线性：在0.225.0 g/ml范围内，各个待测组分个都有着很好的线性关系。检出限：在所检测的待测组分中柠檬黄检出限是0.05 g/mL，其余剩下的5种合成色素均是0.02 g/mL，具体数据见表4。精密度：测得RSD均0.50%（n=6），由此可见试验过程中所使用的仪器精密度良好，详情见表5。重复性：经试验可知AM-

17、2颗粒剂中仅含有一种合成色素，该合成色素为柠檬黄，其平均含量4.48 g/mL（RSD=0.23%，n=6），以此可见该法重复性好，可应用于测定含量，详情见表6。稳定性：不同时间点各个峰面积基本上是保持一致的，柠檬黄的RSD=0.77%（n=6），表明了室温24h内稳定性良好。以不同色谱柱进行试验考察，结果不同厂家的色谱柱对测定结果并无较大的影响，可见该试验方法耐用性良好。回收率：试验结果如表9。样品含量：具体数据见表8。附 图A(428nm) t/minB(521nm) t/minC(608nm) t/min D(509nm) t/minE(483nm) t/minF(529nm) t/mi

18、n1：柠檬黄、2：日落黄、3：胭脂红、4：苋菜红、5：赤藓红、6：靛蓝图1 10 g/mL的混合对照品溶液（不同检测波长）Fig.1 10 g/mL mixed reference solution(different detection wavelengths)AM-1（柠檬黄）AM-2（柠檬黄）AM-3（柠檬黄）图2 供试品溶液Fig.2 test solution附 表表1 样品（阿莫西林颗粒）Table 1 Sample(Amoxicillin granules)药品生产企业样品批号进样编号石药集团中诺药业495180105AM-1石药集团489180109AM-2华北制药股份有限公司

19、F8032001AM-3华北制药股份有限公司F8032302AM-4表2 对照品以及合成色素标准溶液Table 2 Reference and synthetic pigment standard solution名称批号含量生产厂家柠檬黄GBW(E) 100001a0.500mg/mL中国计量科学研究院日落黄GBW(E) 100003a0.500mg/mL中国计量科学研究院胭脂红GBW(E) 100004a0.500mg/mL中国计量科学研究院苋菜红GBW(E) 100002a0.500mg/mL中国计量科学研究院赤藓红GBW(E) 1001910.500mg/mL中国计量科学研究院靛蓝C1

20、428900090.0%Dr. Ehrenstorfer GmbH表3 梯度洗脱Table 3 Gradigent elute时间（min）A 甲醇（%）B 0.02 mol/L醋酸铵溶液（%）0109051585129010149010171090251090表4 线性关系和检出限Table 4 Linear relationship and detection limit色素名称线性范围（g/ml）相关线性回归方程相关系数（R2）检出限（g/ml）柠檬黄0.2-25.0y=30986x+4206.90.99990.05日落黄0.2-25.0y=31759x+4598.40.99990.02

21、胭脂红0.2-25.0y=25926x+3394.50.99990.02苋菜红0.2-25.0y=25239x+3714.50.99990.02赤藓红0.2-25.0y=56603x+5357.90.99990.02靛蓝0.2-25.0y=27334x+3200.70.99980.02表5 精密度试验测定结果Table 5 Result of precision test序号峰面积柠檬黄日落黄胭脂红苋菜红赤藓红靛蓝1308924316126255826251213544224281174230799831615725601825140554493528013833082543160912559

22、93251293544965280378430829231600925583525148354467228063653085563161262563692516085447082807516308278315974253000249761539717278072RSD0.11%0.03%0.49%0.28%0.38%0.40%表6 重复性试验测定结果（AM-2）Table 6 Repeatable results(AM-2)序号样品名称保留时间（min）柠檬黄峰面积浓度（g/mL）1AM-2 0019.1101427714.4862AM-2 0029.1161426184.4813AM-2 0

23、039.0821422314.4694AM-2 0049.0791427814.4875AM-20059.0841423004.4716AM-2 0069.0881420264.462RSD0.22%0.23%表7 稳定性试验测定结果Table 7 Stability test results序号样品名称保留时间（min）柠檬黄峰面积1稳定性试验0h9.1541590262稳定性试验2h9.1391608633稳定性试验4h9.1471585394稳定性试验8h9.1321587715稳定性试验12h9.1281590066稳定性试验24h9.119161440RSD0.77%表8 供试品中合

24、成色素测定结果Table 8 The content of each component was determined样品编号色素种类含量（g/g）AM-1柠檬黄45.46AM-2柠檬黄56.43AM-3柠檬黄14.78AM-4未检出表9 回收率试验测定结果Table 9 Test result of recovery色素的名称对照品加入量（g/mL）平均测得量（g/mL）同水平平均回收率%（n=3）平均回收率%RSD%柠檬黄8.010.012.07.9189.95911.94598.9899.5999.5499.370.35%日落黄8.010.012.07.9449.95511.93499.

25、3099.5099.4599.410.11%胭脂红8.010.012.07.9719.92911.96099.6399.2999.6799.560.21%苋菜红8.010.012.07.9609.96111.95699.5099.6199.6399.580.08%赤藓红8.010.012.07.9489.92911.94599.3599.2999.5499.390.14%靛蓝8.010.012.07.9339.97311.98399.1699.7399.8599.580.37%讨 论3讨论3.1检测波长的选择本实验对药物中合成色素的含量测定选用的是HPLC法，该方法有着易操作、快捷简便、专属性

26、强、灵敏度高的优点。合成色素常用检测波长：254 nm，但是不同的色素在该波长下的响应值存在较大的差别，检验的灵敏度较差。本文参考国家标准GB/T 21916-2008，为了达到更好的分离效果，更高的检测灵敏度，试验采用各色素成分的最大吸收波长（max）作为检测波长。实验中所用高效液相色谱仪配有DAD，可以对样品溶液进行全波长的扫描，可以在同一时间内采集到每个波长下的所有色谱图，测定过程高效便捷，测定结果更加准确可信。3.2溶剂的选择合成色素大多是极性较强的水溶性物质，在水中溶解度较高。并且在试验过程中所检测的6种合成色素均取得了较好的回收率。同时另一方面，纯化水具有经济环保，价廉易得等优点。

27、综合以上所提及的缘由，试验选用了以纯化水来作为溶剂。3.3前处理方法绝大部分的合成色素是水溶性的，所以按理说来，待测样品可以用纯化水作为溶剂进行溶样，之后直接进样到检测仪器中执行分析。但是市售颗粒剂中常常存在的成分是含量较高的蔗糖，其具有一定的黏性和附着力，如若在水中溶解后直接进样，极有可能会造成色谱柱和HPLC仪管路的阻塞，对色谱仪造成严重损耗；而且由于合成色素是作为药用辅料应用在颗粒剂中的，所以含量都比较低。鉴于以上这两点原因，本次试验采用了聚酰胺固相萃取柱。采用该SPE柱对药品进行前处理，一方面可以祛除待测样品中含有的蔗糖等杂质对实验测定的影响，另一方面使得低含量的合成色素得以浓缩富集，

28、有利于进样分析，准确定量。课题研究的过程中，借鉴了部分有关文章期刊4-5中所提及的前处理萃取方法，并通过大量的实验摸索，找寻并调整了淋洗步骤中洗脱液的使用量。最终决定将甲醇-甲酸（6:4）使用量从6mL调至2mL，之所以做出该调整主要是由于，实验过程中所使用的淋洗液用量较大时会冲散在SPE小柱子中滞留的色素环，从而影响实验结果，降低回收率。经实验比较，最后决定选用Wechrom RA (1g:6mL)萃取柱，该固相萃取柱的柱体有着比较大的载样量，在很大程度上减少了合成色素在萃取时，因保留不充分而造成的待测组分流失。3.4柱温的考察实验过程中柱温在2040之间进行调整筛选。通过不断升高色谱柱的温

29、度（在2040范围内），柠檬黄和日落黄的保留时间会出现显著缩短的现象，同时，赤藓红的保留时间也会呈现一定程度的降低。虽然随着柱温升高，峰形变好，柱效提高，但是温度的不断升高也会导致柠檬黄和胭脂红的色谱峰间分辨率下降。同时为了尽可能的降低外部环境波动对于柱温以及研究结果的干扰，最终试验将色谱条件中的柱温设定为30。3.5流动相的选择分离度和流动相是直接相关联的，从原则上来讲，每相邻的两个待测组分之间的分离度应当保证1.5。以此作为基线分离的标准，起到了排除试验中可能会出现的重叠峰干扰因素，在一定程度上，减小了定性定量的难度。本次实验在流动相中加入了醋酸铵缓冲溶液，进行梯度洗脱。在水相中加入适量的

30、醋酸铵可以使色谱峰的峰形更加标准，减少了峰形变宽以及拖尾现象的出现。且经过数次调整洗脱程序中甲醇的占比，进行梯度洗脱程序优化，最终甄选出了保留时间恰当，同时分离度符合标准要求的最佳洗脱条件。结 论本次实验建立了SPE-HPLC法，依此法测定阿莫西林颗粒中合成色素准确含量。前处理采用固相萃取，在一定程度上减少了与测定无关的杂质成分对于待测组分的干扰和影响。该检测方法具有高效准确、专属性强等优点。该课题检测了不同药品企业生产的阿莫西林颗粒中合成色素的准确含量，其中仅有1家药品企业生产的产品未检测出上述提及的色素，剩余3家药品企业的产品均检出了柠檬黄，但是这3家企业产品中柠檬黄的添加量有所差别，检出

31、含量最高是柠檬黄45.46 g/g。尽管食用合成色素可以用作药用辅料来应用，但大量的摄入，还是会影响药物疗效与危及患者生命健康。因此，在有关的质量标准中，对药品中可食用合成色素添加量进行严格把控具有十分深远的意义。本课题所建立的检测方法可以用于阿莫西林颗粒中合成色素种类以及含量的准确测定，为有关药品的安全有成效性和质量可控性起到了保驾护航的积极作用。同时，也为药品中合成色素种类与含量的检测研究提供了一定的参考，促进了药物制剂质量控制标准的不断完善。参考文献1、王婷婷, 洪建文. 阿莫西林胶囊国内外现状比较分析. 国外医药(抗生素分册), 2019, 40 (02): 133-138.2、古丽努

32、尔苏力坦汗. 西药阿莫西林的药理学机制及临床应用J. 广东化工, 2017, 44(09) : 178.3、顾志斌. 阿莫西林药理机制及临床应用分析D. 当代医学, 2014, 20(29): 118-119.4、刘浩, 杨铮, 李宁, 等. 固相萃取高效液相色谱同时检测食品中12种常用食品添加剂D. 食品安全导刊, 2015(27): 111-114.5、汪明志, 江映宇, 陈蓉, 等. RP-HPLC同时测定维生素片中8种食用合成着色剂含量J. 中国执业药师, 2015, 12(07): 12-15.6、张玉华. 阿莫西林所致不良反应的药学探讨D. 中国实用医药, 2013, 8(24):

33、 152.7、任荣军, 毛谊平, 陶涌, 等. 阴离子交换固相萃取-高效液相色谱法快速测定中成药中10种合成色素的方法研究. 临床医药实践, 2019, 28(02): 127-131.8、张甦, 胡青, 孙健, 等. UPLC/MS/MS法定性定量测定中药材中3类27种合成色素. 世界中医药, 2019, 14(04): 822-827+832.40综 述综述阿莫西林颗粒中合成色素含量测定的研究近况当今社会中，阿莫西林是应用较为广泛的广谱-内酰胺类抗生素，其常用的药物制剂有胶囊剂、颗粒剂、分散片等。阿莫西林可以和许多不同种类的药物联合使用，以达到最佳的治疗目的。阿莫西林的半衰期大约是一个小时

34、，在胃肠道内的吸收效率可以达到百分之九十以上1-2。阿莫西林具有强劲的杀菌作用，可以影响细菌细胞壁的合成，穿透细胞膜，致使细菌溶解破裂凋亡1-2，尤其是在杀灭革兰氏阳性菌方面有着十分显著的效果1。该药物适用于敏感菌所引起的感染，如上呼吸系统的感染，泌尿生殖道感染等。是临床上首选的口服杀菌消炎药物。阿莫西林在杀菌消炎方面有着十分显著的疗效，因此在临床上被广泛应用。阿莫西林是一种白色固体粉末药物，其单调乏味的颜色并不能很好的引起病人用药积极性，尤其是对于年纪较小的儿童患者，常常对服药存在抵触抗拒的心理。因此不少药品厂家在生产阿莫西林颗粒时，会加入颜色鲜艳的合成色素，使药物在视觉效果上更加明丽诱人，

35、以便于提高病人主动服药的意愿5。然而, 在经济飞速发展的今时今日，社会中出现了部分利欲熏心的不法商贩，为谋求暴利，不惜在食品药品中非法添加超量超标的合成色素，此举严重危害了广大人民群众的生命安全。因此, 我国对于合成色素在食品药品中的使用应当采取强有力的监管力度；以及，科学系统的研究合成色素的品种和性质，找寻并建立高效灵敏的检验测定技术，也尤为迫在眉睫5。中国对色素的监管：GB 2760食品添加剂使用标准是我国对于食用色素进行监管的主要法规，该标准严格规定种类，用法用量。CAC对色素的监管：CAC下设CCFA制定的食品添加剂通用法典标准规定了食品色素允许使用的品种、最大用量、功能范围、规格和纯

36、度以及相应的分析方法等相关内容4-5。色素：天然色素，合成色素。其间，合成色素则是指通过一系列有机化学反应合成所得，进而可再次分类：偶氮类色素和非偶氮类色素。合成色素相较于天然色素而言，有着色泽明丽、性稳价廉等优点5,6，这些优点使其被广泛应用于制药工艺和食品加工当中7。在制药工艺方面，尤其是在颗粒剂中，作为药用辅料来使用的合成色素，在水中溶解后产生的鲜艳色泽，在一定程度上提高了病人主动服药的倾向4。在食品加工方面，合成色素用于食品着色，适量应用合成色素可提高食品商业价值，促进消费者购买力的增长，使商家获取利润。但是不容忽视的是，合成色素在加工制备的过程中很可能会引入部分有害物质，以及其本身也

37、存在对人体产生不良影响甚至危害的风险。合成色素大多以苯 、萘、甲苯等为原料经有机反应合成得到，产物中含苯、氧杂蒽结构7。尤其是含“-N=N-”结构的色素在进入生物体内后，容易被肠道菌群还原形成能够引起神经毒性、基因毒性以及致癌性的-氨基萘酚和-苯胺两种芳香胺类化合物，从而对人体产生不可逆转的健康危害。因此，严格把控合成色素作为药用辅料的品种和用量，在临床用药安全性上有着十分深远的意义。我国GB5009.35-2016食品添加剂使用标准中也对各种合成色素的使用和限量做出了明确规定。当前, 有关合成色素的分析方法主要包括高效液相色谱法8-14、液质联用法 、离子色谱法、 薄层色谱法等。通过查找比较

38、相关文献中所提及的检测方法，本实验拟采用SPE-HPLC法进行含量测定。因药物中所应用的合成色素含量都比较低，不易于直接测定。所以前处理样品时采用了固相萃取法，使样品最大程度的净化和色素富集，减少了杂质的干扰，提高了检测准确性和灵敏度，同时在一定程度上起到了保护色谱柱剂相应管路的作用。本次试验借鉴了相关含量测定文献中，所提及的前处理固相萃取法中淋洗液以及洗脱液的种类和配比，并针对具体试验流程进行了有效调整。样品在进行固相萃取时，大致上分为了五个步骤：活化，上样，淋洗，洗脱，中和定容4,8，至此即得所需的待测溶液。随后应用高效液相色谱法准确测定药物中合成色素的种类和含量，以HPLC仪器分离和测定

39、待测样品中合成色素的准确含量。本次试验中配制了六种不同的合成色素的单标溶液以及混标溶液，用每个单标溶液进行定位，确定了各个色素的准确保留时间。之后再进样混标溶液，调整找寻最佳洗脱梯度，以求达到最好的分离度。实践证明：实验中建立的SPE-HPLC法，适用于测定阿莫西林颗粒中合成色素的含量。该方法便捷实用，对于大批量样品的处理分析起到了一定的借鉴意义，并且对分离纯化药品中的合成色素，有着操作简便，重现性好等优点。本次课题研究可以为药品中合成色素的检验提供相关依据，为相关质量标准的制订提供参考，为制剂的质量控制提供保障。参考文献1、王淑丽. 阿莫西林药理机制及临床应用分析D. 中国现代药物应用, 2

40、015, 9(03): 251-252.2、马晓君, 苏何蕾. 清咽片质量控制研究D. 药物评价研究, 2013, 36(03): 190-192.3、王鹏宇, 杨杨. 西药阿莫西林的药理作用及临床应用效果观察. 名医, 2019, (03) : 263.4、杨昊, 王骏, 周莉莉, 等. 虾籽中十种合成色素及其色淀的高效液相色谱测定方法D. 山东农业科学, 2014, 46(01): 110-113.5、Chromatography - Capillary Electrophoresis; Findings from Sun Yat Sen University Update Underst

41、anding of Capillary Electrophoresis (Sensitive Simultaneous Determination of Synthetic Food Colorants in Preserved FruitSamples by Capillary Electrophoresis with Contactless Conductivity )J. Food Weekly News, 2018.6、马平,于徊萍.浅谈食品中合成色素监测分析J. 吉林粮专学报, 1994 (04) : 21-22.7、戚平. 食品和环境水中合成色素的高通量筛查及快速检测技术研究D.

42、华南理工大学, 2014.8、王喆, 郝瑞丽, 陈利青, 等. 2中高效液相色谱法测定小米中黄色素的比较J. 山西农业科学, 2019, 47 (05) : 761-765.9、刘浩, 杨铮, 李宁, 等. 固相萃取高效液相色谱同时检测食品中12种常用食品添加剂D. 食品安全导刊, 2015(27): 111-114.10、张毅, 夏义平, 林肖惠, 等. 固相萃取-高效液相色谱法测定果冻中8种人工合成色素D. 天津市疾病预防控制中心理化室, 2018, 45(19): 3581-3585.11、宋月, 白欣, 康译友, 等. 熟肉制品中红2G的超高效液相色谱检测法D. 微量元素与健康研究,

43、2015, 32(04): 32-33.12、ZHANG J W, WU G P, LI Y B, et al. HPLC determination of amaranth of pharmaceutical supplementary materialsJ. Chin J Pharm Anal (药物分析杂志), 2010, 30(8): 1590-1592.13、李蒙蒙. 高效液相色谱法对九种食用合成色素的检测研究D. 天津科技大学, 2014.14、刘畅. 合成酚类抗氧化剂检测方法的研究D. 昆明理工大学, 2014.英 文 原 文英文原文和译文 英 文 原 文英 文 译 文二氧化钛R

44、P-HPLC法同时测定饮料中合成色素摘 要建立了应用二氧化钛为基体的RP-HPLC法同时测定饮料中柠檬黄、胭脂红、日落黄、亮蓝、赤藓红5种合成色素的快速方法。在2.5-40 g/mL内柠檬黄、胭脂红、日落黄有良好线性关系，在0.75-12 g/mL内亮蓝有良好线性关系，在1.25-20 g/mL内赤藓红有良好线性关系。5种合成色素的检测限（LODs）分别为0.042、0.021、0.042、0.0005和0.021g/ml，平均回收率为：92.2%-106.3%。上述合成色素RSD（n=7）均1.18%。该法的精密度和准确度可以满足高效液相色谱分析的要求。此外，还测定了合成色素在钛柱中保留的热力学参数，如焓（H0）、熵（S0）和吉布斯自由能（G0）。关键词： 二氧化钛固定相、反相高效液相、合成色素、饮料二氧化钛RP-HPLC法同时测定饮料中合成色素1.前言合成色素因其价格低廉、高效、性质稳定的优点，被广泛的应用于几乎所有类型食品的增色加工。然而，由于合成色素大多通过一系列有机化学反