WS∕T 236-2017 生殖器疱疹诊断(卫生).pdf
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1、ICS 11.020 C 59 WS 中 华 人 民 共 和 国 卫 生 行 业 标 准 WS/T 2362017 代替 WS 2362003 生殖器疱疹诊断 Diagnosis for genital herpes 2017-07-24 发布 2018-02-01 实施 中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会 发 布 WS/T 2362017 I 前 言 本标准按照GB/T 1.12009 给出的规则起草。本标准代替WS 2362003 生殖器疱疹诊断标准及处理原则,本标准自实施之日起,WS 2362003同时废止。本标准与WS 2362003相比,主要修改如下:标准性质由强制性改为推荐性;
2、本标准名称改为“生殖器疱疹诊断”;增加了术语、定义和缩略语(见第 2 章和第 3 章);临床表现中增加了初发性生殖器疱疹(见 5.2.1);临床表现中增加了非原发感染的初发性生殖器疱疹(见 5.2.1.3);实验室检查中增加了核酸检测(见 5.3.3);实验室检查中增加了抗体检测(见 5.3.4);删除了处理原则(见 2003 版的第 3 章);删除了治疗原则(见 2003 版的 3.1);删除了临床治愈标准(见 2003 版的 3.2);删除了管理与预防(见 2003 版的 3.3);删除了附录 A 中细胞学检查(Tzanck 涂片)(见 2003 版的附录 A.2);删除了附录 B 生殖器
3、疱疹的处理和治疗方案(见 2003 版的附录 B);删除了参考文献(见 2003 版的参考文献);增加了附录 C 单纯疱疹病毒核酸扩增试验(见附录 C);增加了附录 D 单纯疱疹病毒型特异性抗体检测(见附录 D)。本标准起草单位:中国医学科学院皮肤病医院(研究所)、复旦大学附属华山医院、中山大学附属第三医院。本标准主要起草人:蒋娟、龚向东、王千秋、苏晓红、赖伟红、徐金华、陆春。本标准所代替标准的历次版本发布情况为:WS 2362003。WS/T 2362017 1 生殖器疱疹诊断 1 范围 本标准规定了生殖器疱疹的诊断原则、诊断依据、诊断和鉴别诊断。本标准适用于全国各级各类医疗卫生机构及其医务
4、人员对生殖器疱疹的诊断。2 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。2.1 单纯疱疹病毒 herpes simplex virus;HSV 疱疹病毒科、疱疹病毒亚科、单纯病毒属的双链DNA病毒,基因组DNA长约150 kb,病毒核壳由脂质糖蛋白包裹,具有嗜神经组织特性。注:根据单纯疱疹病毒包膜糖蛋白G(gG)的特异性抗原决定簇gG-1和gG-2,将单纯疱疹病毒分为HSV 1和HSV 2两种血清型,其基因组同源序列约为50%。单纯疱疹病毒 2型主要侵犯生殖器与肛门及其周围部位;单纯疱疹病毒 1型主要侵犯面部,也可侵犯生殖器与肛门及其周围部位。2.2 生殖器疱疹 genital herpes 由单
5、纯疱疹病毒感染生殖器与肛门及其周围部位皮肤黏膜,以疼痛性水疱及浅表溃疡为主要特征的一种慢性复发性性传播疾病。2.3 初发性生殖器疱疹 initial episode 分为原发感染的初发性生殖器疱疹和非原发感染的初发性生殖器疱疹。前者为既往无单纯疱疹病毒感染,是单纯疱疹病毒第一次感染后出现临床症状的首次发作,在感染的个体内不存在单纯疱疹病毒抗体;后者为既往有过单纯疱疹病毒1型或2型感染,再次感染另一型别的单纯疱疹病毒而出现生殖器疱疹的首次发作,在感染的个体内已经存在与当前感染型别不同的单纯疱疹病毒抗体。2.4 复发性生殖器疱疹 recurrent episode 生殖器疱疹临床症状的复发,在首次
6、发作皮损消退后,经过一段无症状期,皮疹再次出现或反复发作。无症状期可间断性排放病毒。生殖器与肛门部位单纯疱疹病毒2型感染的复发频率高于单纯疱疹病毒1型感染的复发频率。WS/T 2362017 2 3 缩略语 下列缩略语适用于本文件。CPE:细胞病变效应(cytopathic effect)HSV:单纯疱疹病毒(herpes simplex virus)PCR:聚合酶链式反应(polymerase chain reaction)4 诊断原则 依据流行病学史、临床表现及实验室检查进行综合分析,作出诊断。5 诊断依据 5.1 流行病学史 有不安全性行为史,或多性伴史,或性伴感染史。5.2 临床表现
7、5.2.1 初发性生殖器疱疹 5.2.1.1 潜伏期 2 d20 d,平均 6 d。初起为红斑和丘疱疹,很快发展为集簇或散在的小水疱,2 d4 d 后破溃形成糜烂或浅表溃疡,有烧灼感和疼痛。病程可持续 2 周4 周。男性好发于包皮、冠状沟、龟头、阴茎体、阴阜等,可伴有尿道炎的表现。女性好发于大小阴唇、阴道、宫颈、会阴和阴阜等。有肛交性行为者可有肛门、直肠受累,表现为肛周水疱或溃疡,肛门疼痛、里急后重、便秘和直肠黏液血性分泌物等。5.2.1.2 原发感染的初发性生殖器疱疹,临床症状较重,常伴全身不适、乏力、发热、头痛、肌痛等全身症状,腹股沟淋巴结肿大,有压痛,病程较长。5.2.1.3 非原发感染
8、的初发性生殖器疱疹,临床症状与原发感染类似,部分病例病情相对较轻。5.2.2 复发性生殖器疱疹 与初发性生殖器疱疹相比,自觉症状较轻,水疱、糜烂或溃疡皮损数目较少,病程较短,多在1周内愈合,腹股沟淋巴结肿大和全身症状少见。发疹前可有前驱症状,表现为局部烧灼感、刺痛、感觉异常等。少部分患者临床症状不典型,仅表现为发作性外生殖器或肛门周围红斑、皲裂、糜烂等。5.3 实验室检查 5.3.1 生殖器疱疹实验室检测标本采集方法见附录 A。5.3.2 病毒培养。通过细胞培养法从临床标本中分离出单纯疱疹病毒(见附录 B 的 B.1)。5.3.3 抗原检测。以免疫荧光试验(IFA)或酶联免疫吸附试验(ELIS
9、A)检测临床标本,单纯疱疹病毒抗原阳性(见 B.2)。5.3.4 核酸检测。应用核酸扩增试验从临床标本中检测到单纯疱疹病毒 DNA(见附录 C)。WS/T 2362017 3 5.3.5 抗体检测。单纯疱疹病毒 2 型特异性血清抗体检测阳性(见附录 D)。6 诊断 6.1 临床诊断病例 符合 5.2,同时有或无 5.1 及 5.3.5 者。6.2 确诊病例 符合临床诊断病例,并符合 5.3.2、5.3.3、5.3.4 中的任一项者。7 鉴别诊断 7.1 一期梅毒 临床表现为硬下疳,溃疡一般为单发,直径1 cm2 cm,圆形或椭圆形,界限清楚,边缘略隆起,疮面清洁;触诊基底坚实,浸润明显,呈软骨
10、样硬度,无疼痛或触痛,伴无痛性腹股沟淋巴结肿大。溃疡面取材暗视野显微镜检查可见梅毒螺旋体,梅毒抗体检测阳性。7.2 软下疳 生殖器或肛周炎性小丘疹,1 d2 d后迅速变为脓疱,破溃形成疼痛性溃疡,基底柔软,边缘不整,可潜行穿凿。周围可有卫星状病变,常伴化脓性疼痛性腹股沟淋巴结炎。溃疡不出现反复复发。杜克雷嗜血杆菌培养阳性。A WS/T 2362017 4 A B 附 录 A(规范性附录)生殖器疱疹实验室检测标本采集方法 A.1 标本的采集 A.1.1 标本采集类型 根据实验室检测方法和临床表现采集相应的标本,病原学检测方法采集的标本包括疱液、溃疡面渗液、尿道拭子、宫颈拭子或直肠拭子;血清抗体检
11、测采集血液标本。A.1.2 不同类型标本的采集方法 A.1.2.1 疱液取材:用1 mL注射器和0.5 mm口径针头从成熟水疱或脓疱中抽取疱液,或者刺破水疱后用棉拭子或涤纶拭子取样。A.1.2.2 溃疡取材:先将溃疡表面痂皮或污物去除,再用拭子用力擦拭或刮取溃疡基底部,尤其是溃疡边缘部位的组织渗液。A.1.2.3 红斑及丘疹等病损取材:先用一拭子清除局部污物,再用另一拭子反复擦拭红斑丘疹部位,取皮肤黏膜上皮细胞、或取痂皮及痂下组织液。A.1.2.4 男性尿道内取材:将男用尿道拭子伸入尿道内2 cm4 cm,捻转数圈停留10 s后取出。A.1.2.5 女性宫颈管取材:先用一拭子拭去宫颈表面黏液,
12、再用另一拭子插入宫颈管1 cm2 cm,捻转数圈停留10 s后取出。A.1.2.6 直肠取材:在直肠镜直视下采集直肠黏液脓性分泌物,无条件者盲取。将拭子插入肛管内2 cm3 cm,向侧方用力避免接触粪团,从紧靠肛环边的隐窝中采集分泌物。A.1.2.7 静脉血标本采集:从肘静脉穿刺采集5 mL血液,将血液注入不含抗凝剂的干燥清洁的试管中,待血液凝固后,1 200 r/min 离心10 min分离血清。A.1.3 注意事项 取材前不要使用消毒剂,取材时不要使用润滑剂。疾病不同病期及病损不同形态影响病毒检测的敏感性,应尽量取新出的水疱疱液或脓疱液进行检测。A.2 标本运送 取材后若不能立即进行检测,
13、用于病毒培养的标本,应尽可能洗入病毒运送液中,弃去拭子,置冰浴或4送检。用于免疫学或分子生物学方法检测的标本,置无菌密闭容器送检。A.3 标本保存 WS/T 2362017 5 用于病毒培养的标本,取材当天(24 h内)接种者可暂置4 冰箱保存;如当天不能接种,置-70 低温冰箱保存。用于免疫学或分子生物学方法检测的标本,需根据相应方法的要求处理标本,2 8 可保存48 h,更长时间保存需将标本冻存于-20 或-70 低温冰箱中。WS/T 2362017 6 B C 附 录 B(规范性附录)生殖器疱疹实验室检测方法 B.1 病毒培养、鉴定和分型 B.1.1 材料与仪器 材料与仪器准备如下:a)
14、敏感细胞株:常用的细胞系主要有非洲绿猴肾细胞(Vero)、宫颈癌细胞(HeLa)。b)细胞生长培养液:含 10小牛血清的 RPMI 1640 培养液。成分:RPMI 1640 16.4 g、庆大霉素 50 U/mL、二性霉素 B 2 g/mL、胎牛或新生牛血清 10、万古霉素 25 g/mL、HEPES 25 mmol/L、碳酸氢钠 3.0 g、L-谷氨酰胺 0.2 mmol/L。配制时,双蒸水加至 1 000 mL,用碳酸氢钠调节 pH 至 7.2,正压过滤除菌,-20 保存备用。c)细胞生长维持液:含 2胎牛或新生牛血清的 RPMI 1640 维持液。d)主要仪器:二氧化碳培养箱、倒置显微
15、镜、恒温离心机、旋涡振荡器。B.1.2 方法 操作步骤如下:a)单层细胞的准备。操作步骤如下:1)取出冻存细胞,置 37 水浴融化,加入已含有细胞生长培养液的培养瓶中,置 37 孵育 8 h,待细胞贴壁后换新鲜生长培养液,继续培养 2 d3 d;2)细胞融合成单层后,弃培养液,用适量胰蛋白酶溶液于 37 消化细胞单层 4 min5 min,让细胞完全离散后加入生长培养液,吸管吹打细胞使之均匀混悬;3)用血球计数器计数细胞,再以生长培养液作稀释,使其达到所需细胞浓度(大约 105/mL),分装于 24 孔培养板中,每孔加入 0.5 mL 细胞悬液;4)培养板置于 5 CO2、37 及湿润空气环境
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