SN∕T 4056-2014 蜂蜜中烟曲霉素残留量的测定 液相色谱-串联质谱法(出入境检验检疫).pdf
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1、书 书 书中华人民共和国出入境检验检疫行业标准犛犖犜 蜂蜜中烟曲霉素残留量的测定液相色谱串联质谱法犇犲 狋 犲 狉犿 犻 狀 犪 狋 犻 狅 狀狅 犳犳 狌犿犪 犵 犻 犾 犾 犻 狀狉 犲 狊 犻 犱 狌 犲犻 狀犺 狅 狀 犲 狔犔犆 犕犛 犕犛 犿犲 狋 犺 狅 犱 发布 实施中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局发 布书 书 书前言本标准按照 给出的规则起草。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位:中华人民共和国秦皇岛出入境检验检疫局。本标准主要起草人:刘晓茂、葛娜、李学民、王飞、张进杰、曹彦忠、宋强。犛犖犜 蜂蜜中烟曲霉素残留量的测定液相色谱串联质谱法范围本标准
2、规定了蜂蜜中烟曲霉素残留量的液相色谱串联质谱测定方法。本标准适用于蜂蜜中烟曲霉素残留量的测定。规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有修改单)适用于本文件。分析实验室用水规格和试验方法方法提要蜂蜜试样用水稀释,经固相萃取柱净化,液相色谱串联质谱()检测,外标法定量。试剂和材料除另有说明外,所用试剂均为优级纯,水为 规定的一级水。甲醇:色谱纯。乙腈:色谱纯。甲酸:优级纯。乙酸乙酯:色谱纯。甲醇水(,体积比)溶液:取 甲醇()用水定容至 。乙腈水(,体积比)溶液:取 乙腈()用水定容至 。标准
3、物质:烟曲霉素(号:);纯度大于或等于。烟曲霉素标准贮备溶液:。称取适量的烟曲霉素标准物质(),用甲醇溶解并配制成 的标准贮备液。避光保存于 冰柜中。烟曲霉素标准工作溶液:。吸取适量烟曲霉素标准贮备溶液(),用乙腈水()稀释成 的标准工作溶液,避光保存于 冰柜中。固相萃取柱:,或相当者,使用前依次用甲醇和 水预处理,保持柱体湿润。微孔滤膜:,尼龙。仪器 液相色谱串联四极杆质谱仪,配有电喷雾离子源()。犛犖犜 分析天平:感量分别为 和 。旋涡混匀器。固相萃取装置。真空泵:真空度应达到 。氮气吹干仪。三角瓶:。试管:。试样的制备与保存 试样的制备对于无结晶的实验室样品,将其搅拌均匀。对有结晶的样品
4、,在密闭情况下,置于不超过 的水浴中振荡,待样品全部融化后搅拌均匀,冷却至室温。分出 作为试样。试样保存试样置于常温下,避光保存。试样在制备和保存过程中应避免受到污染或待测物含量发生变化。测定步骤 提取净化称取蜂蜜样品(精确到 ),置于 三角瓶()中,加入 水,涡旋混合 后,全部倒入下接固相萃取柱()的贮液器中,在固相萃取装置()上使样液以小于 的流速依次通过固相萃取柱,待样液全部通过后,用 甲醇水()洗涤固相萃取柱,弃去全部流出液。在 的负压下,减压抽干 。用乙酸乙酯()洗脱至 试管()中,于 水浴中氮气吹至近干,用乙脂水()溶解残余物,供液相色谱串联质谱仪测定。测定 液相色谱参考条件液相色
5、谱参考条件如下:)色谱柱:,(内径)或相当者;)柱温:;)进样量:;)流动相:甲酸()水溶液;:乙腈。梯度洗脱条件见表。表液相色谱梯度洗脱条件时间 流速()流动相流动相 犛犖犜 质谱参考条件质谱参考条件如下:)离子源:电喷雾离子源;)扫描方式:正离子扫描;)检测方式:多反应监测();)雾化气、气帘气、辅助加热气、碰撞气均为高纯氮气;使用前应调节各气体流量以使质谱灵敏度达到检测要求,参考条件参见附录;)喷雾电压、去集簇电压、碰撞能量等参数应优化至最优灵敏度,参考条件参见附录。液相色谱串联质谱测定 定性确证被测组分选择个母离子,个以上子离子,在相同实验条件下,样品中待测物质的保留时间与混合基质标准
6、校准溶液中对应组分的保留时间偏差在 之内;且样品谱图中被测组分的相对离子丰度与浓度接近的混合基质标准校准溶液谱图中对应的相对离子丰度进行比较,偏差不超过表规定的范围,则可判定样品中存在对应的待测物。表定性确证时相对离子丰度的最大允许偏差相对离子丰度犓犓 犓 犓 犓 允许的最大偏差 定量测定外标法定量:在仪器最佳工作条件下,烟曲霉素的混合基质标准校准溶液进样测定,以混合基质标准校准溶液浓度为横坐标,以峰面积为纵坐标,绘制标准工作曲线,用标准工作曲线对待测样品进行定量,样品溶液中待测物的响应值均应在仪器测定的线性范围内。烟曲霉素的标准物质多反应监测()色谱图参见图。空白实验除不称取试样外,均按上述
7、步骤进行。结果计算与表述按式()计算试样中烟曲霉素的含量:犡(犃犃)犮犞 犃犿 ()式中:犡 试样中烟曲霉素的含量,单位为微克每千克();犃 样液中烟曲霉素的峰面积;犃 空白实验中烟曲霉素的峰面积;犮 标准工作溶液中烟曲霉素的浓度,单位为纳克每毫升();犞 样液最终定容体积,单位为毫升();犃 标准工作溶液中烟曲霉素的峰面积;犛犖犜 犿 最终样液所代表的试样量,单位为克()。测定低限、回收率 测定低限本方法测定低限:本标准方法的测定低限为 。回收率蜂蜜中烟曲霉素添加浓度及平均回收率的实验数据如下:)在添加量为 时,平均回收率为 ;)在添加量为 时,平均回收率为 ;)在添加量为 时,平均回收率为
8、 ;)在添加量为 时,平均回收率为 。犛犖犜 附录犃(资料性附录)参考质谱条件)参考质谱条件:)离子源:电喷雾离子源;)扫描方式:正离子扫描;)检测方式:多反应监测();)电喷雾电压:;)气帘气压力流速:;)雾化气压力流速:;)辅助气压力流速:;)辅助气温度:;)去簇电压:;)驻留时间:;)定性离子对:(犿狕)和 (犿狕),其中 (犿狕)碰撞能量:;)定量离子对:(犿狕),碰撞能量:。)非商业性声明:附录所列参数是在 质谱仪上完成的,此处列出试验用仪器型号仅是为了提供参考,并不涉及商业目的,鼓励标准使用者尝试采用不同厂家或型号的仪器。犛犖犜 附录犅(资料性附录)烟曲霉素的多反应监测色谱图图犅
9、烟曲霉素的多反应监测色谱图犛犖犜 犉 狅 狉 犲狑狅 狉 犱犜犺 犻 狊狊 狋 犪 狀 犱 犪 狉 犱狑犪 狊犱 狉 犪 犳 狋 犲 犱犻 狀犪 犮 犮 狅 狉 犱 犪 狀 犮 犲狑 犻 狋 犺狋 犺 犲犌犅犜 犜犺 犻 狊狊 狋 犪 狀 犱 犪 狉 犱狑犪 狊狆 狉 狅狆 狅 狊 犲 犱犫 狔犪 狀 犱狑犪 狊狌 狀 犱 犲 狉狋 犺 犲犮 犺 犪 狉 犵 犲狅 犳犖犪 狋 犻 狅 狀 犪 犾犚 犲 犵 狌 犾 犪 狋 狅 狉 狔犆狅犿犿 犻 狊 狊 犻 狅 狀犳 狅 狉犆犲 狉 狋 犻 犳 犻 犮 犪 狋 犻 狅 狀犪 狀 犱犃犮 犮 狉 犲 犱 犻 狋 犪 狋 犻 狅 狀狅 犳狋 犺 犲
10、犘 犲 狅狆 犾 犲狊犚 犲 狆 狌 犫 犾 犻 犮狅 犳犆犺 犻 狀 犪犜犺 犲狊 狋 犪 狀 犱 犪 狉 犱狑犪 狊犱 狉 犪 犳 狋 犲 犱犫 狔犙 犻 狀 犵 犺 狌 犪 狀 犵 犱 犪 狅犈 狀 狋 狉 狔 犈狓 犻 狋犐 狀 狊 狆 犲 犮 狋 犻 狅 狀犪 狀犙狌 犪 狉 犪 狀 狋 犻 狀 犲犅狌 狉 犲 犪 狌狅 犳狋 犺 犲犘 犲 狅狆 犾 犲狊犚 犲 狆 狌 犫 犾 犻 犮狅 犳犆犺 犻 狀 犪犜犺 犻 狊狊 狋 犪 狀 犱 犪 狉 犱狑犪 狊犿犪 犻 狀 犾 狔犱 狉 犪 犳 狋 犲 犱犫 狔犔 犻 狌犡 犻 犪 狅犿犪 狅,犌犲犖犪,犔 犻犡狌 犲犿 犻 狀,犠犪 狀
11、 犵犉 犲 犻,犣犺 犪 狀 犵犑 犻 狀 犼 犻 犲,犆 犪 狅犢犪 狀 狕 犺 狅 狀 犵,犛狅 狀 犵犙 犻 犪 狀 犵犛犖犜 犇犲 狋 犲 狉犿 犻 狀 犪 狋 犻 狅狀狅 犳犳 狌犿犪 犵 犻 犾 犾 犻 狀狉 犲 狊 犻 犱狌犲犻 狀犺狅狀犲狔犔犆 犕犛 犕犛 犿犲 狋 犺狅犱犛犮 狅狆犲犜犺 犻 狊狊 狋 犪 狀 犱 犪 狉 犱狊 狆 犲 犮 犻 犳 犻 犲 狊狋 犺 犲犿犲 狋 犺 狅 犱狅 犳犱 犲 狋 犲 狉犿 犻 狀 犪 狋 犻 狅 狀狅 犳犳 狌犿犪 犵 犻 犾 犾 犻 狀犻 狀犺 狅 狀 犲 狔犜犺 犻 狊狊 狋 犪 狀 犱 犪 狉 犱犻 狊犪 狆 狆 犾 犻 犮 犪
12、 犫 犾 犲狋 狅狋 犺 犲犱 犲 狋 犲 狉犿 犻 狀 犪 狋 犻 狅 狀狅 犳犳 狌犿犪 犵 犻 犾 犾 犻 狀犻 狀犺 狅 狀 犲 狔犖狅 狉犿犪 狋 犻 狏 犲狉 犲 犳 犲 狉 犲 狀 犮 犲犜犺 犲犳 狅 犾 犾 狅狑 犻 狀 犵犱 狅 犮 狌犿犲 狀 狋 狊犳 狅 狉狋 犺 犲犪 狆 狆 犾 犻 犮 犪 狋 犻 狅 狀狅 犳狋 犺 犻 狊犱 狅 犮 狌犿犲 狀 狋犻 狊犻 狀 犱 犻 狊 狆 犲 狀 狊 犪 犫 犾 犲 犃 犾 犾狋 犺 犲狉 犲 犳 犲 狉 犲 狀 犮 犲犱 狅 犮 狌犿犲 狀 狋 狊犱 犪 狋 犲 犱,狑犺 犻 犮 犺犻 狊狅 狀 犾 狔犪 狆 狆 犾 犻 犮
13、 犪 犫 犾 犲狋 狅狋 犺 犲犱 犪 狋 犲狅 犳狀 狅 狋 犲狏 犲 狉 狊 犻 狅 狀狅 犳狋 犺 犻 狊犱 狅 犮 狌犿犲 狀 狋犃狀 狔 狅 狀 犲狑犺 狅犱 狅 犲 狊 狀狋犱 犪 狋 犲 犱狉 犲 犳 犲 狉 犲 狀 犮 犲犱 狅 犮 狌犿犲 狀 狋 狊,狋 犺 犲犾 犪 狋 犲 狊 狋狏 犲 狉 狊 犻 狅 狀(犻 狀 犮 犾 狌 犱 犲 狊犪 犾 犾狅 犳狋 犺 犲犪犿犲 狀 犱犿犲 狀 狋 狊)犪 狆 狆 犾 犻 犮 犪 犫 犾 犲狋 狅狋 犺 犻 狊犱 狅 犮 狌犿犲 狀 狋犌犅犜 犠犪 狋 犲 狉犳 狅 狉犪 狀 犪 犾 狔 狋 犻 犮 犪 犾犾 犪 犫 狅 狉 犪 狋
14、 狅 狉 狔狌 狊 犲犛狆 犲 犮 犻 犳 犻 犮 犪 狋 犻 狅 狀犪 狀 犱狋 犲 狊 狋犿犲 狋 犺 狅 犱 狊犘 狉 犻 狀 犮 犻 狆 犾 犲犜犺 犲犺 狅 狀 犲 狔狊 犪犿狆 犾 犲 狊犪 狉 犲犱 犻 犾 狌 狋 犲 犱狑 犻 狋 犺狑犪 狋 犲 狉,犪 狀 犱犮 犾 犲 犪 狀 犲 犱犫 狔犎犔犅狊 狅 犾 犻 犱狆 犺 犪 狊 犲犲 狓 狋 狉 犪 犮 狋 犻 狅 狀 犇犲 狋 犲 狉犿 犻 狀 犲 犱犫 狔犔犆犕犛 犕犛(犈犛 犐),狌 狊 犻 狀 犵犲 狓 狋 犲 狉 狀 犪 犾狊 狋 犪 狀 犱 犪 狉 犱犿犲 狋 犺 狅 犱犚犲 犵犲 狀 狋 狊犪 狀 犱犿犪 狋
15、犲 狉 犻 犪 犾 狊犝狀 犾 犲 狊 狊狅 狋 犺 犲 狉狑 犻 狊 犲狊 狆 犲 犮 犻 犳 犻 犲 犱,犪 犾 犾狉 犲 犵 犲 狀 狋 狊狌 狊 犲 犱犪 狉 犲犃 犚 犪 狀 犱“狑犪 狋 犲 狉”犻 狊狋 犺 犲犳 犻 狉 狊 狋犵 狉 犪 犱 犲狑犪 狋 犲 狉狆 狉 犲 狊 犮 狉 犻 犫 犲 犱犫 狔犌犅犜 犕犲 狋 犺 犪 狀 狅 犾:犎犘 犔犆犵 狉 犪 犱 犲 犃犮 犲 狋 狅 狀 犻 狋 狉 犻 犾 犲:犎犘 犔犆犵 狉 犪 犱 犲 犉狅 狉犿 犻 犮犪 犮 犻 犱:犵 狌 犪 狉 犪 狀 狋 犲 犲狉 犲 犪 犵 犲 狀 狋犛犖犜 犈 狋 犺 狔 犾犪 犮 犲 狋
16、犪 狋 犲:犎犘 犔犆犵 狉 犪 犱 犲 犕犲 狋 犺 犪 狀 狅 犾 狑犪 狋 犲 狉(,犞犞):犕 犻 狓 犿犔犿犲 狋 犺 犪 狀 狅 犾()犪 狀 犱 犿犔狑犪 狋 犲 狉 犃犮 犲 狋 狅 狀 犻 狋 狉 犻 犾 犲 狑犪 狋 犲 狉(,犞犞):犕 犻 狓 犿犔犪 犮 犲 狋 狅 狀 犻 狋 狉 犻 犾 犲()犪 狀 犱 犿犔狑犪 狋 犲 狉 犛 狋 犪 狀 犱 犪 狉 犱 狊:犉 狌犿犪 犵 犻 犾 犾 犻 狀,狆 狌 狉 犻 狋 狔 犛 狋 狅 犮 犽狊 狋 犪 狀 犱 犪 狉 犱狊 狅 犾 狌 狋 犻 狅 狀 狊(犿犵犿犔):犛犲 狆 犪 狉 犪 狋 犲 犾 狔犪 犮 犮 狌
17、狉 犪 狋 犲 犾 狔狑犲 犻 犵 犺犪 狀犪 犱 犲 狇 狌 犪 狋 犲犪犿狅 狌 狀 狋狅 犳犳 狌犿犪 犵 犻 犾 犾 犻 狀狊 狋 犪 狀 犱 犪 狉 犱 狊(),犱 犻 狊 狊 狅 犾 狏 犲犻 狀犿犲 狋 犺 犪 狀 狅 犾犪 狀 犱狆 狉 犲 狆 犪 狉 犲犪狊 狅 犾 狌 狋 犻 狅 狀狅 犳 犿犵犿犔犪 狊狋 犺 犲狊 狋 狅 犮 犽狊 狋 犪 狀 犱 犪 狉 犱狊 狅 犾 狌 狋 犻 狅 狀 狊 犛狅 犾 狌 狋 犻 狅 狀 狊犪 狉 犲狊 狋 犪 犫 犾 犲犳 狅 狉犪狔 犲 犪 狉犪 狋 犠狅 狉 犽 犻 狀 犵狊 狋 犪 狀 犱 犪 狉 犱狊 狅 犾 狌 狋 犻 狅
18、狀 狊():,(),犪 狀 犱犱 犻 狊 狊 狅 犾 狏 犲犻 狀犿犲 狋 犺 犪 狀 狅 犾犪 狀 犱狆 狉 犲 狆 犪 狉 犲犪狊 狅 犾 狌 狋 犻 狅 狀狅 犳 犱 犻 犾 狌 狋 犲狑 犻 狋 犺狋 犺 犲犲 狓 狋 狉 犪 犮 狋 犻 狅 狀狊 狅 犾 狌 狋 犻 狅 狀犳 狅 狉犫 犾 犪 狀 犽狊 犪犿狆 犾 犲狋 狅狆 狉 犲 狆 犪 狉 犲狑狅 狉 犽 犻 狀 犵狊 狋 犪 狀 犱 犪 狉 犱犿 犻 狓狊 狅 犾 狌 狋 犻 狅 狀 狊犻 狀狊 犪犿狆 犾 犲犿犪 狋 狉 犻 狓狅 犳犪 狆 狆 狉 狅狆 狉 犻 犪 狋 犲犮 狅 狀 犮 犲 狀 狋 狉 犪 狋 犻 狅 狀
19、 犎犔犅狊 狅 犾 犻 犱狆 犺 犪 狊 犲犲 狓 狋 狉 犪 犮 狋 犻 狅 狀犮 狅 犾 狌犿狀 狊:犿犵,犿犔犆狅 狀 犱 犻 狋 犻 狅 狀犲 犪 犮 犺犮 狅 犾 狌犿狀狑 犻 狋 犺犿犔犿犲 狋 犺 犪 狀 狅 犾犳 狅 犾 犾 狅狑犲 犱犫 狔 犿犔狑犪 狋 犲 狉犫 犲 犳 狅 狉 犲狌 狊 犲狋 狅犽 犲 犲 狆犮 狅 犾 狌犿狀犿狅 犻 狊 狋 犕犲犿犫 狉 犪 狀 犲犳 犻 犾 狋 犲 狉:犃狆 狆 犪 狉 犪 狋 狌 狊犪 狀 犱犲 狇狌 犻 狆犿犲 狀 狋 犔犆 犕犛 犕犛:犈 狇 狌 犻 狆 狆 犲 犱狑 犻 狋 犺犈犛 犐狊 狅 狌 狉 犮 犲 犅 犪 犾 犪 狀
20、 犮 犲:犿犵犪 狀 犱 犵狊 犲 狀 狊 犻 狋 犻 狏 犻 狋 狔 犞狅 狉 狋 犲 狓犿 犻 狓 犲 狉 犛狅 犾 犻 犱狆 犺 犪 狊 犲犲 狓 狋 狉 犪 犮 狋 犻 狅 狀 犞犪 犮 狌 狌犿狆 狌犿狆:犞犪 犮 狌 狌犿狋 狅 犽 犘 犪 犖 犻 狋 狉 狅 犵 犲 狀犲 狏 犪 狆 狅 狉 犪 狋 狅 狉 犆狅 狀 犻 犮 犪 犾犳 犾 犪 狊 犽:犿犔 犜犲 狊 狋狋 狌 犫 犲:犿犔犛犖犜 犛 犪犿狆 犾 犲狆 狉 犲 狆 犪 狉 犪 狋 犻 狅 狀犪 狀 犱狊 狋 狅 狉 犪 犵犲 犘 狉 犲狆 犪 狉 犪 狋 犻 狅狀狅 犳狋 犲 狊 狋狊 犪犿狆 犾 犲犛 狋 犻 狉
21、犻 狋狋 狅犿 犻 狓狑犲 犾 犾犳 狅 狉狌 狀 犮 狉 狔 狊 狋 犪 犾 犾 犻 狕 犲 犱狊 犪犿狆 犾 犲犻 狀犾 犪 犫 狅 狉 犪 狋 狅 狉 狔犉狅 狉犮 狉 狔 狊 狋 犪 犾 犾 犻 狀 犲狊 犪犿狆 犾 犲,狅 狊 犮 犻 犾 犾 犪 狋 犲犻 狋犻 狀狑犪 狋 犲 狉犫 犪 狋 犺狀 狅 狋犿狅 狉 犲狋 犺 犪 狀 犻 狀犮 犪 狊 犲狅 犳狅 犫 狋 狌 狉 犪 狋 犻 狅 狀犠犺 犲 狀犮 狅犿狆 犾 犲 狋 犲狋 犺 犪狑 犻 狀 犵,狊 狋 犻 狉犻 狋狋 狅犿 犻 狓狑犲 犾 犾狋 狅犮 狅狅 犾犱 狅狑狀狋 狅犪犿犫 犻 犲 狀 狋狋 犲犿狆 犲 狉 犪
22、狋 狌 狉 犲 犜 犪 犽 犲 犽 犵犪 狊狋 犺 犲狋 犲 狊 狋狊 犪犿狆 犾 犲 狊 犛 狋 狅 狉 犪 犵犲狅 犳狊 犪犿狆 犾 犲犜犺 犲狋 犲 狊 狋狊 犪犿狆 犾 犲 狊狊 犺 狅 狌 犾 犱犫 犲狊 狋 狅 狉 犲 犱犪 狋犪犿犫 犻 犲 狀 狋狋 犲犿狆 犲 狉 犪 狋 狌 狉 犲犻 狀犱 犪 狉 犽狆 犾 犪 犮 犲犘 狉 狅 犮 犲 犱 狌 狉 犲 犘 狉 犲狆 犪 狉 犪 狋 犻 狅狀狅 犳狋 犲 狊 狋狊 犪犿狆 犾 犲狊 狅 犾 狌 狋 犻 狅狀犠犲 犻 犵 犺犵狅 犳犺 狅 狀 犲 狔狊 犪犿狆 犾 犲(犪 犮 犮 狌 狉 犪 狋 犲狋 狅 犵)犻 狀 狋 狅犪
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