NY∕T 3642-2020 桃品种鉴定 SSR分子标记法(农业).pdf

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1、ICS 65.020.01 B 05 NY 中华人民共和国农业行业标准NY/T 3642-2020 桃品种鉴定SSR分子标记法Identification of peach cultivars using SSR markers method 2020-07-27发布2020-1-01实施中华人民共和国农业农衬部发布NY/T 3642-2020 目次T而言.n 1 11.陀1.2 规范性可1m文件3 术语和l定义4 主要仪器设备及试剂5 溶液配制.6 引物相关信息及使用.7 参!自品种及其使用8 操作程序.9 结果统I10 判定方法.附录八(规范性附录)主要仪器设备及试剂附录B(规范性附录)溶

2、液配制附录C(规范性附录)核心引物名单及j芋3iIJ 附录O(资料性附录)核心引物相关信息 .10 附录E(资料性附录)参照品种名单及来源-.14 I NY/1 3642-2020 11 本标准由全国植物新品种测试标准化技术委员会(SAC/TC277)归口.本标准起草单位中国农业科学院郑州果树研究所.本标准主要起草人王力荣，1Jlr坷、朱更瑞、方伟超、自在同文、王新卫、关利平。NY/1 3642-2020 桃品种鉴定SSR分子标记法范围本标准规定了利用简单蓝sl.序列(Simplcscqucncc repcats，SSRl分子标记进行桃111:11ll鉴定的操作程序、数据采集和判定方法。本标准

3、适用于桃(Pru川spersica W描画画画温疆赢蕾慧副啤!LSSR指纹数据自J采i.!及品利t鉴定.2 规范性引用文件下页。凡是不注日NY/T 2341 NY/T 2594 3 NY/T 3.1 核心引期的版本适用于木文件.扩蛤i片段时，校正噎稳脚飞主母雪场抖宽泛厅，4 见附录A.5 溶液配制见附录B。6 冒|物相关信息及使用引物名单及序列见附录C，号7 参照晶种及其使用参!品种的名称及其相关信息参见附录E.在进行符iJJ!IJ样品的等位变异检iJJ!tl时，应同时包括相应参!(!品种的PCR扩峭产物的检测。注1.同一名称不同来说的参照品种的某一位点上的等位变异可能不相同，在使用其他来源的

4、参照rfl，;f!ut，Jii与以参!i品种核对，确认无误后使川.注2对于附录D中未包街的等位变异，JiY.按本标刊c.h法，通过1lI!HlDNA分析仪与参照品利同时进行检测确定其大小.8 操作程序8.1 样品制备每份样品中至少随机抽取3个单株，混合后用于鉴定分析。当一致性结果较差时，进行单独取样分析。NY/1 3642-2020 8.2 DNA提取a)称11k桃新鲜i;JJ嫩JI.I一片1.0 g，m元菌双蒸水f洗干净，装人2mL 11l O.5 mm直径钢殊的离心包中，放入液氮1预冷，将预冷后的离心m放入高通盐组织研磨仪中进行冷冻liJf靡，45I-Iz研磨905，至粉末状后，依次加入4

5、00L在65C 71.浴中预热的2%CTA裂lfl缓冲液、40L-流基乙酶，充分挤匀;b)离心管置于65C恒汩l71l:10 min,4C 12000 g J萄心10mil1j c)轻轻地l吸收上消液，转入新离心管中，直u入1/10体积的3mol/L m!胶制溶液，2.5倍体积20C T到冷元水乙醉，将离心佼佼上下摇动305,-20CYfJ1，30 min至能见到UDNA絮状物;f)4C 12000 g离心2min，立Ufl倒掉上消液，加入800L75%乙邸，用手指轻弹笆尖，使DNA沉淀漂浮于液体中，rfftJ5 min j g)4C 12 000 g 1萄心2min，弃上清液，再IJfI人8

6、00L75%的乙醉，重复活洗DNA2次，h)将离心管置于超净工作台干;垛，风干约5minj。1m入250Lo.5XTE缓冲液，4C浴解DNA10 min;JU入lL10 mg/mL J RNa5c A，涡旋混匀，置于37C温滔30min,lfif RNA;j)再加l人等体积的级仿-异戊醉(24 1,V V)，轻轻混匀，4C12000 g 离心10min;k)轻轻地吸取上!f，转入新?再心管中，1m人1/10体积的目前阪钊洛液和12.5倍体积-20C预冷的元水乙醉，颠倒混匀，-20Cj(f，fl30min;1)4 C 12 000 g 1萄心2min，沉淀用75%乙醉$l;2次-3次，室温下风干

7、，浴于250L双蒸水，一20C保存、备用。注:以上为推荐的DNA提取方法，其他营养器官以及达到PCR扩增Effi主要求的DNA捉取为法均适川.8.3 PCR扩增8.3.1 反应体系PCR反应体系为10L，lOXPCR buffer 1L，2.5 mmol/L dNTP o.8L，5FAM荧光标记的正反向引物的混合物O.6L，DNA样011，(20ng/L-30 ng/L)1,.L,5 U Taq DNA聚合酶0.1IL，超纯水6.5L，寻|物信息见附录C，8.3.2 反应程序95C预变性5min;95C变性305，56C退火305，72C延伸305，共35个循环;4C保存备用。8.4 PCR产

8、物检测8.4.1 变性聚丙烯酿胶凝胶电泳(Iolyacrylamidegel electrophoresis.PAGE)8.4.1.1 清洗玻璃板i洗玻璃板，用去离子水川1守，后Wii干备用。用之前再用95%乙醉擦洗2遍，吸水纸擦干。在l主板上涂上0.5mL亲和l硅炕工作液，啊l f础的短板上涂0.5mL剥离破炕工作液。操作过程中防止2块玻璃板互相污染.8.4.1.2 组装电泳板待玻璃板彻底干燥后，在两侧放好衬条灭1齐，月3固定夹JII紧两块玻璃板，剂Hl水平仪洲平。8.4.1.3 制胶在60mL 6%PAGE胶液中分别加入600L10%的过硫自主锁和60,.L TEMED，轻轻混匀后。4守玻

9、璃模具倾斜，用注射器l吸取胶液缓慢诸如两破硝板之间的空隙，r自胶过程防止气泡产生。待j皮液充满玻璃NY/T 3642-2020 板夹层后，将0.4.mm厚1t:鱼齿梳齿平齐端向里轻轻插入胶液约0.4cm，胶液在室温下聚合2h以上。l庭聚合后，放入电泳梢，凹型破硝紧贴电泳缓冲液中i，FH大号固定夹固定位两侧。在上下电泳棚内滋人lXTBE电泳缓冲液.ftf丑llJJ!J:板表面溢出的胶液，轻轻拔11梳子，用糟内的缓冲液反复冲洗点样孔，以除去可能存在的米聚合的聚丙烯毗胀和1气泡。8.4.1.4 电泳每一个加样孔点人变性后的2L-4L扩增产物和1fL 6 X Loading Buffcr棍合液，在胶板

10、jJ.!j侧点人DNAMarkcr,I徐待测样品外，还应同时力fJ人参!l!品利t的扩纳产物。在50W-60 Wm功率下电泳，使凝l投温度保持在约50C，电泳L5 h-2.0 hC电泳时间取决于扩增片段的大小liI刮)，同时观察澳!Ii蓝电泳至胶板j成吉普位jTt即可。注具体1)率大小根据8.4.1.5 银染a)I!洗i仅:Hi帘水擦洗2b)染色c)擦洗。i仅d)c)f)8.4.2 DNA 8.4.2.1 9 结果统计9.1 数据表示将待拟IJ样品某一位点位置和布圳l片段大小，9.3 毛细管电泳荧光检测20 min，然后用蒸a的96孔板94C变性3比较，根据参照品种的迁移使用DNA分析仪的片段

11、分析软件，读:h每个位点每个样品的等位变异大小数据。通过使用53个参照品种中的适宜材料，消除不同批次或不同型号DNA分析仪之间可能存在的系统误差。比较参照IB利f的等位变异大小数据与附录D中的相应数据。两者的差数为系统误差的大小。从待由tl佯，iI，(fJ等位变异数据中去|徐该系统误差，获得的数据UIl为待训tl样本的等位变异大小。9.4 结果记录纯合位点的基因型数据记录为X/X，杂合位点的基因型数据记录为X/Y，其中X、Y分别为该位点上两个等位变异，小片段数据在前，大片段数据在后;缺失位点基|封型数据记录为0/0，示例1.一个品种的一个SSR位点为纯合，等位变异大小为120忡，则该品种在该位

12、点上的等位变异数据记录为120;120,3 NY/T 3642-2020 示例2，一个品种的一个SSR位点为杂合位点.2个等位变异大小分别为140bp和1801币，则该品种在该位点上的等位变异数据记录为140;180.10 判定方法10.1 结果判定用附录C中的10对号|物进行检测，获得待测样品和参照品种在这些位点的等位变异记录数据，每份样品的位点数目共20个，利用这些数w.进行比较，判定如下.a)检测样品间的差异位点数二泣，判定为不同样品b)检测样品间的差异位数=1，!)11定为近似样品c)检测样112间 的差异位点数=O，!)II定为疑问样品10.2 结果表述待狈样品一一一一与对照样品一一

13、一一(或数据库中一一一一一已知品种)利JtJ一一一分子标记类型，采用一一一-一检测平台，采用一一一一一位点却l合进行检测，结果显示检测位点数为一一一一一一差异佼点数为一一一一一一声1I定为一一一一一一(不同或近似、疑问)对于判定为疑同的情况，按照NY/T 2341的规定进行田间鉴定，以战终确定品种的异同。A1 主要仪器设备A 1 1 高压灭菌锅A 1.2 电热恒温水槽A 1.3 A 1.4 电泳仪A 1.5 A 1.6 A 1.7 A 1.8 A 1.9 A 1 11 A 1.12 A 1 13 A 2.1 A 2.2 A23 A.24 浓盐酸A.25 氢氧化纳A.2.6 氯化纳A2.7 冰乙

14、酸A.2.8 去离子7(A2.9 双蒸水A 2 10 仕琉基乙醇A 2 1 1苯l!llA 2 12 氯仿A 2.13 异戊醇A 2.14 醋酸纳A 2 15 无水乙醇A 2 16 琼脂糖A.2 17 核酸染料附录A(规范性附录)主要仪器设备及试剂ia噩噩噩喳F.-盟国hA 2.18 DNA marker(15000 bp)NY/T 3642-2020 5 NY/1 3642-2020 A.2 19臭盼蓝A.2.20 二甲苯青A.2 21 甘油A.2.22 10 X PCR Buffer缓冲液(含Mg2+)A.2.23 4种脱氧核营酸(dNTPs)A.2 24 SSR引物A.2.25 laq

15、DNA聚合酶A.2.26 去离子甲酷胶A.2.27 DNA分析仪用分子量内标(最大分子量500bp)A.2.28 DNA分析仪用光谱校准基质(包括HEX和ROX等荧光标记)A.2.29 DNA分析仪用电泳缓冲液6.1 1 mol/L Tris溶液附录B(规范性附录)溶液自己制NY/T 3642-2020 税、J1!1.121.91 g Tris，溶解在800mL去离子水中，待浴液冷却至室温后加入浓主)liJ节11-1至8.000力11水定容至1L，分装后高压灭菌备用。B.2 0.5 mol/L EDTA溶液称I仅186.10 g二水EDTA，加入到800mL去离子水中，在磁力搅拌器上剧烈搅拌，

16、用氢氧化创调节溶液的pl-I至8.00，然后定容至1L，分装后高压灭菌备用。B.3 2%CI础铀提缓冲溶液利、J1!1.CTAB4.00 g、氮化创刊.36g，jj)仅1mol/L Tris浴液20mL和10.5mol/L EDTA的液8mL，先用70mL双蒸水溶解，再定容至200mL;:;EK灭tZI备用。B.4 3 mol/L醋酸纳溶液利、Jj显40.81g三水醋酸俐，加入到80mL去离子水中游解，用冰乙酸调节pI-l至7.00，!JII水定容到100 mL，分装后高压灭菌备用。B.5 50XTAE缓冲液的配制称取Tris242 g和EDTA18.61 g于1L烧杯中，如l入约800mL去

17、离子水，充分搅拌均匀，!Jn入57.10 mL的冰乙酸，充分溶解，用氢氧化俐调pI-l至8.30，!J1I去离子水定容至1L后，室源保存。使用时稀释50倍.B.6 1%琼脂糖凝胶的配制码;Jj!l.4 g琼脂糖.加入40mL l X T八E缓冲液，加热溶解后迅速倒入llitlJJll:袍中，待胶凝固后使用。B.7 10 X Loading Buffer缓冲液称i仅I二DTA7.33 g，澳盼蓝1.25 g、二可J苯背1.25 g，!JII入500mL烧杯中，加入约200mL去离子水，加热搅抖至充分溶解，!m入180mL甘训1，使用2mol/L氢氧化纳调节pI-l=7.00，用去离子水定容至50

18、0mL，.瓶保存备用。B.8 SSR引物溶液合成的引物商心宫开荒前I革时离心105，按照说明书分别配制上游引物和l下游引物终浓度均为10mol/L，正反向引物等量混合，备用.B.9 30%丙烯酷胶溶液(WjVl分别称取290g丙烯航!胶和10g rp叉双丙烯欧Jf!溶于约800mL水中，1JII水定容至1000mL，置于棕色瓶中OC储存。8.10 6%变性PAGE胶(年jVl盘Jli(16 mL 30%的丙烯酷!跤，12mL 5XTBE缓i11液、600L10%过硫股馁(新鲜配制)耳1160L四甲总乙二l跤，!JU水定容至60mL。8.11 亲和硅炕工作液l以Jli(1 mL无水乙醉，!JII

19、入10L亲和破炕和10fL 冰酣酸，混匀。8.12 剥离磕院工作液ilkJjit 2 mL的二甲基二氯硅锐，!m8 mL的三氮甲:院，混匀。7/T 3642-2020 B.13 10%过硫酸钱溶液(W/V)称i叙0.10g过硫股锁溶于1mL 71.中。B.14 10XTBE缓冲液分别称取108g三经l:p基氨基rp炕和155g刷l酸溶于约800mL水中，如l入37mL乙二胶四乙股二例浴液(0.50mol/U，jJII水定容至1L.B.15 5XTBE缓冲液:lilJ&.500 mL 的10XTBE缓冲液，!Jn水定容至1L.B.16 1 XTBE缓冲液ik!仅500mL的10XTBEB.17

20、固定液:!ltJj且100mL B.18 染色液称J&.lgliiB.19 显影液称J&.10 g 8 NY/T 3642-2020 附录C(规范性附录)核心引物名单及序列荧光寻|物(上游或下游进行SFAM、HEX和ITAMRA标记)的染色体fLl(及PCR信息见表C.10 表C.l核心引物名单及序列L;I物名称在桃基因组V2.0al版本的位贺，bpITilI单兀引物序列(5-3)i且火温度:CSSR73 Clu.4,29 833 093-29 833 110(CAAl.F,TTGCTGCTGAAJLTAATGAACA R,GGGTGGCCTGTTGAGAATATAA 56 SSR93 Chr

21、.8.16601301-16601397(AGl.F,AACTGCCTTAGCTTAGACTGGCT 56 R.AAGACGAGAAACCACCTTGAATC SSR96 Chr.2.25847718-25847813(AG F.AACCTCAATCATTCT1寸ACACAAGCR,CTGCTTAAGGAGGAACCTCAAAT 56 SSRI07 Chr.2,18644503-18641518(GAl.F,TGCAGACTAGGGTT寸寸ACAGACAA56 R,GATCTCCAAGTCATCTCCA丁TGSSRI25 Chr.6,22 369 258-22 369 335(GAl.F,TA

22、GCGCCA1寸GTTCACACACR,GCTGGGAGAGAAAGATGACTGT 56 SSRI52 Chr.1.1 400 594-1 400 656(TC F.GTfCTCGACTCCCATATCCAA R,CTCCAAAGTACAGAGCCTATCG 56 SSRI69 Chr.L 12 286 953-12 286 975(CT F.TTCTTArCTGGAAATGCATC R,ACA TITGCCCAAAA T ATGGTG 56 SSRI79 Chr.2,1 647323-1647339(AG F,ATCACGTCGGAcAGTTCCTAGA R.CGCCCTCCTCCCTCA

23、GTA 56 SSRI81 Chr.6,4 799 398-4 799 470(CTl.F.AGAATGCAGGCCT1CCTTCT R,GCACCTTGCTTATCATCCGA 56 SSRI81 Chr.3.3349593-3349659(AGl.F.TGAATGTTCl寸CCTGCTCCTGR.ATGAACATGAACCAGTCAAGGA 56 9 NY/T 3642-2020 核心寻|物相关信息见表D.1.引物名称SSR73 SSR93 SSR96 10 附录D(资料性附录)核心引物相关信息而且Iilt桃133 lfj山青tt#t135 天津水l137 尖嘴红肉139 rfH山桃111

24、 牵化蜗桃143 兴津前Ir桃115 i晴!fIJ昕147 吊枝臼119 金茧6号151 吉林8501153 龙前Ir蜗桃155 喀什黄肉李光参照品种基肉型数据159/159 171/171 171/196 177/196 159/187 190 125 99/111 119/115 121/125 123/117 125/125 127/127 129/129 131/133 131/133 135/135 137/147 131/139 111/111 143/113 1151145 123/147 1151119 149/151 125/153 125/155 NY 11 3642-20

25、20 表D.1(续;1物名称J住荐荧光退火温度.C等位变异.bp参ft!l品种参!ft品种基因型数据SSR96 5HEX 56 157 吉林8801157/159.159 吉林8801157/159 161 五月鲜扁|二115/161 163 削丰163/169 165 组根fl*桃165/165 167 l可伯利亚C167/169 169 削谷163/169 171 做尖红肉123/171 SRI07 5TAMRA 56 156 农书i蟠桃156/156 170 自由桃皇后156/170 190 上悔水蜜190/202 194 荆谷156/194 196 大金旦196/196 198 吊枝白

26、156/198 200 I花200/204 202 奉化蟠桃170/202 204 II,t;200/204 SSRI25 5HEX 56 103 纠花山桃103/103 105 组根|斗肃桃105/105 115 陕l才山桃115/131 123 临l二13号123/I 23 125 阳泉肉桃125/145 127 大金旦127/135 129 内眉2号129/155 131 天津水蜜131/159 135 大金旦127/135 137 深州水蜜137/137 139 鹰啸桃139/115 141 敦煌冬桃141/141 143 喀什黄肉李光143/165 115 蜗桃息后129/145 1

27、47 尖啸组肉147/155 H 9 11t;149/149 151 吉林8501151/151 153 哈维斯153/153 155 i周2号129/155 157 金童6号153/157 159 天津水蜜131/159 161 主l桃157/161 163 帚形山桃129/163 165 略千1黄肉李光143/165 167 吊枝白145/167 169 U州幻皮蜜桃165/169 171 臼凤149/171 173 增艳173/173 175 女王175/1 75 177 3fl-1.且桃177/177 179 11花山桃129/179 189 石桃189/189 191 瓜桃191/1

28、91 I1 NY/T 3642-2020 表D.l(续)引物例:1 推荐荧光rj且火泪度;-1等位变异，bp参!ft品种参照品种.1i肉型敖据SSl152 I 的IEXI 56 226 新!illI蜡桃(无花粉)226/248 236 深州水lli236/236 238 难化辅相t238/256 244 金市6号244/248 216 兴11前1 1桃238/246 2/18 金1(6号244/218 jll!蜗l号248/250 248/252 SSRI69 51-IEX SSRI79 258/258 256/260 248/266 248/270 SSlJ谷19V242 212 1-1-1

29、训l性5号212/238 214 单瓣紫桃214/214 218 H.J桃218/218 222 哈维斯190/222 224 兴.J!前11桃224/238 226 1-1:1制1辅3号188/226 228 l当很H到J桃228/228 232 陕1.lIJ桃232/232 234 llf庄l号234/248 236 T-f州刽皮蜜桃162/236 238 li11 1 12 NY/1 3642-2020 表D.l(续);:JI吻名称lMi荧光迫火温度.C等位变异.bpI 参照日，种参照品种;t闲型放掘SSRJ8J 5TAMRA 56 240 武汉2号188/240 242 1月谷191/

30、242 244 如l玛格190;21111 246 喀什黄肉李光246/250 248 四81号231/218 250 喀什黄肉李光216/250 254 内花山桃254/256 256 l气花山桃254/256 SSRJ81 5FAM 56 225 白花山桃225/255 233 白花233/233 235 深州水蜜235/235 237 金童6号237/261 261 哈维JIJi261/261 263 大金旦263/285 285，剖l桃5号233/285 287 1可111蠕1号285/287 289 兴洋相11桃233/289 13 NY/T 3642-2020 附录E(资料性附录)

31、参照品种名单及来源参!f4品种幸;111及来源见表E.L表E.l参照品种名单及来源编号利:质名称种质外文名1Pi性来斟1I 陕1-1山桃Shm Gan Shan T.:1O 二俯体1闷农业科学院郑州果树研究所2 号Jf:lll桃ZhOll Xing Shan Tao=1f体11-1农业科学院郑州果树研究所3 组Eill快!-long H ua Shan T ao 1n体中l叫农业科学院郑州果树研究所4 ILI:lt:L11桃Bai 1-1 ua Shan T ao 19体1141农业科学院郑州果树研究所5 吉根H肃挑Hong Gen Gan Su Tao 二倍体1lliI农业科学院郑州果树研究

32、所6 1=1根11-*桃ai Gen Gan Su T a。二倍体II:农业科学院郑州果树研究所7 1fr4l:l崎桃(元化粉Xinjiang Pan Tao Cpollen sterility)=1古体1凶农业科学院郑州果树研究所8 吊枝11自aoZhi Bai=f-g体1 I.农业科学院郑州果树研究所9 鹰咖桃Ying Zu=fPi体11:1问农业科学院郑州果树研究所10 五月鲜Ad干Wu Yue Xian Bian Gan 二倍体1 1-1农业科学院郑州果树研究所11 放但冬桃Dunhuang Dong T ao=1i古体巾1-1农业科学院郑州果树研究所12 11自1=13号Lin巴ai

33、3*丰一倍体1国农业科学院郑州果树研究所13 南山甜lliNanshan Tian T ao 俯体11且农业科学院郑州来树研究所14 G挑Shi Ta。古体qt国农业科学院郑州果树研究所15 JIl.桃Gua Tao fg体叶1-1农业科学院郑州梨树研究所16 平水桃Ping Yong Ta。一倍体1 IJ4农业科学院郑州果树研究所17 冉IJ谷Ge Gu=fZ体11叫农业科学院郑州果树研究所18 深州*篮Shenzhou Shui Mi 一倍体11且农业科学院郑州果树研究所19 尖啸幻肉Jian Zui I-Ioog Rou=1g.体 11叫农业科学院郑州呆树研究所20 Il尖幻肉Wei J

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35、o 倍体1 1玛农业科学院郑州果树研究所28 t.1电水iIiChinese Cling f1f体小国农业科学院郑州果树研究所29 莺歌桃Ying Ge Ta。=1;5体1 1叫农业科学院郑州果树研究所30 天Il水liiTianjin Shui Mi 一俯体1 叫农业科学院郑州果树研究所31 略千I-itt肉李光Kashi H uang Rou Li Guang=fP.i体1 1-1农业科学院郑州果树研究所32 大金旦Da Jin Dan-俯体11叫农业科学院郑州果树研究所33 1i丝桃Qing Si Tao 二倍体1川农业科学院郑州果树研究所34 帮化蠕桃Fenghua Pan Tao 二

36、倍体1 r司农业科学院郑州果树研究所35 迎春飞(ingChun 一fg体1141农业科学院郑州果树研究所36 PIjH J号Xizhuang 1#=fPi体11_1同农业科学院郑州果树研究所37 龙臼1 I蠕桃Long You Pan Tlo 一千古体 1 国农业科学院郑州果树研究所38 端桃l;3后Pan Tao Huang I-Iou 一倍体1 1叫农业科学院郑州果树研究所39 1 1-1前III号Zhong You Pan 1#一倍体1凶农业科学院郑州果树研究所40 中;111蠕3号Zhong YOtl Pan 3菩自体1 1-1农业科学院郑州果树研究所11 中却1 1桃5号Zhong

37、 YOll Tao 5#倍体1:1-1间农业科学院郑州果树研究所14 NY/T 3642-2020 表E.1(续)编号种质名称种质外文名f百性来出i42 四伯利亚CSiberian C 倍体中国农业科学院郑州果树研究所13 芒i1Bai J-Iua fH小小因农业科学院郑州果树研究所44 列玛格Nemaguard 古体中国农业科学院郑州果树研究所45 哈维斯I-Iavs fH体中国农业科学院郑州果树研究所46 金茧6号Babygold 6#倍体巾国农业科学院郑州果树研究所17 农书l蝠桃Slark s.lturn 倍体自1.国农业科学院郑州果树研究所18 女王Regina 倍牛中国农业科学院郑

38、州果树研究所49 增艳lmproved Flavor Crest 一倍体中国农业科学院郑州果树研究所50 l当JI-Iakuho=fiH牛中国农业科学院郑州果树研究所51 兴津前桃Okitsu=1i1体11!1农业科学院郑州果树研究所52 四眉2号Xi Mei 2#=f古体中国农业科学院郑州果树研究所53 武汉2号Wuhan 2#:二倍体巾国农业科学院郑州果树研究所15 ONON-qSH讪Z中国农业:1:版社LI.l版(北京市朝阳区麦子J;li衔18号楼网力1:)北京印刷一厂印刷新华书店北京发行所发行各地新华书店经销2020.,642*(邮政编码1001254峰印张J.25 字数25千字2020年10月ItJi第I次印刷4盹2020年10月第l版书号16109.8217 定价30.00元唔开本880mmX1230mm1/16 版权专有侵权必究举报电话(010)59194261 NY/T 3642-2020