SN∕T 2316-2019 出口动物源食品中阿散酸、硝苯砷酸、洛克沙砷残留量的检测方法(出入境检验检疫).pdf

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1、以正式出版文本为准中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 23162019代替 SN/T 23162009中华人民共和国海关总署发 布ICS 67.050c 532019-12-27 发布2020-07-01 实施出口动物源食品中阿散酸、硝苯砷酸、洛克沙砷残留量的检测方法 Determination of p-arsanilic acid、4-nitrophenylarsonic acid、3-nitro-4-hydroxy-phenylarsonic acid residues in animal foods for export以正式出版文本为准以正式出版文本为准ISN/T23162

2、019前 言本标准按照 GB/T1.12009 给出的规则起草。本标准代替 SN/T 23162009动物源性食品中阿散酸、硝苯砷酸、洛克沙砷残留量检测方法 液相色谱-电感耦合等离子体/质谱法。本标准与 SN/T 23162009 相比，主要技术变化如下：标准名称修改为“出口动物源食品中阿散酸、硝苯砷酸、洛克沙砷残留量的检测方法”。增加了液相色谱-原子荧光光谱法（LC-AFS）为第二法。本标准由中华人民共和国海关总署提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国天津海关动植物与食品检测中心、中华人民共和国合肥海关、北京海光仪器有限公司、上海新仪微波化学科技有限公司。本标准主要起草人：肖亚兵、董志珍

3、、高健会、韩芳、宋伟、马兴、宋旭、杨爽、逯玉凤、徐渊。本标准所代替标准的历次版本发布情况为：SN/T 23162009。以正式出版文本为准以正式出版文本为准1SN/T23162019出口动物源性食品中阿散酸、硝苯砷酸、洛克沙砷残留量的检测方法1 范围本标准规定了出口动物源性食品中阿散酸、硝苯砷酸、洛克沙砷残留量测定的高效液相色谱-电感耦合等离子体/质谱检测方法、液相色谱-原子荧光光谱检测方法。本标准适用于鸡肉、鸡肝、鸡肾、鸡可食用下水、猪肉、猪肝、猪肾、猪可食用下水中阿散酸、硝苯砷酸、洛克沙砷残留量的检测。2 规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的

4、版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法第一法 液相色谱-电感耦合等离子体/质谱法3 方法提要试样中残留的阿散酸、硝苯砷酸、洛克沙砷用甲醇+水（11，体积比）提取，离心后定容，过0.45m 滤膜，供高效液相色谱-电感耦合等离子体/质谱（HPLC-ICP/MS）测定，外标法定量。4 试剂和材料除另有规定外，所用试剂均为分析纯，水为 GB/T 6682 规定的一级水。4.1 甲醇：色谱纯。4.2 三氟乙酸：优级纯。4.3 0.1%三氟乙酸：准确移取 1 mL 三氟乙酸至 1000 mL 容量瓶中，定容。4

5、.4 滤膜：0.45 m，直径 47 mm。4.5 甲醇溶液：甲醇+水（11，体积比）。4.6 阿散酸（CAS 号：2045-00-3，C6H8AsNO3）标准物质：纯度大于等于 99。4.7 硝苯砷酸（CAS 号：98-72-6，C6H6AsNO5）标准物质：纯度大于等于 95%。4.8 洛克沙砷（CAS 号：121-19-7，C6H6AsNO6）标准物质：纯度大于等于 97.5%。4.9 阿散酸标准储备溶液：准确称取适量的阿散酸标准物质，用去离子水配成浓度为 500 g/mL 的标准储备液。根据需要用去离子水稀释成适当浓度的标准工作液。4.10 硝苯砷酸标准储备溶液：准确称取适量的硝苯砷酸

6、标准物质，用去离子水配成浓度为 500 g/mL的标准储备液。根据需要用去离子水稀释成适当浓度的标准工作液。4.11 洛克沙砷标准储备溶液：准确称取适量的洛克沙砷标准物质，用去离子水配成浓度为 500 g/mL的标准储备液。根据需要用去离子水稀释成适当浓度的标准工作液。以正式出版文本为准2SN/T23162019标准储备液在 0 4冰箱中保存，有效期为 12 个月，标准工作液在 0 4冰箱中保存。有效期为 6 个月。5 仪器和设备5.1 高效液相色谱-电感耦合等离子体/质谱仪。5.2 高速均质器：15000 r/min。5.3 离心机：3 000 r/min。5.4 涡旋混合器。5.5 超纯水

7、仪。5.6 天平：感量为 0.1 mg 和 1 mg。6 试样制备与保存6.1 试样制备将鸡肉、鸡肝、鸡可食用下水、猪肉、猪肝、猪肾、猪可食用下水等有代表性样品约 500 g、鸡肾样品 100g 用绞肉机绞碎，混匀，均分成 2 份试样，分装入洁净的盛样袋内,密闭并标明标记。6.2 试样保存动物源性食品等试样于-18以下冷冻保存。7 测定步骤7.1 提取称取试样 1 g（精确至 0.001 g）置于微波辅助萃取内罐中，准确加入 10 mL 甲醇溶液（4.5），按照微波辅助萃取仪的标准操作步骤进行提取（参见附录 A 中表 A.1）。提取完毕，取出冷却至室温，10 000 r/min 离心 10 m

8、in。取 4 mL 上清液，氮气吹扫，用甲醇溶液（4.5）定容至 2 mL，经 0.45 m有机微孔滤膜过滤后进行测定。按同一操作方法作空白试验。7.2 测定7.2.1 液相色谱条件7.2.1.1 色谱柱：C18柱，粒径 5 m，250mm4.60 mm 或性能相当者。7.2.1.2 流动相：甲醇-0.1%三氟乙酸水溶液（1090，体积比）。7.2.1.3 流速：1.0 mL/min。7.2.1.4 进样量：20 L。7.2.2 电感耦合等离子体-质谱工作条件和测量参数电感耦合等离子体-质谱工作条件和测量参数见附录 B。7.2.3 高效液相色谱-电感耦合等离子体-质谱测定分别配制阿散酸、硝苯砷

9、酸、洛克沙砷标准使用液 0.0 ug/L，0.4 ug/L，2.0 ug/L，10.0 ug/L，25.0 ug/L，50.0 ug/L，100.0 ug/L，测得其峰面积并求出峰面积与浓度关系的一元线性回归方程。阿散酸、硝苯砷酸、洛克沙砷标准溶液（25 ug/L）的高效液相色谱-电感耦合等离子体、质谱图参见以正式出版文本为准3SN/T23162019附录 C。7.2.4 空白试验除不加试样外，均按上述测定条件和步骤进行。7.2.5 结果计算和表述按式（1）计算试样中阿散酸（或硝苯砷酸或洛克沙砷）残留量，计算结果应将空白值扣除。Xi=（c1 c0）Vm1 000 V2V1（1）式中：Xi试样中

10、被测物的残留量，单位为毫克每千克（mg/kg）；c1样液中被测物的浓度，单位为微克每升（g/L）；c0空白液中被测物的浓度，单位为微克每升（g/L）；V样液最终定容体积，单位为毫升（mL）；V1吸取上清液体积，单位为毫升（mL）；V2最终定容体积，单位为毫升（mL）；m最终样液所代表的试样量，单位为克（g）。8 测定低限和回收率8.1 测定低限阿散酸、硝苯砷酸和洛克沙砷的测定低限均为 0.01 mg/kg。8.2 回收率样品添加回收率见表 D.1。第二法 液相色谱-原子荧光光谱法9 方法提要试样中残留的阿散酸、硝苯砷酸、洛克沙砷经甲醇+水（11，体积比）提取后，以液相色谱进行分离，分离后的目标

11、化合物在酸性环境下与硼氢化钾反应，生成气态砷化合物，用原子荧光光谱仪进行测定。按保留时间定性，外标法定量。10 试剂和材料除另有规定外，本方法所用试剂均为优级纯，水为 GB/T 6682 规定的一级水。10.1 试剂10.1.1 甲醇：色谱纯。10.1.2 盐酸。10.1.3 硼氢化钾。以正式出版文本为准4SN/T2316201910.1.4 氢氧化钠。10.1.5 磷酸二氢钾。10.1.6 三氟乙酸。10.1.7 过硫酸钾。10.1.8 微孔滤膜：0.45 m，有机系。10.2 试剂配制10.2.1 甲醇溶液：甲醇（10.1.1）+水（11，体积比）。10.2.2 盐酸溶液（5%，体积分数）

12、：量取 50 mL 盐酸（10.1.2），溶于水并定容至 1000 mL。10.2.3 硼氢化钾溶液（20 g/L）：称取 5 g 氢氧化钠溶（10.1.4）于水，待氢氧化钠（10.1.4）充分溶解后，称取 20 g硼氢化钾（10.1.3）于氢氧化钠（10.1.4）溶液中，溶于水并定容至 1000 mL。10.2.4 三氟乙酸（0.1%）-磷酸二氢钾溶液（50 mmol/L）：称取 3.402 g磷酸二氢钾（10.1.5）溶于水，待固体完全溶解后，添加 0.5 mL 三氟乙酸（10.1.6），溶于水并定容至 500 mL。经 0.45 m 有机滤膜（10.1.8）过滤后，于超声水浴中超声脱气

13、15 min，备用。10.2.5 过硫酸钾溶液（3%，体积分数）：称取 0.5 g 氢氧化钠（10.1.4）溶于水，待氢氧化钠（10.1.4）充分溶解后，称取 3 g 过硫酸钾（10.1.7）于氢氧化钠溶液中，溶于水并定容至 100 mL。10.3 标物质10.3.1 阿散酸（CAS 号：2045-00-3，C6H8AsNO3）标准物质：纯度大于等于 99。10.3.2 洛克沙砷（CAS 号：121-19-7，C6H6AsNO6）标准物质：纯度大于等于 97.5%。10.3.3 硝苯砷酸（CAS 号：98-72-6，C6H6AsNO5）标准物质：纯度大于等于 95%。10.4 标准溶液配制见

14、4.9 4.11。标准储备液在 0 4冰箱中保存，有效期为 6 个月。11 仪器和设备所有玻璃器皿均应以硝酸溶液（14，体积比）浸泡 24 h，用水反复冲洗，最后用去离子水冲洗干净。11.1 液相色谱-原子荧光光谱仪（LC-AFS）：由液相色谱仪（包括液相色谱泵和进样装置）与原子荧光光谱仪组成。11.2 组织匀浆机。11.3 高速粉碎机。11.4 天平：感量为 0.1 mg 和 1 mg。11.5 真空抽滤装置。11.6 超声波水浴器。11.7 超纯水仪。11.8 微波辅助萃取仪。11.9 冷冻离心机：转速 10 000 r/min。12 样品制备与保存见第 6 章。以正式出版文本为准5SN/

15、T2316201913 分析步骤13.1 提取称取试样 1 g（精确至 0.001 g）置于微波辅助萃取内罐中，准确加入 10 mL 甲醇溶液（10.2.1），按照微波辅助萃取仪的标准操作步骤进行提取（参见表 A.1）。提取完毕，取出冷却至室温，10 000 r/min 离心 10 min。取 4 mL 上清液，氮气吹扫，用甲醇溶液（10.2.1）定容至 2 mL，经 0.45 m有机滤膜过滤后进行测定。按同一操作方法作空白试验。13.2 测定13.2.1 液相色谱参考条件13.2.1.1 色谱柱：C18柱（粒径 5m，250mm4.60 mm），或性能相当者。13.2.1.2 流动相：甲醇-

16、三氟乙酸（0.1%）-磷酸二氢钾溶液（10.2.4）（595，体积比）。13.2.1.3 流速：1.2 mL/min。13.2.1.4 进样体积：100 L。13.2.2 原子荧光检测参考条件13.2.2.1 负高压：330V。13.2.2.2 灯电流：100 mA。13.2.2.3 载气流量：400 mL/min。13.2.2.4 屏蔽气流量：900 mL/min。13.2.2.5 盐酸溶液流速：120 r/min。13.2.2.6 硼氢化钾流速：120 r/min。13.2.2.7 过硫酸钾溶液流速：110 r/min。13.2.2.8 读数模式：峰面积。13.2.3 标准曲线制作分别准确

17、吸取 1.00 mg/L 硝苯砷酸标准工作液和 1.00 mg/L 洛克沙砷标准工作液 0.00 mL、0.40 mL、0.60 mL、0.80 mL、1.00 mL 和 1.20 mL，及 1.00 mg/L 阿散酸标准工作液 0.00 mL、0.20 mL、0.40 mL、0.60 mL、0.80 mL 和 1.00 mL 于 6 个 10 mL 容量瓶，用水稀释至刻度，此混合标准系列溶液的阿散酸浓度为 0.0 g/L，20.0 g/L，40.0 g/L，60.0 g/L，80.0 g/L 和 100.0 g/L，硝苯砷酸和洛克沙砷浓度均为 0.0 g/L，40.0 g/L，60.0 g/

18、L，80.0 g/L，100.0 g/L 和 120.0 g/L。测定标准系列溶液得到色谱图，以保留时间定性，以标准系列溶液中目标化合物的浓度为横坐标，色谱峰面积为纵坐标，绘制标准曲线。标准溶液（100 g/L）色谱图见图 E.1。13.2.4 空白试验除不加试样外，均按上述测定条件和步骤进行。13.2.5 结果计算和表述按式（2）计算试样中阿散酸（或硝苯砷酸或洛克沙砷）残留量，计算结果应将空白值扣除。Xi=（c1 c0）Vm1 000 V2V1（2）以正式出版文本为准6SN/T23162019式中：Xi试样中被测物的残留量，单位为毫克每千克（mg/kg）；c1样液中被测物的浓度，单位为微克每

19、升（g/L）；c0空白液中被测物的浓度，单位为微克每升（g/L）；V样液体积，单位为毫升（mL）；V1吸取上清液体积，单位为毫升（mL）；V2最终定容体积，单位为毫升（mL）；m最终样液所代表的试样量，单位为克（g）。14 测定低限和回收率14.1 测定低限阿散酸的测定低限为 0.1 mg/kg、硝苯砷酸和洛克沙砷的测定低限均为 0.2 mg/kg。14.2 回收率样品添加回收率见附录 D 中表 D.2。以正式出版文本为准7SN/T23162019附 录（资料性附录）微波辅助萃取参考条件微波辅助萃取参考条件见表 A.1。表 A.1 微波辅助萃取参考条件步骤功率/W温度/升温时间/min保留时间

20、/min1300555523006025340065160以正式出版文本为准8SN/T23162019附 录 B（资料性附录）电感耦合等离子体-质谱仪器工作条件和测量参数B.1 电感耦合等离子体-质谱仪器工作条件见表 B.1。表 B.1 电感耦合等离子体-质谱仪器工作条件雾化器同心雾化器炬管石英双通道，2.5 mm采样锥/截取锥1.0/0.4 mm(Ni)锥高频发射功率1300 W采样深度7.5 mm辅助气流量1.00 L/min雾化室石英雾化室温度2载气流量0.65 L/min冷却气流量15.00 L/min载气补偿气流量0.30 L/min待测同位素75AsB.2 用电感耦合等离子体-质谱

21、调谐液(10 g/L)7Li，89Y，140Ce，205Tl，59Co 溶液，调整仪器的各种参数，见表 B.2。表 B.2 电感耦合等离子体-质谱仪器测量参数7Li89Y205Tl轴偏移(amu)7.000.1089.000.10205.000.10分辨率(W-10)0.65 0.800.65 0.800.65 0.80灵敏度（cps）330 000380 000300 000氧化物比值156CeO/140Ce：0.5%双电荷比值70Ce+/140Ce+：2%以正式出版文本为准9SN/T23162019附 录 C（资料性附录）阿散酸、硝苯砷酸和洛克沙砷混合标准溶液（25 g/L）HPLC-IC

22、P/MS 图1.002.003.004.005.006.007.008.009.0010.00 11.00 12.00050100150200250300350400450500550t/minAbundanceTIC:4.D(+,-)图 C.1 阿散酸 2.09 min、硝苯砷酸 5.41 min、洛克沙砷 7.92 min 标准溶液(25 g/L)高效液相色谱-电感耦合等离子体/质谱图以正式出版文本为准10SN/T23162019附 录 D（资料性附录）不同样品中阿散酸、硝苯砷酸和洛克沙砷的添加回收率（n=6）D.1 在 8 种不同基质样品中添加 3 个水平的阿散酸、硝苯砷酸和洛克沙砷，经

23、高效液相色谱-电感耦合等离子体/质谱仪测定，回收率结果见表 D.1。表 D.1 不同样品中阿散酸、硝苯砷酸和洛克沙砷的添加回收率（HPLC-ICP/MS）化合物添加浓度/（mg/kg）回收率范围/%鸡肉鸡肝鸡肾鸡可食用下水猪肉猪肝猪肾猪可食用下水阿散酸0.0182.489.680.186.482.588.581.785.683.688.986.988.681.090.482.392.70.0292.294.382.290.489.393.782.291.587.4109.488.793.682.186.983.9102.50.583.294.684.790.193.9102.582.0104.

24、782.499.782.689.786.789.584.2104.2洛克沙砷0.0189.094.681.893.083.7101.187.999.287.4107.383.189.484.787.986.5101.90.0286.0101.384.793.994.2107.485.2101.781.6102.082.188.890.495.685.2109.40.587.794.284.292.381.796.584.2109.389.3103.983.196.091.796.680.9107.4硝苯砷酸0.0187.192.381.4104.5 92.5106.587.193.787.19

25、3.789.9104.288.6104.684.5104.20.0284.498.581.9104.681.997.080.4102.580.4104.387.9104.792.4106.281.7101.90.584.1104.490.4107.0 85.2109.382.391.187.7102.295.4108.789.7107.590.8104.2D.2 在 8 种不同基质样品中添加三个水平的阿散酸、硝苯砷酸和洛克沙砷，经液相色谱-原子荧光光谱仪测定，回收率结果见表 D.2。表 D.2 不同样品中阿散酸、硝苯砷酸和洛克沙砷的添加回收率（LC-AFS）化合物添加浓度/（mg/kg）回收率

26、范围/%鸡肉鸡肝鸡肾鸡可食用下水猪肉猪肝猪肾猪可食用下水阿散酸0.181.087.081.087.081.090.080.084.081.091.086.0100.083.091.081.0100.00.286.0102.583.587.080.587.080.587.581.089.582.086.580.587.582.592.50.592.296.481.489.080.292.481.092.481.886.281.892.282.690.283.8103.6洛克沙砷0.283.586.083.595.081.086.581.090.581.089.081.089.081.089.58

27、4.088.50.582.688.282.6101.883.487.283.487.082.492.282.885.681.487.285.297.0281.094.181.194.282.186.381.288.181.889.583.689.184.891.180.1101.7以正式出版文本为准11SN/T23162019表 D.2（续）化合物添加浓度/（mg/kg）回收率范围/%/kg）鸡肝鸡肾鸡可食用下水猪肉猪肝猪肾猪可食用下水硝苯砷酸0.281.088.081.088.082.089.583.087.580.087.082.589.582.586.580.086.00.581.887

28、.283.687.881.085.683.486.284.487.881.087.484.298.880.096.4280.786.180.486.382.187.587.7101.280.694.480.589.186.8104.980.696.8以正式出版文本为准12SN/T23162019附 录 E（资料性附录）阿散酸、硝苯砷酸和洛克沙砷混合标准溶液（100 g/L）LC-AFS 图说明：ASA 阿散酸；ROX洛克沙砷；NIT 硝苯砷酸。图 E.1 阿散酸 4.05 min、洛克沙砷 11.79 min、硝苯砷酸 16.87 min 标准溶液(100 g/L)液相色谱-原子荧光光谱图以正

29、式出版文本为准ISN/T23162019ForewordThis standard was drafted in accordance with GB/T 1.12009.This standard was instead of SN/T 23162009“Determination of p-arsanilic acid、4-nitrophenylarsonic acid、3-nitro-4-hydroxy-phenylarsonic acid residues in animal foods LC-ICP/MS”.This standard compares with SN/T 23162

30、009,main technology changes as follows:The title of the standard was changed to“Determination of p-arsanilic acid、4-nitrophenylarsonic acid、3-nitro-4-hydroxy-phenylarsonic acid residues in animal foods for export”；Liquid Chromatography Atomic Fluorescence Spectrometry(LC-AFS)was added as the second

31、method.This standard was proposed by and is under the charge of General Administration of Customs of the P.R.C.This standard was drafted by Animal,Plant and Food Inspection Center of Tianjin Customs of the P.R.C.,Hefei Customs of the P.R.C,Beijing Haiguang Instrument Co.Ltd and Sineo Microwave Chemi

32、stry Technology Co.Ltd.The main drafters of this standard are Xiao Yabing,Dong Zhizhen,Gao Jianhui,Han Fang,Song Wei,Ma Xing,Song Xu,Yang Shuang,Lu Yufeng and Xu Yuan.This standard replaced the following standards:SN/T 23162009。以正式出版文本为准以正式出版文本为准1SN/T23162019Determination of p-arsanilic acid、4-nitro

33、phenylarsonic acid、3-nitro-4-hydroxy-phenylarsonic acid residues in animal foods for export1 ScopeThis standard specifies the methods of determination of p-arsanilic acid、4-nitrophenylarsonic acid、3-nitro-4-hydroxy-phenylarsonic acid residues by LC-ICP/MS and LC-AFS in animal foods for export which

34、indudes principle,reagents and materials,apparatns and epumant sample preparootion and storape,proedure;callation and expression of the resulf.This standard is applicable to the determination of p-arsanilic acid、4-nitrophenylarsonic acid、3-nitro-4-hydroxy-phenylarsonic acid residues in chicken,chick

35、en liver,chicken kidney,chicken offal,pork,pig liver,pig kidney and pig offal.2 Normative referenceThe following documents are essential for this document.for dated reference only dated edtions sball spply to this siardarel.For Any undated reference the latest edition(including all modifications)ref

36、end to applics.GB/T 6682 Water for analytical laboratory use-Specification and test methods.Approach 1 Liquid chromatography inductively coupled plasma/mass spectrometry3 Principle The p-arsanilic acid、4-nitrophenylarsonic acid、3-nitro-4-hydroxy-phenylarsonic acid residues were extracted with methan

37、ol+H2O(1+1,v/v),centrifuged,filtrated by 0.45um filter film,then determined by HPLC-ICP/MS,calculated by comparing peak of the sample with corresponding standard peak area.4 Reagents and materialsUnless otherwise specified,all reagents used should be analytically pure,“water”is deionized distilled W

38、ater.4.1 Methanol:HPLC grade.4.2 Trifluoroacetic acid:HPLC grade.4.3 Trifluoroacetic acid(0.1%,volume fraction):Remove 1 mL accurately trifluoroacetic acid into a 1000 mL volumetric flask,constant volume.4.4 Filter membrane:0.45 m,the diameter is 47 mm.4.5 Methanol solution:methanol+H2O(11,V/V).4.6

39、p-Arsanilic acid standard(C6H8AsNO3,CAS：122453-73-0):Purity 99%.4.7 Nitrophenylarsonic acid standard(C6H6AsNO5,CAS:122453-73-0):Purity 95%.以正式出版文本为准2SN/T231620094.8 Nitro-4-hydroxy-phenylarsonic acid standard(C6H6AsNO6,CAS:122453-73-0):Purity 97.5%.4.9 p-Arsanilic acid standard solution:Weigh approp

40、riate p-Arsanilic acid,dissolve in deionized distilled water and prepare a solution of 500 g/mL as standard stock solution.Dilute the p-Arsanilic acid standard(4.6)stock solution to the required concentration as the standard working solution with deionized distilled water.4.10 Nitrophenylarsonic aci

41、d standard solution:Weigh appropriate p-Arsanilic acid,dissolve in deionized distilled water and prepare a solution of 500 g/mL as standard stock solution.Dilute the 4-Nitrophenylarsonic acid standard stock solution to the required concentration as the standard working solution with deionized distil

42、led water.4.11 Nitro-4-hydroxy-phenylarsonic acid standard solution:Weigh appropriate p-Arsanilic acid,dissolve in deionized distilled water and prepare a solution of 500 g/mL as standard stock solution.Dilute the 3-Nitro-4-hydroxy-phenylarsonic acid standard stock solution to the required concentra

43、tion as the standard working solution with deionized distilled water.standard stock solution shall be stored at 0 4 in refrigerator.Period of validity is 12 month.Standard working solution shall be stored at 0 4 in refrigerator.Period of validity is 6 month.5 Apparatus and equipment5.1 HPLC-ICP/MS.5

44、.2 Homogenizer：15 000r/min.5.3 Centrifuge:3 000 r/min.5.4 Vortex mixer5.5 Ultrapure water system.5.6 Electronic balances:the sensitivity is 0.1 mg and 1 mg.6 Sample preparation and storage6.1 Sample preparationReduce the animal original food sample of chicken,chicken liver,chicken offal,pork,pig liv

45、er,pig kidney and pig offal to ca 500g and 100g chicken kidney by quartering,mix thoroughly and divide into 2 equal portion,place in clean containers,seal and label.6.2 storage of test sampleAnimal original food shall be stored below-18.In the course of sample preparation,precaution must be taken to

46、 avid contamination or any factors which may cause the change of p-Arsanilic acid,4-Nitrophenylarsonic acid,3-Nitro-4-hydroxy-phenylarsonic acid residue content.7 Procedure of determination 7.1 Extraction Weigh 1 g(accurate to 0.001 g)of the test sample into the microwave assisted extraction tank,ad

47、ding 10 mL of Methanol solution(4.5).The extraction was carried out according to the standard operation steps of the microwave assisted extraction apparatus(for reference conditions,see annex A,table A.1).After extraction,remove the extract and cool down to room temperature.Centrifugation at 10 000

48、r/min for 10 min.Take 4 以正式出版文本为准3SN/T23162019mL supernatant and purge the supernatant with nitrogen,and then press the methanol solution(4.5)to 2 mL.The solution was filtered by 0.45 m organic filter membrane(4.4).The filtrate is ready for HPLC-ICP/MS determination.The blank test is performed in th

49、e same operational approach.7.2 Determination7.2.1 LC operating conditions7.2.1.1 Column:SB-C18（250mm4.60mm）5m or equivalent.7.2.1.2 Mobile phase:methanol-0.1%trifluoroacetic acid（1090,V/V）.7.2.1.3 Flow rate:1.0mL/min.7.2.1.4 Injection volumn:20L.7.2.2 ICP/MS operating conditionsThe working conditio

50、ns and measurement parameters of ICP/MS are shown in annex B.7.2.3 HPLC-ICP/MS determinationPreparation of p-arsanilic acid,4-nitrophenylarsonic acid,3-nitro-4-hydroxy-phenylarsonic acid standard solution 0.0 ug/L,0.4 ug/L,2.0 ug/L,10.0 ug/L,25.0 ug/L,50.0 ug/L,100.0 ug/L.The peak area is measured a