NY∕T 2954-2016 小麦区域试验品种抗赤霉病鉴定技术规程(农业).pdf

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1、ICS 65.020.01 B 15 NY 中华人民共和国农业行业标准NY/T 2954-2016 小麦区域试验品种抗赤霉病鉴定技术规程Technical regulations for resistance evaluation of wheat for trials to Fusarium head blight caused by Fusarium graminearum Schw.2016-10-26发布2017-04-01实施:亡中华人民共和国农业部发布目IJr=:I 本标准按照GB/T 1.1-2009给出的规则起草。本标准由农业部种子管理局提出并归口。NY/T 2954-2016

2、 本标准起草单位:全同农业技术推广服务中心、中国农业科学院植物保护研究所、江苏省农业科学院植物保护研究所。本标准主要起草人:刘太国、谷铁城、陈怀符、陈万权、邱军、孙世贤。I NY/T 2954-2016 小麦区域试验品种抗赤霉病鉴定技术规程范围本标准规定了小麦区域试验品种抗赤霉病鉴定技术方法。本标准适用于参加小麦区域试验的普通小麦品种(系)抗赤霉病鉴定。2 规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。NY/T 1443.4 小麦抗病虫性评价技术规范第4部分:小麦抗赤霉病

3、评价技术规范3 术语和定义下列术语和定义适用于本文件。3.1 抗病性disease resistance 植物体所具有的能够减轻或克服病原物致病作用的可遗传的性状。3.2 抗侵入resistance to penetration 植物形态、解剖或机能上具有阻止病原物侵入的能力，从而使寄主的发病率较低。3.3 抗扩展resistance to colonization 由于寄主植物内在因素存在，使病原物侵入后不能建立良好的寄生关系或病原物在寄主体内受到限制，不能正常生长发育。3.4 抗性评价evaluation of resistance 根据采用的技术标准判别小麦品种对赤霉病程度的定性描述。3

4、.5 致病性pathogenicity 病原物所具有的破坏寄主和引起病变的能力。3.6 人工接种artificial inoculation 在适宜条件下，通过人工操作将接种体放于植物体感病部位并使之发病的过程。3.7 自然发病natural infection 将小麦品种种植于适合赤霉病害发生的地点而感染病害的过程。3.8 病情级另IJdisease rating scale 人为定量植物个体或群体发病程度的数值化描述。3.9 NY/T 2954-2016 分离物isolate 从发病部位通过人工培养、纯化、再接种和分离等方法获得的病原菌的培养物。3.10 培养基cuIture medium

5、 可以使病原物生长的自然或人工配制的基质。3.11 接种体inoculum 能够侵染寄主并引起病害的病原体。Xi 按式(1)3.12 普遍率incidence 发病率发病植物体单元数体单元为麦穗。3.13 严重度发病植物的严重程度由即为不3.14 病情指数全面考计算。(1)式中:D1 Si 表率分百严目一翻阳严乱当(2)式中:1-一一普遍率，单位为百分率c%);5一一平均严重度，单位为百分率c%)。3.15 小麦赤霉病wheat scab Ft=!禾谷镰抱Fusarium graminearum Schwabe teleomorph:GibberellazeeCSchwein)Petch和亚洲

6、镰抱F.asitlcum为主引起的主要以穗部产生坏死和枯萎症状的小麦病害，其他病原还有燕麦镰抱卫avenaceumC Fr.)Sacc.，黄色镰抱F.culmorum(W.G.Smith)Sacc.，串珠镰抱F.moniliforme Sheld.，税顶镰抱卫acuminatum(Ell.et Ev.)W r.等。2 NY/T 2954-2016 4 病原物接种体4.1 接种菌株的分离从发病麦穗上，切取病组织(颖、籽粒或穗轴等)，用75%的乙醇表面消毒2min3 min后，无菌水冲洗3次6次，于无菌的马铃薯荒草糖琼脂平板上进行培养，分离物经形态学和分子生物学鉴定后，通过分离物纯化及致病性测定.

7、筛选强致病力菌株.冷藏保存备用，按照NY/T1443.4的规定，用前菌株需进行致病力测定。4.2 小麦赤霉病菌接种体接种所用分离物应为当接种体的制备方法参见-品种，5.3 5.3.1冒险相遇。5.3.2 5.3.3 5.4.1.2 接种单花滴注接种:注入麦穗中部的一个/72 h。穗部接种应在阴天或傍晚进行，条件。5.4.2 土表接种作为穗部接种的辅助鉴定方法。5.4.2.1 接种期粒接种体和分生于包子接种体2种。播，吃，主苟争?兰1艺丰9只I茹茹.歹11臼二-丰L纪知，气F是二飞I泣、.飞￥I二I生玩d俨三I卢气v习&在.号乡纣.扩元I甲卢-手ct.回孟宜的气候条件20L稀释好的接种悬浮液20

8、穗，接种后套袋保湿48h，应及时进行田间浇灌，以满足病害发生所需小麦赤霉病土表接种期为小麦抽穗前1个月。5.4.2.2 接种方法将麦粒繁殖的接种体均匀撒于鉴定圃的小麦行间，每667m2接种量为4kg。土表接种后，应做好田间灌慨，保持土壤水分，以利于子囊壳形成。3 NY/T 2954-2016 6 病情调查6.1 调查时期接种后25d30 d。6.2 调查方法及项目调查时观测记载每份鉴定材料群体的发病状况，根据病害症状描述，逐份材料进行调查，记载病情级别;调查项目按土表接种或穗部滴注接种，调查严重度，并分别计算病情指数和平均严重度，记载表格见附录B。6.3 发病程度记载及标准6.3.1 单花滴注

9、接种条件下的严重度记载及标准6.3.1.1 调查方法调查每份鉴定材料所有接种穗小穗发病情况，根据病害症状描述，逐份材料进行调查并记载严重度。6.3.1.2 病情分级田间严重度分级及其对应的症状描述见表1。表1穗部单花滴注接种条件下小麦赤霉病严重度分级标准严重度分级症状描述O 接种小穗无可见发病症状仅接种小穗发病;或相邻的个别小穗发病，但病斑不扩展到穗轴2 穗轴发病，发病小穗占总、小穗的1/4以下3 穗轴发病，发病小穗占总小榕的1/41/2 4 穗轴发病，发病小穗占总小穗的1/2以上6.3.1.3 单花滴注接种条件下的抗性评价当鉴定圃中的感病对照材料达到其相应感病程度(平均严重度二三3.日，该批

10、次抗赤霉病鉴定视为有效。依据鉴定材料的平均严重度确定其对赤霉病的抗性水平，划分标准见表2。表2穗部单花滴注接种条件下小麦抗赤霉病评价标准平均严重度(主)抗性评价0=5 免疫ImmuneCI)0 52.0 抗病Resistant(R)2.053.0 中抗Moderatelyresistant(MR)3.0三53.5巾感Moderatelysusceptible(MS)3.5:%二S高感Highlysusceptible(S)6.3.2 土表接种条件下的普遍率和严重度记载及标准6.3.2.1 调查方法根据病害病情严重度分级标准，调查每份鉴定材料所有麦穗的病害严重度，计算普遍率。6.3.2.2 病情

11、分级病情严重度分级及其对应的症状描述见表30表3土表接种条件下小麦赤霉病严重度分级标准严重度分级症状描述O 元发病小穗l 零星小穗发病，发病小穗占总小穗的25.0%以下2 发病小穗占总小穗的25.1%50.0%3 发病小穗占总小穗的50.1%75.0%4 发病小穗占总小榕的75.1%以上4 NY/T 2954-2016 6.3.2.3 土表接种条件下的抗性评价当鉴定圃中感病对照材料病穗率达到75%以上，该批次抗赤霉病鉴定视为有效。依据鉴定材料发病程度(病情级别)确定其对赤霉病的抗性水平，抗性划分标准根据对照材料的鉴定结果进行(见表4)。表4土表接种条件下小麦抗赤霉病评价标准病情指数抗性评价DJ

12、=O 免疫Immune(J)ODlDl.R 抗病Resistant(R)DlcKR Dl DJQMR 中抗Moderatelyresistant(MR)DlMRDlDl.5 中感Moderatelysusceptible(MS)Dl二三DI.5高感Highlysusceptible(S)注:DI:病情指数;DIQR:抗病对照病情指数;DJ.MR:中抗对照病情指数;DI:5:感病对照病情指数。7 抗性综合评价7.1 抗性评价依据鉴定材料单花滴注、土表接种条件下发病程度综合确定其对赤霉病的抗性水平，相同鉴定方法通常以最高级别(病情指数或平均严重度)为准。7.1.1 关于人工接种鉴定与自然发病鉴定结

13、果的处理一个品种(系)同年度在不同地点做抗性鉴定，如在一个地点做自然发病鉴定，在另一地点做单花滴注接种鉴定时，肉两种鉴定方法评价的性质不同，前者测试的是品种(系)的抗侵入和抗扩展特性，后者测试的是品种(系)的抗扩展特性，因此应综合对品种进行评判，而不应只注重自然发病鉴定或者人工单花滴注鉴定，应将自然发病鉴定的病情指数转换成单花滴注条件下的病害严重度，计算其平均值，按表2平均严重度所在范围进行综合抗性评价。病情指数转换为单花严重度计算的方法为:病情指数求常用对数再平方，四舍五入，保留2位小数。7.1.2 关于年度间数据处理当连续进行2年(次)抗病鉴定:a)单花滴注接种法抗病级别差异在1级以内时，

14、视为病害因环境条件不同的正常表现;若差异2级及以上，应重复鉴定l次，按照表现多者认定抗性级别。b)土表接种抗病性水平差异在1级以内，视为病害肉环境条件差异的正常表现;若病害抗性水平差异为2级及以上，应再重复鉴定1次，按照表现多者认定抗性水平。c)在同一地点进行土表接种鉴定和单花滴注接种鉴定时.以感病严重的级别作为品种的真实抗性。d)当某地仅进行土表接种鉴定赤霉病时，其评价方法按照表4进行。7.2 重复鉴定初次鉴定中表现为抗病、中抗的材料，翌年用相同的病原菌进行重复鉴定。8 鉴定记载表格小麦抗赤霉病鉴定原始记录及结果记载表格见附录B。D NY/T 2954-2016 A.1 学名和形态描述A.1

15、.1 无性态附录A(资料性附录)小麦赤霉病病原菌优势种为禾谷镰抱Fusnumgraminearum Schwabe。属真菌界(Fungi)、半知菌亚门(Deuteromycota)、丝抱纲(Hyphomycetes)、瘤座抱目(Tubercuari-aes)、瘤座抱科(Tu bercu ariaceae)、镰刀菌属(Fusarium)真菌。其大型分生抱子镰刀形，有隔膜3个7个，顶端钝圆，基部足细胞明显，单个抱子无色，聚集在一起呈粉红色茹稠状。小型抱子很少产生。A.1.2 有性态玉蜀泰赤霉Gibberellazeae(Schwein)Petch。属子囊菌门(Ascomycota)、粪壳菌纲(So

16、rdariomycetes)、肉座菌亚纲(Hypocreomycetidae)、肉座菌目(Hypocreales)、丛赤壳科CNectriaceae)、赤霉属(Gibberell)真菌。子囊壳散生或聚生于寄主组织表面，略包于子座中，梨形，有孔口，顶部呈疵状突起，紫红或紫蓝至紫黑色。子囊无色，棍棒状，大小(100250)mX(15 150)m，内含8个子囊抱子。子囊抱子无色，纺锤形，两端钝圆，多为3个隔膜，大小(1633)mX(36)m。A.2 接种体的制备A.2.1 病麦粒接种体制备将麦粒在室泪下浸泡24h，沥干后，装人三角瓶中，在1210C下灭菌1h，冷却后即制成麦粒培养基。将经PDA培养基

17、平板活化培养的病菌接种于经高压灭菌的麦粒培养基，在230C250C下黑暗培养20 d25 d，每天摇动三角瓶，防止麦粒结块。菌丝布满麦粒后，将麦粒从三角瓶中取出，室温下晾干备用。A.2.2 分生于包子接种体制备称取一定量的绿豆，按绿豆:水=6:100比例加入水，加热煮沸，换小火继续加热10min，分装至三角瓶中，在1210C下灭菌30min，冷却后即制成绿豆培养液。将PDA培养基平板活化培养的病菌接种于经高压灭菌的绿豆培养液中，在200C250C下振荡培养(150r/min),4 d5 d后进行镜检，确认大量产生分生于包子后，配制接种悬浮液。悬浮液中分生于包子浓度调至1X105个/mL5X105个/mL。若暂时不接种，可将接种悬浮液置于40C冰箱中冷藏保存5d6 d。6 附录B(规范性附录)鉴定结果记载表小麦抗赤霉病鉴定原始记录及结果记载见表B.LNY/T 2954-2016 表B.1一一一年小麦抗赤霉病鉴定原始记录及结果记载表土表接种穗部单花滴注接种编号品种来源病情级别、病情指数及严重度病情级别及平均严重度综合平均抗性名称严重度总评O级1级2级3级4级病情指数严重度O级1级2级3级4级平均注1:鉴定地点地势注2:接种病原菌分离物编号注3:接种臼期调查日期注4:播种日期鉴定技术负责人(签字):7