细胞骨架的光镜观察—微丝的观察.ppt

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细胞骨架的光镜观察实验目的 实验原理 实验方法 作业 返回大纲实验目的l掌握显示细胞骨架的染色方法。l光镜观察细胞骨架纤维。返回实验原理l在真核细胞的细胞质中,普遍存在着一个由几种纤维状结构组成的网架,它由微管,微丝,中间纤维和微梁构成。细胞骨架决定着细胞形状的保持和改变,同时也是胞质中许多物质和颗粒运输以及细胞各种运动的结构基础,甚至还被认为在能量转化和信息传递方面也有作用。l.如果用非离子去垢剂TritonX-100处理细胞,可将质膜结构与细胞内许多蛋白质溶解,但细胞骨架蛋白却不被溶解破坏。因此,细胞先经TritonX-100处理后,再用考马斯亮蓝G250染色,其胞质背景着色弱,而细胞骨架着色清晰,从而提高分辨率。返回实验方法1.撕取洋葱鳞茎内的表皮细胞(约1cm大小若干片)置于装有pH6.8磷酸缓冲液的50ml烧杯中,使其下沉。2.吸去磷酸缓冲液,用1%TritonX-100处理20-30min。3.吸去TritonX-100,用M-缓冲液洗三次,每次8min。4.3%戊二醛固定20min。5.PH6.8磷酸缓冲液洗三次.每次8min。6.0.2%考马斯亮蓝G250染色20-30min。7.用蒸馏水洗1-2次,细胞置于载玻片上,加盖玻片,于普通光学显微镜下观察。返回作业l绘洋葱鳞茎表皮细胞骨架图,并作简要分析。返回