乙肝五项修改版.pptx
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1、第一页,共二十三页。目录目录u 1.1.乙肝的定义及传播途径乙肝的定义及传播途径u 2.2.乙肝五项的具体内容乙肝五项的具体内容u 3.3.乙肝五项的检测方法及原理乙肝五项的检测方法及原理u 4.4.乙肝五项各项指标详解乙肝五项各项指标详解u 5.5.乙肝五项不同结果的意义乙肝五项不同结果的意义第二页,共二十三页。一、乙肝的定义:一、乙肝的定义:慢性乙型肝炎简称乙肝是指乙肝病毒检测为阳性,病程超过半年或发病日期不慢性乙型肝炎简称乙肝是指乙肝病毒检测为阳性,病程超过半年或发病日期不明确而临床有慢性肝炎表现者。明确而临床有慢性肝炎表现者。临床表现为乏力、畏食、恶心、腹胀、肝区疼痛等病症。临床表现为
2、乏力、畏食、恶心、腹胀、肝区疼痛等病症。肝大,质地为中等硬度,有轻压痛。肝大,质地为中等硬度,有轻压痛。病情重者可伴有慢性肝病面容、蜘蛛痣、肝掌、脾大,肝功能可异常或持续异病情重者可伴有慢性肝病面容、蜘蛛痣、肝掌、脾大,肝功能可异常或持续异常。常。根据临床表现分为轻度、中度和重度。根据临床表现分为轻度、中度和重度。第三页,共二十三页。乙肝的传播途径乙肝的传播途径 血液传播:主要包括输血及血制品、注射器针头及针炙、牙科及手术器械等医疗行为,血液传播:主要包括输血及血制品、注射器针头及针炙、牙科及手术器械等医疗行为,纹身、纹眉、穿耳眼、做双眼皮、刮面等具有损伤性的美容行为。纹身、纹眉、穿耳眼、做双
3、眼皮、刮面等具有损伤性的美容行为。母婴传播:指携带乙肝病毒的母亲在怀孕期、分娩期、哺乳期将乙肝病毒传播给婴儿母婴传播:指携带乙肝病毒的母亲在怀孕期、分娩期、哺乳期将乙肝病毒传播给婴儿的一种方式。的一种方式。密切接触传播:家庭日常生活可造成传播的情况主要有:密切接触传播:家庭日常生活可造成传播的情况主要有:HBsAgHBsAg阳性人的创伤出血、阳性人的创伤出血、月经血、痔疮血污染家庭环境;与月经血、痔疮血污染家庭环境;与HBsAgHBsAg阳性人共用牙刷、口杯、毛巾和剃刀;阳性人共用牙刷、口杯、毛巾和剃刀;HBsAgHBsAg阳性人同乳幼儿密切接触,尤其是口喂小儿。阳性人同乳幼儿密切接触,尤其是
4、口喂小儿。性接触传播:男女性生活可通过精液、阴道分泌液传播乙肝病毒。性接触传播:男女性生活可通过精液、阴道分泌液传播乙肝病毒。第四页,共二十三页。乙肝五项的概念乙肝五项的概念 乙肝五项也称为乙肝两对半,包括乙肝外表抗原用HBSAg表示、乙肝外表抗体用抗-HBS表示、e抗原用HBeAg表示、e抗体用抗-HBe表示、核心抗体用抗-HBc表示。乙肝五项检查,便是抽出患者静脉血,检测血液中乙肝病毒的血清学标志。第五页,共二十三页。金标法 金标法乙肝两对半快速检测板是采用层析法检测乙肝病毒五项血清学标志HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb。酶免法ELISA法 ELISA可用于测定抗
5、原,也可用于测定抗体。在这种测定方法中有3种必要的试剂:固相的抗原或抗体,酶标记的抗原或抗体,酶作用的底物。HBsAg、HBeAg检测试纸条采用双抗体夹心法测抗原;HBsAb检测试纸条采用双抗原夹心法;HBeAb、HBcAb此两项在检测试纸条上采用了竞争抑制法。由于e抗原较核心抗原仅多29个氨基酸,e抗原很容易转变成核心抗原,因此HBcAb和HBeAb的测定均采用竞争法乙肝五项的检测方法及原理乙肝五项的检测方法及原理第六页,共二十三页。ELISA ELISA法在临床实验室已得到普遍应用,特别是用于各种肝炎法在临床实验室已得到普遍应用,特别是用于各种肝炎标志物的检测,但标志物的检测,但ELISA
6、ELISA法需时较长法需时较长,其主要原因是由于液相中的抗原抗其主要原因是由于液相中的抗原抗体需经扩散才能与固相上的抗原或抗体反响。但作为基层医疗单位、急体需经扩散才能与固相上的抗原或抗体反响。但作为基层医疗单位、急诊病人和手术前的应急的单个标本检测,包括现在的血站的流动采血点献诊病人和手术前的应急的单个标本检测,包括现在的血站的流动采血点献血员的快速筛检是根本无法用血员的快速筛检是根本无法用ELISAELISA法来实现的。法来实现的。2020世纪世纪7070年代初,年代初,FANKLFANKL等建立了免疫胶体金技术,开始作为一种免疫标记技术而被使用,随后逐等建立了免疫胶体金技术,开始作为一种
7、免疫标记技术而被使用,随后逐渐广泛应用于免疫检测技术。各种金标检测条,检测卡已被广泛使用。相渐广泛应用于免疫检测技术。各种金标检测条,检测卡已被广泛使用。相对而言,对而言,ELISAELISA法检测准确性要高于金标法,法检测准确性要高于金标法,金标法检测限为金标法检测限为1ng/ml,ELISA1ng/ml,ELISA法灵敏度为法灵敏度为0.5ng/ml0.5ng/ml,国产,国产ELISAELISA法试剂最高灵敏度可达法试剂最高灵敏度可达 0.1ng/ml 0.1ng/ml。故在。故在实际应用中,根据实际情况两种方法联合起来,特别是实际应用中,根据实际情况两种方法联合起来,特别是 在大批量检
8、测时可在大批量检测时可用金标法作为初筛,这样可大量节约时间,更快速、准确为病人效劳。用金标法作为初筛,这样可大量节约时间,更快速、准确为病人效劳。第七页,共二十三页。1 1将特异性抗体与固相载体连接,形成固相抗体:洗涤除去未结合的抗体及杂将特异性抗体与固相载体连接,形成固相抗体:洗涤除去未结合的抗体及杂质。质。2 2加受检标本:使之与固相抗体接触反响一段时间,让标本中的抗原与固加受检标本:使之与固相抗体接触反响一段时间,让标本中的抗原与固相载体上的抗体结合,形成固相抗原复合物。洗涤除去其他未结合的物质。相载体上的抗体结合,形成固相抗原复合物。洗涤除去其他未结合的物质。3 3加酶标抗体:使固相免
9、疫复合物上的抗原与酶标抗体结合。彻底洗涤未结合加酶标抗体:使固相免疫复合物上的抗原与酶标抗体结合。彻底洗涤未结合的酶标抗体。此时固相载体上带有的酶量与标本中受检物质的量正相关。的酶标抗体。此时固相载体上带有的酶量与标本中受检物质的量正相关。4 4加底物:夹心式复合物中的酶催化底物成为有色产物。根据颜色反响的程度进行加底物:夹心式复合物中的酶催化底物成为有色产物。根据颜色反响的程度进行该抗原的定性或定量。该抗原的定性或定量。根据同样原理,将大分子抗原分别制备固相抗原和酶标抗原结合物,即可用双抗根据同样原理,将大分子抗原分别制备固相抗原和酶标抗原结合物,即可用双抗原夹心法测定标本中的抗体。原夹心法
10、测定标本中的抗体。第八页,共二十三页。双位点一步法即在双抗体夹心法根底上使用针对抗原分子上两个不同表双位点一步法即在双抗体夹心法根底上使用针对抗原分子上两个不同表位的单克隆抗体,分别作为固相抗体和酶标抗体。测定时将待检标本和酶标抗位的单克隆抗体,分别作为固相抗体和酶标抗体。测定时将待检标本和酶标抗体同时参加进行反响,两种抗体互不干扰,经一次温育和洗涤后,即可参加底体同时参加进行反响,两种抗体互不干扰,经一次温育和洗涤后,即可参加底物进行显色测定。物进行显色测定。钩状效应:双位点一步法中,如果待检测标本中抗原浓度过高,过量抗原那么会分别与钩状效应:双位点一步法中,如果待检测标本中抗原浓度过高,过
11、量抗原那么会分别与固相抗体和酶标抗体结合,而不再形成夹心复合物,类似于沉淀反响中抗原过剩的后带现象,固相抗体和酶标抗体结合,而不再形成夹心复合物,类似于沉淀反响中抗原过剩的后带现象,所得结果将低于实际的含量,这种现象称之为钩状效应。所得结果将低于实际的含量,这种现象称之为钩状效应。第九页,共二十三页。固相抗体底物竞争法可用于测定抗原,也可用于测定抗体。以测定抗原为例,竞争法可用于测定抗原,也可用于测定抗体。以测定抗原为例,酶标抗原和待测抗原对固相特异性抗体具有相同的结合力,因此两酶标抗原和待测抗原对固相特异性抗体具有相同的结合力,因此两者竞争结合固相特异性抗体。反响体系中,固相抗体和酶标抗原是
12、者竞争结合固相特异性抗体。反响体系中,固相抗体和酶标抗原是固定限量,且前者的结合位点少于酶标和非酶标抗原的分子数量和。固定限量,且前者的结合位点少于酶标和非酶标抗原的分子数量和。免疫反响后,结合于固相的酶标抗原量与标本中待检抗原含量成反免疫反响后,结合于固相的酶标抗原量与标本中待检抗原含量成反比。待检抗原量越多,相应的结合特异性抗体越多,而酶标抗原和比。待检抗原量越多,相应的结合特异性抗体越多,而酶标抗原和固相抗体结合越少,底物显色反响浅;反之那么显色越深,即底物固相抗体结合越少,底物显色反响浅;反之那么显色越深,即底物显色与待检标本中抗原含量成反比。显色与待检标本中抗原含量成反比。第十页,共
13、二十三页。间接法检测抗体最常用的方法,其原理为利用酶标记的间接法检测抗体最常用的方法,其原理为利用酶标记的抗抗体以检测已与固相结合的受检抗体,故称为间接法。即将抗抗体以检测已与固相结合的受检抗体,故称为间接法。即将能看出抗原吸附于固相载体上。待检标本中相应抗体与之结合,能看出抗原吸附于固相载体上。待检标本中相应抗体与之结合,形成固相抗原形成固相抗原-抗体复合物,再用酶标二抗与固相免疫复合物抗体复合物,再用酶标二抗与固相免疫复合物中的抗体结合,形成固相抗原中的抗体结合,形成固相抗原-抗体抗体-酶标二抗复合物,根据加酶标二抗复合物,根据加底物后的显色程度确定待检抗体含量。底物后的显色程度确定待检抗
14、体含量。第十一页,共二十三页。捕获法的原理是将抗人捕获法的原理是将抗人IgMIgM抗体抗人抗体抗人IgMIgM链抗体吸链抗体吸附于固相载体上,待检标本中的附于固相载体上,待检标本中的IgMIgM类抗体多被固相抗体捕获。类抗体多被固相抗体捕获。参加特异抗原与固相抗体捕获的参加特异抗原与固相抗体捕获的IgMIgM抗体结合,再参加抗原特抗体结合,再参加抗原特异的酶标抗体,形成固相抗人异的酶标抗体,形成固相抗人IgM-IgM-IgM-IgM-抗原抗原-酶标抗体复合物。酶标抗体复合物。最后根据加底物后的显色程度确定待检最后根据加底物后的显色程度确定待检IgMIgM抗体的含量。固相抗体的含量。固相捕获法主
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