2022届高考生物一轮复习第3讲生物技术在其他方面的应用学案新人教版选修1202106052115.doc
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1、-1-第第 3 3 讲讲生物技术在其他方面的应用生物技术在其他方面的应用考情研读备考定位考纲要求核心素养1从生物材料中提取某些特定的成分2蛋白质的提取和分离技术1生命观念通过蛋白质分离技术的深入理解建立生命的物质观。2科学思维分析与综合:分析玫瑰精油、橘皮精油和胡萝卜素的提取原理及过程。3科学探究设计实验探究成分提取的条件等。4 社会责任关注人体健康,关注胡萝卜素缺乏引起的疾病。考点一蛋白质的提取和分离自主回顾素养储备基础梳理1血红蛋白的提取(1)红细胞的洗涤目的:去除杂蛋白。方法:采集的血样要及时分离红细胞,分离时采用低速短时间离心,然后用胶头吸管吸出上层透明的黄色血浆,将下层暗红色的红细胞
2、液体倒入烧杯,再加入五倍体积的生理盐水稀释,再离心,重复洗涤三次,直至上清液中不再呈现黄色,表明红细胞已洗涤干净。(2)血红蛋白的释放加蒸馏水(作用是使红细胞吸水涨破)到原血液的体积,再加 40%体积的甲苯(作用是溶解细胞膜),充分搅拌,细胞破裂释放出血红蛋白。(3)分离血红蛋白溶液将搅拌好的混合液转移到离心管中,以 2 000 r/min 的速度离心 10 min 后,可以明显看到试管中的溶液分为 4 层。将试管中的液体用滤纸过滤,除去脂溶性沉淀层,于分液漏斗中静置片刻后,分出下层的红色透明液体,即血红蛋白溶液。2血红蛋白的粗分离透析(1)原理:透析袋能使小分子自由进出,而将大分子保留在袋内
3、。(2)过程:取 1 mL 的血红蛋白溶液装入透析袋中,将透析袋放入盛有 300 mL 的物质的量浓度为 20 mmol/L 的磷酸缓冲液中(pH 为 7.0),透析 12 h。-2-(3)目的:除去样品中相对分子质量较小的杂质。3血红蛋白的纯化凝胶色谱法(1)原理:相对分子质量较小的蛋白质由于扩散作用进入凝胶颗粒内部,路程较长,移动速度较慢而被滞留;相对分子质量较大的蛋白质被排阻在凝胶颗粒外面,在颗粒之间迅速通过。(2)过程调整缓冲液面:打开色谱柱下端的流出口,调整缓冲液与凝胶面平齐滴加透析样品:关闭下端出口,用吸管小心将 1 mL 样品加到色谱柱顶端样品渗入凝胶床:加样后,打开下端出口,使
4、样品渗入凝胶床内再调整缓冲液面:关闭下端出口,小心加入物质的量浓度为 20 mmol/L 的磷酸缓冲液到适当高度洗脱:打开下端出口,用磷酸缓冲液洗脱收集:待红色的蛋白质接近色谱柱底端时,用试管收集流出液,每 5 mL 收集一管,连续收集4纯度鉴定电泳判断纯化的蛋白质是否达到要求,需要进行蛋白质纯度的鉴定。在鉴定的方法中,使用最多的是 SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳。思维辨析易错整合,判断正误。(1)透析法可去除小分子化合物杂质,原理是不同分子所携带净电荷不同()(2)通过控制离心速率,可使分子大小、密度不同的蛋白质沉降分层,从而分离不同的蛋白质()(3)不同的物质在同一电场中的泳动速度不同,因此可用
5、电泳法分离蛋白质()(4)影响泳动速度的因素包括带电颗粒的性质、电场强度、溶液的 pH 等()延伸探究右图是用凝胶色谱法分离 a、b 两种蛋白质的示意图,请分析:-3-(1)先从层析柱中洗脱出来的是哪种蛋白质?为什么?(2)d 是什么?有什么特点?(3)层析柱装填时不能有气泡的原因是什么?提示(1)a 蛋白质先洗脱出来,因为 a 的相对分子质量较大,被排阻在凝胶颗粒外面,在颗粒之间迅速通过。(2)d 是多孔板,蛋白质可以通过,凝胶颗粒不能通过。(3)气泡会扰乱蛋白质的洗脱次序,干扰实验结果。剖析难点考点突破重难精讲1常用的蛋白质分离方法(1)凝胶色谱法蛋白质项目相对分子质量大相对分子质量小凝胶
6、内部不能进入能进入运动方式垂直向下垂直向下和无规则扩散运动经过路程较短较长洗脱次序先流出后流出(2)电泳法原理a在一定 pH 下,蛋白质分子的某些基团解离后带上正电或负电。在电场的作用下,带电分子会向着与其所带电荷相反的电极移动。b由于待分离样品中各种分子带电性质的差异以及分子本身的大小、形状的不同,使带电分子产生不同的迁移速度,从而实现样品中各种分子的分离。2比较琼脂糖凝胶电泳和 SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳(1)从载体上看,利用琼脂糖凝胶作为载体的是琼脂糖凝胶电泳,利用 SDS聚丙烯酰胺凝胶作为载体的是 SDS 一聚丙烯酰胺凝胶电泳。-4-(2)从依据上看,利用了分子带电性质差异和分子大小的是
7、琼脂糖凝胶电泳,仅利用了分子大小的是 SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳。(3)从优点上看,琼脂糖凝胶电泳操作简单,电泳速度快,样品不需处理,电泳图谱清晰,分辨率高,重复性好;SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳消除了净电荷对迁移率的影响,使电泳迁移率完全取决于分子的大小。精准命题例 1请完成有关血红蛋白提取与分离的相关问题:(1)实验前取新鲜血液,要在采血器中预先加入柠檬酸钠,取血回来,马上进行破碎离心,收集血红蛋白溶液。加入柠檬酸钠的目的是防止血液凝固。(2)在对样品进行处理时,主要包括红细胞的洗涤、血红蛋白的释放;对样品进行粗分离时主要包括:分离血红蛋白溶液、透析等步骤。其中透析技术的原理是小分子可以自由进出
8、透析袋(半透膜),而大分子不能通过。(3)同学甲利用琼脂糖凝胶电泳技术,将得到的蛋白质进行分离,在电泳过程中,影响蛋白质迁移速度的因素包括蛋白质分子的大小、带电性质_以及分子的形状等。而加入 SDS 后,使得蛋白质的迁移率只取决于分子的大小。(4)同学乙利用凝胶色谱法进行血红蛋白的分离(如下图 1),他在操作中加样的正确顺序是,在执行图 1 中所示操作时,色谱柱下端连接的尼龙管应该关闭(填“打开”或“关闭”)。(5)图 2 是同学乙利用样品分离得到的结果,则图 2 中蛋白质相对分子质量最小的是丙。解析(1)新鲜血液中加入柠檬酸钠的目的是防止血液凝固。(2)样品的处理包括红细胞的洗涤、血红蛋白的
9、释放等步骤。分离血红蛋白中所用的透析方法的原理是半透膜的半透性,即小分子可以自由通过,大分子不能自由通过。(3)琼脂糖凝胶电泳时,影响蛋白质迁移速度的因素有蛋白质分子大小、带电性质及分子的形状等。而加入 SDS 后,使得蛋白质的迁移率只取决于分子的大小。(4)装填完毕的凝胶柱需用缓冲液充分洗涤,使其装填紧密,加样时应先加入样品,后加入一定量的缓冲液到适当高度,即正确顺序为;进行所示的环绕加缓冲液时,应关闭下端出口。(5)凝胶色谱法分离蛋白质时,洗脱时间最长的蛋白质相对分子质量最小。由图 2 可看出,丙的洗脱时间最长,相对分子质量应是最小的。考点二植物有效成分的提取-5-自主回顾素养储备基础梳理
10、1提取玫瑰精油实验(1)方法:水蒸气蒸馏法。(2)实验流程:鲜玫瑰花加清水水蒸气蒸馏油水混合物加入 NaCl玫瑰油过滤除水加入无水 Na2SO4分离油层2提取橘皮精油的实验(1)方法:一般采用压榨法。(2)实验流程石灰水浸泡漂洗压榨过滤橘皮油再次过滤静置3胡萝卜素的提取(1)胡萝卜素性质:不溶于水,微溶于乙醇,易溶于石油醚等有机溶剂。(2)提取方法及流程方法:萃取法,石油醚最适宜作萃取剂。实验流程胡萝卜粉碎干燥萃取过滤浓缩胡萝卜素。(3)鉴定方法:纸层析法。思维辨析易错整合,判断正误。(1)油水混合物中加入无水硫酸钠,有利于分离油层()(2)蒸馏法的实验原理是利用水将芳香油溶解出来,再把水蒸发
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