2022届新高考生物精准冲刺复习：选修专题.docx

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1、2022届新高考生物精准冲刺复习选修专题入门测1. （2020辛集市第一中学月考）北魏齐民要术中记载:“作盐水,令极咸,于盐水中洗菜,即内雍中。 此记载介绍的是下列哪种微生物应用技术?A.制作泡菜技术B.制作酱菜技术C.制作果酒技术D.制作果醋技术2. （2019山东历下济南一中高二期中）制备牛肉膏蛋白陈固体培养基的步骤是（）A.计算、称量、倒平板、溶化、灭菌 B.计算、称量、溶化、倒平板、灭菌C.计算、称量、灭菌、溶化、倒平板D.计算、称量、溶化、灭菌、倒平板3. （2020天水市第一中学月考）基因工程的操作步骤:口使目的基因与运载体相结合,口提取目的基因, 检测目的基因的表达是否符合特定性

2、状要求,I将目的基因导入受体细胞。正确的操作顺序是（） A. B. C. D. 4. （2020山东微山县第二中学高二月考）植物组织培养过程的顺序是（）离体的植物器官、组织或细胞根、芽愈伤组织脱分化再分化植物体A.B.C.D.5. （2020山东兖州高二月考）牛雄性胚胎中存在特异性H-Y抗原,可在牛早期胚胎培养液中添加H-Y单 克隆抗体,筛选胚胎进行移植,以利用乳腺生物反应器进行生物制药。下列相关叙述第送的是A. H-Y单克隆抗体可由杂交瘤细胞分泌B.发生抗原抗体阳性反应的为雄性胚胎C.利用筛选出的雄性胚胎做胚胎移植D,用H-Y抗原免疫母牛可获得相应抗体3. （2016山东枣庄高二月考）通过胚

3、胎移植技术,可以实现良种牛的快速繁殖。下列相关叙述正确的是 A.对供体和受体母牛都要进行相同激素处理B,受精和胚胎的早期培养都需要在体外进行C.对冲卵获得的原肠胚检查合格后方可移植D.胚胎分割移植实现同卵多胎的成功率较低课堂讲义、微生物的发酵1.果酒、果醋1.!发酵:通过微生物技术的培养来生产大量代谢产物的过程。1. 1. 1有氧发酵:醋酸发酵谷氨酸发酵无氧发酵:酒精发酵乳酸发酵1. 2酵母菌是兼性厌氧菌型微生物真菌酵母菌的生殖方式:出芽生殖（主要）抱子生殖1.2. 1在有氧条件下,酵母菌进行有氧呼吸,大量繁殖. CHI2O6+6O2-6CO2+6H2O 在无氧条件下,酵母菌能进行酒精发酵。C

4、eH疝6f2c2HQH+2c01. 2. 2酒精发酵时一般将温度控制在18C-25C1. 2. 3在葡萄酒自然发酵的过程中,起主要作用的是附着在葡萄皮表面的野生型酵母菌.在发酵过程中,随 着酒精浓度的提高,红葡萄皮的色素也进入发酵液,使葡萄酒呈现深红色.在缺氧、呈酸性的发酵液 中,酵母菌可以生长繁殖,而绝大多数其他微生物都因无法适应这环境而受到制约。1. 3醋酸菌是单细胞细菌（原核生物）,代谢类型是异养需氧型,生殖方式为二分裂1.3 . 1当氧气、糖源都充足时,醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸;当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙 醛，再将乙醛变为醋酸。1.3.2控制发酵条件的作用醋酸菌对氧气的含量

5、特别敏感,当进行深层发酵时,即使只是短时间中断通 入氧气,也会引起醋酸菌死亡。醋酸菌最适生长温度为3035,控制好发酵温度,使发酵时 间缩短,又减少杂菌污染的机会。1.4 实验流程:挑选葡萄冲洗榨汁酒精发酵一果酒（醋酸发酵f果醋）新鲜葡萄除去枝梗,冲洗以除去灰尘为目的,防止洗去野生酵母菌。1.5 酒精检验:重钠酸钾。在酸性条件下,重铭酸钾与酒精反应呈现灰绿色。先在试管中加入发酵液2mL, 再滴入物质的量浓度为3moi/L的H2s0,3滴,振荡混匀,最后滴加常温下饱和的重铝酸钾溶 液3滴，振荡试管，观察颜色1. 5实验装置1.5. 1充气是在醋酸发酵时连接充气泵进行充气用的:排气口是在酒精发酵时

6、用来排出二氧化碳的;出 料口是用来取样的。排气要通过一个长而的曲的胶管与瓶身相连接,其目的是防止空气中微生物 的污染。开口向下的目的是有利于二氧化碳的排出。使用该装置制酒时，应该关闭充气口;制醋时， 应该充气口连接气泵,输入氧/空气。1.6. 2葡萄汁装入发酵瓶后要留有1/3的空间,目的时先让酵母菌进行有氧呼吸快速繁殖,耗尽氧气后再 进行酒精发酵,防止发酵过程中产生CO造成发酵液溢出。2.腐乳2. 1参与微生物多种微生物参与了豆腐的发酵,如青霉、酵母、曲霉、毛霉等,其中起主要作用的是毛霉。毛霉是 种丝状真菌。代谢类型是异养需氧型。生殖方式是抱子生殖。2. 2原理2. 2.1毛霉等微生物产生的蛋

7、白酶能将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸;脂肪酶可将脂肪水解 为甘油和脂肪酸。2. 2.2毛霉的生长:条件:将豆腐块平放在笼屉内,将笼屉中的控制在1518,并保持一定的湿度。（温 度过低不利于毛霉生长，温度高时菌丝易老化死亡，影响腐乳品质）2. 2. 3来源:1.来自空气中的毛霉抱子2.直接接种优良毛霉菌种2. 3实验流程:让豆腐上长出毛霉加盐腌制f加卤汤装瓶密封腌制2. 4实验材料2.4. 1豆腐的含水量为70%左右，水分过多则腐乳不易成形;过低，不利于毛霉生长。2.4.2加盐腌制:将长满毛霉的豆腐块分层整齐地摆放在瓶中，同时逐层加盐,随着层数的加髙而增加盐 量,接近瓶口表面的盐要铺厚

8、一些。2. 4.3用盐腌制时，注意控制盐的用量（毛胚:食盐=5： 1）:盐的浓度过低，不足以抑制微生物的生长， 可能导致豆腐腐败变质;盐的浓度过高会影响腐乳的口味2. 4. 4食盐的作用:1.抑制微生物的生长，避免腐败变质2.析出水分,是豆腐变硬，在后期制作过程中不 易酥烂3.调味作用,给腐乳以必要的咸味4.浸提毛酚菌丝上的蛋白酶。2. 4. 5卤汤:卤汤、香辛料调味、杀菌防腐。卤汤中酒的含量一般控制在12%左右。2 . 4. 6酒的作用:1.防止杂菌污染2.与有机酸结合形成酯,赋予腐乳风味3.酒精含量越高，对蛋白酶的抑 制作用也越大,使腐乳成熟期延长;酒精含量过低,蛋白酶的活性髙,加快蛋白质

9、的水解,杂菌繁 殖快，豆腐易腐败,难以成块。2.5防止杂菌污染:用来腌制腐乳的玻璃瓶，洗刷干净后要用沸水消毒。装瓶时，操作要迅速小心。 整齐地摆放好豆腐、加入卤汤后，要用胶条将瓶口密封。封瓶时，最好将瓶口通过酒精灯的火焰,防 止瓶口被污染。3 .泡菜3. 1参与微生物及原理3. 1. 1制作泡菜所用微生物是乳酸菌,其代谢类型是异养厌氧型。在无氧条件下,降糖分解为乳酸。分裂方式是二分裂。反应式为:CM2062C3H603+能量。3. 1.2含抗生素牛奶不能生产酸奶的原因是抗生素杀死乳酸菌。常见的乳酸菌有乳酸链球菌和乳酸杆菌。 乳酸杆菌常用于生产酸奶。3. 1.3发酵温度在18-20C,过髙其他杂

10、菌活动能力高,过低不利于乳酸菌代谢。3. 2实验材料3.2. 1选用新鲜的蔬菜,若放置时间过长,蔬菜中的亚硝酸盐易被还原为亚硝酸盐。清水与盐的质量比是4： 1。盐水要煮沸后冷却,煮沸的作用除去水中的氧气杀灭水中的其他微生 物。3. 2. 2泡菜坛坛盖沿的水槽内注满水，保证乳酸菌发酵所需要的无氧环境。而且,在发酵过程中要经常补 水。3. 3测定亚硝酸盐含量在盐酸酸化条件下,亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后，与N-1蔡基乙二胺盐酸盐结合形 成玫瑰红色染料,与已知浓度的标准显色液目测比较（比色法），估算泡菜中亚硝酸盐含量。二、微生物的培养1.培养基1. 1成分培养基的化学成分包括水、无机盐、碳

11、源、氮源、生长因子1.1.1 碳源:能为微生物的代谢提供碳元素的物质。如C“、NaHC（h等无机碳源（自养）;糖类、石油、生 粉饼等有机碳源。异养微生物只能利用有机碳源。单质碳不能作为碳源。1.1.2 氮源:能为微生物的代谢提供氮元素的物质。如N2、NH,、NO、NH/ （无机氮源）蛋白质、氨基酸、 尿素、牛肉膏、蛋白陈（有机氮源）等。只有固氮微生物才能利用用。1.1 . 3培养基还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。例如，培养乳酸杆菌时需要在培 养基中添加维生素，培养霉菌时须将培养基的pH调至酸性，培养细菌是需要将pH调至中性或微碱 性,培养厌氧型微生物是则需要提供无氧的条件

12、1.2 分类1. 2.1按照物理性质 可分为液体培养基、半固体培养基和固体培养基1. 2. 2按照用途可将培养基分为选择培养基和鉴定培养基。选择培养基是指在培养基中加入某种化学物质，以抑制不需要的微生物生长,促进所需要的微生物 的生长。鉴别培养基是根据微生物的特点，在培养基中加入某种指示剂或化学药品配制而成的，用 以鉴别不同类别的微生物。（如加入青霉素分离得到酵母菌和霉菌,利用伊红一美蓝培养基鉴别大 肠杆菌）1. 2. 3人工合成培养基和天然培养基1.3. 备牛肉膏蛋白陈培养基1.4. 1配方牛肉膏、蛋白陈、NaCK琼脂1.5. 2操作计算,称量,融化,灭菌,倒平板称量时,牛肉膏蛋白陈都易吸潮

13、,称量要迅速融化加琼脂时要不断搅拌,防止脂糊底而导致烧 杯破裂灭菌时,装有培养基的锥形瓶要用高压蒸汽灭菌法,培养皿要用干热灭菌法平板冷凝 后需要倒置,既可以使培养基表面的水分更好地挥发,防止皿盖上冷凝的水珠落入培养基,造成 污染。（微生物培养的时候也需要倒置,另个原因:由于重力的作用使培养基表面及次层能富 集微生物生长所需的营养物质,利于微生物生长。）2灭菌与消毒2. 1消毒较为温和的理化方法,仅杀死物体表面或内部的部分有害微生物。包括:煮沸消毒法，巴氏消毒法（对于一些不耐高温的液体）还有化学药剂消毒（如酒精、氯气、石炭酸 等）、紫外线消毒法2.3. 强烈理化因素,杀死物体内外所有微生物,包括

14、芽抱和抱子。包括：灼烧灭菌、干热灭菌、髙压蒸汽灭菌。2.4. 灭菌 接种环、接种针、试管口等使用灼烧灭菌法;（防止x的微生物污染培养基）玻璃器皿、金属用具等使用干热灭菌法,所用器械是干热灭菌箱;培养基、无菌水等使用髙压蒸汽灭菌法,所用器械是高压蒸汽灭菌锅。3纯化微生物的接种方法3.1 平板划线法（适用好氧菌）和稀释涂布平板法（适用好氧菌以及兼性厌氧菌）。3.2 平板划线法是通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作。将聚集的菌种逐步稀释分散到培养 基的表面。在数次划线后培养,可以分离到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体,这就是菌 落。3. 2. !操作的第一步以、每次划线之前、划线操作

15、结束时均需要灼烧接种环的目的操作的第一步灼烧接种环是为了避免接种环上可能存在的微生物污染培养物:每次划线前灼烧接种 环是为了杀死上次划线结束后,接种环上残留的菌种,使下一次划线时,接种环上的菌种直接来 源于上次划线的末端,从而通过划线次数的增加,使每次划线时菌种的数目逐渐减少,最终能得 到由单个细菌繁殖而来的菌落。划线结束后灼烧接种环，能及时杀死接种环上残留的菌种,避免 细菌污染环境和感染操作者。3. 2. 3在灼烧接种环之后，要等其冷却后再进行划线,以免接种环温度太高，杀死菌种3. 2.4最后一区不能与第一区相连,划线度要适中。3.3稀释涂布平板法是将菌液进行系列的梯度稀释,然后将不同稀释度

16、的菌液分别涂布到琼脂固体培养 基的表面,进行培养。分为系列稀释操作和涂布平板操作两步。3.4用平板划线法和稀释涂布平板法接种的目的是:使聚集在起的微生物分散成单个细胞,从而能在培 养基表面形成单个的菌落，以便于纯化菌种。4统计菌落数目4. 1测定微生物数量的常用方法有稀释涂布平板法和显微镜直接计数。4. 2释涂布平板法统计(可以区分活死菌)4.2. 1为了保证结果准确,一般设置32个平板,选择菌落数在30300的平板进行计数,并取平均值。4. 2. 2每克样品中的菌落数=(C/V) *M其中，C代表某稀释度下平板上生长的平均菌落数,V代表涂布 平板时所用的稀释液的体积(ml) , M代表稀释倍

17、数4. 3显微镜直接计数法统计(不能区分活死菌)利用特定的细菌计数板或者血细胞计数板5 土壌中分解尿素与纤维素的细菌的分离5. 1原理5. 1. 1细菌之所以能分解尿素C0(NH2)2,是因为他们能合成服酶,将尿素分解为C02, NH35. 1.2 土壤中的细菌之所以能分解纤维素，是因为他们能合成纤维素酶,纤维素酶是种复合酶，即G酶、 C、酶和葡萄糖苜酶，前两种酶使纤维素分解成纤维二糖，第三种酶将纤维二糖分解成葡萄糖。(棉 花是自然界中纤维素含量最高的天然产物)5.2选择培养基以尿素为唯一氮源的选择培养基，富含纤维素的选择培养基5. 3鉴别方法5. 3.1在培养基中加入酚红指示剂,分解产生氨气

18、，指示剂变红5. 3. 2在培养基中在含有纤维素的培养基中加入刚果红,刚果红能与培养基中的纤维素形成红色复合物。 当纤维素被纤维素能分解后，刚果红纤维素的复合物就无法形成,培养基中会出现以纤维素分解 菌为中心的透明圈。三、基因工程1.基因工程的诞生1 . 1基因工程的概念基因工程是指按照人们的愿望，进行严格的设计，通过体外DNA重组和转基因技术，赋予生物以新的遗传 特性，创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工 的，又叫做DNA重组技术。2 .基因工程的原理及技术2.1 原理:基因重组2. 2技术:(一)基因工程的基本工具2.2. “分子手术刀”

19、限制性核酸内切酶(限制酶)(1)来源：主要是从原核生物中分离纯化出来的。(2)功能:能够识别双链DNA分子的某种特定的核昔酸序列,并且使每一条链中特定部位的两个核昔酸 之间的磷酸二酯键断开,因此具有专一性。(3)结果:经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式:黏性末端和平末端。2. 2. 2 “分子缝合针”DNA连接酶(1)两种DNA连接酶(E coliDNA连接酶和TQNA连接酶)的比较:相同点:都缝合磷酸二酯键。区别:E. coli DNA连接醜来源于大肠杆菌,只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间的磷酸二酯键连接 起来;而T,DNA连接酶来源于噬菌体，能缝合两种末端,但连接平末端的

20、之间的效率较低。(2)与DNA聚合酶作用的异同:DNA聚合酶只能将单个核昔酸加到已有的核甘酸片段的末端,形成磷酸二酯 键。DNA连接醐是连接两个DNA片段的末端,形成磷酸二酯键。2. 2. 3 分子运输车”载体(1)载体具备的条件:能在受体细胞中复制并稳定保存。具有一至多个限制酶切点,供外源DNA片 段插入。具有标记基因,供重组DNA的鉴定和选择。(2)最常用的载体是质拉,它是种裸露的、结构简单的、独立于细菌染色体之外,并具有自我复制能力 的双链环状DNA分子。(3)其它载体:噬菌体的衍生物、动植物病毒2. 3基因工程的基本操作程序2. 3. 1第一步:目的基因的获取1 .目的基因是指:编码蛋

21、白质的结构基因。2 .原核基因采取直接分离获得,真核基因是人工合成。人工合成目的基因的常用方法有反转录法和化学 合成法。3. PCR技术扩增目的基因(1)原理:DNA双链复制(2)过程:第一步：加热至9095CDNA解链:第二步:冷却到5560C,引物结合到互补DNA链:第 三步:加热至7075C,热稳定DNA聚合酶从引物起始互补链的合成。2. 3. 2第二步:基因表达载体的构建1 .目的:使目的基因在受体细胞中稳定在在,并且可以還传至下一代,使目的基因能够表达和发挥作用。2 .组成:目的基因+启动子+终止子+标记基因（1）启动子：是一段有特殊结构的DNA片段,位于基因的首端,是RNA聚合醒识

22、别和结合的部位,能驱 动基因转录岀mRNA,最终获得所需的蛋白质。（2）终止子：也是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的尾端。（3）标记基因的作用：是为了鉴定受体细胞中是否含有目的基因,从而将含有口的基因的细胞筛选出来。 常用的标记基因是抗生素基因。3 . 3. 3第三步:将目的基因导入受体细胞（1）转化的概念：是目的基因进入受体细胞内,并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程。（2）常用的转化方法:将目的基因导入植物细胞：采用最多的方法是农杆菌转化法,其次还有基因枪法和花粉管通道法等。将目的基因导入动物细胞：最常用的方法是显微注射技术。此方法的受体细胞多是受精卵。将目的基因导入微生物细胞：（3

23、）重组细胞导入受体细胞后，筛选含有基因表达载体受体细胞的依据是标记基因是否表达。4 . 3. 4第四步:目的基因的检测和核达1 .首先要检测 转基因生物的染色体DNA上是否插入了目的基因,方法是采用DNA分子杂交技术。2 .其次还要检测目的基因是否转录出了 mRNA,方法是采用用标记的目的基因作探针与mRNA杂交。3 .最后检测目的基因是否翻译成蛋白质,方法是从转基因生物中提取蛋白质,用相应的抗体进行抗原抗体杂交。4.有时还需进行个体生物学水平的鉴定。如转基因抗虫植物是否出现抗虫性状。2.4 （b）基因工程的应用1 .植物基因工程：抗虫、抗病、抗逆转基因植物，利用转基因改良植物的品质。2 .动

24、物基因工程:提高动物生长速度、改善畜产品品质、用转基因动物生产药物。3 .基因治疗:把正常的外源基因导入病人体内,使该基因表达产物发挥作用。4 .蛋白质工程蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合 成,对现有蛋白质进行改造，或制造种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需求。（基因工程在原 则上只能生产自然界已存在的蛋白质）（1）蛋白质工程崛起的缘由：基因工程只能生产自然界已存在的蛋白质（2）蛋白质工程的基本原理:它可以根据人的需求来设计蛋白质的结构,又称为第二代的基因工程。 基本途径：从预期的蛋白质功能出发，设计预期的蛋白质结构，推测应有的氨基酸序列

25、，找到相对应的脱氧核苜酸序列（基因）以上是蛋白质工程特有的途径:以下按照基因工程的一般步骤进行。（注意:目的 基因只能用人工合成的方法）设计中的困难:如何推测非编码区以及内含子的脱氧核甘酸序列 四、细胞工程1 .植物细胞工程1.1 植物细胞的全能性植物细胞的全能性厂概念:具有某种生物全部遗传信息的任何个细胞,都具有发育成完整生物体的潜能一原因:细胞内含有本物种的全部遗传信息一全能性表达条件:具有完整的细胞结构,处于离体状态,提供一定的营养、激素和其他适宜外界条件细胞全能性大小与细胞分化程度成反比全能性大小L植物细胞:受精卵生殖细胞体细胞动物细胞:受精卵生殖细胞体细胞核（动物细胞全能性受限制,但

26、细胞核具有 全能性）1.2 植物组织培养技术1.2.1 原理:植物细胞具有全能性1.2.2 过程:人造胚乳和种皮人工种子离体的植物时介件 器官、组织睨一 或细胞营养物质、激素,使伤组织卜再分化激素、光0、芽I植物体注意：植物激素在植物组织培养中的作用生长素/细胞分裂素的比值作用效果比值高时促进根分化、抑制芽形成比值低时促进芽分化、抑制根形成比值适中促进愈伤组织形成无菌条件1.2.3 用途：微型繁殖、作物脱毒、制造大工种子、单倍体育种等。微型繁殖：可以高效快速地实现种苗的大量繁殖作物脱毒：采用茎尖组织培养来除去病毒（因为植物分生区附近的病毒极少或没有）人工种子：以植物组织培养得到的胚状体、不定芽

27、、顶芽和腋芽等为材料,经大工薄膜包装得到的种子。优点:完全保持优良品种的遗传特性,不受季节的限制;方便储藏和运输1.3 植物体细胞杂交技术1.3.1 过程:植物细胞A 植物细胞b1.3.2 诱导融合的方法:物理法包括离心、振动、电刺激等。化学法一般是用聚乙二醇(PEG)作为诱导剂。1.3.3 意义:克服了远缘杂交不亲和的障碍。2 .动物细胞工程3 .!动物细胞培养1.1.1 概念:动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的组织,将它分散成单个细胞,然后放在适宜的培养 基中,让这些细胞生长和繁殖。1.1.2 过程：取动物组织块用胰蛋白酶处理y分散成单个细胞制成细胞悬液转入培养液中进行原代培养贴满瓶壁

28、的细胞用超亘龍处理分散成单个细胞,.制成细胞悬液弃!转入培养液中进行传代培养1.1.3 细胞生长的两个特点:贴壁生长和接触抑制悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上,称为贴壁生 长。细胞数目不断增多，当贴壁细胞分裂生长到表面相互抑制时，细胞就会停止分裂增殖，这种现象称为 细胞的接触抑制。1.1.4 动物细胞培养需要满足以下条件无菌、无毒的环境:培养液应进行无菌处理。通常还要在培养液中添加一定量的抗生素，以防培养过程 中的污染。此外,应定期更换培养液,防止代谢产物积累对细胞自身造成危害。营养：合成培养基成分：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等。通常需加入血清、血浆等天 然成分。温度:适宜温度

29、:哺乳动物多是36.5C+0.5C； pH： 7.27.4。气体环境:95%空气+5%CC）2。O2是细胞代谢所必需的,CO2的主要作用是维持培养液的pH。2.2 动物体细胞核移植技术和克隆动物2.2.1 原理:动物细胞核具有全能性2.2.2 分类:胚胎细胞核移植（比较容易）和体细胞核移植（比较难）。2.2.3 过程:体碘供柳供细一胞养 细培巢母胞 卵卵细核母胞 入去卵细 注 （不同方 法促进） 细胞融合供人母并组体受细构胚进卵，重 核体胞建胎与遗质相犊 出体物本的 生供传基同牛一代孕母牛注意:I去核方法:显微操作法II激活受体细胞:物理或化学方法,使其完成细胞分裂选用去核卵（母）细胞的原因：

30、卵（母）细胞比较大,容易操作;卵（母）细胞细胞质多,营养丰富。2.2.4 体细胞核移植技术的应用：加速家畜遗传改良进程,促进良畜群繁育;保护濒危物种,增大存活数量;生产珍贵的医用蛋白;作为异种移植的供体;用于组织器官的移植等。2.2.5 体细胞核移植技术存在的问题;克隆动物存在着健康问题、表现出遗传和生理缺陷等。2.3 动物细胞融合2.3.1 动物细胞融合也称细胞杂交,是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。融合后形成的具有 原来两个或多个细胞遗传信息的单核细胞,称为杂交细胞。2.3.2 动物细胞融合与植物原生质体融合的原理基本相同，诱导动物细胞融合的方法与植物原生质体融合的 方法类似，

31、常用的诱导因素有电刺激、聚乙二醉、灭活的病毒等。2.3.3 动物细胞融合的意义:克服了远缘杂交的不亲和性，成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物生物 新品种培育的重要手段。2.3.4 动物细胞融合与植物体细胞杂交的比较:细胞工程植物体细胞杂交动物细胞融合理论基础细胞的全能性、细胞膜的流动性细胞增殖、细胞膜的流动性融合前处理酶解法去除细胞壁(纤维素酶、果胶酶)注射特定抗原,免疫处理正常小鼠诱导手段物理法:离心、振动、电激化学法:聚乙二醇(PEG)物理法:离心、振动、电激化学法:聚乙二醇(PEG)生物法:灭活的病毒(灭活的仙台病毒)诱导过程第一步：原生质体的制备(酶解法) 第二步：原生质体融合(物

32、、化法) 第三步：杂种细胞的筛选和培养 第四步：杂种植株的诱导与鉴定正常小鼠免疫处理动物细胞的融合(物、化、生法)杂交瘤细胞的筛选与培养专抗体检验阳性细胞培养单克隆抗体的提纯用途和意义克服远缘杂交的不亲和障碍,大大扩展杂交的亲本组合范围应用:白菜甘蓝等杂种植株(1) 制备单克隆抗体(2) 诊断、治疗、预防疾病例如生物导弹”治疗癌症2.4 单克隆抗体2.4.1 普通抗体:个B淋巴细胞只分泌种特异性抗体。从血清中分离出的抗体产量低、纯度低、特异 性差。注射特定的 抗原蛋白2.4.2 单克隆抗体的制备过程:Gl Q)-骨髓瘤X B淋巴细胞细胞 杂交细胞筛选!筛选出杂交瘤细胞杂交瘤细胞筛选一第2次筛选

33、:(K筛选出能产生所需抗体二%的杂交瘤细胞体外培养/、产内培养、从小鼠腹水中提取一乂”单克隆抗体2.4.3 杂交瘤细胞的特点:既能大量繁殖,又能产生特异性抗体。2.4.4 单克隆抗体的优点:特异性强,灵敏度髙,并能大量制备。2.4.5 单克隆抗体的作用:作为诊断试剂：准确识别各种抗原物质的细微差异，并跟一定抗原发生特异性结 合,具有准确、高效、简易、快速的优点。用于治疗疾病和运载药物：主要用于治疗癌症治疗,可制成“生 物导弹”，也有少量用于治疗其它疾病。五、胚胎工程1 .体内受精和早期胚胎发育1.1 精子的发生1.1.1 场所:睾丸的曲细精管1.1. 2时间:从初情期开始,到生殖机能衰退1.

34、1. 3过程:（1）精原细胞多个初级精母细胞（通过数次有丝分裂）（2） 1个初级精母细胞2个次级精母细胞4个精子细胞（通过减数分裂,即M!和MID（3）精子细胞f精子（通过变形）精原细胞先进行有丝分裂后进行减数分裂;变形过程中，细胞核为精子头的主要部分，髙尔基体发育为顶 体，中心体演变为精子的尾，线粒体在尾基部形成线粒体鞘膜,其他物质浓缩为原生质滴直至脱落。线 粒体为精子运动提供能量。1.2. 细胞（卵子）的发生1.3. 1场所:卵巢1.4. 2时间:从胎儿时期开始（胎儿时期完成了卵泡的形成和在卵巢内的储备）1.5. 3过程:（1）卵原细胞初级卵母细胞（2） 1个初级卵母细胞一1个次级卵母细胞

35、+第一极体（排卵前后完成）（3） 1个次级卵母细胞1个卵子+第二极体（精子和卵子结合过程中完成）在胎儿时期,卵原细胞进行有丝分裂演变成初级卵母细胞被卵泡细胞包围,减分裂在排卵前后完成, 形成次级卵母细胞和第一极体进入输卵管准备受精;减二分裂是在受精过程中完成的。1. 3受精1.3. 1概念：精子和卵子结合成合子（受精卵）的过程。1.4. 2场所:雌性的输卵管内1. 3. 3过程（1）受精前的准备阶段1:精子获能（2）受惊前的准备阶段2：卵子的准备（到减数第二次分裂中期,具备与精子受精的能力）（3）受精阶段精子穿越放射冠和透明带:顶体反应,透明带反应进入卵黄膜:卵黄膜封闭作用原核形成和配子结合精

36、子获能（在雌性动物生殖道内）;卵子的准备（排出的卵子要在输卵管中进一步成熟到减二中期 具备受精能力）;受精阶段卵子周围的结构由外到内:放射冠、透明带、卵黄膜。a顶体反应:精子释放顶体能溶解卵丘细胞之间的物质,穿越放射冠。b透明带反应:顶体酶可将透明带溶出孔道,精子穿入,在精子触及卵黄膜的瞬间阻止后来精子进入 透明带的生理反应它是防止多精子入卵受精的第一道屏障:c卵黄膜的封闭作用:精子外膜和卵黄膜融合,精子入卵后,卵黄膜会拒绝其他精子再进入卵内的过 程它是防止多精子入卵受精的第二道屏障:d精子尾部脱落，原有核膜破裂形成雄原核,同时卵子完成减二分裂，形成雌原核注意:受精标志是 第二极体的形成:受精

37、完成标志是雌雄原核融合成合子。1.4. 期胚胎发育1.5. 1卵裂期:细胞在透明带中进行有丝分裂，细胞数量不断增加,但胚胎的总体体积并不增加,或略有 减小。1.6. 2桑根胚:胚胎细胞达32个左右的胚胎（之前所有细胞都能发育成完整胚胎的潜能属全能细胞）1.4.3 囊胚:细胞开始分化，其中个体较大的细胞叫内细胞团将来发育成胎儿的各种组织;而滋养层细胞 将来发育成胎膜和胎盘:胚胎内部逐渐出现囊胚腔注:囊胚的扩大会导致透明带的破裂,胚胎伸展出来, 这过程叫孵化1.4.4 原肠胚:内细胞团细胞形成外胚层和内胚层（内细胞团表层形成外胚层，下方细胞形成内胚层,由 内胚层包围的囊腔叫原肠腔）,滋养层发育成胎

38、膜和胎盘。细胞分化在胚胎期达到最大限度2.体外受精和早期胚胎培养2.1 体外受精2.1.1 试管动物技术:通过人工操作使卵子和精子在体外条件下成熟和受精,并通过培养发育为早期胚胎 （桑甚胚或囊胚）后,再经移植产生后代的技术。2. 2. 2卵母细胞的采集:方法一:用促性腺激素处理,使其超数排卵,从中输卵管冲取精子（针对体型小的实验动物，家畜猪、羊 等），可直接受精。方法二:从屠宰母畜卵巢中采集（针对大家畜或大型动物,如牛）方法三：借助超声波探测仪、内窥镜、腹腔镜等工具直接从活体母畜卵巢中吸取（针对大家畜或大型动物， 如牛）2. 2. 3卵母细胞的培养：在体外人工培养成熟2. 2. 4精子的采集:

39、方法有假阴道法、手握法和电刺激法等2. 2. 5精子的获能：方法有:（1）培养法（通过获能培养液）,如啮齿动物、兔、猪等的精子:（2）化学法,用化学药物诱导精子获能,如牛、羊等家畜的精子。2. 3胚胎早期培养2.3. 1条件:受精卵在发育培养液中培养2. 3. 2培养液成分：无机盐、有机盐、维生素、激素、氨基酸、核甘酸、血清等2. 3. 3当胚胎发育到适宜的阶段时,可将其取出向受体移植或冷冻保存。3.胚胎工程的应用及前景胚胎工程的概念及技术手段：对动物早期胚胎或配子所进行的多种显微操作和处理技术，如胚胎移植、体 外受精、胚胎分割、胚胎干细胞培养等技术。3.1 胚胎移植3. 1. 1概念：是指将

40、雌性动物的早期胚胎，或者通过体外受精及其他方式得到的胚胎，移植到同种的、 生理状态相同的其他雌性动物的体内,使之继续发育为新个体的技术。其中提供胚胎的个体叫供体（遗传 特性和生产性能优秀），接受胚胎的个体叫受体（有健康的体质和正常繁殖能力）。3. 1.2应用:胚胎移植是转基因、核移植、或体外受精等技术的最后一道序”。3. 1.3现状:在牛的胚胎移植中,技术方法更为简便、实用。3. 1.4意义:可充分发挥雌性优良个体繁殖潜,产生优良特性的胚胎,缩短繁殖周期。4. 1. 5生理学基础胚胎移植成功与否关系到:供体和受体的生理状况（1）供、受体生殖器官的生理变化相同,为胚胎提供相同的生理环境（2）早期

41、胚胎没有与母体子宫建立组织联系,为胚胎收集提供可能（3）受体对外来胚胎基本不发生免疫排斥反应，为胚胎的存活提供可能（4）胚胎能与受体子宫建立正常的生理和组织联系,但其遗传物质在孕育过程中不受影响3. 1.6基本程序（1）对供、受体母牛进行选择:用激素进行同期发情处理:对供体母牛用激素做超数排卵处理;（2）配种或人工受精:选择同种优秀公牛配种有性生殖过程;（3）胚胎收集（冲卵（早期胚胎）,此时胚胎处于游离状态）、检查（胚胎应发育到桑梅胚或囊胚）、培养或保存（一 196p的液氮）（4）胚胎移植:手术法（引出子宫和卵巢将其注入）；非手术法（用移植管将其送入子宫）（5）移植后的检查（是否妊娠）等（6）

42、产下胚胎移植的犊牛。3. 1. 7、胚胎移植的时间不同动物胚胎移植的时间不同。（牛、羊一般要培育到桑根胚或囊胚阶段能进行移植,小鼠、家兔 等实验动物可在更早的阶段移植,人的体外受精胚胎可在8-16个细胞阶段移植。）3. 2胚胎分割3.2. 1概念:指采用机械方法将早期胚胎切割成2、4或8等份等,经移植获得同卵双胎或多胎的技术可 看作是动物无性繁殖或克隆。3. 2. 2仪器设备:实体显微镜和显微操作仪3. 2. 3意义:来自同一胚胎的后代具有相同的遗传物质，属于无性繁殖。3. 2. 4操作程序：（1）选择发育良好、形态正常的桑根胚或囊胚,移入盛有操作液的培养皿（2）用分割针或分割刀切开胚胎，吸出

43、半个,注入空透明带或直接将裸半胚移植给受体。分割囊胚时要 将内细胞团均等分割，否则会影响分割后胚胎的恢复和进步发育。此时还可用分割针分割滋养层，做胚 胎DNA分析性别鉴定。3. 2. 5局限:刚出生的动物体重偏低，毛色和斑纹上存在差异，同卵多胎的可能性有限。3. 3胚胎干细胞3.3. 1概念:由早期胚胎或原始性腺中分离出来的一类细胞。简称ES或EK细胞。3. 3. 2特点:形态上：体积小、细胞核大、核仁明显功能上:具有发育的全能性,即可分化为成年动物体任何种组织细胞;在体外可增殖而不发 生分化;可冷冻保存;可进行遗传改造。4. 3. 3意义:（1）移植ES细胞修复坏死或退化部位，治愈糖尿病、肝

44、（心）衰竭、成骨不良等病症（2） ES细胞体外诱导分化，可培育人造组织器官,解决供体器官不足和器官移植后免疫排斥 的问题（3） ES细胞在牛黄酸、丁酰环腺甘酸等分化诱导因子作用下可向不同类型组织细胞分化3. 3. 4胚胎干细胞的主要用途是:可用于研究哺乳动物个体发生和发育规律:可以用于治疗人类的某些顽疾，如帕金森综合症、少年糖尿病等;典型例题1. （2019四川成都七中髙三）下列关于果酒和果醋的制作原理、发酵过程的叙述中,错误的是（）A.果酒和果醋的发酵菌种不同,但代谢类型相同B.制作果酒和果醋时都应用体积分数为70%的酒精对发酵瓶消毒C.变酸果酒的表面观察到的菌膜是醋酸菌大量繁殖而形成D.果

45、酒和果醋的制作可用同一装置,但需控制不同发酵条件【答案】A【解析】A、果酒发酵的菌种是酵母菌,其代谢类型为异养兼性厌氧型,而果醋发酵的菌种是醋酸菌,其代谢类型 是异养需氧型,A错误;B、制作果酒和果醋时均需要对发酵瓶消毒,体积分数为70%的酒精具有消毒功能;B正确;C、果酒在醋酸菌的作用下可转变成醋酸，导致果酒变酸，所以变酸果酒的表面观察到的菌膜就能是醋酸 菌在液面大量繁殖而形成的:C正确;D、果酒和果醋的制作可用同一装置,但需控制不同发酵条件,果酒制作需要无氧环境，适宜温度为18 250,而果醋制作需要有氧环境，适宜温度为3035团，D正确;因此选Ao2. （2019上海高三）如表是微生物培

46、养基的成分。下列有关说法错误的是（）编号成分(NH4) 2SO4KH2PO4FeSO4CaCI2HzO含量/g0.44.00.50.5100mLA.此培养基可用来培养自养型微生物B.此表中的营养成分共有三类,即水、无机盐、氮源C.若除去,此培养基可培养圆褐固氮菌D.培养基中若加入氨基酸,则它可充当碳源、氮源和生长因子【答案】C【解析】A、由表格可知，该培养基成分中含有水、无机盐、氮源，但不含含碳有机物，可用来培养自养型微生物,A正确:B、表中的营养成分共有三类，即水、无机盐、氮源,B正确:C、圆褐固氮菌同化类型为异养型,培养基中必须含含碳有机物,所以该培养基不能用来培养圆褐固氮菌,C错误;D、培养基中若加入氨基酸,则它可充当碳源、氮源和生长因子,D正确。故选C,3. （2019