动物营养及研究方法.ppt
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1、动物营养研究技术动物营养研究技术动物营养教研室12/28/202212/28/20221 1动物营养研究的主要任务动物营养研究的主要任务动物所需要的营养素动物所需要的营养素动物所需要的营养素动物所需要的营养素研究并确定营养素的需要量研究并确定营养素的需要量研究并确定营养素的需要量研究并确定营养素的需要量饲料评定与饲料资源开发饲料评定与饲料资源开发饲料评定与饲料资源开发饲料评定与饲料资源开发营养素的代谢及其调节营养素的代谢及其调节营养素的代谢及其调节营养素的代谢及其调节研究动物营养与环境的关系研究动物营养与环境的关系研究动物营养与环境的关系研究动物营养与环境的关系寻求和改进动物营养的研究方法寻求
2、和改进动物营养的研究方法寻求和改进动物营养的研究方法寻求和改进动物营养的研究方法12/28/202212/28/20222 2动物营养学的研究内容营养物质的需要消化、吸收与代谢消化、吸收与代谢功能、缺乏、过量及中毒功能、缺乏、过量及中毒需要量确定需要量确定12/28/202212/28/20223 3动物营养学的研究内容饲料营养价值评定或养分生物效价的评定能量能量矿物元素矿物元素维生素维生素蛋白质、氨基酸蛋白质、氨基酸12/28/202212/28/20224 4动物营养学的研究内容营养物质间的相互关系与抗营养因子有毒元素有毒元素有害物质有害物质颉抗物质颉抗物质12/28/202212/28/
3、20225 5动物营养学的研究内容饲料资源的调查与开发利用饲料资源的调查与开发利用动物营养代谢调控动物营养代谢调控动物营养与环境和自然资源动物营养与环境和自然资源12/28/202212/28/20226 6动物营养实验的一般目的动物营养实验的一般目的动物营养实验的主要目的在于验证某一个假设,动物营养实验的主要目的在于验证某一个假设,即研究一个或多个因素对一特定指标有无影响。即研究一个或多个因素对一特定指标有无影响。一个正确的试验设计可以使我们分离、补偿、消一个正确的试验设计可以使我们分离、补偿、消除和考虑非试验因素的影响,这样一来,我们可除和考虑非试验因素的影响,这样一来,我们可以从实验结果
4、得出有关试验处理的有效结论。以从实验结果得出有关试验处理的有效结论。12/28/202212/28/20227 7影响营养试验结果的某些因素影响营养试验结果的某些因素动物因素动物因素动物因素动物因素环境因素环境因素环境因素环境因素种类、品种种类、品种种类、品种种类、品种房屋房屋房屋房屋遗传遗传遗传遗传栏舍栏舍栏舍栏舍年龄年龄年龄年龄季节季节季节季节体重体重体重体重温度温度温度温度性别性别性别性别光照光照光照光照生理状态生理状态生理状态生理状态日粮日粮日粮日粮生产阶段生产阶段生产阶段生产阶段管理管理管理管理生产水平生产水平生产水平生产水平试验前的处理试验前的处理试验前的处理试验前的处理动物个体动
5、物个体动物个体动物个体12/28/202212/28/20228 8一个试验应该包括一个试验应该包括3个阶段个阶段1)周密细致的试验设计周密细致的试验设计2)试验的实施阶段试验的实施阶段3)对试验结果进行恰当的统计分析对试验结果进行恰当的统计分析统计推断结论12/28/202212/28/20229 9试验设计的基本要素试验设计的基本要素1)试验因素试验因素2)受试对象受试对象3)处理效应处理效应指标的关联性、客观性指标的关联性、客观性灵敏性、精确性灵敏性、精确性观测指标观测指标12/28/202212/28/20221010动物营养实验设计的基本原则动物营养实验设计的基本原则1)重复的原则重
6、复的原则2)随机化原则随机化原则3)局部控制的原则(减少误差)局部控制的原则(减少误差)12/28/202212/28/20221111要求差异的唯一性动物的代表性和随机化环境的一致性试验结果的重演性(重复、试验时间、数据的收集与处理等)12/28/202212/28/2022121212/28/202212/28/20221313动物营养研究方法化学分析、物理测试动物试验其它:同位素示踪 外科造瘘 无菌技术12/28/202212/28/20221414化学分析饲料成分的分析饲料成分的分析动物组织和血液成分的分析动物组织和血液成分的分析动物粪便及成分动物粪便及成分12/28/202212/2
7、8/20221515饲料分析饲料分析 概略养分分析概略养分分析 Van soest 饲草分析方法饲草分析方法 纯养分分析纯养分分析 动物排泄物(粪尿)及组织分析动物排泄物(粪尿)及组织分析抗营养因子和毒素分析抗营养因子和毒素分析 其他分析方法其他分析方法12/28/202212/28/20221616概概略略养养分分分分析析方方法法饲料样品饲料样品饲料样品饲料样品 105105烘干至恒重烘干至恒重烘干至恒重烘干至恒重 水分水分水分水分干物质干物质干物质干物质,DM,DM 550550灰化至恒重灰化至恒重灰化至恒重灰化至恒重 灰分灰分灰分灰分(AshAsh)有机物有机物有机物有机物OMOM 凯氏
8、定氮法凯氏定氮法凯氏定氮法凯氏定氮法 粗蛋白质粗蛋白质粗蛋白质粗蛋白质(CPCP)无氮有机物无氮有机物无氮有机物无氮有机物 乙醚回流浸提乙醚回流浸提乙醚回流浸提乙醚回流浸提 粗脂肪(粗脂肪(粗脂肪(粗脂肪(EEEE)碳水化合物碳水化合物碳水化合物碳水化合物 稀酸、碱(稀酸、碱(稀酸、碱(稀酸、碱(1.25%H1.25%H2 2SOSO4 4和和和和 0.313mol/L 0.313mol/L NaOHNaOH分别处理分别处理分别处理分别处理)粗纤维粗纤维粗纤维粗纤维(CFCF)无氮浸出物(无氮浸出物(无氮浸出物(无氮浸出物(NFENFE)12/28/202212/28/20221717概概略略
9、养养分分分分析析法法的的缺缺陷陷 WeendeWeende 分分分分析析析析法法法法仅仅仅仅能能能能给给给给出出出出饲饲饲饲料料料料中中中中“粗粗粗粗养养养养分分分分”含含含含量量量量的的的的测测测测定定定定值值值值,而而而而未未未未给给给给出出出出“粗粗粗粗养养养养分分分分”中中中中各各各各种具体营养成分的含量。种具体营养成分的含量。种具体营养成分的含量。种具体营养成分的含量。在在在在碳碳碳碳水水水水化化化化合合合合物物物物分分分分析析析析方方方方法法法法上上上上存存存存在在在在不不不不足足足足,在在在在的的的的测测测测定定定定过过过过程程程程中中中中,酸酸酸酸处处处处理理理理使使使使大大大
10、大部部部部分分分分的的的的半半半半纤纤纤纤维维维维素素素素水水水水解解解解,碱碱碱碱处处处处理理理理又又又又使使使使部部部部分分分分的的的的木木木木质质质质素素素素溶溶溶溶解解解解,使使使使得得得得饲饲饲饲料料料料中中中中粗粗粗粗糙糙糙糙的的的的成成成成分分分分并并并并未未未未完完完完全全全全包包包包括括括括在在在在中中中中。从而加大了无氮浸出物的计算误差。从而加大了无氮浸出物的计算误差。从而加大了无氮浸出物的计算误差。从而加大了无氮浸出物的计算误差。CFCF并并并并非非非非化化化化学学学学上上上上的的的的一一一一种种种种物物物物质质质质,而而而而是是是是几几几几种种种种物物物物质质质质比比比
11、比例例例例不不不不确确确确定定定定的的的的混混混混合合合合物物物物,同同同同时时时时也也也也并并并并未未未未将将将将饲饲饲饲料料料料中中中中的的的的这几种物质全部包括在其中。这几种物质全部包括在其中。这几种物质全部包括在其中。这几种物质全部包括在其中。12/28/202212/28/20221818范氏分析法范氏分析法范氏分析法范氏分析法饲草、粗饲料饲草、粗饲料中性洗涤剂可溶物中性洗涤剂可溶物,NDS(蛋白质、脂肪、淀粉、糖蛋白质、脂肪、淀粉、糖)中性洗涤纤维中性洗涤纤维,NDF(半纤维素,纤维素,木质素,硅酸盐半纤维素,纤维素,木质素,硅酸盐)酸性洗涤剂可溶物酸性洗涤剂可溶物,ADS(半纤维
12、素半纤维素)酸性洗涤纤维酸性洗涤纤维,ADF(纤维素,木质素,硅酸盐纤维素,木质素,硅酸盐)72%硫酸,硫酸,2030,3h酸性洗涤木质素酸性洗涤木质素,ADL(木质素,硅酸盐木质素,硅酸盐)水解液水解液(纤维素)纤维素)500 灼烧灼烧逸失物逸失物(木质素)木质素)残渣残渣(灰分,即硅酸盐灰分,即硅酸盐)2%十六烷三甲基十六烷三甲基溴化铵,煮沸溴化铵,煮沸1h3%十二烷基硫十二烷基硫酸钠,煮沸酸钠,煮沸1h范氏分析法原理示意图范氏分析法原理示意图12/28/202212/28/20221919纯养分分析纯养分分析 容量分析容量分析 比色分析比色分析 仪器分析(仪器分析(色谱分析、色谱分析、原
13、子吸原子吸收收、荧光光谱分析、红外光谱、荧光光谱分析、红外光谱分析、核磁共振等分析、核磁共振等)常常用用分分析析方方法法12/28/202212/28/20222020例v高效液相色谱(高效液相色谱(HPLC)法是目前用于氨基法是目前用于氨基酸分析的常用技术酸分析的常用技术。这种方法的样品处理:一般用这种方法的样品处理:一般用 6N HCl于于110水解水解24h。但这种处理法会使但这种处理法会使Cys遭遭破坏破坏。Cys测定测定1)二硫化物类试剂保护法二硫化物类试剂保护法2)过甲酸氧化法过甲酸氧化法12/28/202212/28/20222121以回收以回收TrpTrp为目的的水解为目的的水
14、解代替代替6N-HCl6N-HCl的是使用的是使用4N4N甲烷磺酸,按用盐酸加水甲烷磺酸,按用盐酸加水分解的方法让其分解。分解的方法让其分解。分解后,由于不能减压干燥,加入分解后,由于不能减压干燥,加入4N-NaOH,4N-NaOH,在在PH=2PH=2调节调节在在0.02N-HCI0.02N-HCI给一定的容量作样品给一定的容量作样品 注意事项:注意事项:1)甲烷磺酸是用)甲烷磺酸是用1ml小玻璃瓶装入,由技术化学制品株式会社小玻璃瓶装入,由技术化学制品株式会社出售,其组成是在出售,其组成是在4N甲烷磺酸中含有甲烷磺酸中含有0.2%3-(2-氨基乙烷氨基乙烷)吲哚吲哚氮(杂)氮(杂)2)中和
15、时的)中和时的PH,使用,使用PH试纸试纸 3)分析了)分析了20个被检体后,将分解柱用再生液清洗个被检体后,将分解柱用再生液清洗4小时左右,小时左右,这是为除去从树脂中混入到试剂的吸附物质。这是为除去从树脂中混入到试剂的吸附物质。4)对氢硫基乙烷磺也有效)对氢硫基乙烷磺也有效 12/28/202212/28/20222222以回收以回收CysCys 、MetMet为目的的加水分解为目的的加水分解精确称量精确称量精确称量精确称量12mg12mg12mg12mg样品样品样品样品加入加入加入加入2ml2ml2ml2ml过蚁酸,在过蚁酸,在过蚁酸,在过蚁酸,在0000放置放置放置放置42442442
16、4424小时小时小时小时添加添加添加添加48%HBr 0.3ml48%HBr 0.3ml48%HBr 0.3ml48%HBr 0.3ml减压干燥减压干燥减压干燥减压干燥依从盐酸加水分解的方法,减压进行到干燥为止依从盐酸加水分解的方法,减压进行到干燥为止依从盐酸加水分解的方法,减压进行到干燥为止依从盐酸加水分解的方法,减压进行到干燥为止加入加入加入加入1ml1ml1ml1ml的的的的0.2N-NaOH0.2N-NaOH0.2N-NaOH0.2N-NaOH,放置,放置,放置,放置1 1 1 1小时小时小时小时在在在在0.05 N0.1 NCHI0.05 N0.1 NCHI0.05 N0.1 NCH
17、I0.05 N0.1 NCHI,进行,进行,进行,进行PHPHPHPH调制和给一定的容量调制和给一定的容量调制和给一定的容量调制和给一定的容量 12/28/202212/28/20222323例v有效赖氨酸化学分析方法有效赖氨酸化学分析方法。赖氨酸的赖氨酸的赖氨酸的赖氨酸的-氨基与氨基与氨基与氨基与1-1-氟,氟,氟,氟,2 2,4-4-二硝基苯反二硝基苯反二硝基苯反二硝基苯反应。应。应。应。与与与与2 2,4 4,6-6-三硝基苯磺酸三硝基苯磺酸三硝基苯磺酸三硝基苯磺酸 反应。反应。反应。反应。12/28/202212/28/20222424动物排泄物(粪尿)及组织分析动物排泄物(粪尿)及组
18、织分析12/28/202212/28/20222525尿成分分析尿成分分析 尿尿尿尿中中中中某某某某些些些些代代代代谢谢谢谢中中中中间间间间产产产产物物物物或或或或尾尾尾尾产产产产物物物物的的的的水水水水平平平平,可可可可能能能能反反反反映映映映动动动动物机体某些养分的代谢或营养状况。物机体某些养分的代谢或营养状况。物机体某些养分的代谢或营养状况。物机体某些养分的代谢或营养状况。如如如如,叶叶叶叶酸酸酸酸缺缺缺缺乏乏乏乏则则则则尿尿尿尿中中中中亚亚亚亚胺胺胺胺甲甲甲甲基基基基谷谷谷谷氨氨氨氨酸酸酸酸(FIGLV)FIGLV)排排排排泄泄泄泄增增增增加加加加;烟烟烟烟酸酸酸酸缺缺缺缺乏乏乏乏,尿
19、尿尿尿中中中中N-N-甲甲甲甲基基基基烟烟烟烟酰酰酰酰胺胺胺胺减减减减少少少少;B B6 6缺缺缺缺乏乏乏乏,尿尿尿尿中中中中黄黄黄黄尿酸或犬尿酸含量增加尿酸或犬尿酸含量增加尿酸或犬尿酸含量增加尿酸或犬尿酸含量增加又又又又如如如如,尿尿尿尿中中中中3 3甲甲甲甲基基基基组组组组氨氨氨氨酸酸酸酸水水水水平平平平与与与与体体体体内内内内蛋蛋蛋蛋白白白白质质质质的的的的分分分分解解解解代代代代谢正相关。谢正相关。谢正相关。谢正相关。12/28/202212/28/20222626近红外分析技术近红外分析技术(NIRS)12/28/202212/28/20222727Broilerbroodingsy
20、stem育雏系统12/28/202212/28/20222828动物试验 生物效价:表观和真实消化率生物效价:表观和真实消化率 表观和真实利用率表观和真实利用率 表观、真实沉积率表观、真实沉积率 (包括消化、代谢或平衡试验、饲养试验包括消化、代谢或平衡试验、饲养试验 )需要量研究需要量研究 综合法综合法 析因法析因法12/28/202212/28/20222929饲料养分消化率测定饲料养分消化率测定12/28/202212/28/20223030消化试验体内消化试验体内消化试验 全收粪法全收粪法 指示剂法指示剂法离体消化试验离体消化试验 消化吸收道消化液消化吸收道消化液 人工消化液人工消化液尼
21、龙袋法尼龙袋法12/28/202212/28/20223131消化试验要点试验动物的准备及要求测试饲料和日粮的准备试验过程:预试期和正试期样品收集和处理12/28/202212/28/20223232稻谷和糙米猪消化率测定采用套算法共选9头杂交公猪(平均体重为68.21.7kg),其中3头喂基础日粮(B),3头喂试验日粮S1(70%基础日粮+30%稻谷),3头喂试验日粮S2(70%基础日粮+30%糙米)。基础日粮组成如下(%):玉米50.7,麦麸15.0,次粉15.0,豆饼16.0,食盐0.3,预混料3.0。预试期6d,收粪期5d,每天取粪样的10%,加10%硫酸(每100g粪加10mL)和甲
22、苯数滴后于65烘箱中烘干。待全部粪样收齐后制样分析。计算公式某养分消化率=100(B-T)/f+B其中:T为试验日粮的养分消化率,B为基础日粮的养分消化率,f为稻谷或糙米某养分占试验日粮养分的比例。12/28/202212/28/20223333表2基础日粮、稻谷和糙米的营养成分及计算的f值营养成分基 础 日粮稻谷糙米稻谷的f值糙米的f值干物质88.287.887.00.3000.297粗蛋白14.238.110.30.1960.237粗纤维4.759.61.10.4640.090粗脂肪4.63.13.60.2240.251粗灰分5.54.31.50.2510.105有机物82.783.585
23、.50.3020.307无氮浸出物59.362.670.50.3110.338总能16.1215.7816.360.2970.30612/28/202212/28/20223434表2稻谷和糙米的营养分消化率(%)营养成分营养成分基础日粮基础日粮稻谷日粮稻谷日粮糙米日粮糙米日粮稻谷稻谷干物质80.9675.9382.3764.1985.71有机物82.9877.4084.3364.5087.38粗蛋白76.3776.8380.8378.7295.19粗纤维47.5233.6349.5317.5869.85粗脂肪60.3864.0563.6776.7673.49无氮浸出物89.0588.0591
24、.4685.8396.18总能80.5775.7381.7564.2784.4312/28/202212/28/20223535反刍动物饲料蛋白质瘤胃降解率反刍动物饲料蛋白质瘤胃降解率的测定的测定12/28/202212/28/20223636平衡试验平衡试验(代谢试验)代谢试验)物质平衡试验物质平衡试验 能量平衡试验能量平衡试验12/28/202212/28/20223737代谢试验消化试验仅考虑粪的营养分损失,而代谢试验还需考虑尿和消化道气体中营养物质的损失。尿样的收集和处理12/28/202212/28/20223838代谢能的测定代谢能的测定12/28/202212/28/202239
25、39鸡表观代谢能鸡表观代谢能鸡表观代谢能鸡表观代谢能(以糙米代谢能的测定为例)(以糙米代谢能的测定为例)(以糙米代谢能的测定为例)(以糙米代谢能的测定为例)测定方法测定方法:按鸡表观代谢能测定技术规程的方法进行。选用成年公鸡按鸡表观代谢能测定技术规程的方法进行。选用成年公鸡(体重),饲养于代谢笼中,用配合饲料预饲一周,缝好集粪器,正式(体重),饲养于代谢笼中,用配合饲料预饲一周,缝好集粪器,正式试验开始前试验开始前3 3天,在配合饲料中加大糙米的比例,整个试验期自由饮水。天,在配合饲料中加大糙米的比例,整个试验期自由饮水。试验开始时,先将实验鸡饥饿试验开始时,先将实验鸡饥饿3232小时,然后强
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