DB4203∕T 202-2021 杜鹃兰组培育苗技术规程(十堰市).pdf

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1、ICS 65.020.20 C23 DB4203 湖北省十堪市地方标准DB 4203月202-2021杜鹊兰组培育苗技术规程2021-9-10发布2021-9-15实施十垣市市场监督管理局发布目IJ言本文件依据G/T1.1-2020的规定编写.本文件由十堪市农业科学院提出并归口。OB4203/T 202一-2021本文件起草单位:十堪市农业科学院、湖北医药学院、湖北金水源农业开发有限公司、丹江口市农业环境保护站。本文件主要起草人:李坤、周明、封海东、刘志培、司海f青、郝新才、周军、张泽志、陈世芬、周渭华、崔鹏、欧阳友香、王消、韩明消.本文件由十堪市农业科学院负责解释。本文件实施应用中的疑问，可

2、咨询十堪市农业科学院，联系电话。719-8465802.邮箱;对本文件的有关修改意见建议请反馈至十堪市农业科学院，联系电话。719-8465802.邮箱.I D84203/T 202-2021 杜鹊兰组培育苗技术规程1 范围本文件规定了杜鹊兰育苗技术的设施条件、化学试剂的选择和保存、培养基的市1)备、组织培养技术、组培生根苗脱瓶规格、裁前处理、移裁、生长期管理、病虫害防治、收获以及生产技术档案等.本文件适用于十垠市社鹊兰组织培养生产。2 规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款.其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件，其最

3、新版本(包括所有的修改单适用于本文件。GB 5084 农田灌溉水质标准GB 20287 农用微生物菌剂N Y/T 2306 花卉种茵组培快繁技术规程N Y/T 3024 日光植室建设标准3 术语和定义下列术语和定义适用于本文件。3.1 丰土鹊兰兰科社鹊兰属杜隅兰或斑叶杜鹊兰。3.2 组织培养从植物体分离出符合需要的组织、器官、细胞或原生质体等，通过无菌操作，在人工控制条件下进行培养以获得再生的完整植株或生产具有经济价值的其他产品的技术。3.3 培养基供微生物、植物组织和动物组织生长和维持用的人工配制的养料般都含有碳水化合物、含氮物质、无机盐(包括微量元素以及维生素和水等.3.4 外植体OB42

4、03/T 202-2021 植物组织培养中作为离体培养材料的无菌细胞、器官或组织等的片段。3.5 组培茵根据植物细胞具有全能性的理论，利用外植休，在无菌和适宜的人工条件下，培育的完整植株。3.6 基质无土栽培中用来固定植株的材料，常用的基质有尊炭、珍珠岩等.4 设施条件4.1 组培室设施条件需要配备高压灭菌锅、空气净化器、空气加湿器、超净工作台、空调培养架、LED灯、温湿度计等仪辘设备。4.2 炼苗大棚设施条件炼苗大棚采用温室大棚，配备li!湿度计、防虫网设备、夏季降温遮阳设备(电动遮阳帘、室内灌溉设备(净水器、1质滋系统、冬季防寒保温设备(空调、暖气等、杀菌净化装置(风淋、杀菌灯、臭氧机等)

5、。温室大棚的建设应符合NY/T3024的规定。5 化学试剂的选择和保存化学试剂的级别与保存按照NY/T2306的要求执行。6 培养基的制备培养基经120C-150 C高压灭菌20min-25 min.培养室存放l周以上，无污染后方可使用。发芽培养基MS+NAAO.8mg/L-l.0 mg/L+ZTO.05 mg/L-0.08 mg/L+6-BAO.08 mg/L-0.1 mg/L+l!f.lJ,Ii 30.0 g/L+琼脂6g/L+马铃薯煮熟滤液600.0g/L.pH5.6-6.增殖培养基M附S+咱6-BA0.08m吨g/儿L-0.1m咆g/L+lAAO.1 mg/L-0.2 mg/L+1脖普

6、炭0.7g/L-0.8 g/L+琼脂5.5g/L-6.5 g/L+马铃薯煮熟滤液2纠40g/L-3衍60g/L.pH 5.6-6.分化培养基MS+6-BAO.5mg/L-0.8 mg/L+TDZO.5 mg/L-0.8 mg/L+NAAO.2 mg/L-0.5 mg/L+l!f.糖25 g/L-35 g/L+活性炭。7g/L-O.8 g/L+琼脂5.5g/L-6.5 g/L+马铃薯煮熟滤液240g/L-360 g/L.pH5.6-6。生根培养基MS+NAAO.4m g/L-0.6 mg/L+l!f.糖15g/L-25 g/L+活性炭。7g/L-0.8 g/L+琼脂5.5 g/L-6.5 g/L

7、+马铃薯煮熟滤液240g/L-360 g/L.pH5.6-6.7 组织培养技术2 DB4203/T 202-2021 7.1 外植体的选择;择当年采集的无病斑、未开裂、八成熟黄绿色殉果作为外祖体材料。7.2 页菌方法7.2.1 一次灾菌将杜鹊兰果奖自来水洗净表面污迹，洗衣粉浸泡20min.流水冲洗10min.晾干后用手术刀纵切取出细小双叶杜悄兰种子，装入专用种子消毒袋内，封口机封口待用.7.2.2 二次灭菌将封装好的和l子消毒袋放入配置好的pH9.0-10.0的NaOH溶液中，加入2-3滴吐温80.里于水浴锅内，温度40C.处理30min.捞出后用蒸惚水冲洗5-6次，放入事先消毒好的500mL

8、烧杯内备用。7.2.3 三次灾菌将处理好的种子消毒袋盟于超净工作台内，加入75%消毒酒精浸泡30s-45 s.用蒸馈水冲洗2-3次，加入0.1%氯化ffi:溶液，滴入2-3滴吐温80.不断搅动进行杀菌.10 min-15 min后用无菌水冲洗4-6次，取出消毒袋放入经消毒过的无菌滤纸上，超J争工作台开强风吹2h-4 h至消毒袋内种子里松散状。7.3 接种将经过消毒处理的外植体置于超净工作台内，用手术刀划开消毒袋，用银子轻轻将外植体均匀接种到发芽培养基表丽.11子培养室培养，培养室温度设置24C:!:1 C.温度60号80%.光照强度2500LX-3000LX.光照时间8h-IOh.培养60d-

9、80 d.获得淡黄色原球茎后进行增殖培养.7.4 增殖培养将淡黄色原球茎接种到增殖培养基上进行增殖培养，培养室日间温度23C-25 C.夜间温度20C-23 C.显度6080%.光照强度3000LX-3500 LX.光照时间10h-12 h.培养时间40d-50 d.获得绿色增殖原球茎后进行分化培养。7.5 分化培养将绿色增殖原球茎团块分割成0.3-0.7)cmX 0.3-0.7)cm的原球茎小块，接种到分化培养基上进行分化培养，培养室日问温度23C-25 C.夜间温度20C-23 C.湿度60号也-80%.光照、强度3000LX-3500 LX.光照时间10h-12 h.培养时间40d-50

10、 d.获得根部假鳞茎膨大且分化有簇生芽的无根幼筋后进行生根培养。7.6 生根培养将增殖无根幼苗接种到生根培养基上进行生根培养，培养室日问温度23C-25 C.夜间温度20C-23 C.湿度6仙也-80%.光照强度3000LX-3500 LX.光照、时间10h-12 h.培养时间40d-50 d.获得根部假鳞茎膨大且生长有3-5条根须的组培种苗。B 组培生根苗脱瓶规格壮鹊兰组培生根商无污染，叶片1l或2枚，叶宽0.5cm以上，根2条以上，根长0.5cm以上，根3 D84203/T 202-2021 系粗壮，生长旺盛。9 裁前处理9.1 预处理将经过生根的杜鹊兰组培前从培养室取出，将培养瓶移到室外

11、遮阴温室中进行闭瓶炼苗2-3天，拧开瓶盖继续炼苗3d-5 d，遮阴度为75%，温度20C-25 C，湿度6080%。9.2 基质配置将草炭土、珍珠岩和短石按3:1:0.5(体积比)采用高温干热灭菌法灭菌冷却后备用.将矿源黄腐酸御5000倍液、哈茨木每菌500倍液、枯草芽于包杆菌500倍液、大量元素水溶肥800倍液制成混合营养液，pH值5.6-5.8，充分浸润炼酋基质，湿度60%，发酵5d-7 d。选用的微生物菌剂应符合GB20287 的规定。9.3 厢面准备将发酵好的基质填入厢丽，厢面宽度0.8m-1.2 m，长度随大棚面积而定，用木板刮平，厚度15cm-20 cm.9.4 组培苗脱瓶用摄子将

12、经过m;、茵的杜隅兰茵轻轻取出，放入消水盆中，轻轻洗去根部琼脂，避免伤根，然后捞出，将根部假鳞茎以下放入NAAO.5mglL溶液中浸泡20min.10 移栽10.1 移栽时间一般为9月至次年5月.10.2 移栽方法用手指在基质上打孔，深度2cm-3 cm，行I!7 cm-10 cm，株距3cm-5 cm，将组培苗栽入育苗基质中，覆盖、压实，浇足定根水。时l盟川水符(GB 5084的1f求!11 生长期管理11.1 遮阴度遮阴度75伽-90%。11.2 湿度空气湿度保持在80%，基质湿度保持在60%，经常通风。11.3 温度4 DB4203/T 202-2021 i占1(温度保持在20C-25 C.最高不得超过35C.最低不得低于5C.12 病虫害防治病虫害防治以预防为主，大棚配备的防虫网和基质中添加的活性菌可有效减少病虫害的发生.日常管理时期要注意迎风，加强水分控制与温度的协调，错开高温高湿和低温高湿环境.13收获收获时间一般在4-5月倒苗前或9-10月出芽后进行，随收随种.炼苗出圃标准假鳞茎1-2个，直径。5cm-l cm，苗高8 cm-15cm.收获过程中避免机械损伤.14 生产技术档案按照本文件提出的各项技术要求建立相应的技术管理档案。5