外植体的选择和灭菌ppt课件.ppt

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1、资金是运动的价值，资金的价值是随时间变化而变化的，是时间的函数，随时间的推移而增值，其增值的这部分资金就是原有资金的时间价值一一般般方方法法1资金是运动的价值，资金的价值是随时间变化而变化的，是时间的函数，随时间的推移而增值，其增值的这部分资金就是原有资金的时间价值一、外植体的部位：根、茎、叶、花、果等一、外植体的部位：根、茎、叶、花、果等二、其它：如季节、生理状态和发育年龄等二、其它：如季节、生理状态和发育年龄等三、外植体的大小三、外植体的大小第四章第四章 外植体的选择和灭菌外植体的选择和灭菌第一节第一节 外植体的选择外植体的选择外植体（外植体（explant）：）：从植物体上分离的用于离体

2、培养的植从植物体上分离的用于离体培养的植物体部分。物体部分。第一部分第一部分 组织培养技术组织培养技术2资金是运动的价值，资金的价值是随时间变化而变化的，是时间的函数，随时间的推移而增值，其增值的这部分资金就是原有资金的时间价值外植体种类外植体种类u带芽外植体带芽外植体u胚胚u分化器官、组织分化器官、组织u花粉、雌配子体中的单倍体细胞花粉、雌配子体中的单倍体细胞3资金是运动的价值，资金的价值是随时间变化而变化的，是时间的函数，随时间的推移而增值，其增值的这部分资金就是原有资金的时间价值u 原则上可用植物的任何部位原则上可用植物的任何部位;但不同种类植物及但不同种类植物及同一植物的不同部位对诱导

3、条件反应不同同一植物的不同部位对诱导条件反应不同;选择优良选择优良种质、增殖能力强的外植体种质、增殖能力强的外植体u 外植体应容易得到外植体应容易得到u 应考虑得到无毒苗应考虑得到无毒苗外植体的部位选择外植体的部位选择注意：注意：外植体的幼化程度、年龄外植体的幼化程度、年龄 与着生部位。与着生部位。u 植物主轴植物主轴 向上的部分向上的部分 生理年龄老生理年龄老 易形成花器官易形成花器官.向基部的部分向基部的部分 生理年龄小生理年龄小 易形成根等器官易形成根等器官.u 幼年组织较老年组织具有较高的形态发生能力幼年组织较老年组织具有较高的形态发生能力4资金是运动的价值，资金的价值是随时间变化而变

4、化的，是时间的函数，随时间的推移而增值，其增值的这部分资金就是原有资金的时间价值取材季节取材季节u一般取母株生长旺盛的季节的材料一般取母株生长旺盛的季节的材料外植体的大小外植体的大小u 一般外植体越小成活率越低，难启动或一般外植体越小成活率越低，难启动或启动后仅产生愈伤组织启动后仅产生愈伤组织;越大，消毒越困难越大，消毒越困难u 大小适中大小适中.5资金是运动的价值，资金的价值是随时间变化而变化的，是时间的函数，随时间的推移而增值，其增值的这部分资金就是原有资金的时间价值第二节第二节 外植体的消毒外植体的消毒一、常用消毒剂一、常用消毒剂二、消毒方法二、消毒方法6资金是运动的价值，资金的价值是随

5、时间变化而变化的，是时间的函数，随时间的推移而增值，其增值的这部分资金就是原有资金的时间价值一、常用消毒剂一、常用消毒剂u乙醇：乙醇：70707575；表面灭菌、浸润；表面灭菌、浸润；30s30su升汞（升汞（HgCl2)HgCl2)：0.1%0.1%0.2%0.2%；表面灭菌；表面灭菌；3 310 min10 min；残留多时导致坏死（要残留多时导致坏死（要5 5次以上无菌水冲洗）；注意环境次以上无菌水冲洗）；注意环境污染污染u次氯酸钠：次氯酸钠：2 21212；表面灭菌；表面灭菌；151530min30min；u次氯酸钙（漂白粉）：次氯酸钙（漂白粉）：10102020；表面灭菌；表面灭菌；

6、202030min30min；u过氧化氢：过氧化氢：6 61212；表面灭菌；表面灭菌；5 520min20min；u其他：其他：1 12 2溴水，溴水，5 510min10min；1 1AgNO3AgNO3，151530min30min；7资金是运动的价值，资金的价值是随时间变化而变化的，是时间的函数，随时间的推移而增值，其增值的这部分资金就是原有资金的时间价值u吐温的使用：吐温的使用：0.1%0.1%，表面活性剂，浸润作用，表面活性剂，浸润作用u无菌水无菌水:在用灭菌剂之前和之后均需用无菌水冲在用灭菌剂之前和之后均需用无菌水冲洗数遍洗数遍.8资金是运动的价值，资金的价值是随时间变化而变化的

7、，是时间的函数，随时间的推移而增值，其增值的这部分资金就是原有资金的时间价值二、外植体的灭菌方法二、外植体的灭菌方法具体的灭菌方法和步骤具体的灭菌方法和步骤:依不同的材料而不同依不同的材料而不同P61P61：图：图4-1 4-1 植物外植体消毒的一般程序植物外植体消毒的一般程序9资金是运动的价值，资金的价值是随时间变化而变化的，是时间的函数，随时间的推移而增值，其增值的这部分资金就是原有资金的时间价值第三节第三节 外植体的接种和培养外植体的接种和培养u 接种室需预先消毒；接种室需预先消毒；u 外植体接种应在接种室进行；外植体接种应在接种室进行；u 培养可采用固体培养和液体培养两种形式；培养可采

8、用固体培养和液体培养两种形式；一、接种室的消毒一、接种室的消毒 空空 间间紫外线；甲醛紫外线；甲醛+高锰酸钾；高锰酸钾；超净台超净台紫外线紫外线+75%+75%乙醇；乙醇；工作人员工作人员清洗清洗+新洁尔灭浸泡新洁尔灭浸泡+75%+75%乙醇乙醇二、外植体的接种二、外植体的接种 擦擦冲冲开开灭灭切切 烧烧取取烧烧夹夹放放烧烧包包10资金是运动的价值，资金的价值是随时间变化而变化的，是时间的函数，随时间的推移而增值，其增值的这部分资金就是原有资金的时间价值u温度：温度：252252；u光照：包括光照、光质和光周期；光照：包括光照、光质和光周期；u培养基的培养基的pH:5.6-6.0;pH:5.6

9、-6.0;但若培养基中含有铁但若培养基中含有铁离子，离子，pHpH应在应在5.25.2以下以下.u湿度湿度:培养容器的湿度常保持在培养容器的湿度常保持在100%;100%;培养培养室的湿度室的湿度70-80%.70-80%.u气体气体:氧氧;二氧化碳二氧化碳;乙烯等乙烯等.三、培养条件三、培养条件11资金是运动的价值，资金的价值是随时间变化而变化的，是时间的函数，随时间的推移而增值，其增值的这部分资金就是原有资金的时间价值第四节第四节 污染原因和预防措施污染原因和预防措施u外植体预先培养外植体预先培养u避免阴雨天在田间采集外植体避免阴雨天在田间采集外植体u对外植体内部有污染的材料，要取材料的对外植体内部有污染的材料，要取材料的深层分生组织深层分生组织12