2023年高中生物必修实验知识点总结.doc

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1、实验一观测DNA和RNA在细胞中的分布实验原理：DNA绿色，RNA红色分布：真核生物DNA重要分布在细胞核中，线粒体和叶绿体内也具有少量的DNA；RNA重要分布在细胞质中。实验结果:细胞核呈绿色,细胞质呈红色.实验二物质鉴定还原糖+斐林试剂砖红色沉淀脂肪+苏丹III橘黄色脂肪+苏丹IV红色蛋白质+双缩脲试剂紫色反映1、还原糖的检测（1）材料的选取：还原糖含量高，白色或近于白色，如苹果，梨，白萝卜。（2）试剂：斐林试剂（甲液：0.1g/mL的NaOH溶液，乙液：0.05g/mL的CuSO4溶液），现配现用。（3）环节：取样液2mL于试管中加入刚配的斐林试剂1mL（斐林试剂甲液和乙液等量混合均匀后

2、再加入）水浴加热2min左右观测颜色变化（白色浅蓝色砖红色）模拟尿糖的检测1、取样：正常人的尿液和糖尿病患者的尿液2、检测方法：斐林试剂（水浴加热）或班氏试剂或尿糖试纸3、结果：（用斐林试剂检测）试管内发生出现砖红色沉淀的是糖尿病患者的尿液，未出现砖红色沉淀的是正常人的尿液。4、分析：由于糖尿病患者的尿液中具有还原糖，与斐林试剂发生反映产生砖红色沉淀，而正常人尿液中无还原糖，所以没有发生反映。2、脂肪的检测（1）材料的选取：含脂肪量越高的组织越好，如花生的子叶。（2）环节：制作切片（切片越薄越好）将最薄的花生切片放在载玻片中央染色（滴苏丹染液23滴切片上23min后吸去染液滴体积分数50%的酒

3、精洗去浮色吸去多余的酒精）制作装片（滴12滴清水于材料切片上盖上盖玻片）镜检鉴定（显微镜对光低倍镜观测高倍镜观测染成橘黄色的脂肪颗粒）3、蛋白质的检测（1）试剂：双缩脲试剂（A液：0.1g/mL的NaOH溶液，B液：0.01g/mL的CuSO4溶液）（2）环节：试管中加样液2mL加双缩脲试剂A液1mL，摇匀加双缩尿试剂B液4滴，摇匀观测颜色变化(紫色)考点提醒：（1）常见还原性糖与非还原性糖有哪些？葡萄糖、果糖、麦芽糖都是还原性糖；淀粉、蔗糖、纤维素都是非还原性糖。（2)还原性糖植物组织取材条件？含糖量较高、颜色为白色或近于白色，如：苹果、梨、白色甘蓝叶、白萝卜等。（3)研磨中为什么要加石英砂

4、？不加石英砂对实验有何影响？加石英砂是为了使研磨更充足。不加石英砂会使组织样液中还原性糖减少，使鉴定期溶液颜色变化不明显。（4）斐林试剂甲、乙两液的使用方法？混合的目的？为什么要现混现用？混合后使用；产生氢氧化铜；氢氧化铜不稳定。（5)还原性糖中加入斐林试剂后，溶液颜色变化的顺序为：浅蓝色棕色砖红色（6）花生种子切片为什么要薄？只有很薄的切片，才干透光，而用于显微镜的观测。（7）转动细准焦螺旋时，若花生切片的细胞总有一部分清楚，另一部分模糊，其因素一般是什么？切片的厚薄不均匀。（8）脂肪鉴定中乙醇作用？洗去浮色。（9）双缩脲试剂A、B两液是否混合后用？先加A液的目的。如何通过对比看颜色变化？不

5、能混合；先加A液的目的是使溶液呈碱性；先留出一些大豆组织样液做对比。 实验三观测叶绿体和细胞质流动1、材料：新鲜藓类叶、黑藻叶或菠菜叶，口腔上皮细胞临时装片2、原理：叶绿体在显微镜下观测，绿色,球形或椭球形。用健那绿染液染色后的口腔上皮细胞中线粒体成蓝绿色,细胞质接近无色。知识概要：取材制片低倍观测高倍观测考点提醒：（1)为什么可直接取用藓类的小叶，而不能直接取用菠菜叶？由于藓类的小叶很薄，只有一层细胞组成，而菠菜叶由很多层细胞构成。（2）取用菠菜叶的下表皮时，为什么要稍带些叶肉？表皮细胞除保卫细胞外，一般不含叶绿体，而叶肉细胞含较多的叶绿体。（3)如何加快黑藻细胞质的流动速度？最适温度是多少

6、？进行光照、提高水温、切伤部分叶片；25左右。（4）对黑藻什么部位的细胞观测，所观测到的细胞质流动的现象最明显？叶脉附近的细胞。（5）若视野中某细胞中细胞质的流动方向为顺时针，则在装片中该细胞的细胞质的实际流动方向是如何的？仍为顺时针。（6）是否一般细胞的细胞质不流动，只有黑藻等少数植物的细胞质才流动？否，活细胞的细胞质都是流动的。（7）若观测植物根毛细胞细胞质的流动，则对显微镜的视野亮度应如何调节？视野应适当调暗一些，可用反光镜的平面镜来采光或缩小光圈。（8）在强光照射下，叶绿体的向光面有何变化？叶绿体的受光面积较小有一面面向光源。实验四观测有丝分裂1、材料：洋葱根尖（葱，蒜）2、环节：（一

7、）洋葱根尖的培养（二）装片的制作制作流程：解离漂洗染色制片1.解离:药液:质量分数为15%的盐酸,体积分数为95%的酒精(1:1混合液).时间:35min.目的:使组织中的细胞互相分离开来.2.漂洗:用清水漂洗约10min.目的:洗去药液,防止解离过度,并有助于染色.3.染色:用质量浓度为0.01g/mL或0.02g/mL的龙胆紫溶液(或醋酸洋红液)染色35min目的:使染色体着色,利于观测.4.制片:将根尖放在载玻片上,加一滴清水,并用镊子把根尖弄碎,盖上盖玻片,在盖玻片上再加一片载玻片.然后用拇指轻轻地按压载玻片.目的:使细胞分散开来,有助于观测.（三）观测1、先在低倍镜下找到根尖分生区细

8、胞：细胞呈正方形，排列紧密,有的细胞正在分裂。2、换高倍镜下观测：分裂中期分裂前、后、末期分裂间期。（注意各时期细胞内染色体形态和分布的特点）。其中，处在分裂间期的细胞数目最多。考点提醒：（1)培养根尖时，为什么要经常换水？增长水中的氧气，防止根进行无氧呼吸导致根的腐烂。（2）培养根尖时，应选用老洋葱还是新洋葱？为什么？应选用旧洋葱，由于新洋葱尚在休眠，不易生根。（3）为什么每条根只能用根尖？取根尖的最佳时间是何时？为什么？由于根尖分生区的细胞能进行有丝分裂；上午10时到下午2时；由于此时细胞分裂活跃。（4）解离和压片的目的分别是什么？压片时为什么要再加一块载玻片？解离是为了使细胞互相分离开来

9、，压片是为了使细胞互相分散开来；再加一块载玻片是为了受力均匀，防止盖玻片被压破。（5）若所观测的组织细胞大多是破碎而不完整的，其因素是什么？压片时用力过大。（6)解离过程中盐酸的作用是什么？丙酮可代替吗？分解和溶解细胞间质；不能，而硝酸可代替。（7)为什么要漂洗？洗去盐酸便于染色。（8)细胞中染色最深的结构是什么？染色最深的结构是染色质或染色体。（9）若所观测的细胞各部分全是紫色，其因素是什么？染液浓度过大或染色时间过长。（10）为什么要找分生区？分生区的特点是什么？能用高倍物镜找分生区吗？为什么？由于在根尖只有分生区的细胞可以进行细胞分裂；分生区的特点是：细胞呈正方形，排列紧密，有的细胞处在

10、分裂状态；不能用高倍镜找分生区，由于高倍镜所观测的实际范围很小，难以发现分生区。（11）分生区细胞中，什么时期的细胞最多？为什么？间期；由于在细胞周期中，间期时间最长。（12）所观测的细胞能从中期变化到后期吗？为什么？不能，由于所观测的细胞都是停留在某一时期的死细胞。（13）观测洋葱表皮细胞能否看到染色体？为什么？不能，由于洋葱表皮细胞一般不分裂。（14）若观测时不能看到染色体，其因素是什么？没有找到分生区细胞；没有找到处在分裂期的细胞；染液过稀；染色时间过短。 实验五比较酶和Fe3+的催化效率考点提醒：（1）为什么要选新鲜的肝脏？由于在不新鲜的肝脏中，过氧化氢酶的活性会由于细菌的破坏而减少。

11、（2）该实验中所用试管应选较粗的还是较细的？为什么？应选用较粗的，由于在较细的试管中容易形成大量的气泡，而影响卫生香的复燃。（3）为什么要选动物的肝脏组织来做实验，其他动植物的组织的研磨液能替代吗？由于肝脏组织中过氧化氢酶含量较丰富；其它动植物组织也具有少量的过氧化氢酶，所以可以替代。（4）相同质量的块状肝脏和肝脏研磨液，哪一个催化效果好？为什么？研磨液效果好；由于它增长过氧化氢酶与过氧化氢的接触面积。（5）滴入肝脏研磨液和氯化铁溶液时，可否共用下个吸管？为什么？不可共用，防止过氧化氢酶与氯化铁混合，而影响实验效果。实验六色素的提取和分离1、原理：叶绿体中的色素能溶解在有机溶剂丙酮或无水乙醇提

12、取色素各色素在层析液中的溶解度不同,随层析液在滤纸上扩散速度不同分离色素2、环节：（1）提取色素研磨（2）制备滤纸条（3）画滤液细线：均匀，直，细，反复若干次（4）分离色素：不能让滤液细线触及层析液（5）观测和记录:结果滤纸条上从上到下依次为:橙黄色(胡萝卜素)、黄色(叶黄素)、蓝绿色(叶绿素a)、黄绿色(叶绿素b).考点提醒：（1）对叶片的规定？为什么要去掉叶柄和粗的时脉？绿色、最佳是深绿色。由于叶柄和叶脉中所含色素很少。（2）二氧化硅的作用？不加二氧化硅对实验有何影响？为了使研磨充足。不加二氧化硅，会使滤液和色素带的颜色变浅。（3）丙酮的作用？它可用什么来替代？用水能替代吗？溶解色素。它可

13、用酒精等有机溶剂来代替，但不能用水来代替，由于色素不溶于水。（4）碳酸钙的作用？不加碳酸钙对实验有何影响？保护色素，防止在研磨时叶绿体中的色素受到破坏。不加碳酸钙，滤液会变成黄绿色或褐色。（5）研磨为什么要迅速？要充足？过滤时为什么用布不用滤纸？研磨迅速，是为了防止丙酮大量挥发；只有充足研磨，才干使大量色素溶解到丙酮中来。色素不能通过滤纸，但能通过尼龙布。（6）滤纸条为什么要剪去两角？防止两侧层析液扩散过快。（7）为什么不能用钢笔或圆珠笔画线？由于钢笔水或圆珠笔油中具有其它色素，会影响色素的分离结果。（8）滤液细线为什么要直？为什么要重画几次？防止色素带的重叠；增长色素量，使色素带的颜色更深一

14、些。（9）滤液细线为什么不能触到层析液？防止色素溶解到层析液中。（10）滤纸条上色素为什么会分离？由于不同的色素在层析液中的溶解度不同，因而它们随层析液在滤纸条上的扩散速度就不同。（11）色素带最宽的是什么色素？它在层析液中的溶解度比什么色素大一些？最宽的色素带是叶绿素a，它的溶解度比叶绿素b大一些。（12）滤纸条上互相间距最大的是哪两种色素？胡萝卜素和叶黄素。（13)色素带最窄的是第几条色素带？为什么？第一条色素带，由于胡萝卜素在叶绿体的四种色素中含量最少。实验七观测质壁分离和复原1、条件：细胞内外溶液浓度差，活细胞，大液泡2、材料：紫色洋葱鳞片叶外表皮细胞（具紫色大液泡），质量浓度0.3g

15、/mL的蔗糖溶液，清水等。3、环节：制作洋葱鳞片叶外表皮细胞临时装片观测盖玻片一侧滴蔗糖溶液,另一侧用吸水纸吸引观测(液泡由大到小,颜色由浅变深,原生质层与细胞壁分离)盖玻片一侧滴清水,另一侧用吸水纸吸引观测(质壁分离复原)4、结论:细胞外溶液浓度细胞内溶液浓度，细胞失水质壁分离细胞外溶液浓度细胞内溶液浓度，细胞吸水质壁分离复原知识概要：制片观测加液观测加水观测考点提醒：（1）洋葱为什么要选紫色的？若紫色过淡怎么办？紫色的洋葱有紫色的大液泡，便于观测液泡的大小变化；缩小光圈，使视野变暗些。（2）洋葱表皮应撕还是削？为什么？表皮应撕不能削，由于削的表皮往往太厚。（3）植物细胞为什么会出现质壁分离

16、？动物细胞会吗？当细胞失去水分时，其原生质层的伸缩性大于细胞壁的伸缩性；动物细胞不会发生质壁分离，由于动物细胞没有细胞壁。（4）质壁分离时，液泡大小和颜色的变化？复原时呢？细胞发生质壁分离时，液泡变小，紫色加深；当细胞质壁分离复原时，液泡变大，紫色变浅。（5）若发生质壁分离后的细胞，不能发生质壁分离复原，其因素是什么？细胞已经死亡（也许是外界溶液浓度过大，细胞失水过多或质壁分离时间过长）（6）高倍镜使用前，装片如何移动？若要把视野中上方的物像移到视野的正中心，则要将装片继续向上移动。若要把视野中左方的物像移到视野的正中心，则要将装片继续向左方移动，由于显微镜视野中看到的是倒像。（7）换高倍物镜

17、后，如何使物像清楚？视野明暗度会如何变化？如何调亮？换高倍物镜后，应调节细准焦螺旋使物像变得清楚；视野会变暗，可调大光圈或改用反光镜的凹面镜来使视野变亮。（8）所用目镜、物镜的长度与放大倍数的关系？目镜越长，放大倍数越小；物镜越长，放大倍数越大。（9）物像清楚后，物镜与载玻片之间的距离和放大倍数的关系？物镜与载玻片之间的距离越小，放大倍数越大。（10)总放大倍数的计算方法？放大倍数具体指面积的放大倍数还是长度的放大倍数？总放大倍数等于目镜放大倍数与物镜放大倍数的乘积；放大倍数是指细小物体长度或宽度的放大倍数。（11）放大倍数与视野中细胞大小、多少、视野明暗的关系？放大倍数越大，视野中细胞越大、

18、数目越少、视野越暗。（12）更换目镜，若异物消失，则异物在目镜上；更换物镜，若异物消失，则异物在物镜上、移动载玻片，若异物移动，则异物在载玻片上。（13）如何运用质壁分离现象来测定植物细胞液的浓度？配制一系列浓度从小到大的蔗糖溶液分别用以上不同浓度的溶液制成某植物细胞的临时装片用显微镜观测某植物细胞是否发生质壁分离。某植物细胞液的浓度就介于不能引起质壁分离的浓度和能引起质壁分离的浓度之间。实验八DNA的粗提取与鉴定考点提醒：（1)鸡血能用猪血代替吗？为什么？不能，由于哺乳动物的红细胞中没有细胞核，不能提取DNA。（2）鸡血中为什么要加柠檬酸钠？为什么要弃去鸡血细胞的上清液？防止血液凝固；由于上

19、清液是血浆，不含细胞和DNA。（3）胀破细胞的方法？能用生理盐水吗？向血细胞中加入蒸馏水，使细胞大量吸水而胀破；不能用生理盐水，由于血细胞在蒸馏水中不能吸取水分。（4）该实验中最佳应用玻璃烧杯还是塑料烧杯？为什么？最佳用塑料烧杯，由于玻璃烧杯容易吸附DNA。（5）前后三次过滤时，所用纱布的层数分别是多少？为什么？第一次用一层纱布，有助于核物质透过纱布进入滤液；第二次用多层纱布，能防止DNA丝状物透过纱布进入滤液；第三次用两层纱布，既有助于DNA透过纱布，又能防止其它杂质透过纱布。（6）若实验中所得黏稠物太少，其因素是什么？第一次加蒸馏水过少，细胞未充足胀破；第二次加蒸馏水过多或过少；第一次过滤

20、用了多层纱布；第二次过滤用了一层纱布。（7）两次加入蒸馏水的目的分别是什么？第一次是为了使血细胞吸水胀破；第二次是为了减少氯化钠的浓度，有助于DNA有析出。（8）实验中搅拌溶液时，为什么总要沿一个方向搅拌？防止DNA分子受到损伤。（9）两次析出DNA的方法分别是什么？原理分别是什么？第一次是加蒸馏水，减少氯化钠的浓度，促使DNA析出；第二次是加入冷酒精，由于DNA不溶于酒精溶液。（10)三次溶解DNA的液体分别是什么？原理分别是什么？第一次、第二次都是用浓度为2mol/L的氯化钠溶液，第三次用的是0.015mol/L（或2mol/L）的氯化钠溶液。其原理是DNA在氯化钠中的溶解度，是随着氯化钠的浓度的变化而改变的。当氯化钠的物质的量浓度为0.14mol/L时，DNA的溶解度最低。2mol/L的氯化钠溶液和0。015mol/L的氯化钠溶液对DNA的溶解度都比较高。（11)鉴定DNA时为什么要用两支试管？其现象分别是什么？其中不加DNA的试管起对照作用。该试管溶液不变色，另一支加有DNA的试管溶液变蓝色