6第六章革兰阳性球菌.ppt

《6第六章革兰阳性球菌.ppt》由会员分享，可在线阅读，更多相关《6第六章革兰阳性球菌.ppt（79页珍藏版）》请在淘文阁 - 分享文档赚钱的网站上搜索。

1、第六章第六章 革兰阳性球菌革兰阳性球菌 李向阳李向阳革兰阳性球菌n n是指革兰染色为阳性的一群球菌，与医学是指革兰染色为阳性的一群球菌，与医学 有关的兼性厌氧球菌有有关的兼性厌氧球菌有9属属n n通常引起化脓性感染，故又称化脓性球菌通常引起化脓性感染，故又称化脓性球菌（pyogenic cocci）n n本章主要介绍本章主要介绍n n葡萄球菌属、链球菌属、肠球菌属。葡萄球菌属、链球菌属、肠球菌属。葡萄球菌属、链球菌属、肠球菌属。葡萄球菌属、链球菌属、肠球菌属。n n专性厌氧球菌在第十六章厌氧菌中介绍。专性厌氧球菌在第十六章厌氧菌中介绍。第一节 葡萄球菌属n n葡萄球菌属（葡萄球菌属（Staph

2、ylococcus）在自然界广在自然界广泛分布。泛分布。n n存在于人和动物的皮肤黏膜上的菌株存在于人和动物的皮肤黏膜上的菌株n n可致多种化脓性感染可致多种化脓性感染n n疖、痈、脓肿、菌血症等疖、痈、脓肿、菌血症等疖、痈、脓肿、菌血症等疖、痈、脓肿、菌血症等n n烫伤样皮肤综合症烫伤样皮肤综合症烫伤样皮肤综合症烫伤样皮肤综合症n n毒性休克综合症毒性休克综合症毒性休克综合症毒性休克综合症一、分类n n葡萄球菌属目前有葡萄球菌属目前有葡萄球菌属目前有葡萄球菌属目前有3535个种、个种、个种、个种、1717个亚种个亚种个亚种个亚种n n凝固酶凝固酶凝固酶凝固酶n n凝固酶阳性葡萄球菌凝固酶阳性

3、葡萄球菌凝固酶阳性葡萄球菌凝固酶阳性葡萄球菌n n凝固酶阴性葡萄球菌凝固酶阴性葡萄球菌凝固酶阴性葡萄球菌凝固酶阴性葡萄球菌 （CoagulaseCoagulase negative staphylococcus,negative staphylococcus,CoNSCoNS ）n n噬菌体分型噬菌体分型噬菌体分型噬菌体分型n n可将金黄色葡萄球菌分成可将金黄色葡萄球菌分成可将金黄色葡萄球菌分成可将金黄色葡萄球菌分成4 45 5群群群群2626型型型型n n质粒分型、血清学分型、抗生素分型和细菌质粒分型、血清学分型、抗生素分型和细菌质粒分型、血清学分型、抗生素分型和细菌质粒分型、血清学分型、抗

4、生素分型和细菌DNADNA的的的的RFLPRFLP或或或或PFGEPFGE分型，用来研究细菌的致病性、耐分型，用来研究细菌的致病性、耐分型，用来研究细菌的致病性、耐分型，用来研究细菌的致病性、耐 药性、流行病学特点和细菌鉴别的关系药性、流行病学特点和细菌鉴别的关系药性、流行病学特点和细菌鉴别的关系药性、流行病学特点和细菌鉴别的关系分类n n引起人类疾病的重要菌种有引起人类疾病的重要菌种有引起人类疾病的重要菌种有引起人类疾病的重要菌种有n n金黄色葡萄球菌（金黄色葡萄球菌（金黄色葡萄球菌（金黄色葡萄球菌（S.aureusS.aureus）n n表皮葡萄球菌（表皮葡萄球菌（表皮葡萄球菌（表皮葡萄球

5、菌（S.epidermidisS.epidermidis）n n头状葡萄球菌（头状葡萄球菌（头状葡萄球菌（头状葡萄球菌（S.capitisS.capitis）n n人葡萄球菌（人葡萄球菌（人葡萄球菌（人葡萄球菌（S.hominisS.hominis）n n腐生葡萄球菌（腐生葡萄球菌（腐生葡萄球菌（腐生葡萄球菌（S.saprophyticusS.saprophyticus）n n其余尚有一些能在人体中分离到其余尚有一些能在人体中分离到其余尚有一些能在人体中分离到其余尚有一些能在人体中分离到n n溶血葡萄球菌、沃氏葡萄球菌、模仿葡萄球菌、里昂溶血葡萄球菌、沃氏葡萄球菌、模仿葡萄球菌、里昂溶血葡萄球

6、菌、沃氏葡萄球菌、模仿葡萄球菌、里昂溶血葡萄球菌、沃氏葡萄球菌、模仿葡萄球菌、里昂葡萄球菌、施氏葡萄球菌、巴氏葡萄球菌、耳葡萄球葡萄球菌、施氏葡萄球菌、巴氏葡萄球菌、耳葡萄球葡萄球菌、施氏葡萄球菌、巴氏葡萄球菌、耳葡萄球葡萄球菌、施氏葡萄球菌、巴氏葡萄球菌、耳葡萄球菌、孔氏葡萄球菌、木糖葡萄球菌、解糖葡萄球菌、菌、孔氏葡萄球菌、木糖葡萄球菌、解糖葡萄球菌、菌、孔氏葡萄球菌、木糖葡萄球菌、解糖葡萄球菌、菌、孔氏葡萄球菌、木糖葡萄球菌、解糖葡萄球菌、山羊葡萄球菌、普氏葡萄球菌、中间葡萄球菌等。山羊葡萄球菌、普氏葡萄球菌、中间葡萄球菌等。山羊葡萄球菌、普氏葡萄球菌、中间葡萄球菌等。山羊葡萄球菌、普氏

7、葡萄球菌、中间葡萄球菌等。二、临床意义n n凝固酶阳性的金黄色葡萄球菌是人类重要致病菌凝固酶阳性的金黄色葡萄球菌是人类重要致病菌凝固酶阳性的金黄色葡萄球菌是人类重要致病菌凝固酶阳性的金黄色葡萄球菌是人类重要致病菌n n可引起社区和医院感染可引起社区和医院感染可引起社区和医院感染可引起社区和医院感染n n感染常以急性、化脓性为特征，如果未经有效治疗，感染常以急性、化脓性为特征，如果未经有效治疗，感染常以急性、化脓性为特征，如果未经有效治疗，感染常以急性、化脓性为特征，如果未经有效治疗，感染可扩散至周围组织或经菌血症转移至其他器官感染可扩散至周围组织或经菌血症转移至其他器官感染可扩散至周围组织或经

8、菌血症转移至其他器官感染可扩散至周围组织或经菌血症转移至其他器官n n常见的感染常见的感染常见的感染常见的感染n n疖、痈、外科切口、创伤等局部化脓性感染和骨髓炎、化脓疖、痈、外科切口、创伤等局部化脓性感染和骨髓炎、化脓疖、痈、外科切口、创伤等局部化脓性感染和骨髓炎、化脓疖、痈、外科切口、创伤等局部化脓性感染和骨髓炎、化脓性关节炎、肺炎、心内膜炎、脑膜炎、菌血症等全身性感染性关节炎、肺炎、心内膜炎、脑膜炎、菌血症等全身性感染性关节炎、肺炎、心内膜炎、脑膜炎、菌血症等全身性感染性关节炎、肺炎、心内膜炎、脑膜炎、菌血症等全身性感染临床意义n n致病性主要与各种侵袭性酶类和多种毒素有关致病性主要与各

9、种侵袭性酶类和多种毒素有关致病性主要与各种侵袭性酶类和多种毒素有关致病性主要与各种侵袭性酶类和多种毒素有关n n肠毒素引起食物中毒，表现为急性胃肠炎肠毒素引起食物中毒，表现为急性胃肠炎肠毒素引起食物中毒，表现为急性胃肠炎肠毒素引起食物中毒，表现为急性胃肠炎n n噬菌体噬菌体噬菌体噬菌体IIII群产生的剥脱毒素（或称表皮溶解素）可引群产生的剥脱毒素（或称表皮溶解素）可引群产生的剥脱毒素（或称表皮溶解素）可引群产生的剥脱毒素（或称表皮溶解素）可引起人类烫伤样皮肤综合征起人类烫伤样皮肤综合征起人类烫伤样皮肤综合征起人类烫伤样皮肤综合征n n多见于新生儿、幼儿和免疫功能低下的成人多见于新生儿、幼儿和免

10、疫功能低下的成人多见于新生儿、幼儿和免疫功能低下的成人多见于新生儿、幼儿和免疫功能低下的成人n n皮肤呈弥漫性红斑和水疱形成，继以表皮上层大量脱落皮肤呈弥漫性红斑和水疱形成，继以表皮上层大量脱落皮肤呈弥漫性红斑和水疱形成，继以表皮上层大量脱落皮肤呈弥漫性红斑和水疱形成，继以表皮上层大量脱落n n由噬菌体由噬菌体由噬菌体由噬菌体群产生的毒性休克综合征毒素群产生的毒性休克综合征毒素群产生的毒性休克综合征毒素群产生的毒性休克综合征毒素-I I（Toxic Toxic shock syndrome toxin I,TSST-1shock syndrome toxin I,TSST-1）n n属超抗原家

11、族，刺激属超抗原家族，刺激属超抗原家族，刺激属超抗原家族，刺激T T细胞诱发细胞诱发细胞诱发细胞诱发TNFTNF和和和和IL-1IL-1n n可致机体多个器官的功能紊乱或引起毒性休克综合征可致机体多个器官的功能紊乱或引起毒性休克综合征可致机体多个器官的功能紊乱或引起毒性休克综合征可致机体多个器官的功能紊乱或引起毒性休克综合征(TSS)(TSS)临床意义n nCoNSCoNS是人体皮肤黏膜正常菌群之一是人体皮肤黏膜正常菌群之一是人体皮肤黏膜正常菌群之一是人体皮肤黏膜正常菌群之一n n是医院感染的主要病原菌是医院感染的主要病原菌是医院感染的主要病原菌是医院感染的主要病原菌n n表皮葡萄球菌表皮葡萄

12、球菌表皮葡萄球菌表皮葡萄球菌n n人工瓣膜性心内膜炎、静脉导管感染、腹膜透析性腹膜炎、人工瓣膜性心内膜炎、静脉导管感染、腹膜透析性腹膜炎、人工瓣膜性心内膜炎、静脉导管感染、腹膜透析性腹膜炎、人工瓣膜性心内膜炎、静脉导管感染、腹膜透析性腹膜炎、血管移植物感染和人工关节感染等血管移植物感染和人工关节感染等血管移植物感染和人工关节感染等血管移植物感染和人工关节感染等n n腐生葡萄球菌腐生葡萄球菌腐生葡萄球菌腐生葡萄球菌n n女性尿路感染的重要病原菌女性尿路感染的重要病原菌女性尿路感染的重要病原菌女性尿路感染的重要病原菌n n其他凝固酶阴性葡萄球菌其他凝固酶阴性葡萄球菌其他凝固酶阴性葡萄球菌其他凝固酶

13、阴性葡萄球菌n n重要的条件致病菌和免疫受损患者的感染菌重要的条件致病菌和免疫受损患者的感染菌重要的条件致病菌和免疫受损患者的感染菌重要的条件致病菌和免疫受损患者的感染菌n n产生荚膜多糖或糖萼有关产生荚膜多糖或糖萼有关产生荚膜多糖或糖萼有关产生荚膜多糖或糖萼有关n n增强细菌与外来物质（生物性瓣膜、导管等）表面的增强细菌与外来物质（生物性瓣膜、导管等）表面的增强细菌与外来物质（生物性瓣膜、导管等）表面的增强细菌与外来物质（生物性瓣膜、导管等）表面的粘附或在其表面形成一层生物膜而保护细菌对抗杀菌粘附或在其表面形成一层生物膜而保护细菌对抗杀菌粘附或在其表面形成一层生物膜而保护细菌对抗杀菌粘附或在

14、其表面形成一层生物膜而保护细菌对抗杀菌物质作用。物质作用。物质作用。物质作用。三、生物学特性n n直径直径直径直径0.51.50.51.5mm、革兰阳性球菌革兰阳性球菌革兰阳性球菌革兰阳性球菌n n呈单个、成双、短链（液体培养基或脓汁中）或成簇排呈单个、成双、短链（液体培养基或脓汁中）或成簇排呈单个、成双、短链（液体培养基或脓汁中）或成簇排呈单个、成双、短链（液体培养基或脓汁中）或成簇排列呈葡萄串样，无鞭毛和芽胞，某些菌株能形成荚膜列呈葡萄串样，无鞭毛和芽胞，某些菌株能形成荚膜列呈葡萄串样，无鞭毛和芽胞，某些菌株能形成荚膜列呈葡萄串样，无鞭毛和芽胞，某些菌株能形成荚膜n n在金黄色葡萄球菌的细

15、胞壁有葡萄球菌在金黄色葡萄球菌的细胞壁有葡萄球菌在金黄色葡萄球菌的细胞壁有葡萄球菌在金黄色葡萄球菌的细胞壁有葡萄球菌A A蛋白，具有抗蛋白，具有抗蛋白，具有抗蛋白，具有抗原性原性原性原性n n大多为兼性厌氧菌大多为兼性厌氧菌大多为兼性厌氧菌大多为兼性厌氧菌,对营养要求不高，最适生长条对营养要求不高，最适生长条对营养要求不高，最适生长条对营养要求不高，最适生长条件件件件35373537，pH7.47.6pH7.47.6。普通培养基上形成直径普通培养基上形成直径普通培养基上形成直径普通培养基上形成直径2323mmmm不透明的圆形凸起菌落不透明的圆形凸起菌落不透明的圆形凸起菌落不透明的圆形凸起菌落n

16、 n产生金黄色、白色、柠檬色等非水溶性色素附着在产生金黄色、白色、柠檬色等非水溶性色素附着在产生金黄色、白色、柠檬色等非水溶性色素附着在产生金黄色、白色、柠檬色等非水溶性色素附着在菌落上。菌落上。菌落上。菌落上。生物学特性生物学特性n n金黄色葡萄球菌血琼脂平板上菌落周围有透金黄色葡萄球菌血琼脂平板上菌落周围有透金黄色葡萄球菌血琼脂平板上菌落周围有透金黄色葡萄球菌血琼脂平板上菌落周围有透 明溶血环。能在含明溶血环。能在含明溶血环。能在含明溶血环。能在含10%15%10%15%NaClNaCl琼脂中生长琼脂中生长琼脂中生长琼脂中生长n n该菌的抵抗力比其他无芽胞细菌强，耐干燥该菌的抵抗力比其他无

17、芽胞细菌强，耐干燥该菌的抵抗力比其他无芽胞细菌强，耐干燥该菌的抵抗力比其他无芽胞细菌强，耐干燥n n近年来耐药性增强，对多种抗菌药物不敏感近年来耐药性增强，对多种抗菌药物不敏感近年来耐药性增强，对多种抗菌药物不敏感近年来耐药性增强，对多种抗菌药物不敏感n n生化反应活泼、能分解多种糖类和蛋白质，生化反应活泼、能分解多种糖类和蛋白质，生化反应活泼、能分解多种糖类和蛋白质，生化反应活泼、能分解多种糖类和蛋白质，触酶阳性触酶阳性触酶阳性触酶阳性n n该属细菌该属细菌该属细菌该属细菌DNA G+C mol%DNA G+C mol%为为为为30393039酶和毒素n n葡萄球菌属产生多种酶和毒素葡萄球菌

18、属产生多种酶和毒素n n产生产生2种血浆凝固酶种血浆凝固酶n n结合凝固酶或聚集因子结合凝固酶或聚集因子结合凝固酶或聚集因子结合凝固酶或聚集因子n n是结合在菌体表面的凝固酶，能与血浆中的纤维蛋是结合在菌体表面的凝固酶，能与血浆中的纤维蛋是结合在菌体表面的凝固酶，能与血浆中的纤维蛋是结合在菌体表面的凝固酶，能与血浆中的纤维蛋白原交联使菌体快速凝集白原交联使菌体快速凝集白原交联使菌体快速凝集白原交联使菌体快速凝集n n游离凝固酶游离凝固酶游离凝固酶游离凝固酶n n是细菌分泌到菌体外的凝固酶，能被血浆中的协同是细菌分泌到菌体外的凝固酶，能被血浆中的协同是细菌分泌到菌体外的凝固酶，能被血浆中的协同是

19、细菌分泌到菌体外的凝固酶，能被血浆中的协同因子（因子（因子（因子（cofactorcofactor）激活形成复合物，再使纤维蛋白激活形成复合物，再使纤维蛋白激活形成复合物，再使纤维蛋白激活形成复合物，再使纤维蛋白原转变成纤维蛋白，而使血浆凝固原转变成纤维蛋白，而使血浆凝固原转变成纤维蛋白，而使血浆凝固原转变成纤维蛋白，而使血浆凝固酶和毒素n n耐热核酸酶耐热核酸酶耐热核酸酶耐热核酸酶n n葡萄球菌溶素葡萄球菌溶素葡萄球菌溶素葡萄球菌溶素n n有有有有、等等等等n n破坏红细胞、白细胞、血小板以及肝细胞等破坏红细胞、白细胞、血小板以及肝细胞等破坏红细胞、白细胞、血小板以及肝细胞等破坏红细胞、白细

20、胞、血小板以及肝细胞等n n肠毒素肠毒素肠毒素肠毒素n n是一组对热稳定的可溶性蛋白质，耐热是一组对热稳定的可溶性蛋白质，耐热是一组对热稳定的可溶性蛋白质，耐热是一组对热稳定的可溶性蛋白质，耐热100 100 3030min,min,分子量为分子量为分子量为分子量为26263030kDakDa，能够抵抗胃肠液中蛋白酶的水能够抵抗胃肠液中蛋白酶的水能够抵抗胃肠液中蛋白酶的水能够抵抗胃肠液中蛋白酶的水解作用解作用解作用解作用n n根据抗原性和等电点的不同可分为根据抗原性和等电点的不同可分为根据抗原性和等电点的不同可分为根据抗原性和等电点的不同可分为A A、B B、C1C1、C2C2、C3 C3、D

21、D、E E、G G和和和和HH等等等等9 9个血清型，以个血清型，以个血清型，以个血清型，以A A、D D 型多见型多见型多见型多见n n编码肠毒素基因大多位于染色体上（编码肠毒素基因大多位于染色体上（编码肠毒素基因大多位于染色体上（编码肠毒素基因大多位于染色体上（DD型由质粒编码）型由质粒编码）型由质粒编码）型由质粒编码）酶和毒素n n毒性休克综合征毒素毒性休克综合征毒素n n透明质酸酶、磷脂酶、触酶、杀白细胞透明质酸酶、磷脂酶、触酶、杀白细胞 素和表皮剥脱毒素等素和表皮剥脱毒素等n n携带诱导性的青霉素酶和乙酰基转移酶质粒，携带诱导性的青霉素酶和乙酰基转移酶质粒，通过转导进行质粒的转移通过

22、转导进行质粒的转移n n部分菌株通过获得外源性的部分菌株通过获得外源性的macA基因而基因而 产生青霉素结合蛋白产生青霉素结合蛋白2a（PBP2a），），导致对导致对所有所有内酰胺类抗生素耐药内酰胺类抗生素耐药 四、微生物检验四、微生物检验四、微生物检验四、微生物检验 （一）检验程序（一）检验程序（一）检验程序（一）检验程序（二）标本采集n n根据感染的部位，采集不同的标本。根据感染的部位，采集不同的标本。n n该属细菌广泛分布在人体皮肤和黏膜，采该属细菌广泛分布在人体皮肤和黏膜，采取时避免病灶周围正常菌群污染取时避免病灶周围正常菌群污染。（三）标本直接检查n n无菌体液如脑脊液和关节穿刺液可

23、使用涂无菌体液如脑脊液和关节穿刺液可使用涂 片、革兰染色后直接显微镜检查，查见细菌片、革兰染色后直接显微镜检查，查见细菌 具有重要临床价值。具有重要临床价值。n n其他体液标本如同时伴有炎性细胞时则直接其他体液标本如同时伴有炎性细胞时则直接 显微镜检查结果也具有参考价值。显微镜检查结果也具有参考价值。n n涂片检查发现有形态相似的革兰阳性球菌，涂片检查发现有形态相似的革兰阳性球菌，则可初步报告则可初步报告“查见类似葡萄球菌属革兰阳查见类似葡萄球菌属革兰阳性性 球菌球菌”，并进一步进行分离和鉴定予以证实。，并进一步进行分离和鉴定予以证实。（四）分离培养与鉴定n n脓液、分泌物等脓液、分泌物等n

24、n接种于血琼脂平板接种于血琼脂平板接种于血琼脂平板接种于血琼脂平板n n有污染的标本如粪便等有污染的标本如粪便等n n应接种在选择平板上，如甘露醇高盐平板、哥应接种在选择平板上，如甘露醇高盐平板、哥应接种在选择平板上，如甘露醇高盐平板、哥应接种在选择平板上，如甘露醇高盐平板、哥伦比亚多粘菌素奈啶酸平板伦比亚多粘菌素奈啶酸平板伦比亚多粘菌素奈啶酸平板伦比亚多粘菌素奈啶酸平板n n血液标本则用肉汤增菌培养基血液标本则用肉汤增菌培养基 葡萄球菌属内各菌种鉴定方法 1.菌落性状 n n金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌n n直径直径直径直径6 6 6 6 8mn8mn8mn8mn

25、，金黄色或橙色，菌落周围出现或不出现透明溶血环金黄色或橙色，菌落周围出现或不出现透明溶血环金黄色或橙色，菌落周围出现或不出现透明溶血环金黄色或橙色，菌落周围出现或不出现透明溶血环n n表皮葡萄球菌表皮葡萄球菌表皮葡萄球菌表皮葡萄球菌n n直径为直径为直径为直径为5 5 5 5 6 6 6 6mmmmmmmm，某些产粘液菌株能粘附在琼脂平板表面，无色或白色某些产粘液菌株能粘附在琼脂平板表面，无色或白色某些产粘液菌株能粘附在琼脂平板表面，无色或白色某些产粘液菌株能粘附在琼脂平板表面，无色或白色n n溶血葡萄球菌溶血葡萄球菌溶血葡萄球菌溶血葡萄球菌n n直径直径直径直径5 5 5 5 9 9 9 9

26、mmmmmmmm，不透明，无色素或奶油色、黄色，不透明，无色素或奶油色、黄色，不透明，无色素或奶油色、黄色，不透明，无色素或奶油色、黄色n n里昂葡萄球菌里昂葡萄球菌里昂葡萄球菌里昂葡萄球菌n n直径直径直径直径4 4 4 4 7 7 7 7mmmmmmmm，边缘整齐稍扁，奶色、黄色和沃氏葡萄球菌相似边缘整齐稍扁，奶色、黄色和沃氏葡萄球菌相似边缘整齐稍扁，奶色、黄色和沃氏葡萄球菌相似边缘整齐稍扁，奶色、黄色和沃氏葡萄球菌相似n n腐生葡萄球菌腐生葡萄球菌腐生葡萄球菌腐生葡萄球菌n n直径直径直径直径5 5 5 5 8 8 8 8mmmmmmmm，白色或柠檬色白色或柠檬色白色或柠檬色白色或柠檬色

27、n n菌落外观疑为葡萄球菌者应进行革兰染色证实菌落外观疑为葡萄球菌者应进行革兰染色证实菌落外观疑为葡萄球菌者应进行革兰染色证实菌落外观疑为葡萄球菌者应进行革兰染色证实n n甘露醇高盐平板上金黄色葡萄球菌菌落为黄色甘露醇高盐平板上金黄色葡萄球菌菌落为黄色甘露醇高盐平板上金黄色葡萄球菌菌落为黄色甘露醇高盐平板上金黄色葡萄球菌菌落为黄色2凝固酶试验 n n有玻片法和试管法两种有玻片法和试管法两种n n玻片凝固酶试验玻片凝固酶试验-测定结合型凝固酶测定结合型凝固酶n n试验时挑取少数菌落培养物（不能用生试验时挑取少数菌落培养物（不能用生 长高盐琼脂上的菌落）加入长高盐琼脂上的菌落）加入1滴血浆，滴血浆

28、，10 秒内观察细菌聚集和凝块形成秒内观察细菌聚集和凝块形成n n金黄色葡萄球菌、中间型葡萄球菌呈现金黄色葡萄球菌、中间型葡萄球菌呈现 阳性反应阳性反应2凝固酶试验n n试管凝固酶试验试管凝固酶试验试管凝固酶试验试管凝固酶试验-测定分泌型凝固酶测定分泌型凝固酶测定分泌型凝固酶测定分泌型凝固酶n n以孵育过夜的牛心脑浸液肉汤培养物和血浆在以孵育过夜的牛心脑浸液肉汤培养物和血浆在以孵育过夜的牛心脑浸液肉汤培养物和血浆在以孵育过夜的牛心脑浸液肉汤培养物和血浆在3737水浴中孵育水浴中孵育水浴中孵育水浴中孵育4 4h h，观察凝块形成。如试验结果为阴性观察凝块形成。如试验结果为阴性观察凝块形成。如试验

29、结果为阴性观察凝块形成。如试验结果为阴性者再置室温者再置室温者再置室温者再置室温18241824h h，因某些菌种（中间葡萄球菌、因某些菌种（中间葡萄球菌、因某些菌种（中间葡萄球菌、因某些菌种（中间葡萄球菌、猪葡萄球菌）的凝集出现所需时间长于猪葡萄球菌）的凝集出现所需时间长于猪葡萄球菌）的凝集出现所需时间长于猪葡萄球菌）的凝集出现所需时间长于4 4h hn n必须注意必须注意必须注意必须注意n n某些菌株产生的葡激酶在延长孵育时间后可使凝块溶解某些菌株产生的葡激酶在延长孵育时间后可使凝块溶解某些菌株产生的葡激酶在延长孵育时间后可使凝块溶解某些菌株产生的葡激酶在延长孵育时间后可使凝块溶解使之产生

30、假阴性使之产生假阴性使之产生假阴性使之产生假阴性n n若使用的不是无菌血浆可产生假阳性或假阴性结果；若使用的不是无菌血浆可产生假阳性或假阴性结果；若使用的不是无菌血浆可产生假阳性或假阴性结果；若使用的不是无菌血浆可产生假阳性或假阴性结果；n n细菌不是纯培养物或污染可导致假阳性细菌不是纯培养物或污染可导致假阳性细菌不是纯培养物或污染可导致假阳性细菌不是纯培养物或污染可导致假阳性3耐热核酸酶试验 n n大多数金黄色葡萄球菌、施氏葡萄球菌、大多数金黄色葡萄球菌、施氏葡萄球菌、中间葡萄球菌、猪葡萄球菌能产生耐热核中间葡萄球菌、猪葡萄球菌能产生耐热核酸酶。酸酶。n n表皮葡萄球菌、模仿葡萄球菌、肉葡萄

31、球表皮葡萄球菌、模仿葡萄球菌、肉葡萄球菌含微弱耐热核酸酶。菌含微弱耐热核酸酶。4磷酸酶试验 n n 大多数的表皮葡萄球菌和金黄色葡萄球菌、大多数的表皮葡萄球菌和金黄色葡萄球菌、施氏葡萄球菌、中间葡萄球菌和猪葡萄球施氏葡萄球菌、中间葡萄球菌和猪葡萄球菌为阳性。菌为阳性。n n将待测菌种点种在加有硝基酚磷酸盐的将待测菌种点种在加有硝基酚磷酸盐的pH5.66.8 MH琼脂上，孵育琼脂上，孵育1824h，菌落菌落周围出现黄色为阳性。周围出现黄色为阳性。5吡咯烷酮芳基酰胺酶试验 n n 溶血葡萄球菌、里昂葡萄球菌、施氏葡萄溶血葡萄球菌、里昂葡萄球菌、施氏葡萄球菌和中间葡萄球菌为阳性。球菌和中间葡萄球菌为

32、阳性。n n将孵育将孵育24h斜面培养物接种在含吡咯烷酮斜面培养物接种在含吡咯烷酮-萘基酰胺（萘基酰胺（PYR）肉汤中，使细菌浓度调肉汤中，使细菌浓度调整为整为2号麦氏管浊度，号麦氏管浊度，35孵育孵育2h，加入加入PYR试剂后试剂后2分钟内呈现深紫红色为阳性。分钟内呈现深紫红色为阳性。6其他鉴定试验 n n常用的葡萄球菌属种间细菌的鉴定生化试常用的葡萄球菌属种间细菌的鉴定生化试验验n n鸟氨酸脱羧酶试验、脲酶试验、鸟氨酸脱羧酶试验、脲酶试验、鸟氨酸脱羧酶试验、脲酶试验、鸟氨酸脱羧酶试验、脲酶试验、-半乳糖苷酶、半乳糖苷酶、半乳糖苷酶、半乳糖苷酶、3-3-羟基丁酮酸试验、新生霉素敏感试验、多粘

33、羟基丁酮酸试验、新生霉素敏感试验、多粘羟基丁酮酸试验、新生霉素敏感试验、多粘羟基丁酮酸试验、新生霉素敏感试验、多粘菌素菌素菌素菌素B B耐药试验、糖产酸试验耐药试验、糖产酸试验耐药试验、糖产酸试验耐药试验、糖产酸试验（五）肠毒素检测n n动物学试验动物学试验动物学试验动物学试验n n经典的方法是采用幼猫腹腔注射经典的方法是采用幼猫腹腔注射经典的方法是采用幼猫腹腔注射经典的方法是采用幼猫腹腔注射(肉汤培养物或呕吐物肉汤培养物或呕吐物肉汤培养物或呕吐物肉汤培养物或呕吐物)，4 4h h 内发生呕吐腹泻和体温升高或死亡等现象者，提内发生呕吐腹泻和体温升高或死亡等现象者，提内发生呕吐腹泻和体温升高或死

34、亡等现象者，提内发生呕吐腹泻和体温升高或死亡等现象者，提示金黄色葡萄球菌肠毒素存在示金黄色葡萄球菌肠毒素存在示金黄色葡萄球菌肠毒素存在示金黄色葡萄球菌肠毒素存在n n 琼脂扩散试验或琼脂扩散试验或琼脂扩散试验或琼脂扩散试验或ELISAELISA法测定法测定法测定法测定n n用琼脂扩散试验测定待测标本中的金黄色葡萄球菌肠用琼脂扩散试验测定待测标本中的金黄色葡萄球菌肠用琼脂扩散试验测定待测标本中的金黄色葡萄球菌肠用琼脂扩散试验测定待测标本中的金黄色葡萄球菌肠毒素与相应抗毒素在琼脂糖中进行双相扩散，观察有毒素与相应抗毒素在琼脂糖中进行双相扩散，观察有毒素与相应抗毒素在琼脂糖中进行双相扩散，观察有毒素

35、与相应抗毒素在琼脂糖中进行双相扩散，观察有无沉淀线产生无沉淀线产生无沉淀线产生无沉淀线产生n n将抗毒素包被在固相载体中以双抗体夹心将抗毒素包被在固相载体中以双抗体夹心将抗毒素包被在固相载体中以双抗体夹心将抗毒素包被在固相载体中以双抗体夹心ELISAELISA法检测法检测法检测法检测样本中的肠毒素样本中的肠毒素样本中的肠毒素样本中的肠毒素第二节 链球菌属n n链球菌属（链球菌属（Streptococcus）n n细菌种类多，分布广细菌种类多，分布广n n其中某些菌种为毒力强的致病菌其中某些菌种为毒力强的致病菌其中某些菌种为毒力强的致病菌其中某些菌种为毒力强的致病菌n n另一些则是作为正常菌群栖

36、居于宿主的呼吸道、另一些则是作为正常菌群栖居于宿主的呼吸道、另一些则是作为正常菌群栖居于宿主的呼吸道、另一些则是作为正常菌群栖居于宿主的呼吸道、消化道、泌尿生殖道消化道、泌尿生殖道消化道、泌尿生殖道消化道、泌尿生殖道n n还有一些是皮肤上的过路菌和黏膜上的定居菌还有一些是皮肤上的过路菌和黏膜上的定居菌还有一些是皮肤上的过路菌和黏膜上的定居菌还有一些是皮肤上的过路菌和黏膜上的定居菌一、分类n n链球菌属的分类较为复杂链球菌属的分类较为复杂n n传统分类传统分类n n以血平板上溶血现象以血平板上溶血现象以血平板上溶血现象以血平板上溶血现象n nLancefieldLancefield抗原血清分型抗

37、原血清分型抗原血清分型抗原血清分型n n种系分类法种系分类法n n链球菌属的分类较以前的分类有较大的变化链球菌属的分类较以前的分类有较大的变化链球菌属的分类较以前的分类有较大的变化链球菌属的分类较以前的分类有较大的变化传统分类n n根据链球菌属各种细菌在血平板上的溶血现象根据链球菌属各种细菌在血平板上的溶血现象根据链球菌属各种细菌在血平板上的溶血现象根据链球菌属各种细菌在血平板上的溶血现象n n甲型（甲型（甲型（甲型（）溶血性链球菌溶血性链球菌溶血性链球菌溶血性链球菌n n乙型（乙型（乙型（乙型（）溶血性链球菌溶血性链球菌溶血性链球菌溶血性链球菌n n不出现溶血的丙型（不出现溶血的丙型（不出现

38、溶血的丙型（不出现溶血的丙型（）链球菌链球菌链球菌链球菌n n根据根据根据根据LancefieldLancefield抗原血清分型抗原血清分型抗原血清分型抗原血清分型n n分为分为分为分为A A、B B、C C、DD、等等等等2020群群群群n n血清群与溶血特性没有相关性。对人类致病的主血清群与溶血特性没有相关性。对人类致病的主血清群与溶血特性没有相关性。对人类致病的主血清群与溶血特性没有相关性。对人类致病的主要是要是要是要是A A群群群群种系分类法n n根据种系分类法的研究结果根据种系分类法的研究结果根据种系分类法的研究结果根据种系分类法的研究结果n n原来归属为原来归属为原来归属为原来归

39、属为DD群链球菌的肠球菌和群链球菌的肠球菌和群链球菌的肠球菌和群链球菌的肠球菌和NN群链球菌已分别独群链球菌已分别独群链球菌已分别独群链球菌已分别独立为肠球菌属（立为肠球菌属（立为肠球菌属（立为肠球菌属（EnterococcusEnterococcus）和乳球菌属和乳球菌属和乳球菌属和乳球菌属（lactococcuslactococcus）n n遗传学和血清学分型不能统一遗传学和血清学分型不能统一遗传学和血清学分型不能统一遗传学和血清学分型不能统一n n在遗传学上相关的同种细菌其抗原可出现异质性在遗传学上相关的同种细菌其抗原可出现异质性在遗传学上相关的同种细菌其抗原可出现异质性在遗传学上相关的

40、同种细菌其抗原可出现异质性n n毫无相关的菌种可出现同一抗原。毫无相关的菌种可出现同一抗原。毫无相关的菌种可出现同一抗原。毫无相关的菌种可出现同一抗原。n n根据伯杰鉴定细菌手册第根据伯杰鉴定细菌手册第根据伯杰鉴定细菌手册第根据伯杰鉴定细菌手册第9 9版，链球菌目前分为版，链球菌目前分为版，链球菌目前分为版，链球菌目前分为4040个种和亚种个种和亚种个种和亚种个种和亚种传统的分类方法n n 溶血性链球菌溶血性链球菌溶血性链球菌溶血性链球菌n nA A、C C、G G群抗原群抗原群抗原群抗原n n菌落直径大于菌落直径大于菌落直径大于菌落直径大于0.50.5mm mm n nA A群的化脓性链球菌

41、（群的化脓性链球菌（群的化脓性链球菌（群的化脓性链球菌（S.S.pyogenespyogenes）、）、）、）、C C群、群、群、群、G G群的马链球菌群的马链球菌群的马链球菌群的马链球菌（S.equiS.equi）和似马链球菌（和似马链球菌（和似马链球菌（和似马链球菌（S.equismilisS.equismilis）n n菌落直径小于菌落直径小于菌落直径小于菌落直径小于0.50.5mmmm具具具具A A、C C、G G群抗原，统称米勒链球菌群抗原，统称米勒链球菌群抗原，统称米勒链球菌群抗原，统称米勒链球菌（S.milleriS.milleri）n n咽喉炎链球菌、中间型链球菌和星座链球菌咽

42、喉炎链球菌、中间型链球菌和星座链球菌咽喉炎链球菌、中间型链球菌和星座链球菌咽喉炎链球菌、中间型链球菌和星座链球菌n n还有还有还有还有 溶血和不溶血的细菌溶血和不溶血的细菌溶血和不溶血的细菌溶血和不溶血的细菌n nB B群抗原群抗原群抗原群抗原n n无乳链球菌（无乳链球菌（无乳链球菌（无乳链球菌（S.agalactiaeS.agalactiae）传统的分类方法n n溶血性链球菌溶血性链球菌n n包括肺炎链球菌包括肺炎链球菌包括肺炎链球菌包括肺炎链球菌（S.pneumoniaeS.pneumoniae）n n草绿色链球菌群（草绿色链球菌群（草绿色链球菌群（草绿色链球菌群（ViridansViri

43、dans streptococci streptococci）n n不溶血不溶血D群链球菌群链球菌n n牛链球菌（牛链球菌（牛链球菌（牛链球菌（S S.bovis.bovis）二、临床意义n n化脓性链球菌是致病力最强的一种链球菌化脓性链球菌是致病力最强的一种链球菌化脓性链球菌是致病力最强的一种链球菌化脓性链球菌是致病力最强的一种链球菌n n能产生多种毒素能产生多种毒素能产生多种毒素能产生多种毒素n n链球菌溶素链球菌溶素链球菌溶素链球菌溶素OO和和和和S Sn n红疹毒素红疹毒素红疹毒素红疹毒素n nMM蛋白、脂磷壁酸蛋白、脂磷壁酸蛋白、脂磷壁酸蛋白、脂磷壁酸n n酶（链激酶、链道酶、透明质

44、酸酶等）酶（链激酶、链道酶、透明质酸酶等）酶（链激酶、链道酶、透明质酸酶等）酶（链激酶、链道酶、透明质酸酶等）n n可引起急性咽炎、呼吸道感染、丹毒、脓疱病、可引起急性咽炎、呼吸道感染、丹毒、脓疱病、可引起急性咽炎、呼吸道感染、丹毒、脓疱病、可引起急性咽炎、呼吸道感染、丹毒、脓疱病、软组织感染、心内膜炎和脑膜炎等软组织感染、心内膜炎和脑膜炎等软组织感染、心内膜炎和脑膜炎等软组织感染、心内膜炎和脑膜炎等n n产毒株还可引起猩红热产毒株还可引起猩红热产毒株还可引起猩红热产毒株还可引起猩红热n n可致感染后的变态反应性疾病如急性肾小球肾炎、可致感染后的变态反应性疾病如急性肾小球肾炎、可致感染后的变态

45、反应性疾病如急性肾小球肾炎、可致感染后的变态反应性疾病如急性肾小球肾炎、风湿热等风湿热等风湿热等风湿热等n n近年来报道引起毒素休克综合征近年来报道引起毒素休克综合征近年来报道引起毒素休克综合征近年来报道引起毒素休克综合征临床意义n n无乳链球菌是新生儿菌血症和脑膜炎的常见菌无乳链球菌是新生儿菌血症和脑膜炎的常见菌无乳链球菌是新生儿菌血症和脑膜炎的常见菌无乳链球菌是新生儿菌血症和脑膜炎的常见菌n n该菌定居于妇女生殖道该菌定居于妇女生殖道该菌定居于妇女生殖道该菌定居于妇女生殖道n n能导致新生儿感染能导致新生儿感染能导致新生儿感染能导致新生儿感染n n早发型新生儿感染多发病于出生后早发型新生儿

46、感染多发病于出生后早发型新生儿感染多发病于出生后早发型新生儿感染多发病于出生后2424h h，以肺炎为主以肺炎为主以肺炎为主以肺炎为主n n晚发型为产后晚发型为产后晚发型为产后晚发型为产后7 7天至天至天至天至3 3月内，以脑膜炎和菌血症为主月内，以脑膜炎和菌血症为主月内，以脑膜炎和菌血症为主月内，以脑膜炎和菌血症为主n nB B群链球菌对成人侵袭力较弱群链球菌对成人侵袭力较弱群链球菌对成人侵袭力较弱群链球菌对成人侵袭力较弱n n主要有肾盂肾炎、子宫内膜炎主要有肾盂肾炎、子宫内膜炎主要有肾盂肾炎、子宫内膜炎主要有肾盂肾炎、子宫内膜炎n n糖尿病、泌尿生殖道功能失调、肿瘤和免疫机能低下糖尿病、泌

47、尿生殖道功能失调、肿瘤和免疫机能低下糖尿病、泌尿生殖道功能失调、肿瘤和免疫机能低下糖尿病、泌尿生殖道功能失调、肿瘤和免疫机能低下者易受者易受者易受者易受B B群链球菌感染群链球菌感染群链球菌感染群链球菌感染临床意义n nC、G群群溶血性链球菌溶血性链球菌n n与化脓性链球菌有相似的毒力因子，引起上述与化脓性链球菌有相似的毒力因子，引起上述与化脓性链球菌有相似的毒力因子，引起上述与化脓性链球菌有相似的毒力因子，引起上述相似的感染相似的感染相似的感染相似的感染n n米勒链球菌是人体口腔、上呼吸道、消化米勒链球菌是人体口腔、上呼吸道、消化道、泌尿生殖道正常菌群道、泌尿生殖道正常菌群n n尽管在化脓性

48、感染病灶中能分离到该菌，但大尽管在化脓性感染病灶中能分离到该菌，但大尽管在化脓性感染病灶中能分离到该菌，但大尽管在化脓性感染病灶中能分离到该菌，但大都是手术和创伤引起的内源性感染都是手术和创伤引起的内源性感染都是手术和创伤引起的内源性感染都是手术和创伤引起的内源性感染临床意义n n肺炎链球菌肺炎链球菌n n大叶性肺炎、支气管炎大叶性肺炎、支气管炎大叶性肺炎、支气管炎大叶性肺炎、支气管炎n n中耳炎、乳突炎、鼻窦炎、脑膜炎和菌血症中耳炎、乳突炎、鼻窦炎、脑膜炎和菌血症中耳炎、乳突炎、鼻窦炎、脑膜炎和菌血症中耳炎、乳突炎、鼻窦炎、脑膜炎和菌血症n n肺炎链球菌的荚膜在细菌的侵袭力上起着肺炎链球菌的

49、荚膜在细菌的侵袭力上起着重要作用重要作用n n肺炎链球菌的溶血素、神经氨酸酶也是其主要肺炎链球菌的溶血素、神经氨酸酶也是其主要肺炎链球菌的溶血素、神经氨酸酶也是其主要肺炎链球菌的溶血素、神经氨酸酶也是其主要致病物质致病物质致病物质致病物质临床意义n n草绿色链球菌草绿色链球菌n n人体口腔、消化道、女性生殖道的正常菌群，人体口腔、消化道、女性生殖道的正常菌群，人体口腔、消化道、女性生殖道的正常菌群，人体口腔、消化道、女性生殖道的正常菌群，n n可引起心脏瓣膜异常患者的亚急性细菌性心内可引起心脏瓣膜异常患者的亚急性细菌性心内可引起心脏瓣膜异常患者的亚急性细菌性心内可引起心脏瓣膜异常患者的亚急性细

50、菌性心内膜炎膜炎膜炎膜炎n n从血液中分离出该菌常被认为是污染的细菌从血液中分离出该菌常被认为是污染的细菌从血液中分离出该菌常被认为是污染的细菌从血液中分离出该菌常被认为是污染的细菌n n血液链球菌血液链球菌、温和链球菌温和链球菌、格氏链球菌格氏链球菌、口腔链球菌口腔链球菌、中间型链球菌中间型链球菌n n常分离自深部脓肿，特别是肝和脑的脓肿常分离自深部脓肿，特别是肝和脑的脓肿常分离自深部脓肿，特别是肝和脑的脓肿常分离自深部脓肿，特别是肝和脑的脓肿三、生物学特性三、生物学特性1形态n n链球菌是直径小于链球菌是直径小于2m的球形或卵圆形革兰的球形或卵圆形革兰阳性球菌，呈链状排列，链的长短和细菌阳