04_光与物质的相互作用3.pptx
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1、生物光学计量生物光学计量光与物质的相互作用散射分类归纳散射分类归纳17:47发生在组织内的弹性散射发生在组织内的弹性散射3透射也是光在介质中的折射的一中形式,均匀介质满足折射定律;不均匀介质光被吸收后,剩余的能量以散射透射和散射反射的形式传输。17:47光的透射光的透射ssScattered and reflectedScattered and absorbed Scattered and transmitted m ma,m ms,g出射光子的分类对于生物组织体这样的混沌介质,如果以超短激光脉冲入射,则出射的光可以按照其在组织体中传播的时间被分为三类弹道光和蛇形光又被统称为早期到达光关于三类
2、光子的讨论(1)弹道光的特点p 光子具有相同的且最短的光子飞行时间。p 在光的入射方向出射。p 保持了入射光的相干性。(2)蛇形光的特点p飞行时间略长于弹道光。p出射方向分布在入射光方向周围较小的立体角内。p 基本保持了入射光的相干性。共性p可应用L-Bp 穿透深度小Application:OCT(optical coherence tomography)(3)漫射光的特点p 经过不同的路径到达表面,在组织内传播所经历的飞行时间差异很大。p 组织体的表面的出射光强是一个时间分布曲线(temporal profile),分布曲线的形状不但和组织体厚度有关而且和组织体的光学参数有关。p 出射方向几
3、乎是任意的。p 不再保持相干性。Application:DOT(diffused optical tomography)p无法应用L-B组织体发光组织体发光荧光的产生过程荧光的产生过程无辐射跃迁:指以放热的形式将多余的能量辐射给周围环境,包括:(a)振动驰豫(vibrational relaxation,VR):振动态内的跃迁(b)内转换(internal conversion,IC):单(三)重态到单(三)重态间 的跃迁(c)外转换(external conversion,EC):激发态到基态的跃迁(d)系间跨越(intersystem crossing,ISC):单重态到三重态间的跃迁辐射
4、跃迁:指以放光的形式将多余的能量辐射给周围环境。激发态激发态基态的能量传递途径基态的能量传递途径 电电子子处处于于激激发发态态是是不不稳稳定定状状态态,返返回回基基态态时时,通通过过辐辐射射跃迁跃迁(发光发光)和无辐射跃迁等方式失去能量;和无辐射跃迁等方式失去能量;传递途径传递途径辐射跃迁荧光延迟荧光磷光内转移外转移系间跨越振动弛预无辐射跃迁 激发态停留时间短、返回速度快的途径,发生的几率大,发光强度相对大;荧光荧光:10-710-9 s,第一激发单重态单重态的最低振动能级基态;磷光磷光:10-410s;第一激发三重态三重态的最低振动能级基态;S2S1S0T1吸吸收收发发射射荧荧光光发发射射磷
5、磷光光系间跨越内转换振动弛豫能量 2 1 3 外转换 2T2内转换振动弛豫 按分子激发态的类型划分时,由第一激发单重态所产生的辐射跃迁而伴随的发光现象称为荧光.由最低的电子激发三重态所产生的辐射跃迁,其发光现象称为磷光.主要光谱参量主要光谱参量13激发谱激发谱 固定发射波长固定发射波长(一般将其固定于发射波段中感兴趣的峰位一般将其固定于发射波段中感兴趣的峰位),扫描,扫描出的化合物的出的化合物的发射光强发射光强(荧光荧光/磷光磷光)与与入射光波长入射光波长的关系曲线。的关系曲线。发射谱发射谱 固定激发波长固定激发波长(一般将其固定于激发波段中感兴趣的峰位一般将其固定于激发波段中感兴趣的峰位),
6、扫描出扫描出的化合物的的化合物的发射光强发射光强(荧光荧光/磷光磷光)与与入射光波长入射光波长的关系曲线。的关系曲线。吸收谱吸收谱 化合物的化合物的吸收光强吸收光强与与入射光波长入射光波长的关系曲线的关系曲线。14 吸收谱吸收谱反映出的是物质的基态能级与激发态能级之间所有的允许跃迁。反映出的是物质的基态能级与激发态能级之间所有的允许跃迁。通常状态下的物质的通常状态下的物质的表观颜色表观颜色大部分时候取决于其大部分时候取决于其吸收特性吸收特性。激发谱激发谱则反映的是基态与所有与该荧光发射有关的能级之间的跃迁。其所则反映的是基态与所有与该荧光发射有关的能级之间的跃迁。其所呈现的关系比吸收谱要有选择
7、性,但有时候又不如吸收谱来的直接。呈现的关系比吸收谱要有选择性,但有时候又不如吸收谱来的直接。电子跃迁到不同激发态能级时,电子跃迁到不同激发态能级时,吸收不同波长的能量吸收不同波长的能量(如能级如能级图图 2 2 ,1 1),产生不同吸收带,产生不同吸收带,但均回到第一激发单重态的最但均回到第一激发单重态的最低振动能级再跃迁回到基态,低振动能级再跃迁回到基态,产生波长一定的荧光产生波长一定的荧光(如如 2 2 )。因此,。因此,发射谱的形状与激发射谱的形状与激发波长无关发波长无关。主要光谱参量主要光谱参量激发光谱 与 发射光谱?形状和吸收光谱的形状极为相似,并呈现“镜像”现象;波长总是比激发波
8、长稍长;发射光谱的形状和激发光的波长无关;只有一个荧光带;荧光发射的强度和激发光的波长有关。主要光谱参量主要光谱参量荧光光谱与磷光光谱荧光光谱与磷光光谱16荧光光谱荧光光谱 固定激发光波长物质发射的荧光强度与发固定激发光波长物质发射的荧光强度与发射光波长关系曲线,如右图中曲线射光波长关系曲线,如右图中曲线II。荧光本身则是由电子在两能级间不发生自荧光本身则是由电子在两能级间不发生自旋反转的辐射跃迁过程中所产生的光。旋反转的辐射跃迁过程中所产生的光。磷光光谱磷光光谱 固定激发光波长物质发射的磷光强度与发固定激发光波长物质发射的磷光强度与发射光波长关系曲线,如右图中曲线射光波长关系曲线,如右图中曲
9、线III。磷光本身则是由电子在两能级间发生自旋磷光本身则是由电子在两能级间发生自旋反转的辐射跃迁过程中所产生的光。反转的辐射跃迁过程中所产生的光。17光谱图光谱图荧光光谱与磷光光谱荧光光谱与磷光光谱1、辐射量子效率or 量子产额(quantum yield)影响量子产额的因素主要有:内部因素:分子内可进行能量转换的振动能级 的数目等 外部因素:物质分子所处的环境 (需要稳定的环境)荧光发光的表征荧光发光的表征2、荧光强度(fluorescence intensity)为摩尔吸收系数;为样品的厚度;为样品中荧光剂的浓度。对于极稀的溶液:3、荧光寿命(fluorescence lifetime)在
10、 脉冲激励下,辐射由其本来强度衰减到1/e时所需要的时间,称为荧光寿命,用 表示。荧光寿命和组织所处的环境,如PH等有关,因此可以作为判别组织病变的一个指标。1、自体荧光(intrinsic fluorescence 或 auto-fluorescence)由生物组织体内固有的荧光团吸收一定波长的光而引起的荧光发射叫做自体荧光。自体荧光光谱的特异性差异反映了病变组织的特异性,是自体荧光光谱应用于应用于医学诊断。(a)正常组织正常组织 (b)良性肿瘤良性肿瘤 (c)癌组织癌组织乳腺组织的自荧光乳腺组织的自荧光2、外荧光(extrinsic fluorescence)荧光探剂(probe):发荧光
11、的物质分子,外在荧光团 作为荧光探剂必须具备一下几个条件:探剂与被研究分子的某一基因必须能特异性地、牢固地结合;探剂的荧光必须对环境灵敏;结合的探剂不应该影响被研究的大分子的结构特性。光热效应(photothermal effects):由于组织体在曝光时间内吸收了激光的能量并使其转化程了热,热效应的最终结果是造成了组织的损伤。光热密度(J/cm3)表达式:也常被称为辐射曝光量(radiant exposure),单位为 J/cm2 光热密度引起的组织体表面温升为:是用来描述组织体对热的储存能力的热容(单位:),为密度(单位:g/cm3),不同组织体对热的储存能力不同。光热效应与光声效应光热效
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- 04 物质 相互作用
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