麻黄碱对α1和α2肾上腺素亚型受体的药理作用 外文翻译eikc.docx

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1、吉林化工学院学士学位毕业论文外文翻译麻黄碱对对1和2肾上腺腺素亚型型受体的的药理作作用Guoyyi MMa,SSuprriyaa A.Bavvadeekarr,Yoolannde M.DDaviis,SShillpa G.LLalcchanndanni,Ranggaswwamyy Naagmaani,Briian T.SSchaanebbergg,Ikkhlaas AA.Khhan,andd Deenniis RR.Feelleer摘 要要麻黄类植植物起有有益作用还还是有害害影作用用主要与与麻黄碱的量有有关。几几份报告告研究了了麻黄碱对对人类亚亚型肾上上腺素受受体的直直接影响响受体。在在本研究

2、究中，通通过在细细胞上做做试验估估测麻黄黄生物碱碱对1A-,1BB-,1D-,2AA-,2B-,2CC-的影响响。细胞胞基报告告了麻黄黄碱对1A-,1AA-,2C-的影响响。数据据显示，麻麻黄碱没没有激活活1-和2-，并且还还抑制了了1-和2-的作用用。正如如在研究究中显示示，1RR,2RR-和1R,2S-比1S,2R-和1S,2S拮拮抗作用用更明显显。同分分异构体体引力排排序是11R,22R11R,22S11S,22R11S,22S。包包含一个个1R,2S的的麻黄碱碱潜能排排序是去去甲麻黄黄碱大于于麻黄碱碱，远远远大于NN-甲基基麻黄碱碱。这些些研究证证明甲基基旁边的的-羟基和和N-甲基基替

3、换对对-AR晶格格非常重重要，并并且在麻麻黄碱中中非常活活跃。总总之，麻麻黄素异异构体和和类似物物的研究究并没有表表现出任任何直接接兴奋剂现象，并并且对人人类克隆隆-受体体。麻黄生生物碱对对2A-和2C-有直接接拮抗作作用。麻黄属由由于植物物其药用用价值被被广泛用用于。麻麻黄属植植物的主主要活性性成分是是麻黄素素，拥有有两个手手性中心心，并可可以存在在指定的的四个异异构体受受体，如如1R,2S-和1S,2R-麻黄碱碱和1RR,2RR-和1S,2S-伪麻黄黄碱（格格里菲斯斯和约翰翰逊，119955年）。自自然生成成的麻黄黄素生物物碱主要要包括11R,22S-麻黄碱碱，1SS,2SS-伪麻黄黄碱，

4、11R,22S-去甲麻麻黄碱，1R,2S-N-甲基麻黄碱和1S,2S-去甲伪麻黄碱。这些麻黄属植物的麻黄素生物碱已被用来作为鼻腔减充血剂，支气管扩张剂和中枢神经兴奋剂（卡利克斯，1991年；霍夫曼，2001），并且麻黄属植物也被用于治疗肥胖（阿奇等，1984年，刘等人，1995年）。近年来，有许多报告关于由于摄入引起的不良反应，特别是过量服用，草药产品含有麻黄提取物导致艾滋病的体重减少（约瑟夫森，1996年）。其他影响，如高血压、震颤、心肌梗死、癫痫发作并导致中风死亡（蔡氏和本杰明，1988年；瓦特等人，1997年；哈勒和班诺维兹，2000年）。美国食品和药品监督管理局最近禁止食品中含有麻黄素

5、。然而，含有麻黄碱的草药产品在其他国家仍在继续使用。 麻黄素及及相关类类似物的的有利和和不利影影响已知知是-和-肾上腺腺素受体体的传输输介质，可可引起与与受体的的激动剂剂或拮抗抗剂任何何直接的的相互作作用或间间接作用用，要么么造成释释放内源源性儿茶茶酚胺或或防止其其他神经摄摄取（特特伦德兰兰伯格，119633年；特伦德德兰伯格格等，119633年；帕蒂尔尔等，119677年，费费勒等，19999年年；罗思曼曼等，220033年；威尔曼曼等，220033年）。直接和间间接的相相互作用用相对于于麻黄素素异构体体在体内内敷设的的药理作作用一直直是有争争议的。麻麻黄生物物碱的11R,22S-受体结构构

6、，一般般都表明明直接影影响受体体，而同同分异构构体的11S,22S-和和1S,2R-结构有间间接的行行动（帕帕蒂尔等等，19965年年，19967年年；拉皮皮迪等，119677年；帕蒂尔尔，19968年年；瓦尔德德克和威威德马克克，19985年年；Kawwasuuji等等，19996年年；Vannsall和费勒勒，19999年年；Lilles等等，20006年年）。研研究中使使用的麻黄素素异构体体，间接接的行动动主要表表现在用用尽去甲甲肾上腺腺素，罗罗斯曼等等。（220033年），使使用电池池的体外外试验，报报告说，最最强有力力的行动动，麻黄黄碱和苯苯丙醇胺胺类似物物和同分分异构体体的最强强有

7、力的的行动是是去甲肾肾上腺素素转运基基质。尽管有报报告指明明直接影影响人类类-受体的麻黄碱碱同分异异构体（费费勒等，19999年年），没没有全面面的信息表明明麻黄素素异构体体和有关关麻黄生生物碱存存在直接接的相互互作用（激激动剂和和拮抗剂剂效力），相关的人类-受体麻黄碱也是如此。罗斯曼等人。（2003年）发现，麻黄素异构体和类似物不能激动人类1A-或2A-型受体，但他们不能测试任一拮抗剂或其他亚型受体的化合物。在本研究中，所造成的直接后果是麻黄素异构体和自然发生的麻黄素生物碱已系统地审查激动剂和拮抗剂关于克隆人1（1A，1B，和1D）-和2（2A，2B，和2C）-亚型受体表达的宿主细胞。初步报

8、告在我们的工作中出现（2004年）。材料与方方法人胚肾（HEK293）细胞稳定表示同种人口的人类1A-，1B-，和1D-亚型受体从Kenneth Minneman（Emory大学，亚特兰大，美国佐治亚）获得 。人类2A-，2B-，和2C-亚型受体表示在CHO细胞中的稳定性由资料简化系统中获得。马克卡隆，罗伯特莱夫科维茨（杜克大学，达勒姆，北卡罗来纳州），和斯蒂芬利吉特（辛辛那提大学，辛辛那提，俄亥俄州）。在此项研究中的麻黄素生物碱（美国俄亥俄州立大学，哥伦布，俄亥俄州），或从Sigma-Aldrich公司购买（圣路易斯，密苏里州）。该化合物溶解在水或二甲基亚砜和水以1:5混合中。10mM储存方

9、法是每天用新鲜的水稀释适当的浓度进行研究。在佛波酯反应元件，荧光素酶基因和cAMP反应元件，Dr.A.Himmler所提供的荧光素酶报告基因（勃林格殷格翰英格尔海姆公司研究和发展，维也纳，奥地利）。所有细胞培养试剂从生命科技中获得（卡尔斯巴德，CA）的。其他化学品均购自Sigma-Aldrich公司。HEK2293细细胞稳定定表示1A-，1B-，和和1DD-亚型受体体种植在在1500平方厘厘米瓶（阿阿克顿，马）中，与杜杜尔贝科科改良的的培养基基辅以110胎胎牛血清清，2毫米米谷氨酰酰胺，青青霉素GG（1000U/mmL的），链链霉素（100g/mL），和G418 （100g/mL）。混合后，轻

10、轻将细胞分离。CHO细胞稳定表示对2A-，2B-，和2C-受体共种植在150平方厘米培养瓶中，在F12培养基中附加10胎牛血清牛血清，2毫米谷氨酰胺，青霉素G（100U/mL的），链霉素（100g/mL），和G418（100g/mL）。所有细胞培养在温度为37，5CO2和湿度为95的大气中。放置48小时，直至细胞融合。融合后，用胰蛋白酶将细胞超脱2分钟（0.25胰蛋白酶乙二胺四乙酸）。竞争力的的放射配配体结合合检测。放放射配体体结合实实验进行行了完整整的HEEK2993细胞胞稳定表表达1A-，1BB-，1DD-亚型受受体，完完整的CCHO细细胞稳定定表达2A-，2B-，和2C-亚型受体体Lal

11、lchaandaani等等所描述述的那样样（20002年年）。用用三乙二二胺四乙乙酸缓冲冲液对细胞进行行分离，ppH值为为7.44，其中中包含550mM，20mMM二钠乙乙二胺四四乙酸，154mM氯化钠，最终暂停。放射性用于竞争性药物的固定浓度为0.1Ci的缺乏和存在的不同浓度。该药物添加到细胞（50000）在50mM的三乙二胺四乙酸缓冲中，置于2.0mL容器中，在温度37中培养1小时。通过石墨/碳过滤器过滤，缓冲液洗涤两次。特异性结合的百分比是确定除以总额之间的差额约束（衰变每分钟）和非特异性约束（衰变每分钟）的总方向（衰变每分钟）。功能分析析最近发展展敏感基基因法（220022年），被用来

12、来阐明对对麻黄素素生物碱碱对人类类的2-亚型受体体。在1-受体的的研究中中，质粒粒由Dr.A.HHimmmlerr提供（SStraatowwa等，19995）是是用于研研究麻黄黄素生物物碱的功功能影响响。HEKK2933细胞稳稳定表达达1A-受体与与质粒（40g/mL）使用电穿孔（70ms，单脉冲，150V）。在转染种子细胞的密度50000细胞/以及在微量板在200L和允许增加24小时的潜伏期为37（5的二氧化碳）。24h后，细胞治疗药物浓度不同，为期20小时，其中被认为是最佳的时间过程中进行分析前（数据没有提交）。拮抗剂研究体现，每形成的化合物，15分钟前增加了激动剂，L型药物暴露，细胞溶解

13、，荧光素酶活性测定采用Luclite试剂检测（城镇生活和分析科学）。积累和分分析，在细胞胞线路上上的研究究上，在每个个实验中中增加了了不同浓浓度的药药物，使使用棱镜镜软件测测定.该文的价价值是所所叙述的的方程和数数据以及及实验。浓度取决于诱导在CHO细胞中的荧光素酶活性变化和用来评估激动剂的活动的麻黄素类似物。麻黄素类似物拮抗剂活动，测定前2-受体激动剂有一个固定的浓度。IC50的数据表达了至少n=6的实验。个别药品之间的结合亲和力和功能反应使用了t配对检验。当p麻黄碱碱N-甲基麻麻黄碱。作为驱配麻黄碱的比较远远低于那些比标准激动剂类似物，L-苯肾上腺素。标准激动剂和所有的麻黄素生物碱对1A-

14、和2A-亚型受体给出的数据。1R，2S-N-去甲麻黄碱，缺乏N-甲基组份如1R,2S麻黄碱，显示了越来越高的具有约束力的亲和力亚型检验。在添加的N-甲基组份情况下，1R,2S-N-甲基麻黄碱，表明下降约束力的亲和力与受体，1R，2S-麻黄碱在1A-，2A-，和2C-受体，麻黄素异构体对人类1受体亲和力（基值）在HEK293细胞的排列顺序是1R,2R-伪麻黄碱1R,2S-麻黄碱1S,2R-麻黄碱1S,2S-伪麻黄碱在1A-受体中；1S,2R-麻黄碱1R,2R-伪麻黄碱1R,2S-麻黄碱1S,2S伪麻黄碱在1B-受体中；1R,2R-伪麻黄碱1R,2S-麻黄碱1S,2R-麻黄碱1S,2S-伪麻黄碱在

15、1D-受体中。1R,2S-去甲麻黄碱和1S,2S-去甲伪麻黄碱的亲和力在1A-受体上对于1R,2S麻黄碱是相似的。在人类2-受体的CHO细胞中的麻黄素异构体的亲和力排名顺序是1R,2R-伪麻黄碱1R,2S-麻黄碱1S,2R-麻黄碱1S,2S-伪麻黄碱在2A-受体上；1R,2R-伪麻黄碱1R,2S麻黄碱=1S,2R麻黄碱1S,2S伪麻黄碱在2B-受体上；1R,2R-伪麻黄碱1R,2S-麻黄碱1S,2R-麻黄碱1S,2S-伪麻黄碱在2C-受体上。1R,2R-和1R,2S-麻黄碱异构体比在-受体上的所有1S,2R-和1S,2S-异构体有更大的亲和力，除了在1B-上的受体。1S,2S-伪麻黄碱在所有的

16、-受体中显示最低的结合亲和力，此外，1R,2S-去甲麻黄碱和1S,2S-去甲伪麻黄碱在1R,2S-麻黄碱亚型受体的亲和力是相似的。直接激动动剂影响响麻黄碱碱生物碱碱对受体体亚型。细胞的的基因分分析用建建立功能能活动在在1A-，2A-，和2C-受体敷设设。直接激激动剂影影响麻黄黄素异构构体1-受体，荧荧光素酶酶检测研研究表明明，1RR,2SS-麻黄黄碱，11S,22R-麻麻黄碱，11R,22R-伪伪麻黄碱碱，1SS,2SS-伪麻麻黄碱，11R,22S-去甲麻麻黄碱，11R,22S-NN-甲基基麻黄碱碱和1SS,2SS-去甲甲伪麻黄黄碱在1A-受体上有有很小的的影响力力。这些些异构体体了反应应11

17、0-44M）的1R,2S-麻黄碱碱异构体体和去甲甲麻黄碱碱，所有有异构体体的测试试麻黄/麻黄素素生物碱碱生产只只有在-亚型型受体上上活动的的中度拮拮抗剂受受体。根据我我们的调调查结果果，它可可能是这这些麻黄黄生物碱碱在体内的行动，主要是是一种在在人体-受体体间接的的行动。然然而，一一个直接接交流化化的在11R,22S-麻麻黄碱受受体的机机制，已已提议观观察体内内的药理理作用治治疗哮喘喘（格里里菲斯，19995；霍夫曼曼，20001）和和其中枢枢神经系系统的刺刺激和/或心血血管（心心脏病和和中风）的的不利影影响，观察其其滥用和和滥用人人类（哈哈勒和班班诺维兹兹，20000年年）。有趣的的是，我我

18、们的调调查结果果与最近近在体内内升压作作用的报报告（LLilees等，20006年年）和大大鼠活动动（威尔尔曼等，20003年），他们在表明，1R,2S-麻黄碱受体，其激动剂活动通过直接效应在1-受体上。这方面，在体外实验研究涉及突变变化（沃等，2000年）的1A-受体上表现出4倍的功能潜力，1R,2S-麻黄碱异构体，而效力下降了36倍。在场的情况下，芳香儿茶酚组肾上腺素更受突变，比邻苯二酚分子缺乏功能（麻黄素）。沃等人。（2000年）显示部分激动剂活动，仅此麻黄素异构体的野生型和突变克隆大鼠和仓鼠在1A-受体上。1R,2S-麻黄碱受体激动剂送达阻塞，沃等人。（2000年）可能原因是增加受体密

19、度的细胞用于实验。总的来说，这些结果提供证据证明在体内及体外受体激动剂活动，-受体上的1R,2S-麻黄碱研究中心。麻黄生物物碱预计计生态制药药混合机机制，涉涉及-亚型受体体上间接接和直接接行动。最后，我我们的研研究表明明，人体体1-和2-亚型型受体中中的麻黄黄素异构构体和类类似物没没有表现现出任何何重大的的直接激激动剂交交流活性性。我们们建议，观观察在体体内麻黄黄/麻黄黄素生物物碱的影影响，一一部分是是通过阻阻断去甲甲肾上腺腺素在1A-和/2A-型受体的的活动。我们的的研究结结果是，在人类2-受体发现现特别，表表明在体体内抑制制雄激素素受体亚亚型的麻麻黄素类类似物。最最合理的的建议是是，自然然

20、发生的的可作为为拮抗剂剂的麻黄黄素生物物碱突触触前2A/2C-受体。因因此，麻麻黄素类类似物可可能会干干扰突触触，去甲肾肾上腺素素吸收和和提高突突触浓度度。在这方方面，罗罗斯等人。（2003年）用体外实验，以衡量影响有关释放或回收的去甲麻黄碱在大鼠全脑（减去尾和小脑）的筹备工作，并建议采取行动麻黄素类似物通过间接机制导致释放，麻黄碱也没有提高。还显示，麻黄素异构体和有关类似物产生一个类似的模式，但有少量多巴胺的释放，而且麻黄素类似物和血清素受体有亲和力的互动。研究麻黄生物碱对多巴胺和羟色胺亚型受体也可能是值得的，但超出了本工作的范围。因此，同样清楚的是，药理学麻黄素生物碱在体内和体外的解释结果可能进一步复杂化了，相对丰度-/-亚型受体和其他药理受体及其信号转导途径存在靶组织。目前更多的研究报告将被要求建立重要性，这些行动胺在体内。不论麻黄或其生物碱在体外和体内的行动，很明显，他们的影响药物敷设合乎逻辑，将取决于剂量和可能影响直接和/或间接的去甲肾上腺素依赖性途径机制，。11