药品卫生检验方法总则hgjr.docx

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1、药品卫生生检验方方法总则则抽样样供供试品一一般按批批号抽样样抽抽样时，凡凡发现有有异常或或可疑的的样品，应应抽选有有疑问的的样品，但但因机械械损伤明明显破裂裂的包装装不得作作为样品品。凡凡已能从从药品、瓶瓶口（外外盖内侧侧及瓶口口周围）外外观看出出长螨、发发霉、虫虫蛀以及及变质的的药品，可可直接判判为不合合格品，无无需再抽抽样检验验。抽抽样量一一般应为为检验用用量（个以上上最小包包装单位位）的倍量。一一般采用用随机抽抽样方法法抽样。供试试品保存存供供试品在在检验之之前，应应保存在在阴凉干干燥处（勿勿冷藏或或冷冻），以以防供试试品中的的污染菌菌因保藏藏条件所所引起致致死、损损伤或繁繁殖。供供试品

2、在在检验之之前，应应保持原原包装状状态，严严禁开启启。包装装已开启启的样品品不得为为供试品品。检验验供供试品检检验项目目按中华华人民共共和国卫卫生部颁颁布的药药品卫生生标准确确定。检检验的全全过程必必须符合合无菌技技术要求求。除除另有规规定外，供供试品制制备成供供试液后后，应在在均匀状状态取样样。供供试品制制成供试试液后，应应在小小时内注注皿操作作完毕。检验验量所所有剂型型的检验验均需取取自个个以上包包装单位位。口口服固体体制剂中成药丸丸剂、片片剂、冲冲剂、散散剂、胶胶剂、茶茶剂、曲曲剂、胶胶囊剂等等检验量量均为。蜜蜜丸除应应取自个以上上包装外外，还应应取自丸以上上。化学学药品、生生化药品品的

3、粉剂剂、胶囊囊剂、片片剂、冲冲剂、滴滴丸剂等等检验量量为。口口服液体体制剂：糖浆剂剂、乳剂剂、合剂剂、溶液液剂、混混悬剂、酒酒剂等检检验量为为。半半固体制制剂：膏膏剂等检检验量为为。外外用液体体制剂：滴眼剂剂、滴鼻鼻剂及其其他液体体制剂检检验量为为。外外用栓剂剂、软膏膏剂、眼眼膏剂等等检验量量为。膜膜剂，除除另有规规定外，中中药膜剂剂检验量量取平方厘厘米，化化学药及及生化药药膜剂取取平平方厘米米，以上上均需取取自个个以上包包装并片以上上。特特殊贵重重的或极极微量包包装的药药品，其其检验量量可酌减减。除另另有规定定外，口口服固体体制剂不不得低于于；液体制制剂采用用原液者者不得少少于、采采用供试试

4、液者不不得少于于；外用用药品不不得少于于。检检查活螨螨的取样样量，见见活螨检检验法。供试试液的制制备一一般供试试品的供供试液制制备方法法。固体体供试品品称取，置置研钵中中，以稀释释剂（生生理盐水水或磷酸酸盐缓冲冲液（）分分次加入入研磨细细匀，并并转移至至锥锥形瓶中中，使成成供供试液。或或将供试试品和稀稀释剂同同置匀浆浆仪中，以以转速转转分，开开机分钟钟。对吸吸水膨胀胀或粘度度大的供供试品，可可制成供供试液。液体体供试品品量取，加入入含稀稀释剂的的锥锥形瓶中中，混匀匀成供供试液。合合剂（含含王浆、蜂蜂蜜者）、滴滴眼剂等等可以原原液为供供试液。半固固体供试试品称取取，加入入含稀释剂剂的锥形瓶瓶中，

5、混混匀成供供试液。特特殊供试试品的供供试液制制备方法法非水水溶性基基质供试试品供试试液的制制备方法法（）软软膏剂、乳乳膏剂吐温西黄黄蓍胶（或或羧甲基基纤维素素钠）法法称取供供试品，置置研钵或或烧杯中中，加吐温，充分分研匀。加加入西黄黄蓍胶或或羧甲基基纤维素素钠，充充分研匀匀以的稀释释剂，边边加边研研磨，使使成均匀匀乳剂，并并移至锥形形瓶中，即即为供供试液。注注吐温预预先以高压灭灭菌分钟。西黄蓍胶、羧甲基纤维素钠预先以干热灭菌分钟。原注液体石蜡吐温法称取供试品，分别量取液体石蜡（液体石蜡，预先以干热灭菌小时），吐温，稀释剂。先将供试品置研钵中，边研磨边加液体石蜡，然后再边研磨边滴加吐温，研磨均匀

6、后，再边加稀释剂边研磨，初始每次约，待起团块时，加入量可增至约，稍停分钟，再轻轻研磨至乳化，将稀释剂加完为止。即得供试液。（）栓栓剂称取取供试品品，置置锥锥形瓶（内内含玻璃璃珠若干干粒）中中，加适适量稀释释剂，置置水浴浸浸泡分钟使使融，加加吐温，振振摇使之之乳化，再再加稀释释剂（稀稀释剂和和吐温总总量为）制成成供供试液。（）油油剂量取取供试品品，加加入吐温稀稀释剂，混匀匀，制成成供供试液。胶囊囊剂、胶胶丸及胶胶剂供试试液制备备方法（）胶胶囊剂、胶胶丸剂称称取供试试品置锥锥形瓶中中，加入入稀释剂剂，于于水浴中中振摇至至溶，即即为供供试液。（）胶胶剂取胶胶剂若干干，捣碎碎，称取取，再用用研钵研研细

7、，转转入锥形瓶瓶中，加加入稀释释剂，置于于水浴中中，振摇摇使溶，即即为供供试液。肠溶溶胶囊（片片）剂供供试液制制备方法法称取供试试品，置置锥形瓶瓶中并放放入水浴，加加入磷酸盐盐缓冲液液（附录录二），保保温、振振摇，使使肠衣溶溶解，混混匀，即即得供供试液。气雾雾剂供试试液制备备方法。将供试品品置冰室室内小小时后，取取出，用用灭菌钢钢锥小心心钻孔，使使抛射剂剂缓慢释释放，然然后再用用灭菌注注射器加加入适量量稀释剂剂，混匀匀后吸取取相当于于或的的供试品品，再稀稀释成供供试液。膜剂剂供试液液制备方方法中药膜剂剂除另有有规定外外，取平平方厘米米，将药药膜剪成成碎片，置置锥形瓶瓶中，加加稀释剂剂适量，使使

8、每含含平方方厘米浓浓度，浸浸泡分钟，摇摇匀，即即得。化化学药膜膜剂除另另有规定定外，取取平平方厘米米，置锥锥形瓶中中，加稀稀释剂，浸浸泡、振振荡使溶溶，即得得。必要要时，可可置水浴中中助溶。含含抑菌成成分供试试品的供供试液制制备方法法。凡含有防防腐剂或或抑菌成成分且影影响检验验（阳性性对照控控制菌不不生长）的的供试品品，可根根据供试试品的性性质，控控制菌的的特性及及检验条条件等按按下列方方法之一一（或两两种以上上方法联联合应用用）及其其他适宜宜方法处处理后，作作控制菌菌检验。离心心沉淀法法可溶性供供试液取取供试液液，置置入刻度度离心管管中，以以转分以上上离心沉沉淀分钟，用用毛细吸吸管吸取取上清

9、液液弃掉，留留下管底底约残余余液，将将其全部部洗入增增菌培养养基中，作作控制菌菌检验。混悬供试液取供试液，置刻度离心管中，先以转分离心沉淀分钟，取其上层液移入另一离心管中，再经转分以上离心沉淀分钟，弃去上清液，保留约残余液，全部洗入增菌培养基中，作控制菌检验。本法适用用于一些些抑菌作作用不强强的中、西西药品，如如蜜丸、水水丸、片片剂、散散剂、冲冲剂、胶胶囊剂及及液体制制剂。应应用本法法须严防防操作污污染，并并注意上上层液或或上清液液和管底底残渣的的分离，避避免沉渣渣混入其其中。薄膜膜过滤法法取规定量量的供试试液，按按加生理理盐水约约的比比例，混混匀，置置入薄膜膜过滤器器内，减减压过滤滤至干，再

10、再以生理理盐水或或其他适适宜溶剂剂冲洗滤滤膜次次，每次次。取取出滤膜膜，剪成成片，使使每片相相当于供供试品或。放放入增菌菌培养基基中，作作控制菌菌检验。本法适用用于水溶溶性抑菌菌成分的的中、西西药品和和滴眼剂剂等的制制剂“灭活”处理。安放滤膜膜时，注注意滤膜膜与滤器器应密合合，防止止滤膜破破损、漏漏液。本本法所用用微孔滤滤膜孔径径应为。钝化化剂中和和法磺胺类药药物中和和法取规规定量供供试液，加加入含对氨氨基苯甲甲酸的增菌液液中，作作增菌培培养即得得。本法适用用于含磺磺胺较少少的制剂剂、如三三磺软膏膏、消炎炎眼药水水、斑马马眼药水水等。应用本法法可因供供试品不不同，对对氨基苯苯甲酸的的用量，可可

11、适当调调整。含重金属属药物中中和法取取规定量量供试液液，加入入硫乙醇醇酸钠胱氨酸酸增菌液液（附录录三）中，作作增菌培培养即得得。本法适用用于含重重金属盐盐类药物物的检验验，如磺磺胺嘧啶啶银软膏膏等。含洗必泰泰等制剂剂中和法法取规定定量供试试液，加加入含适适量吐温温等等表面活活性剂的的增菌液液中，作作增菌培培养即得得。本法适用用于洗必必泰含片片、洗必必泰栓、霉霉滴栓及及其他含含抑菌成成分的供供试品。应用本法法须注意意，由于于供试品品不同，用用量应预预试，表表面活性性剂的用用量应预预试，用量不可可过大，否否则本身身亦产生生抑菌作作用。沉降降法（）取取规定量量供试液液，自然然沉降分钟，吸吸取上层层液

12、于增增菌液中中，作增增菌培养养即得。（）取取规定量量供试液液，自然然沉降分钟，吸吸取上层层液于含含对对氨基苯苯甲酸的的增菌液液中，作作增菌培培养即得得。本法适用用于水溶溶性小的的抗菌制制剂检验验，如磺磺胺类药药。（）法适适用于单单一成分分固体制制剂，如如磺胺嘧嘧啶片检检验；（）法适适用于复复方磺胺胺制剂，如如复方磺磺胺嘧啶啶片、复复方新诺诺明片等等检验。应用本法法时，供供试品应应充分研研细，并并与稀释释剂充分分摇匀，使使污染菌菌分散于于液相中中；沉降降时间不不宜超过过分钟钟，以防防菌细胞胞下沉；取上层层液时，避避免吸入入药渣。稀释释法取供试液液，加加入较大大量增菌菌液中（使使该供试试品稀释释至

13、阳性性对照菌菌能生长长的浓度度），作作增菌培培养即得得。本法适用用于抑菌菌作用不不强的中中药、化化学药品品检验。对照照试验阴阴性对照照试验测测试检验验全过程程无菌技技术的可可靠性。菌数数测定阴阴性对照照试验：用吸管管从供用用的稀释释剂中各各吸取于于个无无菌平皿皿中，分分别按细细菌数、霉霉菌数测测定方法法注皿培培养、检检查，不不得长菌菌。控制制菌检验验阴性对对照试验验：用吸吸管从供供用的稀稀释剂中中吸取于于增菌液液中，按按控制菌菌检验方方法检查查，不得得长菌。阳阳性对照照试验检检查供试试品是否否对控制制菌生长长产生干干扰作用用及检查查培养条条件是否否适宜。阳性性对照试试验方法法同供试试品检验验，

14、于供供试液中中加入一一定量的的相应对对照菌，作作平行试试验。规定定阳性对对照菌株株：大肠肠杆菌（）、沙门氏菌菌（）、绿脓脓杆菌（）、金黄色色葡萄球球菌（）及及破伤风风杆菌（）。对照照菌的加加入量为为个，可可事前预预试确定定。需气气菌常用用计数方方法，取取培养小时时的新鲜鲜肉汤培培养物，倍递递增稀释释至，取其其于于普通肉肉汤琼脂脂平板表表面涂抹抹或取稀稀释液以以注皿法法进行菌菌数测定定。当供供试品未未检出供供试菌时时，而阳阳性对照照试验也也未能检检出，不不能做出出供试品品未检出出控制菌菌的结论论。阳性性对照试试验操作作必须与与供试品品检验操操作严格格分开，避避免交叉叉污染。检验验报告单单位细细菌

15、数、霉霉菌数和和酵母菌菌数的测测定一般般以或为单单位的菌菌落数表表示。中中药膜剂剂以平方厘厘米、化化学药及及生化药药膜剂以以平方方厘米为为单位的的菌落数数表示。眼眼科用药药的霉菌菌和酵母母菌数以以或或为单位位的菌落落数或“未检出出”表示。控控制菌检检验报告告一般以以或或、中药药膜剂以以平平方厘米米、化学及生生化药膜膜剂以平方厘厘米为单单位报告告“检出”或“未检出出”。复试试菌菌数测定定不合格格者应复复试。控控制菌检检验以次检出出为准，不不再复试试，但应保留留检出菌菌株个个月备查查。复复试项目目以不合合格项目目为准，作作单项复复试。复复试需另另取同批批号样品品，测定定次。复复试报告告以次次测定结

16、结果的算算术平均均值报告告。眼眼科用药药的霉菌菌和酵母母菌数复复试报告告，须以以二次复复试结果果均不得得长菌，方方可判定定合格。特别别抽样不符合部部颁药品品卫生标标准规定定的药品品，经卫卫生行政政部门审审批准予予在不影影响外观观与质量量的前提提下，充充许采取取适宜措措施进行行处理，处处理后的的药品抽抽样按本本款进行行。抽抽样方法法大包装抽抽样，按按出厂的的大包装装，件以下下抽件件，件以上上每增加加件件加抽件，最最后不足足件件者不加加抽，超超过件加抽抽件。小小包装抽抽样，按按规定手手续，从从大包装装中随机机抽取小小包装个以上上单位为为供试品品。检检验项目目：按部部颁药药品卫生生标准规规定检验验，

17、不得得单项检检验。检检验报告告测定定菌数报报告：以以各次测测定结果果全部平平均值报报告。控制制菌按全全部复试试检验结结果报告告，如全全部复试试均未检检出控制制菌时，报报告为：“按规定定抽样检检验结果果未检出出菌”；如全部部抽样中中任一样样品检出出控制菌菌时，报报告为：“按规定定抽样检检验，检检出菌，不不符合药药品卫生生标准规规定”。注报告中中写出具具体的控控制菌名名称。细菌数测测定细菌数是是指规定定单位的的非规定定灭菌药药品制剂剂中污染染活细菌菌的数量量。是判判定药品品受到细细菌污染染程度的的标志。其其内含是是多义的的。细菌菌数愈多多，表明明药品受受到致病病微生物物污染的的可能性性以及药药品制

18、剂剂的变质质可能性性也愈大大，安全全性也就就越差。同同时细菌菌数测定定也是对对生产单单位的药药品原辅辅料、器器具设备备、工艺艺流程、生生产环境境和操作作者的卫卫生状况况进行卫卫生学评评价的综综合依据据之一。细菌数测测定采用用平板菌菌落计数数法，是是一种活活菌计数数法。测测定结果果只反映映出在规规定条件件下生长长的细菌菌数，不不可能包包括在本本法条件件下不生生长的细细菌，因因而测定定数只可可能低于于实际的的污染数数。此外外，测定定中个个细菌可可能繁殖殖成个个菌落，而而一群也也可能只只形成个菌落落，以及及污染的的不均匀匀性等等等原因，极极易造成成测定差差异。故故在测定定细菌数数时，必必须严格格按本

19、法法所规定定条件操操作。培养养基、试试剂肉肉汤琼脂脂（或肉肉汤琼脂脂）（附附录三，）磷酸酸盐缓冲冲液（）或或生理盐盐水（附附录二）检验验程序制备备稀释稀稀释供试品品供试液液供试液液供试液液 ? 平皿平皿平皿个个个注皿干燥培养小时时菌落计计数报告操作作步骤供供试液制制备，经经阴性对对照取样样后，按按各类制制剂制备备供试液液的方法法（总则）制制备。稀稀释及吸吸样稀释级一一般应采采用级级。稀释取吸吸管支支，吸取取混匀的的供供试液（或或原液、供供试液），在在离稀释释剂液面面上约处处，沿管管壁注入入装有的的稀释剂剂的试管管中，混混匀成（或、）的稀稀释液。吸样用上上述吸管管分别取取供供试液（或或原液、供供

20、试液），注注入个平平皿中。以另一支支吸管，按按上述操操作，作作下一级级的稀释释与吸样样。操作时，应应特别注注意每次次吸液前前必须使使稀释液液充分混混匀（吸吸管反复复吹吸数数次或充充分震荡荡），以以使菌体体充分均均匀分散散，降低低测定误误差。倾倾注琼脂脂（注皿皿）与干干燥事先先将肉汤汤琼脂融融化、置置水浴中中，备用用当供供试液及及各级稀稀释液均均注入平平皿后，以以上述琼琼脂倾注注入平皿皿，每皿约，随即即转动平平皿，使使样液与与琼脂混混匀后置置水平台台上待凝凝。干燥燥琼脂凝凝固后，在在净化条条件下开开盖倒置置或换灭灭菌的陶陶瓦盖，使平板干干燥，减减少平板板表面的的水分，防防止菌落落蔓延生生长。干干

21、燥时间间一般在在小时时左右，干干燥时间间计入培培养时限限。将将上述平平板倒置置于培养箱箱中，培培养小时时。菌落落计数细细菌菌落落是个个菌细胞胞或菌细细胞团在在局限位位置上，经经一定条条件繁殖殖成肉眼眼可见的的细菌群群体。由由于细菌菌种类繁繁多，形形成菌落落大小、形形状、色色泽、透透明度等等皆因种种而异，差差别甚大大。计数数时一般般用透射射光于平平板背面面或正面面仔细观观察。不不要漏计计琼脂层层内和平平板边缘缘生长的的菌落。并并须注意意细菌菌菌落与药药渣或培培养基的的沉淀物物，酵母母菌及霉霉菌菌落落的区别别。必要要时，用用显微镜镜鉴别。用用肉眼直直接计数数、标记记或在菌菌落计数数器上点点计，然然

22、后用倍放大大镜检查查，有否否遗漏。若若平板上上有个个或个个以上的的菌落重重叠，可可分辨时时仍以个或个以上上菌落计计数。平平板上有有片状菌菌落或花花斑样菌菌落蔓延延生长以以及平板板受到污污染的情情况，该该平板计计数无效效。计计算各稀稀释级平平均平板板菌落数数。当用用一稀释释级使用用个平平板时，应应采用个平板板菌落数数的均值值为平均均平板菌菌落数。若若个平平板菌落落数相差差在倍倍以上时时，该稀稀释级不不宜采用用，但不不包括个平板板菌落数数均在个以以下的情情况。注以下两两平板菌菌落数允允许幅度度、。当同同一稀释释级使用用个平平板时，应应采用个平板板菌落数数的均值值为平均均菌落数数。若其其中个个平板菌

23、菌落数与与其他个相近近的平板板菌落数数的均值值相差倍以上上时，该该平板菌菌落数不不能参与与平均，但但不包括括平板菌菌落数均均在个以下下的情况况。注以以下平平板最大大与最小小菌落数数的允许许幅度，、。菌数数报告规规则一般宜选选取平均均平板菌菌落数在在间的稀稀释级，作作为菌数数计算的的依据。若若有个个稀释级级的平均均平板菌菌落数处处在时，将将该稀释释级的平平均平板板菌落数数乘以稀稀释倍数数，为报报告菌数数。若若有个个稀释级级的平均均平板菌菌落数处处在时，先先计算两两稀释级级菌落数数的比值值。高稀释级级的平均均平板菌菌落数稀释倍倍数比值低稀释级级的平均均平板菌菌落数稀释倍倍数当比比值时，以以两级的的

24、菌落数数均值为为报告菌菌数。当比比值时，以以低稀释释级平均均平板菌菌落数乘乘以稀释释倍数为为报告菌菌数。若若有个个稀释级级的平均均平板菌菌落数均均处在时时，采用用后个个稀释级级计算级级间比值值。当比比值时，以以两级的的菌落数数的均值值为报告告菌数。当比比值时，以以低稀释释级平均均平板菌菌落数乘乘以稀释释倍数为为报告菌菌数。若若各稀释释级平均均平板菌菌落数均均在以上上，按最最高的稀稀释级的的平均平平板菌落落数乘以以稀释倍倍数为报报告菌数数，或适适当增加加稀释级级，重作作测定后后报告结结果。若若各稀释释级的平平均平板板菌落数数均不在在间，其其中一稀稀释级的的平均平平板菌落落数大于于，相邻邻稀释级级

25、的平均均平板菌菌落数又又小于时，以以最接近近或或的稀释释级平均均平板菌菌落数乘乘以稀释释倍数为为报告菌菌数。若若各稀释释级平均均平板菌菌落数均均小于时，按按最低稀稀释级的的平均平平板菌落落数乘以以稀释倍倍数为报报告菌数数。但若若应用原原液为供供试液，当当稀稀释级与与原液的的平均平平板菌落落数相等等或大于于时，应应以培养养基稀释释法测定定，按测测定结果果报告菌菌数。培养基稀稀释法：吸取供试试液（原原液或供供试液），注注入个个平皿内内（每皿皿，总总量为）。共共作份份，共个平平皿。每每皿倾注注融化并并冷至左右的的普通肉肉汤琼脂脂约，旋旋转混合合，冷凝凝后按规规定培养养温度与与时限培培养、计计数。将每

26、注入个平板板的菌落落计数结结果合并并为每菌落落数，共共得组组数据。取取组数数据平均均值乘稀稀释倍数数，为报报告菌数数。若若各稀释释级的平平均平板板菌落数数均无菌菌落生长长或测定定数在个以以下时，报报告菌数数为个。表细菌菌数报告告规则举举例供供试品稀稀释倍数数级间报告数数规则原液菌落数数比比值书写或或或或或不可计计或不可计计或或或或或报告告数书写写菌菌落数在在个以内内时，按按实测数数书写报报告。菌菌落数大大于时，取取二位有有效数字字，第三三位数按按有效数数字处理理规则处处理，为为简便计计，也可可用的指数数报告。霉菌和酵酵母菌数数测定霉菌和酵酵母菌数数是指规规定单位位非规定定灭菌药药品制剂剂中污染

27、染的霉菌菌和酵母母菌的活活菌数量量。霉菌和酵酵母菌广广泛分布布于自然然界，土土壤、空空气及水水中都有有它们的的菌体及及孢子存存在。因因而在药药品生产产、贮藏藏等各个个环节均均可污染染药品，以以致引起起药品变变质，危危害人体体健康。有有些霉菌菌毒素也也是重要要的致癌癌物质。霉菌和酵酵母菌数数是判定定药品受受到污染染程度的的标志之之一，也也是对药药品原料料、生产产工艺、生生产环境境以及操操作人员员卫生状状况进行行卫生学学评价的的综合依依据之一一。霉菌和酵酵母菌种种属繁多多，采用用一种培培养基和和培养条条件，不不可能适适合所有有霉菌和和酵母菌菌的生长长繁殖。故故本法测测定结果果只能是是在一定定条件下

28、下平板生生长的霉霉菌和酵酵母菌菌菌落数。本本法规定定，一般般制剂用用虎红琼琼脂作霉霉菌数测测定（液液体制剂剂包括酵酵母菌数数）。但但含蜂蜜蜜或王浆浆的合剂剂另以酵酵母膏，蛋蛋白胨、葡葡萄糖（）琼琼脂作酵酵母菌数数测定，而而霉菌数数测定仍仍用虎红红琼脂。培养养基、试试剂磷酸酸盐缓冲冲液（）（附附录二）生生理盐水水（附录录二）琼琼脂培养养基（附附录三）虎虎红琼脂脂培养基基（附录录三）检验验程序 ? 供试品品供供试液供试液液供试试液 ? 合剂（含含蜂蜜或或王浆者者）滴眼剂剂平皿个个平皿个个平皿个个平皿个个虎红琼琼脂，琼琼脂（含蜂蜂蜜或王王浆的合合剂用）注注皿培养小时时菌落计计数报告操作作步骤供供试液

29、的的制备（总总则）与与稀释，按按细菌数数测定项项下的方方法进行行。稀释释级一般般采用级。合合剂（含含蜂蜜或或王浆者者）和滴滴眼剂可可用原液液作第级供试试液，分分别在作作倍倍递增稀稀释的同同时，即即可取该该稀释级级的吸管管吸取稀稀释液于于灭菌平平皿内，每每个稀释释级个平平皿。各各稀释液液注入平平皿后，应应及时将将融化并并冷至左右的的虎红琼琼脂培养养基（如如供试品品为含蜂蜂蜜或王王浆的合合剂，加加用琼脂脂培养基基测定酵酵母菌数数）约倾注平平皿内，摇摇匀待凝凝。凝凝固后，置置培养箱箱内，一一般培养养小时时，如有有可疑，可可标记后后适当延延长培养养时间。菌落落计数方方法菌菌落形态态霉菌菌菌落形形态：具

30、具有放射射状或树树状分枝枝的菌丝丝是霉菌菌菌落的的特征。初初形成时时，多无无色透明明，有明明显的折折光性，在在较暗的的背景下下，以透透射光观观察，易易于识别别。少数数生长在在琼脂表表面的菌菌落，初初起时，似似为小小块水迹迹，需借借助暗反反射光才才能看清清。成熟熟的霉菌菌菌落多多数有各各种颜色色的孢子子形成，随随种而异异，极易易判定。酵母母菌菌落落形态：在虎红红琼脂平平板上，多多数为圆圆形凸起起，边缘缘整齐，表表面光滑滑湿润，呈呈不透明明乳脂状状，乳白白色或粉粉红色。少少数表面面粗糙或或皱褶，有有的菌落落周边呈呈细分枝枝状。位位于琼脂脂内的菌菌落，可可呈铁饼饼形、三三角形及及多角形形。菌落落外观

31、与与细菌菌菌落不易易区别时时，应挑挑取菌落落，用水水制片，置置高倍显显微镜下下观察，其其细胞个个体比细细菌大数数倍，多多为圆形形或卵圆圆形，绝绝大多数数为出芽芽繁殖。当当平板内内酵母菌菌菌落甚甚多时，常常有酒香香气。在琼脂平平板上的的菌落与与虎红平平板上的的形态相相似，但但稍大，多多数为乳乳白色。菌菌落计数数：一般般在平板板背面用用肉眼直直接点数数，必要要时用放放大镜检检查，以防遗漏漏。若有有根霉或或毛霉蔓蔓延生长长时，为为避免影影响其它它霉菌和和酵母菌菌计数，应应及时将将平板取取出计数数或从平平板背面面观察霉霉菌生长长中心点点或霉菌菌蔓延生生长区域域来计数数。固体体制剂仅仅计数霉霉菌菌落落；

32、液体体制剂应应计数霉霉菌菌落落和酵母母菌菌落落的总数数；含王王浆或蜂蜂蜜的合合剂则应应将虎红红平板上上的霉菌菌数加上上平板上上的酵母母菌数为为霉菌和和酵母菌菌总数，计计算各稀稀释级的的平均平平板菌落落数。菌数数报告规规则选选择菌落落数在之之间的稀稀释级平平板计数数，以该该稀释级级的平均均平板菌菌落数乘乘稀释倍倍数作为为报告菌菌数。若若邻近的的个稀稀释级平平均平板板菌落数数均在之之间，计计算级间间比值。当当比值时，以以两级菌菌落数的的平均值值为报告告菌数；比值时，按按低稀释释级平均均菌落数数乘稀释释倍数为为报告菌菌数。各各稀释级级平均菌菌落数均均不足时，以以最低稀稀释级平平均菌落落数乘稀稀释倍数

33、数为报告告菌数。菌数数报告的的书写固固体制剂剂报告霉霉菌数；液体制制剂及半半固体制制剂报告告霉菌和和酵母菌菌的总数数。菌菌数报告告的书写写参照细细菌数测测定。眼眼科用药药各稀释释级（含含原液）均均未生长长菌落时时，报告告“未检出出”。大肠杆菌菌检验法法大肠杆菌菌为肠杆杆菌科埃埃希氏菌菌属细菌菌，是人人和温血血动物肠肠道内的的常住菌菌，随粪粪便排出出体外，可可直接或或间接污污染药品品及药品品生产的的各个环环节。药药品中检检出大肠肠杆菌表表明该样样品已受受到粪便便污染，服服用后有有可能被被粪便中中存在的的肠道致致病菌或或寄生虫虫卵等病病原体感感染。因因此，大大肠杆菌菌被列为为粪便污污染指示示菌，是

34、是非规定定灭菌口口服药品品的常规规必检项项目。培养养基、试试剂普普通肉汤汤培养基基（附录录三）胆胆盐乳糖糖（）增菌菌液（附附录三）乳乳糖发酵酵管（附附录三）或或乳乳糖发酵酵管（附附录三）蛋蛋白胨水水培养基基（附录录三）磷磷酸盐葡葡萄糖蛋蛋白胨水水培养基基（附录录三）西西蒙氏柠柠檬酸盐盐培养基基（附录录三）伊伊红美蓝蓝（）琼琼脂（附附录三）麦麦康凯琼琼脂（附附录三）柯柯凡克试试剂（附附录二）甲基红红指示剂剂（附录录二）试剂（附附录二）革兰氏氏染色液液（附录录二）检验验程序供试品品供试液液增增菌液小时或麦康康凯琼脂脂小时疑似菌落落生长无无菌落生生长普通肉肉汤琼脂脂斜面报告告小小时革镜乳靛甲柠兰檬氏基基酸染试盐色检糖质红验验小小时报告操作作步骤增增菌培养养取供试试液（总总则），加入入备妥的的增菌菌液内，置置培养小时时。增菌菌液呈现现混浊。液液面可见见或未见见气泡都都表明有有菌生长长，如未未见明显显混浊，可可延长增增菌培养养时间至至小小时。分分离培养养将上述述增菌培培养液轻轻微摇动动，以接接种环沾沾取环划划线接种