国家大学生创新性实验计划申请表1-湖南师范大学开放实验项10283.docx

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1、湖南师范大学“国家大学生创新性实验计划”项目申请表 20077-20008 年年 1 学期项目名称利用转基因因斑马鱼研研究人RMMND5AA基因的心脏脏功能个人申请 团队申请 团队名称RMND55A基因心心脏功能研研究小组申请经费200000元起止时间2007 年 11 月 至 20088 年 11 月申请人或团团队姓名潘旭明王沁陈晓胡雪晴蔡娟年级2005级级2005级级2005级级2005级级2005级级专业生物基地生物基地生物基地生物基地生物基地联系人陈晓所在院、专专业生科院生物基地联系电话1346776191157EmaillChenxxiao11620导师吴秀山职务/职称称院长/教授授

2、联系电话88727780EmaillXiushhanwuu20033yahhoo.ccom.ccn计划时数100建议学分2(每人)主体设备斑马鱼养殖殖系统注射仪显微镜离心机消耗材料经费预算种类斑马鱼饲料料DNA试剂剂盒核酸内切酶酶原位杂交试试剂盒抗体其他试剂测序用量2公斤1个4种1个4种10种10次经费（元）100150015002500800045001900总计（元）200000申请理由（包包括自身具具备的知识识条件：自自己的特长长、兴趣等等）我们团队的的每一个成成员都对生生命科学充充满着浓厚厚的兴趣，总总以极大的的热情去探探索未知的的生命之谜谜。经过两两年多的专专业学习，我我们对生命命科

3、学的基基础知识有有了一定的的了解，对对其各个领域也也有所涉猎猎。怀着对对心脏发育育的共同兴兴趣，我们们组建了RRMND5AA基因心脏脏功能研究究小组，经经过大家的的仔细思考考研究，吴吴秀山教授授的悉心指指导，我们们决定借助助心脏发育育实验室利利用转基因因斑马鱼研研究人的RRMND55A基因。作为生物基基地专业的的学生，我我们已经具具备遗传学学、分子生生物学、发发育学等方方面的基本本知识，并并掌握了相相关的基本本实验操作作技术。五五位成员皆皆能吃苦耐耐劳，意志志坚强，品品学兼优，善于思考，有创新意识。其中两人曾分别获专业一等和二等奖学金，四人有多种学生干部经历，有较强的分析问题、处理问题的能力和

4、沟通协调能力。一人在心脏发育实验室已经做过三个多月的前期准备工作，并已熟练掌握质粒载体构建，原位杂交，免疫共沉淀等实验方法和技巧。一人曾在中科院生物物理所感染与免疫中心，学习过基础实验方法，基本功扎实。总之，团队构建合理，人员之间经过长期共同实习，配合默契，具备了一定的科学研究能力。我们所研究究的RMNND5A基因是是一个功能能未知的新新基因，主主要在心脏脏和骨骼肌肌中表达，这这个实验室室在前期曾曾采用RNNA干扰技技术，抑制制该基因表表达，使得得斑马鱼围围心腔扩大大。我们计计划建立一一个该基因因的转基因因斑马鱼稳稳定系，来来研究其功功能，此方方法将会在在该基因的的进一步研研究上有很很大优势。

5、经经过前期准准备，目前前实验室已已具备我们们开展研究究所需的RRMND55A基因，ccmlc22心脏启动动子，pllres22-egffp质粒载载体。项目创新点及方案设计项目创新点点：1 RMND55A作为人人类一个新新基因，主主要在心脏脏与骨骼肌肌中表达，可可能与心脏脏发育相关关，而目前前还没有对对它的功能能进行专门门的研究。2 首次利用斑斑马鱼作为为模式动物物研究RMMND5AA这个基因因的功能。3 该研究有可可能从生物物整体水平平上，阐明明该基因在在心脏中的的功能。利用转基因因斑马鱼研研究人RMMND5AA基因的功功能基本方案：1 插入心脏启启动子cmmlc2于于plrees2-eegf

6、p质质粒载体，构构建重组质质粒。2 将RMNDD5A基因插插入重组质质粒多克隆隆位点，连连入载体。3 将cmlcc2-RMMND5AA-irees-eggfp质粒粒片段切下下，纯化回回收。4 将前一步所所得片段注注入二细胞胞期或四细细胞期的斑斑马鱼受精精卵中，制制备转基因因个体。5 观察筛选具具有绿色荧荧光蛋白的的个体。6 筛选纯合体体后代。7 检测心脏解解剖结构等等相关指标标。8 分析试验数数据得出结结论。（详详细附后）预期成果1成功构构建重组质质粒，并使使用cmllc2-RRMND55A-irres-eegfp质质粒片断，构构建转基因因斑马鱼稳稳定系，为为进一步相相关研究打打下基础。2通过检检测转基因因斑马鱼稳稳定系，证证明RMNND5A基因与与心脏发育育的重要关关系，探讨讨该基因的的心脏功能能，进一步步弄清心脏脏发育机制制，为心脏脏病的治疗疗做出贡献献。3团队的的每一成员员都能通过过这次活动动，巩固专专业知识，提提高实验技技能，培养养创新能力力和科研素素质。实验室意 见 主任签字： 年 月 日日导师意见签名： 年年 月 日学 院工作组意 见 签签字盖章： 年 月 日日学校意见签名盖章： 年年 月 日