饲料营养价值评定研究方法152170.docx
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1、第三章 饲料营养价值评定饲料营养价价值是指饲饲料本身所所含营养分分以及这些些营养分被被动物利用用后所产生生的营养效效果。饲料料中所含有有的营养成成分是动物物维持生命命活动和生生产的物质质基础,一一种饲料或或饲粮含的的营养分越越多、而这这些养分又又能大部分分被动物利利用的话,这这种饲料的的营养价值值就高,反反之,若饲饲料或饲粮粮所含营养养分低、或或虽营养分分含量高,但但能被动物物利用的少少,则其营营养价值就就低。动物物的组织及及体外产品品都是动物物摄取的饲饲料营养物物质在机体体内代谢与与转化的结结果(产物物),或者者说是饲料料养分在动动物体内的的沉积。饲饲料营养价价值的评定定也就必须须依据饲料料
2、中的营养养物质含量量和饲料中中营养物质质在动物体体内的营养养效果,定定量分析饲饲料的营养养价值。本章将主要要讨论饲料料营养价值值的评定方方法、饲料料能量和蛋蛋白质营养养价值的评评定以及维维生素和矿矿物元素营营养价值的的评定。第一节 饲料营养养价值的评评定方法近一个世纪纪以来,饲饲料营养价价值主要通通过化学分分析、消化化试验、代代谢试验、平平衡试验和和饲养试验验来评定。各各国学者对对评定方法法进行了大大量的研究究和改进,已已使饲料营营养价值的的评定成为为许多营养养实验室的的常规工作作之一。一、化学分分析(一)分析析用样品的的采集与制制备 样样品采集是是饲料营养养价值评定定工作中最最重要的一一步,
3、采集集的样品必必须具有代代表性,即即代表全部部被检物质质的平均水水平。否则则,即使实实验室分析析的仪器和和方法先进进、科学,也也不能得出出科学、公公证和实用用的结果。饲料样本的的制备在于于确保样品品十分均匀匀,在分析析时,取任任何部分都都能代表全全部被检测测物质的成成分。根据据被检物质质的性质和和检测项目目要求,可可以用摇动动、搅拌、切切碎、研磨磨或捣碎等等方法进行行。互不相相溶的液体体,分离后后分别取样样。(二)饲料料养分的表表示 百百分数(%):是最最为常用的的表示方法法,即表示示饲料中某某养分在饲饲料中的重重量百分比比。主要用用以表示概概略养分、常常量元素、氨氨基酸的含含量。mg/kgg
4、:通常用用以表示微微量元素、水水溶性维生生素等养分分(有时还还用g/kgg)。IU(国际际单位):常用以表表示脂溶性性维生素等等在饲料中中的含量。CIU(鸡鸡国际单位位,chiickenn intternaationnal uunit)。饲料的存在在状态不同同,其养分分含量有很很大差异。因因此饲料营营养价值经经常用3种种存在状态态来表示:原样基础:有时可能能是鲜样基基础或潮湿湿基础,有有时也可能能是风干基基础。原样样基础的水水分变化很很大,不便便于进行饲饲料间的比比较。风干基础:指空气中中自然存放放基础或自自然干燥状状态,亦称称风干状态态。该状态态下饲料水水分含量在在13%左左右。绝干基础(D
5、DM baasis):指完全无无水的状态态或1000%干物质质状态。绝绝干基础在在自然条件件下不存在在,在实践践中常将DDM含量不不一致的原原样基础或或风干基础础下的养分分含量换算算成绝干基基础,以便便于比较。(三)概略略养分分析析法 11860年年德国Weeende试验验站的Heennebberg与与Stohhmannn二人创建建了分析测测定水分、粗粗灰分、粗粗蛋白质、粗粗脂肪、粗粗纤维与无无氮浸出物物的概略养养分分析方方法。该法法测得的各各类物质,并并非化学上上某种确定定的化合物物,故也有有人称之为为“粗养分” 。尽管管这一套分分析方案还还存在某些些不足或缺缺陷,但长长期以来,这这套方法在
6、在科研和教教学中被广广泛采用,用用该分析方方案所获数数据在动物物营养与饲饲料的科研研与生产中中起到了十十分重要的的作用,因因此,一直直沿用至今今。其分析析方案见图图3-1。饲料样品 1005烘干至恒恒重 水水分干物质,DDM灰分,Ash 505烘干、灰灰化至恒重重 有机物,OOM粗蛋白质,CP粗蛋白质(CP) 凯氏定氮氮法 无氮有机物物 乙醚或石石油醚回流流浸提 粗脂肪肪(EE)碳水化合物物 稀酸酸(1.225%H22SO4和0.3113moll/L NNaOH分别别处理300min)粗纤维,CCF 无氮浸出物物,NFEE 图3-11 概略养养分分析方方法 概概略养分分分析法仅能能给出饲料料中
7、“粗养分”含量的测测定值,而而未给出“粗养分”中各种具具体营养成成分的含量量,如灰分分中各种元元素含量,粗粗纤维中各各种物质含含量等,导导致本属于于不同养分分的化合物物划分在同同一养分内内,使营养养价值的评评定不准确确。如在粗粗纤维的测测定过程中中,酸处理理会使很大大一部分半半纤维素被被溶解,使使饲料中最最不能被利利用的成分分并未完全全包括在粗粗纤维中,从从而加大了了无氮浸出出物的计算算误差。粗粗纤维并非非化学上的的一种物质质,而是几几种物质比比例不确定定的混合物物,同时也也并未将饲饲料中的这这几种物质质全部包括括在其中。(四)Vaan Sooest饲饲草分析法法(粗饲料料分析方案案) 概概略
8、养分分分析法虽在在饲料营养养价值评定定中起了十十分重要的的作用,但但它在碳水水化合物分分析方法上上的不足也也受到广泛泛批评。为为此,Vaan Sooest在在19644年首次建建立了适于于动物营养养目的的粗粗饲料洗涤涤分析程序序(见图3-2)。(五)纯养养分分析 随着动动物营养科科学的发展展和测试手手段的提高高,饲料营营养价值的的评定进一一步深入细细致,也更更趋于自动动化和快速速化。饲料料纯养分分分析项目,包包括蛋白质质中各种氨氨基酸、各各种维生素素、各种矿矿物质元素素及必需脂脂肪酸等。这这些项目的的分析需要要昂贵的精精密仪器和和先进的分分析技术。(六)近红红外分析技技术(Neear IInf
9、raared Refllectaance Specctrosscopyy, NIIRS) 用传统统的化学方方法分析饲饲料营养价价值,由于于耗时、耗耗试剂而成成本高,最最近20年年来,在一一些营养实实验室采用用了将分析析技术和统统计分析技技术联合使使用的近红红外分析技技术。这一一技术是应应用一套光光学设备和和计算机获获得样品的的数据谱,将将一套已知知分析值的的饲料样品品(通常需需要50个个样品)在在近红外仪仪上测定,然然后计算二二者之间的的回归关系系,这一关关系被输入入计算机,用用作样品测测定时的经经验公式。近近红外的波波长范围从从730nnm到25500nmm,是介于于波长更短短饲草等 3%十
10、十二烷基硫硫酸钠煮沸沸1h 中性洗涤涤可溶物,NNDS NDF 2%十六六烷基三甲甲基溴化铵铵煮沸1hh 酸性性洗涤可溶溶物,ADDS ADF 72%H2SO4 2030处理3hh 水水解液(纤纤维素)ADL 5000 2h 木质素灰分图 3-22 Vann Soesst粗饲料料分析方案案的可见光和和波长更长长的红外光光之间的,样样品分析时时只要读取取光学数据据就可以很很快获得分分析结果。自自19844年以来,该该方法已经经用于测定定青草粗蛋蛋白、酸性性洗涤纤维维和水溶性性淀粉,用用于测定青青贮饲料的的粗蛋白和和酸性洗涤涤纤维。目目前,国外外一些大型型企业已经经开始将NNIRS技技术用于常常规
11、营养成成分的快速速测定。使使用该方法法时,样品品的制备非非常重要,由由于样品制制备不好,颗颗粒大小变变异而造成成的分析误误差可以占占整个仪器器分析误差差的90%。(七)抗营营养因子和和毒素的分分析 在在植物性饲饲料中主要要存在的是是蛋白酶抑抑制因子、血血凝素、致致甲状腺肿肿物质、氰氰、巢菜碱碱、植酸磷磷、浓缩丹丹宁、黄曲曲霉毒素和和生物碱及及动物性饲饲料中的病病原微生物物等抗营养养因子,其其分析方法法一般都很很专一,有有些还需要要精密仪器器。二、消化试试验饲料进入动动物消化道道后,经机机械的、化化学的及生生物学的作作用后,大大分子的饲饲料颗粒被被逐渐降解解为简单的的分子,并并为动物肠肠道所吸收
12、收,这就是是动物的消消化过程。在在实践中通通常用消化化率来表示示饲料养分分被消化的的程度及动动物对养分分的消化能能力。动物食入的的某饲料养养分减去粪粪中排出的的该养分,即即称可消化化养分。那那么消化率率就是指饲饲料某养分分的可消化化养分占饲饲料中该养养分总量的的百分率,可可用公式表表示为:某养分的消消化率(%) (31)但是按以上上方法测得得的养分消消化率,严严格地说应应称为表观观消化率。这这是由于粪粪中所排出出的养分并并非全部属属于饲料本本身未被消消化吸收部部分,还有有一部分是是来自消化化道本身的的产物,它它包括消化化器官所分分泌的消化化液的残余余、消化道道粘膜及上上皮细胞脱脱落的残余余和消
13、化道道微生物残残体及产物物等,这些些产物常被被称为(粪粪)代谢性性产物(mmetabbolicc feccal pproduucts, MFPP)。那么么真(实)消消化率的概概念可用以以下公式表表示:某养分的真真实消化率率() (332)显然,从理理论上讲,同同一饲料养养分的表观观消化率总总是低于其其真实消化化率。当然然用真消化化率表示饲饲料养分的的消化程度度(评定饲饲料)比用用表观消化化率更真实实、可靠。但但对于许多多的养分来来说,要准准确收集与与测定试验验动物MFFP的养分分是非常困困难的,因因此,用表表现消化率率来评定饲饲料的消化化性能仍被被普遍采用用。根据试验所所使用的条条件,消化化试
14、验可分分为体内消消化试验(in vivo)、尼龙袋消化试验(nylon bag technique)和离体消化试验 (in vitro)。根据被测定定饲料种类类,消化试试验分为直直接法与间间接法。能能独立构成成动物饲粮粮的饲料,如如混合饲料料,反刍动动物的干草草、青草等等可用直接接法测定;而不能单单独构成饲饲粮的单一一饲料则采采用间接法法。间接法法需做2次次消化试验验才能计算算出被测饲饲料的养分分消化率。根据收集方方法不同消消化试验又又可分为全全收粪法和和指示剂法法。(一)体内内消化试验验1.全收粪粪法 在在试验期间间精确计量量饲料采食食量;全部部收集试验验动物粪便便并准确计计量。有代代表性地
15、采采取饲料与与粪样并准准确分析。使使用全收粪粪法测定消消化率时,收收粪设备有有多种:最最简单的是是粪袋,适适于大型草草食动物消消化试验收收粪。猪和和家禽有专专用消化试试验栏或笼笼。 栏栏式要求水水磨石地面面,笼式多多为钢质结结构;鱼类类消化试验验另有特殊殊设备。应选择生长长发育、营营养状况、食食欲、体质质均正常的的健康动物物,为了便便于粪尿分分离,哺乳乳动物一般般应选雄性性。同时要要求动物的的品种、年年龄、体重重、血缘关关系和发育育阶段基本本一致。评评定一种饲饲料需动物物36头(只只)。试验日粮应应参照动物物的营养需需要,按照照试验设计计要求配制制。试验所所需饲料总总量按动物物采食量与与试验天
16、数数估算,并并一次配好好,再按每每天所需数数量分装成成包,备试试验时使用用,同时应应采样,在在实验室制制成分析样样品供饲料料营养成分分分析用。消化试验全全期分为预预试期和正正试期。预预试期的工工作包括:将选好的的试验动物物关进消化化试验笼中中,单笼饲饲养,饲喂喂待测饲粮粮(如待测测饲粮有适适应性等问问题则先经经过一段时时间的过渡渡),并注注意观察试试验动物的的采食习性性、排粪情情况及其他他行为活动动。预试期期的长短,因因动物而异异(动物消消化道内食食糜的排空空速度)。通通过预试后后,动物预预试前采食食的其他饲饲料的食糜糜残渣应从从消化道排排尽。为了了保证这一一点,对不不同动物预预试期的长长短作
17、出如如下规定:牛、水牛牛、绵羊 10d;哺乳期动动物 4dd;猪(448月龄龄)6d;肉食性动动物3d。在在预试期的的最后3dd应定量(准准确)饲喂喂待测料。在在预试期间间应作好正正试期的一一切准备工工作。正试试期的任务务是按预试试期末确定定的喂量准准确定量饲饲喂;全部部收集各试试验动物正正试期的排排粪,按比比例取样保保存(保存存期间注意意防腐)。待待正试期结结束时,将将各头试验验动物每天天的粪样混混合在一起起干燥制成成风干样以以备分析。从从理论上讲讲,正试期期越长,越越准确,但但由于人力力、物力的的限制,正正试期不可可能太长,一一般为:牛牛、羊、 10d(哺哺乳期犊牛牛 4d);猪(48月龄
18、)55d;肉食食动物 5d。2指示剂剂法(稳定定物质法) 为了简简化消化试试验繁锁的的收粪手段段,Wieepf(11874)曾采用粗粗饲料中所所含的不被被动物消化化吸收的二二氧化硅为为内源指示示剂,Ebbin(11918) 又采用用了用三氧氧化二铬(Cr2O3)为外源指示剂来测定饲料养分的消化率。其原理是:假定指示剂(稳定物质)通过家畜消化道后能完全从粪中排出(即完全不被吸收),从而通过饲料与粪中养分与指示剂含量的变化即可计算出养分的消化率,其计算公式为:饲料养分消消化率()1000- (33)常用指示剂剂包括内源源指示剂和和外源指示示剂,前者者有SiOO2、木质素素、酸不溶溶灰分(AAIA,
19、AAcid Insoolublle Assh)等。较较为常用的的是AIAA,即2mmol/LL(或4mool/L)盐盐酸不溶的的灰分。后后者有Crr2O3,Fe2O3,Ti2O3(钛),BBaSO44等。对指示剂回回收率的研研究表明:没有一种种稳定物质质的回收率率能真正达达100%。多数研研究者认为为Cr2O3较为理想想,回收率率可达988%。因此此目前常用用的指示剂剂是Cr2O3和AIAA。外源指指示剂的一一般添加量量为0.22%1.0%。如添加加太少,难难以准确测测定,对回回收率影响响较大,但但添加太多多又可能影影响动物对对养分的消消化(注意意准确、均均匀的掺和和)。粪样的采集集与制备:应
20、采集未未受其它物物质污染(如如尿)的粪粪便,一般般应每天采采集3次,采采集的总量量一般不应应少于总排排粪量的335%。烘烘干混匀制制成分析样样,待测定定养分和指指示剂含量量。3间接法法 对于于不能单独独用于饲喂喂动物的饲饲料,其消消化率测定定使用间接接法。它需需要经过22次消化试试验。第一一次测定基基础日粮的的养分消化化率;第二二次试验测测定由800%500%的基础础饲粮和220%550%待测测饲料构成成的新日粮粮的养分消消化率。 基基本假定:基础日粮粮养分的消消化率在22次试验中中保持不变变。营养分分的消化率率具有可加加性。 在以上上基本假定定成立的情情况下,通通过2次消消化试验便便可按如下
21、下公式计算算出待测饲饲料养分消消化率: 待测饲料料养分消化化率(DFF,%)DB+ (34)式中DB和和DT分别别表示基础础日粮与新新日粮养分分的消化率率; f表示新日日粮养分中中待测饲料料养分所占占的比例。 注注意事项:本法是在在假定基础础饲料养分分消化率在在两次测定定中保持完完全一致的的条件下实实现,但实实际上1000%的不不变是不可可能的(饲饲料间的互互作及其他他条件的影影响)。为为了保证测测定结果的的相对准确确,就应保保持基础饲饲粮养分消消化率的稳稳定。因此此须注意以以下几个方方面:(1)基础础饲粮应是是营养平衡衡的配合饲饲料(应符符合动物营营养需要),且且基础饲粮粮中含有约约10%的
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