高三复习细胞工程ppt课件.ppt

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1、细胞工程细胞工程最新考纲最新考纲1.植物的组织培养植物的组织培养()。2.动物细胞培养与体细胞克隆动物细胞培养与体细胞克隆()。3.细胞融合与单克隆抗体细胞融合与单克隆抗体()。考点一植物细胞工程考点一植物细胞工程1.细胞工程细胞工程(1)操作水平：操作水平：。(2)目的：按照人的意愿来改变细胞内的目的：按照人的意愿来改变细胞内的 或获得或获得。细胞水平或细胞器水平细胞水平或细胞器水平遗传物质遗传物质细胞产品细胞产品2.植物细胞的全能性植物细胞的全能性(1)概念：具有某种生物全部概念：具有某种生物全部的的任任何何一一个个细细胞胞，都都具有发育成具有发育成的潜能。的潜能。(2)原理：细胞内含有本

2、物种的原理：细胞内含有本物种的。(3)全能性表达条件：具有完整的细胞结构，处于全能性表达条件：具有完整的细胞结构，处于状状态态，提供一定的提供一定的和其他适宜外界条件。和其他适宜外界条件。遗传信息遗传信息完整生物体完整生物体全部遗传信息全部遗传信息离体离体营养、激素营养、激素3.植物组织培养技术植物组织培养技术(1)原理：植物细胞具有原理：植物细胞具有。(2)过程：过程：全能性全能性人工种子人工种子脱分化脱分化再分化再分化4.植物体细胞杂交技术植物体细胞杂交技术(1)概念：将概念：将 的植物体细胞，在一定条件下融合成的植物体细胞，在一定条件下融合成，并把杂种细胞培育成，并把杂种细胞培育成的技术

3、。的技术。(2)原理：体细胞杂交利用了细胞膜的原理：体细胞杂交利用了细胞膜的，杂杂种种细细胞胞培培育成杂种植株利用了植物细胞的育成杂种植株利用了植物细胞的。不同种不同种杂种细胞杂种细胞新的植物体新的植物体流动性流动性全能性全能性(3)过程过程(4)意义：克服不同种生物远缘杂交的意义：克服不同种生物远缘杂交的性。性。纤维素酶和果胶纤维素酶和果胶原生质体原生质体物理物理PEG细胞壁细胞壁不亲和不亲和5.植物细胞工程的实际应用植物细胞工程的实际应用(1)植物繁殖的新途径植物繁殖的新途径微型繁殖：用于快速繁殖优良品种的植物组织培养技术。微型繁殖：用于快速繁殖优良品种的植物组织培养技术。作物脱毒技术：选

4、取作物作物脱毒技术：选取作物(如如茎茎尖尖)进进行行组组织织培培养，获得脱毒苗的技术。养，获得脱毒苗的技术。人工种子：以植物组织培养得到的人工种子：以植物组织培养得到的、不不定定芽芽、顶顶芽和腋芽等为材料，经过人工薄膜包装得到的种子。芽和腋芽等为材料，经过人工薄膜包装得到的种子。遗传特性遗传特性无毒组织无毒组织胚状体胚状体(2)作物新品种的培育作物新品种的培育单倍体育种单倍体育种a.实质：花药离体培养过程就是植物组织培养过程。实质：花药离体培养过程就是植物组织培养过程。c.优点：后代不发生性状分离，都是优点：后代不发生性状分离，都是，能能够够稳稳定定遗遗传传，明显明显。单倍体幼苗单倍体幼苗纯合

5、子纯合子纯合子纯合子缩短了育种年限缩短了育种年限突突变变体体的的利利用用：在在植植物物组组织织培培养养过过程程中中，由由于于培培养养细细胞胞一一直直处处于于不不断断的的分分生生状状态态，因因此此容容易易受受到到培培养养条条件件和和外外界界压压力力(如如射射线线、化化学学物物质质等等)的的影影响响而而发发生生突突变变。从从这这些些产产生生突突变变的的个个体体中中可可以以筛选出对人们有用的突变体，进而培育成筛选出对人们有用的突变体，进而培育成。(3)细胞产物的工厂化生产细胞产物的工厂化生产细胞产物：蛋白质、脂肪、糖类、药物、香料、生物碱等细胞产物：蛋白质、脂肪、糖类、药物、香料、生物碱等培养阶段：

6、培养阶段：阶段阶段技术基础：植物组织培养技术技术基础：植物组织培养技术新品种新品种愈伤组织愈伤组织(教教材材P40讨讨论论题题解解答答)人人工工种种皮皮是是保保证证包包裹裹在在其其中中的的胚胚状状体体顺顺利利生生长长成成小小植植株株的的关关键键部部分分，请请探探讨讨：人人工工种种皮皮中中应应该该具具有有的的有有效效成成分分是是什什么么？为为了了促促进进胚胚状状体体的的生生长长发发育育，我我们们还还可可以以向向人人工工种种皮中加入哪些物质？皮中加入哪些物质？提提示示针针对对植植物物种种类类和和土土壤壤等等条条件件，在在人人工工种种子子的的包包裹裹剂剂中中还还可可以以加加入入适适量量的的养养分分、

7、无无机机盐盐、有有机机碳碳源源以以及及农农药药、抗抗生生素素、有有益益菌菌等等。为为了了促促进进胚胚状状体体的的生生长长发发育育，还还可可以以向向人人工工种种皮皮中中加加入入一一些植物生长调节剂。些植物生长调节剂。1.(2013全全国国课课标标卷卷，40)甲甲、乙乙是是染染色色体体数数目目相相同同的的两两种种二二倍倍体体药药用用植植物物，甲甲含含有有效效成成分分A，乙乙含含有有效效成成分分B。某某研研究究小小组组拟拟培育同时含有培育同时含有A和和B的新型药用植物。的新型药用植物。回答下列问题：回答下列问题：(1)为为了了培培育育该该新新型型药药用用植植物物，可可取取甲甲和和乙乙的的叶叶片片，先

8、先用用_酶酶 和和 _酶酶 去去 除除 细细 胞胞 壁壁，获获 得得 具具 有有 活活 力力 的的_，再再用用化化学学诱诱导导剂剂诱诱导导二二者者融融合合。形形成成的的融融合合细细胞胞进进一一步步培培养养形形成成_组组织织，然然后后经经过过_形形成成完完整整的的杂杂种植株。这种培育技术称为种植株。这种培育技术称为_。(2)上上述述杂杂种种植植株株属属于于多多倍倍体体，多多倍倍体体是是指指_。假假设设甲甲与与乙乙有有性性杂杂交交的的后后代代是是不不育育的的，而而上上述述杂杂种种植植株株是是可可育育的的，造成这种差异的原因是造成这种差异的原因是_。(3)这这种种杂杂种种植植株株可可通通过过制制作作

9、人人工工种种子子的的方方法法来来大大量量繁繁殖殖。经经植植物物组组织织培培养养得得到到的的_等等材材料料用用人人工工薄膜包装后可得到人工种子。薄膜包装后可得到人工种子。答答案案(1)纤纤维维素素果果胶胶原原生生质质体体愈愈伤伤再再分分化化(分分化化)植植物物体体细细胞胞杂杂交交技技术术(2)体体细细胞胞中中含含有有三三个个或或三三个个以以上上染染色色体体组组的的个个体体在在减减数数分分裂裂过过程程中中，前前者者同同源源染染色色体体联联会会异异常常，而而后后者者同同源源染色体联会正常染色体联会正常(3)胚状体、不定芽、顶芽、腋芽胚状体、不定芽、顶芽、腋芽2.(2016江江西西九九江江七七校校第第

10、一一次次联联考考，29)根根据据下下面面植植物物体体细细胞胞杂杂交交技术流程图，回答相关问题。技术流程图，回答相关问题。(1)运运用用传传统统有有性性杂杂交交(即即用用番番茄茄、马马铃铃薯薯杂杂交交)自自然然状状态态下下不不能能得到杂种植株，原因是得到杂种植株，原因是_。(2)在在利利用用杂杂种种细细胞胞培培育育杂杂种种植植株株的的过过程程中中，依依据据的的原原理理是是_，其其中中过过程程称称为为_，植植物物体体细细胞胞融融合合完完成的标志是成的标志是_。(3)已已知知番番茄茄、马马铃铃薯薯分分别别为为四四倍倍体体、二二倍倍体体，则则“番番茄茄马马铃铃薯薯”属于属于_倍体植株。倍体植株。(4)

11、已已知知柴柴油油树树种种子子含含有有的的柴柴油油是是植植物物细细胞胞的的代代谢谢产产物物，可可用用植植物物组组织织培培养养来来实实现现柴柴油油的的工工业业化化生生产产。若若利利用用此此技技术术，将将柴柴油油树树细细胞培养到胞培养到_阶段即可阶段即可(填字母编号填字母编号)。(5)若若培培育育抗抗虫虫棉棉，将将抗抗虫虫基基因因通通过过适适当当的的途途径径导导入入棉棉花花受受精精卵卵，然后进行组织培养，该过程相当于然后进行组织培养，该过程相当于_(填字母编号填字母编号)。(6)人人工工种种子子是是由由发发育育到到_过过程程(填填字字母母编编号号)的的结结构构包包裹裹上上人工种皮制备的。人工种皮制备

12、的。答案答案(1)不同种的植物存在生殖隔离不同种的植物存在生殖隔离(2)细胞的全能性原生质体融合产生新的细胞壁细胞的全能性原生质体融合产生新的细胞壁(3)六六(4)e(5)(6)f1.植物组织培养的关键植物组织培养的关键(1)条条件件：离离体体，一一定定营营养养物物质质，激激素素(生生长长素素、细细胞胞分分裂裂素素)等。等。(2)培培养养基基状状态态：固固体体培培养养基基(需需再再分分化化生生根根培培养养基基及及生生芽芽培培养基养基)(3)体内细胞未表现全能性的原因：基因的表达具有选择性。体内细胞未表现全能性的原因：基因的表达具有选择性。(4)光照的应用光照的应用脱脱分分化化阶阶段段不不需需要

13、要给给予予光光照照，再再分分化化阶阶段段需需要要给给予予光光照照，以利于叶绿素的形成。以利于叶绿素的形成。2.植物激素在植物组织培养中的作用植物激素在植物组织培养中的作用生长素生长素/细胞分裂素的比值细胞分裂素的比值作用效果作用效果比值高时比值高时促进根分化、抑制芽形成促进根分化、抑制芽形成比值低时比值低时促进芽分化、抑制根形成促进芽分化、抑制根形成比值适中比值适中促进愈伤组织形成促进愈伤组织形成3.杂种植物遗传物质的变化杂种植物遗传物质的变化(1)遗遗传传特特性性：杂杂种种植植株株中中含含有有两两种种植植物物的的遗遗传传物物质质，故故杂杂种植株具备两种植物的遗传特性。种植株具备两种植物的遗传

14、特性。(2)染色体组数染色体组数染色体组数两种植物体细胞内染色体组数之和。染色体组数两种植物体细胞内染色体组数之和。植植物物体体细细胞胞杂杂交交形形成成的的杂杂种种植植株株，有有几几个个染染色色体体组组就就称称为几倍体。为几倍体。若一植物细胞含有若一植物细胞含有2x条染色体，条染色体，2个染色体组，基因型为个染色体组，基因型为Aabb，另一植物细胞含有，另一植物细胞含有2y条染色体，条染色体，2个染色体组，基因个染色体组，基因型为型为ccDd，则新植株应为异源四倍体，其体细胞中染色体，则新植株应为异源四倍体，其体细胞中染色体为为(2x2y)条，条，4个染色体组，基因型为个染色体组，基因型为Aa

15、bbccDd。考点二动物细胞工程考点二动物细胞工程1.动物细胞培养动物细胞培养(1)地地位位：动动物物细细胞胞工工程程常常用用的的技技术术手手段段有有动动物物细细胞胞培培养养、动动物物细胞核移植、细胞核移植、等。其中等。其中是其他动物细胞工程技术的基础。是其他动物细胞工程技术的基础。动物细胞融合动物细胞融合动物细胞培养动物细胞培养(2)培养过程培养过程胰蛋白酶胰蛋白酶原代培养原代培养二氧化碳二氧化碳培养箱培养箱胰蛋白酶胰蛋白酶传代传代(3)培养条件培养条件营营养养：除除糖糖、氨氨基基酸酸、促促生生长长因因子子、无无机机盐盐、微微量量元元素素之之外外通通常还需加入常还需加入等一些天然成分。等一些

16、天然成分。适宜的温度：适宜的温度：36.5 0.5；适宜的；适宜的pH：7.27.4。抗生素抗生素培养液培养液血清、血浆血清、血浆细胞代谢细胞代谢2.动物体细胞克隆技术动物体细胞克隆技术(核移植技术核移植技术)(1)原理：原理：。(2)核移植分类：核移植分类：移植和体细胞核移植。移植和体细胞核移植。(3)核移植过程核移植过程(以克隆高产奶牛为例以克隆高产奶牛为例)(4)应用：应用：加速家畜加速家畜进进程程，促促进进优优良良畜畜群群繁繁育育。保护保护。生生产产医医用用蛋蛋白白。作作为为异异种种移移植植的的供供体。体。用于组织器官的移植。用于组织器官的移植。动物细胞核具有全能性动物细胞核具有全能性

17、胚胎细胞核胚胎细胞核去核去核细胞融合细胞融合移植移植遗传改良遗传改良濒危物种濒危物种3.动物细胞融合和单克隆抗体的制备动物细胞融合和单克隆抗体的制备(1)动物细胞融合动物细胞融合原理：原理：。融合方法：聚乙二醇融合方法：聚乙二醇(PEG)、电激等。、电激等。意义：突破了意义：突破了 的局限，使的局限，使成为可能，也为制造成为可能，也为制造开辟了新途径。开辟了新途径。细胞膜的流动性细胞膜的流动性灭活的病毒灭活的病毒有性杂交方法有性杂交方法远缘杂交远缘杂交单克隆抗体单克隆抗体(2)单克隆抗体单克隆抗体制备过程制备过程优点：特异性强、优点：特异性强、，可大量制备。，可大量制备。用途：作为用途：作为；

18、用于治疗疾病和；用于治疗疾病和 。杂交瘤细胞杂交瘤细胞能产生所需抗体能产生所需抗体灵敏度高灵敏度高诊断试剂诊断试剂运载药物运载药物1.进行核移植时，为何选用去核的进行核移植时，为何选用去核的“卵母细胞卵母细胞”？提提示示选选用用去去核核卵卵(母母)细细胞胞的的原原因因；卵卵(母母)细细胞胞比比较较大大，容容易易操操作作；卵卵(母母)细细胞胞细细胞胞质质多多，营营养养丰丰富富，含含有有促促进进核核全全能能性性表表达达的物质。的物质。2.(教教材材P49讨讨论论2解解答答)用用于于核核移移植植的的供供体体细细胞胞一一般般都都选选用用传传代代10代以内的细胞，想一想，这是为什么？代以内的细胞，想一想

19、，这是为什么？提提示示培培养养的的动动物物细细胞胞一一般般当当传传代代至至1050代代左左右右时时，部部分分细细胞胞核核型型可可能能会会发发生生变变化化，其其细细胞胞遗遗传传物物质质可可能能会会发发生生突突变变，而而10代代以以内内的的细细胞胞一一般般能能保保持持正正常常的的二二倍倍体体核核型型。因因此此，在在体体细细胞胞核核移移植植中中，为为了了保保证证供供体体细细胞胞正正常常的的遗遗传传基基础础，通通常常采采用用传传代代10代以内的细胞。代以内的细胞。3.图图中中a、b分分别别为为骨骨髄髄瘤瘤细细胞胞和和已已免免疫疫的的B淋淋巴巴细细胞胞，图图2为为单单克克隆抗体制备流程隆抗体制备流程(顺

20、序已被打乱顺序已被打乱)。请思考。请思考图图1图图2解读解读(1)针针对对图图1为为了了能能充充分分发发挥挥图图中中两两种种细细胞胞各各自自的的特特点点，经经特特殊殊处处理理，在在促促细细胞胞融融合合因因子子的的作作用用下下，两两种种细细胞胞发发生生融融合合，形形成成图图中中的的d细细胞胞，d细细胞胞的的特特点点是是_。由由d细细胞胞产产生生的的抗抗体与普通血清抗体相比较，具有体与普通血清抗体相比较，具有_等特点。等特点。(2)图图2中中B注射的物质是什么？其目的是什么？注射的物质是什么？其目的是什么？(3)在获取在获取C细胞时，曾筛选淘汰了哪些细胞？细胞时，曾筛选淘汰了哪些细胞？(4)请请用

21、用箭箭头头把把代代表表各各图图解解的的字字母母按按单单克克隆隆抗抗体体制制备备过过程程的的顺顺序序连连接起来。接起来。提提示示(1)既既能能无无限限增增殖殖，又又能能产产生生特特定定的的抗抗体体特特异异性性强强、灵灵敏敏度高、并可大量制备度高、并可大量制备(2)特特定定抗抗原原，刺刺激激机机体体发发生生免免疫疫应应答答，从从而而产产生生效效应应B淋淋巴巴细细胞胞(浆细胞浆细胞)。(3)未未融融合合的的细细胞胞和和同同种种细细胞胞融融合合后后形形成成的的细细胞胞(“BB”细细胞胞、“瘤瘤瘤瘤”细细胞胞)都都会会被被淘淘汰汰，只只有有融融合合的的杂杂交交瘤瘤细细胞胞(“B瘤瘤”细细胞胞)才才能能生

22、长。生长。(4)如图所示：如图所示：1.(2016全全国国课课标标卷卷，40)下下图图表表示示通通过过核核移移植植等等技技术术获获得得某某种种克隆哺乳动物克隆哺乳动物(二倍体二倍体)的流程。的流程。回答下列问题：回答下列问题：(1)图图中中A表表示示正正常常细细胞胞核核，染染色色体体数数为为2n，则则其其性性染染色色体体的的组组成成可可为为_。过过程程表表示示去去除除细细胞胞核核，该该过过程程一一般般要要在在卵卵母母细细胞胞培培养养至至适适当当时时期期再再进进行行，去去核核时时常常采采用用_的的方方法法。代表的过程是代表的过程是_。(2)经经过过多多次次传传代代后后，供供体体细细胞胞中中_的的

23、稳稳定定性性会会降降低低。因因此此，选材时必须关注传代次数。选材时必须关注传代次数。(3)若若获获得得的的克克隆隆动动物物与与供供体体动动物物性性状状不不完完全全相相同同，从从遗遗传传物物质质的的角度分析其原因是角度分析其原因是_。(4)与与克克隆隆羊羊“多多莉莉(利利)”培培养养成成功功一一样样，其其他他克克隆隆动动物物的的成成功功获获得也证明了得也证明了_。解析解析(1)提供体细胞的供体可能为雌性，也可能为雄性，因此图提供体细胞的供体可能为雌性，也可能为雄性，因此图中中A(正常细胞核正常细胞核)的性染色体组成为的性染色体组成为XX或或XY。常采用显微操作。常采用显微操作去核法来去除卵母细胞

24、的细胞核。去核法来去除卵母细胞的细胞核。过程表示将早期胚胎移入受过程表示将早期胚胎移入受体，其过程为胚胎移植。体，其过程为胚胎移植。(2)取取供供体体动动物物的的体体细细胞胞培培养养，一一般般选选用用传传代代10代代以以内内的的细细胞胞，因因为为10代代以以内内的的细细胞胞一一般般能能保保持持正正常常的的二二倍倍体体核核型型，保保证证了了供供体体细细胞胞正正常常的的遗遗传传基基础础。超超过过10代代继继续续培培养养，则则其其遗遗传传物物质质(或或核核型型)的的稳稳定定性性会会降降低低。(3)克克隆隆动动物物的的细细胞胞核核基基因因来来自自供供体体，因因此此大大部部分分性性状状与与供供体体相相同

25、同，但但细细胞胞质质基基因因来来源源于于受受体体(或或提提供供卵卵母母细细胞胞的的个个体体)，即即卵卵母母细细胞胞的的细细胞胞质质中中的的遗遗传传物物质质会会对对克克隆隆动动物物的的性性状状产产生生影影响响，这这就就决决定定了了克克隆隆动动物物的的性性状状与与供供体体不不完完全全相相同同。(4)克克隆隆动动物物的的培培育育采采用用的的是是核核移移植植技技术术，核核移移植植技技术术的的原原理理是是：已已经分化的动物体细胞核具有全能性。经分化的动物体细胞核具有全能性。答答案案(1)XX或或XY显显微微操操作作(去去核核法法)胚胚胎胎移移植植(2)遗遗传传物物质质(3)卵卵母母细细胞胞的的细细胞胞质

26、质中中的的遗遗传传物物质质会会对对克克隆隆动动物物的的性性状状产产生生影影响响(4)已经分化的动物体细胞核具有全能性已经分化的动物体细胞核具有全能性2.(2016山山东东潍潍坊坊期期末末)鼠鼠源源单单克克隆隆抗抗体体用用于于疾疾病病的的治治疗疗时时。易易发发生生不不良良反反应应，科科学学家家通通过过对对鼠鼠和和人人控控制制抗抗体体产产生生的的基基因因进进行行拼拼接接。实实现现了了对对鼠鼠源源单单克克隆隆抗抗体体的的改改造造，生生产产出出对对人人体体不不良良反反应应小、效果更好的单克隆抗体。请回答：小、效果更好的单克隆抗体。请回答：(1)鼠鼠源源单单克克隆隆抗抗体体是是将将经经过过免免疫疫的的小

27、小鼠鼠_细细胞胞与与骨骨髓髓瘤瘤细细胞胞融融合合，然然后后筛筛选选出出_的的杂杂交交瘤瘤细细胞胞，并并通通过过体体内内或或体外培养生产的抗体。体外培养生产的抗体。(2)动动物物细细胞胞融融合合常常用用_诱诱导导，细细胞胞融融合合体体现现了了细细胞胞膜膜的的_。在在体体外外培培养养杂杂交交瘤瘤细细胞胞时时，培培养养液液中中通通常常加加入入_等等天天然然成成分分，将将其其置置于于95%空空气气加加5%CO2的的气气体体环环境境中，中，CO2的作用是的作用是_。(3)基因拼接用到的工具有基因拼接用到的工具有_和和_。(4)单克隆抗体的优点是单克隆抗体的优点是_。答答案案(1)B淋淋巴巴既既能能无无限

28、限增增殖殖，又又能能产产生生所所需需抗抗体体(2)灭灭活活的的病毒病毒(聚乙二醇聚乙二醇)流动性血清流动性血清(血浆血浆)维持培养液的维持培养液的pH(3)限制性核酸内切酶限制性核酸内切酶(限制酶限制酶)DNA连接酶连接酶(4)特异性强，灵敏度高特异性强，灵敏度高(1)核核移移植植中中供供体体动动物物、提提供供卵卵母母细细胞胞的的动动物物、代代孕孕动动物物和和克克隆隆动动物物之之间间的的关关系系：克克隆隆动动物物绝绝大大部部分分性性状状与与供供体体动动物物相相同同，少少数数性性状状由由线线粒粒体体DNA控控制制的的性性状状与与提提供供卵卵母母细细胞胞的的动动物物相相同同，与代孕动物的性状无遗传

29、关系。与代孕动物的性状无遗传关系。(2)核核移移植植产产生生的的克克隆隆动动物物与与提提供供细细胞胞核核的的亲亲本本可可能能不不同同的的3个个原因：原因：克隆动物细胞质基因来源于另一个亲本，与植物组织培养不克隆动物细胞质基因来源于另一个亲本，与植物组织培养不同同(来自一个亲本来自一个亲本)，即克隆动物遗传物质来自两个亲本。，即克隆动物遗传物质来自两个亲本。在在发育过程中可能发生基因突变、染色体变异导致性状改变。发育过程中可能发生基因突变、染色体变异导致性状改变。外外界环境条件的影响引起不可遗传的变异。界环境条件的影响引起不可遗传的变异。易错易错防范清零防范清零易错清零易错清零易易错错点点1不不

30、清清楚楚动动物物细细胞胞培培养养时时，为为何何使使用用胰胰蛋蛋白白酶酶而而不不使使用胃蛋白酶用胃蛋白酶点点拨拨进进行行动动物物细细胞胞传传代代培培养养时时用用胰胰蛋蛋白白酶酶分分散散细细胞胞，说说明明细细胞胞间间的的物物质质主主要要是是蛋蛋白白质质。分分散散细细胞胞时时不不能能用用胃胃蛋蛋白白酶酶，因因为为胃胃蛋蛋白白酶酶作作用用的的适适宜宜pH约约为为1.8。胰胰蛋蛋白白酶酶作作用用的的适适宜宜pH为为7.27.8，而多数动物细胞培养的适宜，而多数动物细胞培养的适宜pH为为7.27.4。易错点易错点2混淆原代培养与传代培养混淆原代培养与传代培养点点拨拨(1)原原代代培培养养：细细胞胞悬悬液液

31、第第一一次次在在瓶瓶中中培培养养，没没有有分分瓶瓶培养之前的细胞培养。培养之前的细胞培养。(2)传传代代培培养养：原原代代培培养养的的细细胞胞生生长长、繁繁殖殖一一定定时时间间后后，由由于于空空间间不不足足或或细细胞胞密密度度过过大大导导致致接接触触抑抑制制影影响响细细胞胞的的生生长长，因因此此需需要要重重新新用用胰胰蛋蛋白白酶酶等等处处理理，进进行行分分瓶瓶扩扩大大培培养养，即即传传代代培养。培养。易易错错点点3误误认认为为动动物物细细胞胞培培养养液液中中加加入入5%CO2的的目目的的是是维维持持气体平衡或用于呼吸气体平衡或用于呼吸点点拨拨动动物物的的细细胞胞培培养养时时，需需向向培培养养液

32、液中中加加入入5%CO2(95%空空气气)，加入，加入CO2的目的是的目的是“维持培养液的维持培养液的pH”。易易错错点点4不不清清楚楚动动物物细细胞胞克克隆隆化化培培养养时时为为何何常常选选10代代以以内内的的细细胞，而胞，而“瘤细胞瘤细胞”却为却为“50代以后代以后”点点拨拨取取供供体体动动物物的的体体细细胞胞培培养养，一一般般选选用用传传至至10代代以以内内的的细细胞胞，因因为为10代代以以内内的的细细胞胞一一般般能能保保持持正正常常的的二二倍倍体体核核型型，保保证证了了供供体体细细胞胞正正常常的的遗遗传传基基础础。然然而而欲欲获获得得“无无限限增增殖殖”的的“瘤瘤细细胞胞”则则往往往往

33、在在“50代代以以后后”，其其遗遗传传物物质质已已发发生生变变化化，具具“癌变癌变”特性。特性。易错点易错点5不清楚植物脱毒苗培养时选择要求及原理不清楚植物脱毒苗培养时选择要求及原理点点拨拨由由于于植植物物分分生生区区附附近近(如如茎茎尖尖)的的病病毒毒极极少少，所所以以常常采采用茎尖组织培养技术获得脱毒苗。用茎尖组织培养技术获得脱毒苗。易易错错点点6误误认认为为植植物物组组织织培培养养均均需需“再再分分化化至至幼幼苗苗”，误误认认为为“人工种子人工种子”即平常所说的即平常所说的“种子种子”点点拨拨(1)组组织织培培养养的的目目的的不不同同，培培养养的的阶阶段段不不同同。如如：生生产产细细胞胞

34、代代谢谢产产物物，只只需需培培养养至至愈愈伤伤组组织织时时期期；生生产产人人工工种种子子，则则需需要要培培养养至至胚胚状状体体时时期期；获获得得植植株株就就需需培培养养至至幼幼苗苗时时期期。(2)人人工工种种子子是是通通过过无无性性生生殖殖(植植物物体体细细胞胞的的组组织织培培养养技技术术)形形成成的的，只只有有一一个个亲亲本本的的性性状状；自自然然种种子子是是有有性性生生殖殖的的产产物物，具有两个亲本的性状。具有两个亲本的性状。易易错错点点7不不清清楚楚为为何何选选择择M中中期期的的卵卵母母细细胞胞作作核核移移植植的的受受体体细胞细胞点拨点拨卵母细胞选择时期及原因：卵母细胞选择时期及原因：M

35、中期的卵母细胞，此中期的卵母细胞，此时具备受精能力，细胞质中合成与分裂、分化有关的物质能时具备受精能力，细胞质中合成与分裂、分化有关的物质能刺激融合后重组细胞进行分裂分化，形成重组胚胎。刺激融合后重组细胞进行分裂分化，形成重组胚胎。规范答题规范答题如如图图所所示示为为动动物物细细胞胞培培养养过过程程中中，动动物物细细胞胞增增殖殖情情况况的的变变化化曲曲线线(图中图中B、D两点表示经筛选后继续培养两点表示经筛选后继续培养)，据图回答问题。，据图回答问题。(1)图图中中_段段为为原原代代培培养养，AB段段可可能能发发生生了了_现现象象，可否使用胃蛋白酶处理使组织细胞分散开来？可否使用胃蛋白酶处理使

36、组织细胞分散开来？_。(2)动动物物细细胞胞培培养养和和植植物物组组织织培培养养过过程程中中，就就细细胞胞增增殖殖、分分化化来来说说，动动植植物物细细胞胞都都要要进进行行_，不不同同的的是是植植物物细细胞胞还还要要进进行行_。(3)动动物物细细胞胞体体外外培培养养时时，通通常常要要在在培培养养基基中中补补充充一一定定浓浓度度的的某某些些物质物质培养液中添加一定量的抗生素的目的是培养液中添加一定量的抗生素的目的是_。培养箱中充入培养箱中充入5%的的CO2气体的主要作用是气体的主要作用是_。如如图图是是血血清清对对正正常常细细胞胞和和癌癌细细胞胞培培养养影影响响的的实实验验结结果果。据据图图可可知知培培养养液液必必须须添添加加动动物物血血清清的的是是_(填填癌癌细细胞胞、正正常常细胞、癌细胞和正常细胞细胞、癌细胞和正常细胞)答卷采样答卷采样原处纠错原处纠错纠错依据纠错依据不清楚原代培养与传代培养的界限，即原代培养，不清楚原代培养与传代培养的界限，即原代培养，应为分瓶前应为分瓶前(接触抑制前接触抑制前)忽视胃蛋白酶最适忽视胃蛋白酶最适pH(1.8)与动物细胞培养液最适与动物细胞培养液最适pH(7.27.4)的差异的差异未抓住动物细胞培养与植物组织培养的最关键区未抓住动物细胞培养与植物组织培养的最关键区别别不明确不明确CO2的作用的作用