3、1菊花的组织培养.ppt

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1、专题三专题三 课题课题1 1 菊菊花的花的组织培养组织培养 指植物的离体部分（包括任何器官、指植物的离体部分（包括任何器官、组织、细胞或组织、细胞或原生质体原生质体），在人工控制的），在人工控制的培养基及环境条件培养基及环境条件（温度及光照）下，得（温度及光照）下，得以生长和以生长和分化分化成完整植株的一种无菌培养成完整植株的一种无菌培养技术。技术。又称：又称：植物离体培养植物离体培养一、植物组织培养的概念（1 1）细胞的分化）细胞的分化概念：概念：在在个体发育个体发育中，中，相同细相同细胞胞在在形态、结形态、结构构和生和生理功能上发生理功能上发生稳定性差异稳定性差异的过程的过程 .原原因：因

2、：基因选择性表达的结果基因选择性表达的结果.（2 2）细胞的）细胞的全能性全能性概念概念：细胞的全能性是指已分化的细胞具有细胞的全能性是指已分化的细胞具有发育成完整个体的潜能。发育成完整个体的潜能。原因原因：是生物体的每一个细胞都含有该物种是生物体的每一个细胞都含有该物种所特有的全套遗传物质所特有的全套遗传物质B.B.脱分化：脱分化：由由高度分化高度分化的植物器官、组织或细的植物器官、组织或细胞产生胞产生愈伤组织愈伤组织的过程，又称去分化。的过程，又称去分化。C.C.再分化：再分化：脱分化产生的愈伤组织在培养过程中脱分化产生的愈伤组织在培养过程中重新分化重新分化根或芽根或芽等器官的过程等器官的

3、过程D.D.愈伤组织愈伤组织:细胞排列疏松而无规则细胞排列疏松而无规则,是是高度液高度液泡化泡化的、成无定形状态的的、成无定形状态的薄壁细胞薄壁细胞.（3 3）植物组织培养）植物组织培养1 1、相、相关概念关概念:A.A.外植体外植体：用于用于离体离体培培养养的植物细的植物细胞、组织胞、组织或器官或器官.2、植物组织培养的基本过程二、影响植物组织培养的因素：1 1、外植体的选取、外植体的选取 不同植物的组织培养难度不同不同植物的组织培养难度不同 同一种植物的不同组织培养难度不同同一种植物的不同组织培养难度不同2、培养基的配制、培养基的配制(MS培养基培养基)大量元素：大量元素：C C、H H、

4、O O、N N、P P、K K、CaCa、MgMg、S S 微量元素：微量元素：B B、MnMn、CuCu、ZnZn、FeFe、MoMo、I I、CoCo 有机物：有机物：甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素、蔗糖等甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素、蔗糖等 植物激素：植物激素：生长素、细胞分裂素、赤霉素等生长素、细胞分裂素、赤霉素等未开花植物的茎上未开花植物的茎上部新萌生的侧枝部新萌生的侧枝3、不同植物激素使用顺序、不同植物激素使用顺序使用顺序使用顺序 实验结果实验结果 先生长素，先生长素，后细胞分裂素后细胞分裂素 有利于细胞分裂但不分化有利于细胞分裂但不分化 先细胞分裂素，先细胞分裂素，后生长素后生长素 细

5、胞既分裂也分化细胞既分裂也分化 同时使用同时使用 分化频率提高分化频率提高 4、不同植物激素使用量、不同植物激素使用量生长素生长素/细胞分裂素细胞分裂素比值比值结果结果 比值高时比值高时 促根分化，促根分化，抑芽形成抑芽形成 比值低时比值低时 促芽分化，促芽分化，抑根形成抑根形成 比值适中比值适中 促进愈伤组织生长促进愈伤组织生长 5、pH、温度、光照、温度、光照（菊花组培）（菊花组培）pH=5.8 温度控制在温度控制在1822 每日光照每日光照12h6、消毒、消毒在培养的整个过程中，都需要是一个无菌环在培养的整个过程中，都需要是一个无菌环境境制备制备MS固固体培养基体培养基外植体消毒外植体消

6、毒 接种接种 培培 养养栽栽 培培三、实验操作 移移 栽栽冲洗冲洗酒精酒精无菌水无菌水冲洗冲洗氯化汞氯化汞无菌无菌水冲洗至少三次之上水冲洗至少三次之上配制各种母液配制培配制各种母液配制培养基灭毒养基灭毒结果分析与评价结果分析与评价（一）对接种操作中污染情况的分析（一）对接种操作中污染情况的分析（二）是否完成了对植物组织的脱分化和再分化（二）是否完成了对植物组织的脱分化和再分化（三）是否进行了统计、对照与记录（三）是否进行了统计、对照与记录（四）生根苗的移栽是否合格（四）生根苗的移栽是否合格练习练习1 1、下图是植物组织培养的简略表示。据此回答：、下图是植物组织培养的简略表示。据此回答：（1 1

7、）表示表示_，它能被培养成为，它能被培养成为的根本原因的根本原因是是_。（2 2）表示表示_，它与，它与相比分化程度相比分化程度_，全，全能性能性_._.（3 3）若想制成人工种子，应选用）若想制成人工种子，应选用_。（4 4）若）若是花药，则是花药，则是是_，继续对其使用，继续对其使用_处理可获得处理可获得_正常植株，该过程称为正常植株，该过程称为_。（5 5）若）若是胡萝卜根尖细胞，则培养成是胡萝卜根尖细胞，则培养成的叶片的颜色为的叶片的颜色为_，这说明，这说明_。（6 6）若利用此项技术制造治疗烫伤、割伤的药物）若利用此项技术制造治疗烫伤、割伤的药物紫草素，培紫草素，培养将进行到养将进行

8、到_。脱分化再 分化答案：（答案：（1 1）离体的植物组织或器官）离体的植物组织或器官 植物细胞具有全能性植物细胞具有全能性 （2 2）愈伤组织愈伤组织 低低 高高 （3 3）（4 4）单倍体植株）单倍体植株 秋水仙素秋水仙素 纯合纯合体体 单倍体育种单倍体育种 （5 5）绿色）绿色 含有表达叶绿体的基因含有表达叶绿体的基因 （6 6）辣椒素作为一种生物碱广泛用于食品保健、医药工业等领域。辣椒素的获得途径如图。（1）图中图中和和分别表示辣椒组织培养中细胞的分别表示辣椒组织培养中细胞的_和和_过程。过程。（2）图中培养外植体的培养基中常用的凝固剂是）图中培养外植体的培养基中常用的凝固剂是_。培。

9、培养基中的生长素和细胞分裂素用量的比值养基中的生长素和细胞分裂素用量的比值_（填（填“高高”或或“低低”）时，有利于芽的分化。对培养基彻底灭菌时，应采用的灭菌）时，有利于芽的分化。对培养基彻底灭菌时，应采用的灭菌方法是方法是_。（3）图中外植体的消毒所需酒精的体积分数是）图中外植体的消毒所需酒精的体积分数是_。用酶。用酶解法将愈伤组织分离成单细胞时，常用的酶是解法将愈伤组织分离成单细胞时，常用的酶是_和纤维和纤维素酶。素酶。（4）提取辣椒素过程中，萃取加热时需安装冷凝回流装置，其）提取辣椒素过程中，萃取加热时需安装冷凝回流装置，其目的是目的是_。低低再再分化分化琼脂琼脂脱分化脱分化高压蒸汽灭菌高压蒸汽灭菌70%果胶酶果胶酶防止有机溶剂挥发防止有机溶剂挥发