免疫组化抗体手册范本.doc
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1、1/45免 疫 组 织 化 学抗体手册目目录录中间丝细胞角蛋白AE1/AE3Cam5.2MNF-11634E12CK5/6常见肿瘤中的特殊角蛋白CK1CK7CK8CK13CK14CK18CK19CK20TTF-1,CK7 和 CK20 的表达有助于诊断原发性肺腺癌还是转移性腺癌Vimentin(波形蛋白)Desmin(结蛋白)GFAP(胶质纤维酸性蛋白)Neurofilament proteins(神经细丝蛋白)Acid phosphatase(酸性磷酸酶)Actins(肌动蛋白)Muscle-specific actin(HHF35)肌肉特异性肌动蛋白(MSA)Smooth muscle a
2、ctin(SMA)平滑肌肌动蛋白-actinin(-肌动蛋白)NPM/ALK(间变性淋巴瘤激酶)AAT、AACT(1-抗胰蛋白酶、1抗糜蛋白酶)AFP(甲胎蛋白)-lactalbumin(-乳清蛋白)Angiotensin-converting enzyme(血管紧素-转换酶)Anti-Mullerian hormone(AMH),Mullerian-抑制因子Cyclin D1(PRAD-1,bcl-1,CCND1)细胞周期蛋白 D1bcl-2Bcl-6Ber-EP4Ca15.3B72.3(BRST-3)BCA-225CA125CA19.9CEA(CD66e)CadherinsCalciton
3、inh-CaldesmonS-100CalponinCalretininCD1CD2CD3CD4CD5CD7CD8CD9(运动相关蛋白,MRP-1)CD10(CALLA,NEP)CD11CD13CD14CD15(LeuM1)CD16CD19CD20CD212/45CD22CD23CD25CD30(Ki-1)CD31CD33CD34CD35CD38CD43CD44CD45(白细胞共同抗原,LCA)CD45RA(4KB5,MB1,KiB3,MT2)CD45RO(UCHL1,A6,OPD4)CD56(神经细胞粘附分子,NCAM,Leu19)CD57(Leu 7)CD68(Kp1,PG-M1)CD74
4、CDw75CD79aCD99(MIC2)CD101CD117(c-kit 癌基因)黑色素瘤细胞粘附分子,Mel-CAM,CD146Chromogranin(嗜铬蛋白)C-mycCAN.42Collagen(胶原)DBA44DesmoplakinEndosialin(FB5)Endothelin(ET-1)上皮膜抗原(EMA、MUC1)OestrogenReceptor(ER)Factor VIII-related antigen(von willibranel factor,VWF)Factor XIIIaFascinFerritinFli-1Glucose-transporter-4,GLU
5、T-4HBME-1Heppar 1,Hepatocyte paraffin1HLA-DRHMB-45(anti-gp100)Human chorionic gonadotrophin(hCG)Human placental lactogen(hPL)-InhibinInvolucrinKi-67Ki-S2Laminin(层粘连蛋白)MAC387(巨噬细胞标志物)Melan-A(一种黑色素细胞分化标志物)Microphthalmia transcrftion Factor(mitf)MOC-31MucinsMyogenin 和 Myo-D1MyoglobinLow-affinity Nerve
6、goowth Factor receptor 低亲和力神经生长因子受体(P75NGFR)NSEOsteocalcin and other putative markers of ostoblastic differantiationgu g 骨钙蛋白和成骨细胞分化其它标志物Osteonectin(SPARC,BM-40)P504SParathyroid hormore-related peptide(PTHrP)甲状旁腺激素相关肽Pax gene products(Pax 基因产物)Proliferatiny Cell Nucrear Antigen(PCNA)增殖细胞核抗原Placental
7、 alkaline phosphataseProgesterone receptor(孕酮受体)Prostate-specific antigen(PSA)前列腺特异抗原Prostatic acid phosphatase(PAP)前列腺酸性磷酸酶Protein gene Product 9.5(PGP9.5)蛋白基因产物P53P63Renal cell careinoma marker(RCC Ma)肾细胞癌标志物Rb2/P130Sarcomeric contractile proteins 肌肉收缩蛋白3/45Sialosy1-TNSurfactant proteins 表面活性蛋白Tau
8、Synaptophysin(突触素)Telomerase reverse transcriptase,TERT 端粒酶逆转录因子Tenascin-CTerminal deoxynuckotide transferase(TdT)末端脱氧核苷酸转移酶Thrombomodulin 血栓调节蛋白Thyroglobulin 甲状腺球蛋白Thyroid transcription factor-1 甲状腺转录因子-1Tyrosinase 酪氨酸酶VS38Wilms tumor gene,WT1中间丝中间丝这是一组构成细胞骨架的蛋白质,它们形成直径 810nm 的胞浆细丝。其中有一个由 310 个氨基酸残
9、基构成的中心”柱”区域,两侧连接头部和尾部区域,标志着该中间丝的特殊性与具有免疫原性。中间丝之间氨基酸顺序排列的同源性显示出用单克隆抗体测定时存在交叉反应的潜在性,另外这些细丝在各种细胞系中常为优势表达,共表达在肿瘤中也较常见。中间丝目前被分成 6 类:Acidic cytokeratin(酸性细胞角蛋白)Basic cytokeratin(碱性细胞角蛋白)Vimentin(波形蛋白)、Desmin(结蛋白)、GFAP(胶质纤维酸性蛋白)、Peripherin(外周蛋白)Neurofilaments(神经细丝)Nuclear laminin proteins(核层粘连蛋白)Nestin(网状蛋
10、白)中间丝的最初作用被认为是构成细胞骨架,然而现在我们知道它们可包绕于核酸外,与钙调节蛋白激酶与一磷酸腺苷环化酶(cAMP)作用有关。当前的观点是它们可调节细胞间的相互作用。细胞角蛋白细胞角蛋白细胞角蛋白作为一种中间丝,存在于所有上皮细胞与部分非上皮细胞。事实上,几乎所有肿瘤类型中都被证实存在角蛋白,包括子宫平滑肌瘤、大部分软组织肉瘤、黑色素瘤、神经胶质瘤、浆细胞瘤和某些淋巴瘤。它们分成两组:I 型:酸性细胞角蛋白(Moll 数为 920)。II 型:碱性细胞角蛋白(Moll 数为 18)。每种 I 型角蛋白和 II 型角蛋白形成一对,所有上皮细胞包括至少两种角蛋白。角蛋白 19 是个例外,它
11、以非配对形式存在,I 型角蛋白通常和一种大其 9KD 的 II 型角蛋白配对。角蛋白也可以分成低分子量型(通常为 8,18 和 19)和高分子量型(通常为 1,5,10,14)。诊断应用:诊断应用:1癌的鉴别2显示不同上皮样分化肉瘤的鉴别 滑膜肉瘤 上皮样肉瘤3肉瘤中的异常染色可为间皮瘤、黑色素瘤、平滑肌肉瘤和皮细胞肿瘤的诊断提供线索,仅仅只有 CK8 和 CK18(被 Cam5.2 和 35BH11证明)表达阳性,这两种存在于所有组织中的原始角蛋白胚胎源性表达也许可以解释 CK8 和 CK18 的异位性表达。4在小细胞癌中可以看到细胞核周“圆点状”染色,如麦克尔细胞癌、肉瘤与髓细胞瘤可显示异
12、常免疫反应性。5许多儿童的小兰圆细胞肿瘤表达角蛋白,包括尤文氏肉瘤/PNET、横纹肌肉瘤、肾母细胞瘤和促结缔组织增生性小圆细胞肿瘤。细胞角蛋白细胞角蛋白 M Molloll 数数碱 性 角 蛋 白酸 性 角 蛋 白Moll 数分子量(kD)Moll 数分子量(kD)1679642651056.53631156459125555813516561450754155285216481746184519402046除了表格所列的 20 种软角蛋白外,还有限于头发、指甲上皮组织的硬角蛋白。细胞角蛋白最初的分类建立在 2D 凝胶电泳的基础上。现在有特异的单克隆抗体可应用于石蜡包埋的组织,由于细胞角蛋白之
13、间的同源性,单抗需十分仔细地筛选以避免交叉反应。抗原决定簇在某些情况下可以被遮蔽,可能反应发生在免疫印迹上而不是在组织切片。正常上皮组织中的角蛋白正常上皮组织中的角蛋白上皮组织分成如下几类:4/451“单层”:所有非复层上皮组织2“复层扁平”:包括角化的复层鳞状上皮和非角化的复层鳞状上皮3“复合”:所有其他复层和假复层上皮所有单层、复层和假复层上皮均表达 CK8 和 CK18,复层上皮表达 CK8 和 CK18 并不明确,“分层角蛋白”包括 CK1CK6 和 CK10CK17。CK5 和 CK14/15 在基底部表达,其他类型角蛋白根据不同上皮类型在基底以上部份表达。CK1/2 和 CK10
14、与角化有关,脏表面的复层扁平上皮(舌和喉)表达 CK4 和 CK13,角化复层扁平上皮的过度增殖(不管生理性的还是病理性的)导致 CK6 和 CK16 的表达。上皮组织碱性角蛋白(II 型)酸性角蛋白(I 型)表皮1,(2),510,11,14(15)足底1,(2),5,69,10,11,14,16肛管1,(2),5,610,11,13,14,(15),(16),(17)毛囊(根鞘以外部分)5,614,(15),(16),17皮脂腺4,5,6(10),(11),14,(15),(17)角膜3,512子宫颈阴道部1,(2),4,5,613,(14),(15),(16),(19)舌4,5,613,
15、14,(15),16,(17),(19)会厌4,5,613,14,15,16,(17),(19)食道4,5,613,(14),(15),(16),(17),(19)隐窝腺4,5,7,8(13),14,(17),(18)19外分泌腺5,6,7,814,15,(17),(18),19乳腺导管5,7,814,(15),17,(18)19气管5,(6),(7),813,(14),15,17,(18)19羊膜5,6,8(14),17,(18)19膀胱上皮(4),5,7,813,17,18,19,20胆囊7,818,19小肠818,19结肠818,19,20胰腺腺泡7,818,19间皮7,818,19肺泡
16、7,818,19胰腺导管818,19肝细胞818间充质细胞亦表达角蛋白,如子宫和血管平滑肌、脐带间质、胎儿的心肌和浆膜下层的结缔组织。AE1/AE3AE1/AE3这两种抗体组成的混合物主要用于由福尔马林固定,石蜡包埋的组织。免疫组化表达免疫组化表达AE1 可和大多数酸性细胞角蛋白(I 型)发生反应,AE3 识别所有已知的碱性细胞角蛋白(II 型)。这种抗体混合物几乎可与所有的上皮组织发生反应,和其它中间丝无交叉反应。1 鳞状细胞癌(包括梭形细胞变异体)2 腺癌肾上腺样瘤肝细胞癌3 移行细胞癌4 小细胞癌5 类癌6 多形性腺瘤(上皮成分)7 胸腺瘤8 间皮瘤(包括肉瘤成分)9 脊索瘤10胚胎细胞
17、肿瘤,除外精原细胞瘤11滑膜肉瘤12上皮样肉瘤13平滑肌肉瘤可能阳性Cam5.2Cam5.2免疫组化表达免疫组化表达5/45人类细胞角蛋白中分子量为 45kD(Moll 数为 18)和 52kD(Moll 数为 8),它和正常的具有分泌功能的上皮发生反应,但不和复层鳞状上皮反应。诊断应用诊断应用通常在下列细胞中表达:1腺癌2鳞状细胞癌包括梭形细胞癌,在宫颈、阴道与食道鳞状细胞癌中可能呈阴性反应。3肾细胞癌4肝细胞癌5胆管癌6神经分泌细胞癌,包括小细胞癌(可能呈圆点状阳性)和麦克尔细胞癌7间皮瘤:间皮瘤通常比腺癌染色更深,间皮瘤的纤维细胞表达比腺癌更普遍8胚胎细胞肿瘤,除外精原细胞瘤9滑膜肉瘤1
18、0上皮样肉瘤11胸腺瘤上皮细胞12平滑肌和平滑肌肿瘤13一些乳腺肿瘤14脑膜瘤15神经母细胞瘤16间变性 B 细胞淋巴瘤(WHO 将其归入弥漫性大 B 细胞淋巴瘤)17灶状阳性染色在黑色素瘤中达 10以上。MNF-116MNF-116这种抗体作用于福尔马林固定石蜡包埋的组织,它可检测许多角蛋白的表面抗原(Moll 数 5,6,8,17,也可能 19)免疫组化表达免疫组化表达1上皮,包括复层鳞状上皮和单层腺上皮2平滑肌3淋巴结树突状细胞4合胞体滋养层5一些皮层神经6浆细胞7癌,包括:鳞状细胞鼻咽部小细胞,核周圆点状强染色肉瘤样/梭形细胞腺癌8间皮瘤,包括上皮样和肉瘤样9滑膜肉瘤(梭形细胞成分显示
19、灶状染色)10血管肿瘤海绵状血管皮细胞瘤鼻窦部海棉状血管皮细胞瘤上皮样血管肉瘤11促结缔组织增生性小圆细胞肿瘤12脊索瘤13肾外横纹肌样肿瘤14肌上皮瘤15卵黄囊肿瘤16平滑肌肿瘤17浆细胞瘤18原始神经外胚层肿瘤(通常灶状阳性)诊断应用诊断应用作为上皮性肿瘤的一线标志物,由于其它大部分肿瘤可能表达阳性而具有局限性,如上面所列的肿瘤。据报道纤维细胞中 MNF116 阳性表达在间皮瘤中比在腺癌中表达要常见。作者腺癌间皮瘤Brockstedt,2000纤维细胞中阳性反应 26%(15/57)纤维细胞中阳性反应 57%(68/119)3434E12E12这种抗体和 1,5,10,14 细胞角蛋白反应
20、,福尔马林固定石蜡包埋组织的免疫反应性,需要抗原修复。免疫组化表达免疫组化表达1正常鳞状上皮,导管上皮与其它复合上皮2鳞状细胞癌,包括肺与肺的不同基底细胞样的鳞状细胞癌,还有肺基底细胞癌3乳腺导管癌、胰腺、胆管和唾液腺4膀胱移行细胞癌5鼻咽癌6胸腺瘤7上皮样间皮瘤表达阴性的有:1肝细胞癌2肾细胞癌3子宫膜癌诊断应用诊断应用1与良性前列腺腺泡的基底细胞发生反应,包括基底细胞增生和非典型腺瘤样增生,不能与前列腺腺癌反应。联合 P504S 进行检测有效。2与乳头状癌发生反应,不能(或仅仅灶状)与甲状腺结节增生或滤泡状癌反应。CK5/6CK5/66/45诊断应用诊断应用腺癌和间皮瘤的不同表达作者腺癌间
21、皮瘤Clover,19975/2723/23Ordonez,19990/3040/40Cury,20009/6356/61Kayser,200172/14690/118Carella,20011/2040/46总计30%(87/261)86%(249/288)常见肿瘤中的特殊角蛋白常见肿瘤中的特殊角蛋白细胞角蛋白(Moll 目录)肿瘤部位与类型4578131417181920皮肤鳞癌+皮肤基底细胞癌+皮肤麦克尔细胞+-+小细胞癌/类癌+部分+-食道鳞癌+肺腺癌+部分+-间皮瘤+部分+乳腺+-食道腺癌+胃-小肠+结肠部分+部分+胰腺+部分+肝细胞部分+-+部分少见胆管+部分+少见卵巢粘液性+部分
22、+其他+-子宫膜+部分-肾细胞癌+-+-泌尿道移行细胞癌低级别+部分+高级别+前列腺腺癌+-+甲状腺滤泡状+-+-乳头状+-+-细胞角蛋白4578131417181920CK7 和 CK20 的联合表达对鉴别某种肿瘤的原发灶特别有用。CK1CK1CK1 是一种高分子量的角蛋白(65-68KD),除此之外,它在角化鳞状上皮中表达,是位于皮细胞上的多肽蛋白激肽酶受体复合物的成分之一。它可以被单抗 34B4 检测。AE3 可以和所有 II 型角蛋白起反应,包括 CK1。CK1 通常和 CK10 在复层鳞状上皮中成对出现。免疫组化表达免疫组化表达正常组织正常组织CK1CK1CK10CK10表皮角化细胞
23、阳性阳性胸腺小体阳性阳性食道和牙龈上皮大部分为阳性肝上皮细胞阴性胰腺上皮细胞阴性肺上皮细胞阴性胃上皮细胞阴性结肠上皮细胞阴性泌尿道阴性胎盘膜阳性一些动、静脉与毛细血管的皮阳性通常阴性胚胎血管阴性(除外胚盘和脐带)血管平滑肌弱阳性胃肠平滑肌弱阳性三月龄心肌阳性成人心肌阴性三月龄骨胳肌阳性成人骨骼肌阴性三月龄神经系统阳性成人大脑阴性肿瘤肿瘤阴性阴性10%30%30%皮肤基底细胞癌4/51/5(分化的鳞状细胞中)皮肤鳞状细胞癌25/25头颈部鳞癌6/104/10(角化肿瘤)乳腺导管癌10/10肺腺癌12/12胃腺癌10/107/45结肠腺癌29/29肝细胞癌3/3膀胱移行细胞癌6/71/7(伴鳞状细
24、胞分化)前列腺癌17/17子宫膜癌5/5卵巢浆液与粘液性肿瘤20/20血管瘤2/6613/6612/6639/66淋巴管瘤5/5上皮样血管皮瘤8/8梭形细胞血管皮瘤12/12血管肉瘤22/8114/8110/8135/81结节性筋膜炎30/30神经鞘瘤6/163/164/163/16韧带样瘤5/5孤立性纤维性肿瘤15/15平滑肌瘤10/10平滑肌肉瘤10/10双相滑膜肉瘤8/225/227/222/22单相滑膜肉瘤41/464/46上皮样肉瘤11/375/377/3714/37MPNST16/16横纹肌肉瘤(胚胎性和牙源性)6/6CK10 在正常的和肿瘤性鳞状上皮均有表达,但在正常或肿瘤性皮细
25、胞不表达,在任何 CK1 表达阳性的软组织中均不能检测到。CK7CK7可应用于福尔马林固定石蜡包埋的组织免疫组化表达免疫组化表达CK7 是许多腺上皮与移行上皮中的一种碱性角蛋白。CK7 通常在下列腺癌中表达:1肺2乳腺3卵巢(浆液性和粘液性肿瘤)4子宫颈肿瘤5胆管上皮和胆管癌6膀胱移行细胞癌在下列肿瘤中缺乏:1鳞状细胞癌2结肠腺癌3卵巢粘液腺癌4肝细胞和肝细胞癌5前列腺和前列腺腺癌6肾上皮肿瘤常见肿瘤0/10嫌色细胞瘤9/9 胞膜强染(7 例呈灶状染色)嗜酸性粒细胞瘤8/8 灶状胞浆弱染,胞膜不强染诊断应用诊断应用1CK7 和 CK20 的联合应用对鉴别腺癌原发灶尤为有用。2肾癌:与常见肿瘤、
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