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1、第八章第八章蛋白质代谢蛋白质代谢第一节第一节 蛋白质消化吸收及营养作用蛋白质消化吸收及营养作用一、消化 蛋白酶作用下水解消化过程消化过程:唾液不含蛋白酶;蛋白消化从胃开始;蛋白消化主要在小肠。胃酸(胃酸(pH1.5-2.5)作用:)作用:防腐剂,可杀死微生物、外来细胞。促进蛋白质变性、松散,多肽链易被蛋白酶水解。促进蛋白质变性、松散,多肽链易被蛋白酶水解。激活胃蛋白酶原。凝乳作用:胃蛋白酶对乳中的酪蛋白有凝乳作用。凝乳作用对婴幼儿很重要,乳汁 凝块,在胃中停留较长时间,以利消化。1外源性蛋白在消化道中的水解:外源性蛋白进入消化道,经消化道酶水解成 AA、少量二肽、三肽而被吸收,消化主要在小肠中
2、。常见的蛋白水解酶:内肽酶:水解肽链内部的肽键,产物:小肽。胃蛋白酶胰蛋白酶糜蛋白酶弹性蛋白酶 外肽酶(产物:自由外肽酶(产物:自由 AA)羧肽酶:从羧基末端水解肽键。氨肽酶:从氨基末端水解肽键。二肽酶:二肽AA2内源性蛋白质:由细胞内溶酶体分泌的各种蛋白酶内源性蛋白质:由细胞内溶酶体分泌的各种蛋白酶水解。微生物(植物):细胞内可产生各种蛋白水解酶:微生物(植物):细胞内可产生各种蛋白水解酶:胞内酶胞内酶胞外酶。二、营养作用(一)N平衡1总N平衡:摄入量=排出量蛋白质合成、分解处于动态平衡。正常成年人。2正N平衡:摄入量排出量部分摄入的N用于体内蛋白质合成。如:正在生长的儿童,孕妇、恢复期的病
3、人。3负N平衡:摄入量排出量体内蛋白质消耗增加,合成减慢。如:饥饿、消耗性疾病患者。(二)蛋白质生理需要量实验证明:70Kg成年人有400g/day蛋白质在体内变化。其中:1/4降解,需外源蛋白质补充。3/4在体内循环。不进食时,最低分解量:20g/day。成人最低需要量:30-50g/day我国营养学会推荐蛋白质需要量:80g/day(成人)(三)必需氨基酸和非必需氨基酸必需氨基酸(essential amino acid):人和动物需要但不能自行合成,必须从食物获得。包括:苯(Phe),色(Try),赖(Lys),蛋(Met),亮(Leu),异亮(Ile),苏(Thr),纈(Val)半必需
4、AA:合成速度较慢,常常可满足自身机体、组织需要。如:组(His),精(Arg)非必需AA:可由人和动物自身合成。植物和微生物可从糖为原料合成全部所需氨基酸。(四)蛋白质营养价值评价:(四)蛋白质营养价值评价:结论:结论:食物蛋白质的营养价值的高低,取决于其所含必食物蛋白质的营养价值的高低,取决于其所含必需氨基酸的需氨基酸的种类、含量及比例种类、含量及比例 是否与人体所需的是否与人体所需的相近似,越近似,营养价值越高。相近似,越近似,营养价值越高。一般:动物蛋白质营养价值一般:动物蛋白质营养价值 植物蛋白,植物蛋白,酵母营养高。酵母营养高。(五)蛋白质营养的搭配(五)蛋白质营养的搭配各种动植物
5、蛋白,不一定具备或充分具备所有的氨各种动植物蛋白,不一定具备或充分具备所有的氨基酸,吃单一食物蛋白难免引起营养不良,食物来源要多样化,注意营养平衡。源要多样化,注意营养平衡。蛋白质的互补作用:营养价值较低的蛋白质混合食用,如果必需氨基酸能互相补充,可以提高营养价值。如:谷类:如:谷类:Lys少,少,Try多多豆类:Lys多,Try少二者混合食用可互补。二者混合食用可互补。第二节第二节 氨基酸代谢氨基酸代谢高等动物体内氨基酸的代谢概况:高等动物体内氨基酸的代谢概况:体内各种体内各种AA都有NH2和和 COOH,所以有共同代谢途径有共同代谢途径 共性。共性。一、氨基酸的脱氨基作用一、氨基酸的脱氨基
6、作用类型:氧化脱氨类型:氧化脱氨非氧化脱氨非氧化脱氨氨基移换(转氨)作用氨基移换(转氨)作用*联合脱氨联合脱氨*1氧化脱氨在酶催化下经氧化脱去氨基的过程。主要的酶:LAA氧化酶DAA脱H酶氨基酸脱H酶如:L谷氨酸脱H酶:不需氧脱H酶,NAD(P)为辅酶,存在比较广泛。该酶反应是联系糖代谢的重要反应。2转氨作用:定义:转氨酶催化下,AA与酮酸之间发生氨基转移,一个AA分子中的NH2转移到一个酮酸的酮基上。使 酮酸变成相应的AA,原AA失去氨基成相应的 酮酸。反应:参加转氨的酮酸主要有:酮戊二酸 Glu体内大多数AA能与酮戊二酸转氨生成相应的酮酸和谷AA。已发现50多种转氨酶,除Gly、Lys、P
7、ro、Thr 外,其余AA均可转氨。其中最重要的转氨酶是:谷丙转氨酶谷AA与与-酮戊二酸体系谷草转氨酶谷AA与草酰乙酸3联合脱氨作用过程:转氨氧化脱氨(转氨酶L谷AA脱H酶)某一AA的NH2借转氨作用转到-酮戊二酸分子上,生成相应的酮酸和谷AA;然后谷AA在L谷AA脱H酶催化下脱去氨基,又生成-酮戊二酸。结果:-AA脱去NH2转变成酮酸和NH3;-酮戊二酸是氨基传递体,在联合脱氨中未消耗。骨骼肌、心肌中,L谷AA脱H酶活性不高,以其他方式脱氨。4嘌呤核甘酸循环(Purine Nueleatides CyclPNC)七十年代提出,主要方式脱氨。需要转氨酶,谷草转氨酶,延胡索酸酶,苹果酸酶等协调作
8、用完成转氨过程。二、氨基酸脱羧作用二、氨基酸脱羧作用氨基酸脱羧作用是机体组织中一种常见的变化,脱氨基酸脱羧作用是机体组织中一种常见的变化,脱羧形成一 级胺和CO2。脱羧在量上不占重要位置,但。脱羧在量上不占重要位置,但其产物都有重要生理作用,有些胺对动物有毒。其产物都有重要生理作用,有些胺对动物有毒。反应通式:脱羧酶专一性很高,一般一种脱羧酶专一性很高,一般一种 AA有一种脱羧酶。辅酶:除组AA脱羧不需辅酶外,其它均以磷酸吡哆脱羧不需辅酶外,其它均以磷酸吡哆醛为辅酶。组组AA 组胺:一种强烈的血管舒张剂,有降血压用,浓度过低可引起虚脱。组胺可刺激胃酸和胃蛋白酶的分泌。谷谷AA 氨基丁酸:脑中含
9、量高,对中枢神经系统有抑止作用。VB6为谷AA脱羧酶辅酶。故B6可增加该酶的活性,生成大量的 氨基酸,抑抑制中枢神经的兴奋作用。三、氨基酸脱氨脱羧产物的去路三、氨基酸脱氨脱羧产物的去路脱氨:脱氨:NH3酮酸(AA骨架的代谢)脱羧:脱羧:CO2,胺1NH3的代谢NH3去向:废物去向:废物排泄N源转化,储存(尤其植物)体内体内NH3来源:外源来源:外源从消化道吸收从消化道吸收(肠道细菌的腐败作用)内源AA脱氨及其它含脱氨及其它含N物产生。物产生。NH3的毒性在人及动物体内氨是一种有毒物质,特别对神经系统有害,动物实验证明:血氨浓度 5mg,动物立即死亡。正常情况下,不会发生 NH3在体内堆积。正常
10、人血氨浓度 0.1mg。NH3在体内转化为:尿素(动物排泄)尿酸(动物排泄)NH3(动物排泄)含N物 AA,含N碱,NH4+等。2-酮酸的代谢AA的C骨架的代谢-酮酸:R-CO-COOH合成非必需AA 通过氨基化作用氧化供能产生CO2,H2O转变成糖或脂类合成非必需AA 通过氨基化作用方式:氧化脱氨、转氨、联合脱氨的逆反应。氧化供能 产生CO2,H2O途径:各种氨基酸分别形成五种中间产物 TCA乙酰CoA -酮戊二酸AA 草酰乙酸TCA CO2,H2O 延胡索酸琥珀酰CoA 转变成糖或脂类1AA在体内转变成糖 糖原 生糖AA(多数)。生糖AA:在体内可转变成糖的 AA。C骨架按糖代谢途径进行代
11、谢 糖异生2AA参与脂代谢生成酮体 生酮AA。(少数)生酮AA:在体内可转变成酮体的 AA。AA即可生成糖,又可生成酮体 生糖兼生酮AA 第三节 蛋白质的生物合成一、遗传密码遗传密码:编码氨基酸的核苷酸序列。密码子:核酸分子上三个连续的核苷酸形成的三联体称为密码子,每个密码子代表一种氨基酸。A U G1961-1965 年,确定了20种AA的密码子。遗传密码表二、遗传密码的重要性质(基本特点)二、遗传密码的重要性质(基本特点)1不重叠每个三联体密码独立的代表一种 AA,沿,沿5 3方方向逐个阅读核苷酸。2密码子通用性和变异性各种生物共用同一套遗传密码,从细菌到人都适用。不同生物中不同密码的使用
12、频率不同。通用性不是绝对的。如:人线粒体的密码与通用的遗传密码不完全相同。UGA不再是终止密码 色AA的密码结论:遗传密码并非完全通用,而是近于完全通用。3简并性和摆动性一种AA可由几种密码子编码叫简并性,编码相同AA密码子称为同义密码子。Trp(色)、et(蛋)只有一个密码子。简并性主要发生在密码子的第三位核苷酸的变化。mRNA密码子与tRNA 反密码子配对时,密码子第1、2位碱基配对严格,第 3个碱基可有一定变动。4无间隔性连续性密码子之间是连续的,无其它核苷酸隔开。密码子被识别阅读时,从起始密码子开始,直到终止密码子 为止。密码中插入或减去一个碱基使后面的密码发生错位 遗码突变。5方向性
13、翻译时,密码子阅读方向从 mRNA的5 3。6起始密码子AUG(Met、fMet)GUG(Val)终止密码子UAG,UAA,UGA,不编码任何,不编码任何氨基酸。氨基酸。三、三、mRNA,rRNA,tRNA在蛋白质合成中的作用在蛋白质合成中的作用1tRNA搬运氨基酸工具,特定氨基酸需专门的搬运氨基酸工具,特定氨基酸需专门的 tRNA搬运。搬运。在酶作用下,tRNA与特定的氨基酸结合成为氨基酰tRNA AA-tRNA;tRNA反密码子按照碱基互补配对原则与 mRNA的密码子配合,使氨基酸对号入座,排成一定顺序。2rRNA的作用rRNA与蛋白质结合成核糖体,作为蛋白质合成的场所,将tRNA搬运来的
14、氨基酸缩合成肽。核糖体的结构:由 2个亚基组成。核糖体的功能部位:30S和50S亚基的接触面上有mRNA结合位点。50S亚基上有2个结合位点:氨基酰位点(A位点):与新进入 AA-tRNA 结合。肽酰位点(P位点):与延伸中肽酰-tRNA结合。核糖体的功能:识别mRNA上的起始位点,并开始翻译。密码子与反密码子的正确配对。合成肽键。(三)mRNA的功能蛋白质合成的模板,指导肽链的合成。mRNA的核苷酸顺序决定蛋白质分子中氨基酸顺序。53AUGAUGUAAUAA读码框架读码框架核糖体识别部位核糖体识别部位原核生物mRNA四、密码子的识别:反密码子密码子tRNA的反密码子通过碱基配对识别mRNA密
15、码子。tRNA的上的AA对识别密码子没有影响,tRNA分子本身起着决定作用。3553Phe112312 3五、蛋白质合成的过程(原核生物)氨基酸的活化:形成氨基酰tRNA(AA-tRNA)。肽链合成的起始:形成 70S 起始复合物。肽链延伸:结合(进位)新AA-tRNA 进入核糖体A位。转肽形成肽键。脱落转肽后,P位上的tRNA脱落。移位核糖体沿mRNA 5 3方向移动一个密码的距离;肽酰-tRNA从核糖体的A位移到P位。肽链合成的终止肽链的折叠和加工处理1AA的活化形成蛋白质时,氨基酸之间以肽键相连。一个AA的-COOH与另一个AA的-NH2反应,从热力学观点上看是困难的,只有-COOH活化
16、才能反应。活化方式:氨基酰tRNA合成酶(E)催化、ATP供能,AA的-COOH与tRNA 的3-OH成酯键,形成氨基酰tRNA(AA-tRNA)AA+ATP+E AA-AMP-E +PPi(复合物)复合物AA-AMP-E 上活化的AA转到tRNA3-OH,形成氨基酰tRNA(AA-tRNA):AA-AMP-E +tRNA AA-tRNA+E+AMP2肽链合成的起始起始密码子(Initiation codon)合成多肽并非从mRNA 5末端第一个核苷酸开始,被翻译的第一个密码子多位于 5端第 25个核苷酸后。起始密码子为AUG,少数为GUG。起始AA为MetMet+tRNAf Met-tRNA
17、f fMet-tRNAf 甲酰-FH4(甲酰化)30S起始复合物的形成30S-IF3+mRNA+fMet-tRNAf 30S起始复合物30S 起始复合物70S起始复合物的形成30S起始复合物+50S 70S 起始复合物tRNA-fMet 进入核糖体P位点,A位点空着,准备接受另一个AA-tRNA。fMet-tRNAf 进入核糖体P位点。需起始因子IF1,IF2,IF3,需GTP供能。70S 起始复合物50S3肽链的延伸肽链的延伸(1)进位(结合)进位(结合)按碱基互补规则,一个新的AA-tRNA进入进入70S复复合物A位点。需两种延伸因子EF-Tu,和和EF-Ts的作用;需GTP供能。(2)转
18、肽肽酰转移酶催化,P位上tRNA携带的带的fMet转移给A位点上新进入的氨酰-tRNA的氨基,形成1个肽键;P位上的tRNA成为空负载;A位上的tRNA负载一个二肽;转肽反应需GTP,ATP参与。(3)脱落脱落转肽后,P位上空载的tRNA脱落。脱落。(4)移位移位移位酶作用,核糖体沿 mRNA 5 3方向相对位移移1个密码子距离,使肽酰基-tRNA(P-tRNA)从核糖体A位P位移动。A位空出,以使第三个 AA-tRNA进入。进入。此过程需GTP供能。以上过程:以上过程:进位进位转肽转肽脱落脱落移位重复进行移位重复进行,核糖体,核糖体沿mRNA每移动一个密码单位,肽链加长一个 AA单位,直到直
19、到mRNA终止密码子出现在核糖体终止密码子出现在核糖体 A位点为止。位点为止。肽链延伸的方向由 N C端。4肽链合成的终止肽链合成进行到mRNA的终止密码子UAA,UAG,UGA出现在核糖体 A位时。1终止因子RF识别mRNA的终止密码子,并结合到 A位点。2RF使肽酰转移酶活性改变,促使肽酰 tRNA间的酯键水解,新合成的多肽从核糖体上释放出来。3RF促使tRNA(无负载)从核糖体释放。tRNA从70S核糖体脱落,核糖体离开 mRNA,同时IF3与30S结合,开始新一轮合成。5肽链的折叠和加工处理肽链合成后需加工(修饰)才成为有活性的蛋白。(1)肽链末端的修饰N端切去fMet;切去甲酰基;从N端切去几个AA。(2)AA共价修饰磷酸化(糖原磷酸化酶)乙酰化(组蛋白)甲基化(Cytc,肌肉蛋白)糖基化(糖蛋白)羟基化(3)肽链水解修饰 切去一段肽链(4)S-S 形成在链内或链间形成 S-S,有助于蛋白质空间结构形成。六、蛋白质合成总结:条件:模板:DNA mRNA(直接)能量:GTP,ATP。每合成一个肽键至少需 4个高能键。原料:20种AA。载体:tRNA场所:核糖体,需多种蛋白因子 IF,EF,RF密码阅读方向:沿mRNA 5 3。肽链延伸方向:NC
限制150内