【世纪金榜】2015届高考生物二轮复习 专题九 现代生物科技专题课件1.ppt

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1、专题九现代生物科技专题第1讲基因工程、细胞工程一、基因工程一、基因工程1.1.基因工程的工具：基因工程的工具：(1)(1)选择选择下面符合要求的填空：下面符合要求的填空：a.a.限制限制酶酶b.DNAb.DNA连连接接酶酶c.DNAc.DNA聚合聚合酶酶d.d.质质粒粒e.e.噬菌体的衍生物噬菌体的衍生物f.f.动动植物病毒植物病毒能能够识别够识别双双链链DNADNA分子的某种特定核苷酸序列，并能将特定分子的某种特定核苷酸序列，并能将特定部位的两个核苷酸之部位的两个核苷酸之间间的磷酸二的磷酸二酯键酯键断开的是：断开的是：_。能将双能将双链链DNADNA片段片段连连接起来的是：接起来的是：_。基

2、因工程中的基因工程中的载载体包括：体包括：_。a ab bd d、e e、f f(2)(2)载载体的特点及作用体的特点及作用(判断正判断正误误)。载载体能体能够够在在细细胞内自我复制并胞内自我复制并稳稳定保存。定保存。()()载载体具有一个限制体具有一个限制酶酶切割位点，便于外源切割位点，便于外源DNADNA片段插入其片段插入其中。中。()()载载体具有特殊的体具有特殊的标记标记基因，供重基因，供重组组DNADNA的的鉴鉴定和定和选择选择。()()2.2.基因工程的基本操作程序：基因工程的基本操作程序：(1)(1)目的基因的目的基因的获获取：取：人工合成目的基因：常用的方法人工合成目的基因：常

3、用的方法为为_。扩扩增目的基因可利用：增目的基因可利用：_。(2)(2)基因工程的核心：基因工程的核心：_。基因表达基因表达载载体的体的组组成：成：_。化学合成法化学合成法多聚多聚酶酶链链式反式反应应(PCR)(PCR)基因表达基因表达载载体的构建体的构建目的基因、启目的基因、启动动子、子、终终止子、止子、标记标记基因、复制原点基因、复制原点(3)(3)目的基因目的基因导导入受体入受体细细胞：胞：从以下从以下选项选项中中选选出恰当方法填空：出恰当方法填空：a.a.农农杆菌杆菌转转化法化法b.b.基因基因枪枪法法c.c.花粉管通道法花粉管通道法d.d.显显微注射法微注射法e.e.感受感受态细态细

4、胞法胞法将目的基因将目的基因导导入植物入植物细细胞：胞：_。将目的基因将目的基因导导入入动动物物细细胞：胞：_。将目的基因将目的基因导导入微生物入微生物细细胞：胞：_。a a、b b、c cd de e(4)(4)目的基因的目的基因的检测检测与与鉴鉴定：定：检测检测目的基因是否目的基因是否进进入受体入受体细细胞可采用胞可采用_技技术术。检测检测目的基因是否目的基因是否转录转录出出mRNAmRNA，可采用，可采用_技技术术。检测检测目的基因是否翻目的基因是否翻译译出蛋白出蛋白质质，可采用，可采用_技技术术。个体生物学水平个体生物学水平鉴鉴定：根据目的基因表达出的性状判断。定：根据目的基因表达出的

5、性状判断。DNADNA分子分子杂杂交交分子分子杂杂交交抗原抗原抗体抗体杂杂交交二、蛋白二、蛋白质质工程工程1.1.蛋白蛋白质质工程的步工程的步骤骤：_。预预期蛋白期蛋白质质功能；功能；找到相找到相对应对应的脱氧核苷酸序列；的脱氧核苷酸序列；推推测应测应有的氨基酸序列；有的氨基酸序列；设计预设计预期蛋白期蛋白质结质结构构2.2.蛋白蛋白质质工程的工程的实质实质：_。3.3.蛋白蛋白质质工程的工程的产产物：物：产产生新的生新的_。改造控制某蛋白改造控制某蛋白质质合成的基因合成的基因蛋白蛋白质质三、三、细细胞工程胞工程1.1.植物植物细细胞工程：胞工程：(1)(1)植物植物细细胞工程理胞工程理论论基

6、基础础：_。(2)(2)植物植物组织组织培养培养过过程中，程中，细细胞胞发发生：生：_。(3)(3)植物体植物体细细胞胞杂杂交克服的障碍：交克服的障碍：_。细细胞全能性胞全能性脱分化、再分化脱分化、再分化远缘杂远缘杂交不交不亲亲和和2.2.动动物物细细胞工程：胞工程：(1)(1)动动物物细细胞工程常用的技胞工程常用的技术术手段有手段有_、_、_、生、生产单产单克隆抗体等。克隆抗体等。(2)(2)动动物物细细胞培养胞培养过过程中，使程中，使组织细组织细胞分散开使用的胞分散开使用的酶酶是是_。(3)(3)动动物物细细胞培养胞培养过过程中使用的培养基是程中使用的培养基是_。(4)(4)动动物物细细胞

7、融合原理：胞融合原理：_。融合方法：融合方法：_、电电激等。激等。(5)(5)单单克隆抗体克隆抗体优优点：可大量制点：可大量制备备、_、灵敏度高。、灵敏度高。动动物物细细胞培养胞培养动动物体物体细细胞核移植胞核移植动动物物细细胞融合胞融合胰蛋白胰蛋白酶酶或胶原蛋白或胶原蛋白酶酶液体培养基液体培养基细细胞膜的流胞膜的流动动性性聚乙二醇、聚乙二醇、灭灭活的病毒活的病毒特异性特异性强强(6)(6)辨析辨析单单克隆抗体制克隆抗体制备备中的两次中的两次筛选筛选。第一次第一次筛选筛选要得到的是融合的要得到的是融合的杂杂种种细细胞。胞。()()第二次第二次筛选筛选出的是能出的是能产产生特定抗体的生特定抗体的

8、杂杂交瘤交瘤细细胞。胞。()()高高频频考点一考点一基因工程基因工程1.(20141.(2014 景德景德镇镇二模二模)下下图图是是“万能万能细细胞胞”的的诞诞生生过过程程(图图中来自中来自胚胎干胚胎干细细胞的胞的OCT4OCT4、SOX2SOX2、NANOGNANOG和和LIN28LIN28等基因决定等基因决定细细胞胞“全全能性能性”)。请请据据图图回答下列回答下列问题问题：(1)(1)该该研究研究过过程用到了程用到了、等等现现代生物技代生物技术术手段。手段。(2)(2)图图中由皮肤中由皮肤细细胞到胞到“万能万能细细胞胞”的的“改造改造”类类似于植物似于植物组织组织培养培养技技术术中的中的过

9、过程。程。(3)(3)图图中病毒的作用是中病毒的作用是。为为方便方便筛选筛选，在，在重重组组病毒中除了插入的目的基因外，病毒中除了插入的目的基因外，还应还应有有基因。基因。【审题审题解题解题答题答题】1.(1.(关关键键)皮肤皮肤细细胞到胞到“万能万能细细胞胞”的的“改造改造”重点在于重点在于细细胞的胞的变变化，由高度化，由高度分化分化细细胞成胞成为为“万能万能细细胞胞”(相当于胚胎干相当于胚胎干细细胞胞)，即，即类类似植物似植物组组织织培养的培养的“脱分化脱分化”。2.(2.(必必备备)(1)(1)基因表达基因表达载载体的体的组组成：目的基因、启成：目的基因、启动动子、子、终终止子、止子、标

10、记标记基基因等。因等。(2)(2)常用目的基因的常用目的基因的载载体：体：动动物病毒、植物病毒、物病毒、植物病毒、细细菌病毒、菌病毒、质质粒。粒。【解析解析】(1)(1)图示过程利用了基因工程图示过程利用了基因工程(DNA(DNA重组技术重组技术)、动物细、动物细胞培养等现代生物技术手段。胞培养等现代生物技术手段。(2)(2)皮肤细胞是高度分化的细胞，失去分裂能力，由皮肤细胞皮肤细胞是高度分化的细胞，失去分裂能力，由皮肤细胞到到“万能细胞万能细胞”的的“改造改造”类似于植物组织培养的脱分化过程。类似于植物组织培养的脱分化过程。(3)(3)利用病毒将目的基因导入受体细胞，是作为基因工程的载利用病

11、毒将目的基因导入受体细胞，是作为基因工程的载体。在重组病毒中除了插入的目的基因外，还应有标记基因，体。在重组病毒中除了插入的目的基因外，还应有标记基因，便于筛选出含有目的基因的细胞。便于筛选出含有目的基因的细胞。答案：答案：(1)(1)基因工程基因工程(DNA(DNA重组技术重组技术)动物细胞培养动物细胞培养(2)(2)脱分化脱分化(3)(3)作为载体标记作为载体标记2.(20132.(2013 新新课标课标全国卷全国卷 T40T40节选节选)阅读阅读如下如下资资料：料：资资料甲：科学家将牛生料甲：科学家将牛生长长激素基因激素基因导导入小鼠受精卵中，得到了入小鼠受精卵中，得到了体型巨大的体型巨

12、大的“超超级级小鼠小鼠”；科学家采用；科学家采用农农杆菌杆菌转转化法培育出化法培育出转转基基因烟草。因烟草。资资料乙：料乙：T T4 4溶菌溶菌酶酶在温度在温度较较高高时时易失去活性。科学家易失去活性。科学家对编码对编码T T4 4溶菌溶菌酶酶的基因的基因进进行了改造，使其表达的行了改造，使其表达的T T4 4溶菌溶菌酶酶第第3 3位的异亮氨位的异亮氨酸酸变为变为半胱氨酸，在半胱氨酸，在该该半胱氨酸与第半胱氨酸与第9797位的半胱氨酸之位的半胱氨酸之间间形成形成了一个二硫了一个二硫键键，提高了，提高了T T4 4溶菌溶菌酶酶的耐的耐热热性。性。回答下列回答下列问题问题：(1)(1)资资料甲属于

13、基因工程的范畴。将基因表达料甲属于基因工程的范畴。将基因表达载载体体导导入小鼠的受入小鼠的受精卵中常用精卵中常用法。构建基因表达法。构建基因表达载载体常用的工具体常用的工具酶酶是是 和和。在培育有些在培育有些转转基因植物基因植物时时，常用，常用农农杆菌杆菌转转化法，化法，农农杆菌的作用杆菌的作用是是 。(2)(2)资资料乙中的技料乙中的技术术属于属于工程的范畴，工程的范畴，该该工程是指工程是指以分子生物学相关理以分子生物学相关理论为论为基基础础，通，通过过基因修基因修饰饰或基因合成，或基因合成，对对进进行改造，或制造一种行改造，或制造一种的技的技术术。在。在该实该实例中，引起例中，引起T T4

14、 4溶菌溶菌酶酶空空间结间结构改构改变变的原因是的原因是组组成成该该酶酶肽链肽链的的序列序列发发生了改生了改变变。【审题审题解题解题答题答题】1.(1.(必必备备)(1)(1)基因表达基因表达载载体构建体构建过过程中使用的工具程中使用的工具酶酶是：限制性核酸内切是：限制性核酸内切酶酶和和DNADNA连连接接酶酶。(2)(2)蛋白蛋白质质工程工程结结果：改造果：改造现现有蛋白有蛋白质质或制造出新的蛋白或制造出新的蛋白质质。2.(2.(方法方法)目的基因目的基因导导入植物入植物细细胞的方法：胞的方法：(1)(1)农农杆菌杆菌转转化法。化法。(2)(2)基因基因枪枪法。法。(3)(3)花粉管通道法。

15、花粉管通道法。【解题指导解题指导】解答本题需要注意以下两点：解答本题需要注意以下两点：(1)(1)动、植物基因工程中目的基因导入的方法不同：前者一般动、植物基因工程中目的基因导入的方法不同：前者一般用显微注射法，后者常用农杆菌转化法。用显微注射法，后者常用农杆菌转化法。(2)(2)蛋白质工程应先研究蛋白质分子的结构规律及其与生物功蛋白质工程应先研究蛋白质分子的结构规律及其与生物功能的关系，然后再进行基因修饰或基因合成。能的关系，然后再进行基因修饰或基因合成。【解析解析】(1)(1)将基因表达载体导入动物受精卵常用的方法是显将基因表达载体导入动物受精卵常用的方法是显微注射法。构建基因表达载体常用

16、的工具酶是限制性核酸内切微注射法。构建基因表达载体常用的工具酶是限制性核酸内切酶和酶和DNADNA连接酶。在培育转基因植物时常用农杆菌转化法，因连接酶。在培育转基因植物时常用农杆菌转化法，因为农杆菌能在自然条件下感染双子叶植物和裸子植物。为农杆菌能在自然条件下感染双子叶植物和裸子植物。(2)(2)蛋白质工程是以蛋白质分子的结构规律及其与生物功能的蛋白质工程是以蛋白质分子的结构规律及其与生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质的技术。该实例中，改造，或制造一种新的蛋白质的技术。该实例中，T T

17、4 4溶菌酶空溶菌酶空间结构改变的原因是组成该酶肽链的氨基酸序列发生了改变。间结构改变的原因是组成该酶肽链的氨基酸序列发生了改变。答案：答案：(1)(1)显微注射限制性核酸内切酶显微注射限制性核酸内切酶DNADNA连接酶农杆菌连接酶农杆菌可感染植物，将目的基因转移到受体细胞中可感染植物，将目的基因转移到受体细胞中(2)(2)蛋白质现有蛋白质新的蛋白质氨基酸蛋白质现有蛋白质新的蛋白质氨基酸【知识知识方法方法误区误区】基因工程易基因工程易错错点：点：(1)(1)目的基因目的基因应应插入启插入启动动子与子与终终止子之止子之间间的部位。的部位。(2)(2)将目的基因将目的基因导导入受体入受体细细胞没有

18、碱基互胞没有碱基互补补配配对现对现象。象。(3)(3)原核生物作原核生物作为为受体受体细细胞的胞的优优点：繁殖快、多点：繁殖快、多为单细为单细胞、胞、遗传遗传物物质质相相对较对较少。少。(4)(4)一般情况下，用同一种限制一般情况下，用同一种限制酶酶切割切割质质粒和含有目的基因的片粒和含有目的基因的片段，但有段，但有时时可用两种限制可用两种限制酶酶分分别别切割切割质质粒和目的基因，以避免粒和目的基因，以避免质质粒和粒和质质粒之粒之间间、目的基因和目的基因之、目的基因和目的基因之间间的的连连接。接。(5)(5)标记标记基因的作用基因的作用筛选筛选、检测检测目的基因是否目的基因是否导导入受体入受体

19、细细胞。胞。(6)(6)受体受体细细胞常用植物受精卵或体胞常用植物受精卵或体细细胞胞(经组织经组织培养培养)、动动物受精物受精卵卵(一般不用体一般不用体细细胞胞)、微生物、微生物(大大肠肠杆菌、酵母菌杆菌、酵母菌)等。等。(7)(7)启启动动子子(DNA(DNA片段片段)起始密起始密码码子子(RNA)(RNA)；终终止子止子(DNA(DNA片段片段)终终止密止密码码子子(RNA)(RNA)。高高频频考点二考点二细细胞工程胞工程1.(20141.(2014 新新课标课标全国卷全国卷 T40)T40)某研究者用抗原某研究者用抗原(A)(A)分分别别免疫免疫3 3只同种小鼠只同种小鼠(X(X、Y Y

20、和和Z)Z)，每只小鼠免疫，每只小鼠免疫5 5次，每次免疫一周后次，每次免疫一周后测测定各小鼠血清抗体的效价定各小鼠血清抗体的效价(能能检测检测出抗原抗体反出抗原抗体反应应的血清最大的血清最大稀稀释释倍数倍数)，结结果如下果如下图图所示。所示。若要制若要制备杂备杂交瘤交瘤细细胞，需取免疫后小鼠的胞，需取免疫后小鼠的B B淋巴淋巴细细胞胞(染色体数染色体数目目4040条条)，并将，并将该细该细胞与体外培养的小鼠骨髓瘤胞与体外培养的小鼠骨髓瘤细细胞胞(染色体数染色体数目目6060条条)按一定比例加入按一定比例加入试试管中，再加入聚乙二醇管中，再加入聚乙二醇诱导细诱导细胞融合胞融合，经筛选经筛选培养

21、及抗体培养及抗体检测检测，得到不断分泌抗，得到不断分泌抗A A抗体的抗体的杂杂交瘤交瘤细细胞。胞。回答下列回答下列问题问题：(1)(1)制制备备融合所需的融合所需的B B淋巴淋巴细细胞胞时时，所用免疫小鼠的血清抗体效，所用免疫小鼠的血清抗体效价需达到价需达到16 00016 000以上，以上，则则小鼠最少需要小鼠最少需要经过经过次免疫次免疫后才能有符合要求的。达到要求后的后才能有符合要求的。达到要求后的X X、Y Y、Z Z这这3 3只免疫小鼠中，只免疫小鼠中，最适合用于制最适合用于制备备B B淋巴淋巴细细胞的是胞的是 小鼠，理由是小鼠，理由是 。(2)(2)细细胞融合胞融合实验实验完成后，融

22、合体系中除含有未融合的完成后，融合体系中除含有未融合的细细胞和胞和杂杂交瘤交瘤细细胞外，可能胞外，可能还还有有 ，体系中出，体系中出现现多种多种类类型型细细胞的原因是胞的原因是 。(3)(3)杂杂交瘤交瘤细细胞中有胞中有个个细细胞核，染色体数目最多是胞核，染色体数目最多是条。条。(4)(4)未融合的未融合的B B淋巴淋巴细细胞胞经经多次多次传传代培养后都不能存活，原因是代培养后都不能存活，原因是 。【审题审题解题解题答题答题】1.(1.(题题眼眼)注意注意题题中关中关键键信息：血清抗体效价需达到信息：血清抗体效价需达到16 00016 000以上。以上。2.(2.(必必备备)(1)(1)细细胞

23、两两融合后形成的胞两两融合后形成的细细胞胞类类型：型：AAAA型、型、BBBB型、型、ABAB型。型。(2)(2)正常正常细细胞不能无限增殖。胞不能无限增殖。3.(3.(突破突破)结结合合题题意，特意，特别别关注关注图图中横中横纵纵坐坐标标含含义义及数及数值值。【解析解析】本题考查制备单克隆抗体的相关知识。本题考查制备单克隆抗体的相关知识。(1)(1)据图中数据分析，第四次免疫后据图中数据分析，第四次免疫后Y Y、Z Z小鼠的血清抗体效价小鼠的血清抗体效价均达到均达到16 00016 000以上，免疫后小鼠以上，免疫后小鼠Y Y的的B B淋巴细胞产生抗体效价最淋巴细胞产生抗体效价最高，最适用于

24、制备单克隆抗体。高，最适用于制备单克隆抗体。(2)B(2)B淋巴细胞与骨髓瘤细胞混合在一起时，可能发生淋巴细胞与骨髓瘤细胞混合在一起时，可能发生B B淋巴细淋巴细胞之间的融合、骨髓瘤细胞之间的融合和胞之间的融合、骨髓瘤细胞之间的融合和B B淋巴细胞与骨髓瘤淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，故体系中会出现多种类型的细胞。细胞融合，故体系中会出现多种类型的细胞。(3)(3)杂交瘤细胞形成后，小鼠的杂交瘤细胞形成后，小鼠的B B淋巴细胞核与骨髓瘤细胞核会淋巴细胞核与骨髓瘤细胞核会融合形成一个细胞核。染色体可达融合形成一个细胞核。染色体可达100100条，有丝分裂后期染色条，有丝分裂后期染色体数目最多为体数目

25、最多为200200条。条。(4)(4)未融合的未融合的B B淋巴细胞经多次传代培养后，仍然不是能无限增淋巴细胞经多次传代培养后，仍然不是能无限增殖的细胞，分裂次数是有限的。殖的细胞，分裂次数是有限的。答案：答案：(1)(1)四四Y YY Y小鼠的抗体效价最高小鼠的抗体效价最高(2)B(2)B淋巴细胞相互融合形成的细胞，骨髓瘤细胞相互融合形成淋巴细胞相互融合形成的细胞，骨髓瘤细胞相互融合形成的细胞细胞融合是随机的，没有特异性且融合率达不到的细胞细胞融合是随机的，没有特异性且融合率达不到100%100%(3)1(3)1200200(4)(4)不能无限增殖不能无限增殖2.(20142.(2014 武

26、武汉汉四四调调)在在ABOABO血型系血型系统统中，中，A A型血和型血和B B型血人型血人红细红细胞胞膜表面分膜表面分别别含有凝集原含有凝集原A A、B B，ABAB型血人型血人红细红细胞膜表面同胞膜表面同时时含有含有凝集原凝集原A A和和B B，O O型血人型血人红细红细胞膜表面没有凝集原。下胞膜表面没有凝集原。下图图是利用是利用动动物物细细胞胞杂杂交方法制交方法制备备人抗人抗A A凝集原抗体的凝集原抗体的过过程，程，请请回答下列回答下列问题问题：(1)(1)要制要制备备人抗人抗A A凝集原抗体，凝集原抗体，应应向小鼠体内注射向小鼠体内注射细细胞，使小鼠胞，使小鼠产产生生免疫。从小鼠体免疫

27、。从小鼠体内分离的内分离的细细胞胞为为细细胞。胞。(2)(2)为诱导细为诱导细胞胞与骨髓瘤与骨髓瘤细细胞融合，常胞融合，常选选用用 作作为诱导剂为诱导剂。融合后，培养液中存在多种。融合后，培养液中存在多种杂杂交交细细胞和胞和未融合未融合细细胞，需要胞，需要进进行行 培养、克隆化培养和培养、克隆化培养和 ，才能才能获获得需要的得需要的杂杂交瘤交瘤细细胞。胞。(3)(3)制制备备的人抗的人抗A A凝集原抗体能与凝集原抗体能与发发生特异性生特异性结结合，合，若若该该抗体与待抗体与待测测血液血液样样本呈阳性反本呈阳性反应应，则则待待测样测样本的血型是本的血型是。【审题审题解题解题答题答题】1.(1.(

28、方法方法)动动物物细细胞融合方法：聚乙二醇胞融合方法：聚乙二醇(PEG)(PEG)、灭灭活的病毒、活的病毒、电电激等。激等。2.(2.(易易错错)人抗人抗A A凝集原抗体与待凝集原抗体与待测测血液血液样样本反本反应应呈阳性，如果不呈阳性，如果不理解阳性，理解阳性，则则会答成会答成B B型或型或O O型。型。【解析解析】(1)(1)凝集原凝集原A A存在于存在于A A型血和型血和ABAB型血人的红细胞膜上，型血人的红细胞膜上，要制备人抗要制备人抗A A凝集原抗体，应向小鼠体内注射凝集原抗体，应向小鼠体内注射A A型血或型血或ABAB型血人型血人的红细胞，使小鼠产生特异性的红细胞，使小鼠产生特异性

29、(或体液或体液)免疫，再从小鼠体内分免疫，再从小鼠体内分离出能产生抗离出能产生抗A A凝集原抗体的凝集原抗体的B B淋巴细胞。淋巴细胞。(2)(2)诱导诱导B B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，常选用聚乙二醇或灭活淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，常选用聚乙二醇或灭活的病毒作为诱导剂。融合后，培养液中存在多种杂交细胞和未的病毒作为诱导剂。融合后，培养液中存在多种杂交细胞和未融合细胞，需要进行选择培养、克隆化培养和抗体检测，最终融合细胞，需要进行选择培养、克隆化培养和抗体检测，最终获得需要的杂交瘤细胞。获得需要的杂交瘤细胞。(3)(3)人抗人抗A A凝集原抗体能与凝集原凝集原抗体能与凝集原A A发生特异性结合

30、，发生特异性结合，A A型或型或ABAB型型血的人红细胞膜表面含有凝集原血的人红细胞膜表面含有凝集原A A，该抗体会与其待测血液样，该抗体会与其待测血液样本呈阳性反应。本呈阳性反应。答案：答案：(1)A(1)A型型(或或ABAB型型)血人的红特异性血人的红特异性(或体液或体液)B B淋巴淋巴(浆浆)(2)(2)聚乙二醇或灭活的病毒选择抗体检测聚乙二醇或灭活的病毒选择抗体检测(3)(3)凝集原凝集原A AA A型或型或ABAB型型【知识知识方法方法误区误区】1.1.动物细胞培养的操作流程：动物细胞培养的操作流程：2.2.动动物物细细胞培养的条件：胞培养的条件：(1)(1)无菌、无毒：无菌、无毒：

31、对对培养液和所有培养用具培养液和所有培养用具进进行无菌行无菌处处理，添加理，添加抗生素，定期更抗生素，定期更换换培养液以清除代培养液以清除代谢产谢产物。物。(2)(2)营营养：除正常的有机和无机养：除正常的有机和无机营营养外，通常需加入血清、血养外，通常需加入血清、血浆浆等。等。(3)(3)适宜的温度和适宜的温度和pHpH：一般温度：一般温度为为36.536.50.5(0.5(哺乳哺乳动动物物)，pHpH为为7.27.27.47.4。(4)(4)气体气体环环境：含境：含95%95%的空气加的空气加5%CO5%CO2 2的混合气体。的混合气体。(15(15分分)解决器官移植的免疫排斥反解决器官移

32、植的免疫排斥反应应和器官供和器官供应应不足是治不足是治疗疗白白血病面血病面临临的的问题问题。某科研所运用。某科研所运用现现代生物技代生物技术术培育出培育出转转基因克基因克隆猪。隆猪。请请据据图图回答：回答：(1)(1)将供体基因将供体基因组组，以抑制抗原决定基因的表达，以抑制抗原决定基因的表达或除去抗原决定基因，降低免疫排斥反或除去抗原决定基因，降低免疫排斥反应应。(2)(2)基因表达基因表达载载体体导导入受体入受体细细胞的方法是胞的方法是。通。通过过DNADNA分子分子杂杂交技交技术术来来检测检测 ，是目的基因，是目的基因稳稳定定遗传遗传的关的关键键。(3)E(3)E过过程中若要程中若要获获

33、得大量的卵母得大量的卵母细细胞需用胞需用激素激素处处理成年母猪。受体卵母理成年母猪。受体卵母细细胞去核及胞去核及选选用用MM中期的原因是中期的原因是 。(4)(4)上述上述过过程涉及的程涉及的现现代生物工程技代生物工程技术术，属于，属于细细胞水平的是胞水平的是 。(5)(5)经过经过培养得到早期胚胎后可以用培养得到早期胚胎后可以用技技术术以以获获得得更多基因型相同的更多基因型相同的转转基因克隆猪，由于基因克隆猪，由于 ，这为这为胚胎在受体内的存活提供了胚胎在受体内的存活提供了可能。可能。【押题理由押题理由】1.1.考情分析：考情分析：纵观纵观近五年新近五年新课标课标全国卷，全国卷，“基因工程与

34、基因工程与细细胞工程胞工程”每年必考，每年必考，如如20142014年卷年卷T40T40、卷、卷T40T40，20132013年卷年卷T40T40，20122012年年T40T40等。等。所占分所占分值值一般一般为为1515分，主要分，主要为为非非选择题选择题。2.2.命命题题角度：角度：基因工程的步基因工程的步骤骤、原理、原理、应应用，体用，体细细胞核移植的流程、原理、胞核移植的流程、原理、优优点，点，转转基因克隆猪培育的技基因克隆猪培育的技术术手段等。手段等。3.3.难难度：中等偏上。度：中等偏上。4.4.押押题题指数：指数：【答题必备答题必备】1.1.降低降低转转基因基因动动物免疫排斥反

35、物免疫排斥反应应的关的关键键：抑制或除去抗原决定：抑制或除去抗原决定基因。基因。2.2.细细胞核移入去核卵母胞核移入去核卵母细细胞培养的理由：胞培养的理由：(1)(1)营营养丰富。养丰富。(2)(2)体体积积大，易操作。大，易操作。(3)(3)含有刺激含有刺激细细胞核恢复分裂能力的物胞核恢复分裂能力的物质质。【自我评卷自我评卷】本本题题共共1515分，除第分，除第(3)(3)小小题题第一空第一空1 1分外，其他每空分外，其他每空2 2分。分。你的得分是：你的得分是：分。分。【答案解析答案解析】【解析解析】(1)(1)降低免疫排斥反应的实质是对抗原的处理，故采降低免疫排斥反应的实质是对抗原的处理

36、，故采用将供体基因组导入某种调节因子，以抑制抗原决定基因的表用将供体基因组导入某种调节因子，以抑制抗原决定基因的表达或除去抗原决定基因，降低免疫排斥反应。达或除去抗原决定基因，降低免疫排斥反应。(2)(2)目的基因导入受体细胞常用三种方法：目的基因导入受体细胞常用三种方法：(植物植物)农杆菌转化农杆菌转化法；法；(动物动物)显微注射法；显微注射法；(微生物微生物)感受态细胞法。因受体细胞感受态细胞法。因受体细胞为成纤维细胞，故用显微注射法。为成纤维细胞，故用显微注射法。DNADNA分子杂交技术是检测目分子杂交技术是检测目的的DNADNA是否插入受体细胞染色体是否插入受体细胞染色体DNADNA中

37、，属于目的基因的检测与中，属于目的基因的检测与鉴定步骤。鉴定步骤。(3)(3)促性腺激素作用于卵巢，促进超数排卵。受体细胞去核保促性腺激素作用于卵巢，促进超数排卵。受体细胞去核保证目的基因的表达，从而使核移植的胚胎遗传物质全部来自有证目的基因的表达，从而使核移植的胚胎遗传物质全部来自有价值的供体细胞；价值的供体细胞；MM中期的卵母细胞具有受精能力，并且可中期的卵母细胞具有受精能力，并且可以激发细胞分裂、分化形成重组胚胎。以激发细胞分裂、分化形成重组胚胎。(4)(4)转基因克隆猪的培育运用了基因工程、动物细胞培养、体转基因克隆猪的培育运用了基因工程、动物细胞培养、体细胞核移植、早期胚胎培养、胚胎

38、移植等生物技术，属于细胞细胞核移植、早期胚胎培养、胚胎移植等生物技术，属于细胞水平的是动物细胞培养、体细胞核移植。水平的是动物细胞培养、体细胞核移植。(5)(5)为获得更多基因型相同的转基因克隆猪，可采用胚胎分割为获得更多基因型相同的转基因克隆猪，可采用胚胎分割技术。受体对移入子宫的外来胚胎基本上不发生免疫排斥反应，技术。受体对移入子宫的外来胚胎基本上不发生免疫排斥反应，这是胚胎移植的生理基础之一。这是胚胎移植的生理基础之一。答案：答案：(1)(1)导入某种调节因子导入某种调节因子(2)(2)显微注射法目的基因是否已插入猪胎儿成纤维细胞的染显微注射法目的基因是否已插入猪胎儿成纤维细胞的染色体色体DNADNA上上(3)(3)促性腺保证核移植的胚胎遗传物质全部来自有价值的供促性腺保证核移植的胚胎遗传物质全部来自有价值的供体细胞；具有受精能力，激发细胞分裂、分化形成重组胚胎体细胞；具有受精能力，激发细胞分裂、分化形成重组胚胎(4)(4)动物细胞培养、体细胞核移植动物细胞培养、体细胞核移植(5)(5)胚胎分割受体对移入子宫的外来胚胎基本上不发生免疫胚胎分割受体对移入子宫的外来胚胎基本上不发生免疫排斥反应排斥反应