北大医学八年制课件—细胞增殖与调控.ppt

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1、基础医学院基础医学院基础医学院基础医学院 细胞生物学系细胞生物学系细胞生物学系细胞生物学系细胞增殖及调控细胞增殖及调控细胞增殖及调控细胞增殖及调控 概述概述v细细胞胞增增殖殖（cellproliferation）是是细细胞胞生生命命活活动动的的重重要要特特征征，包包括括细细胞胞生生长长和细胞分裂的过程和细胞分裂的过程v细胞生长（细胞生长（cellgrowth）v细胞分裂（细胞分裂（celldivision）分裂是生长到一定阶段的结果分裂是生长到一定阶段的结果分裂和生长反复进行，导致细胞增殖分裂和生长反复进行，导致细胞增殖 细胞完成生长和分裂的全过程称为细胞完成生长和分裂的全过程称为细胞增殖周期

2、，简称细胞周期。细胞增殖周期，简称细胞周期。细胞周期包括细胞分裂的物质准备细胞周期包括细胞分裂的物质准备和细胞分裂两个相互连续的过程。和细胞分裂两个相互连续的过程。v细胞增殖是生物繁育的基础。v成体生物通过细胞增殖来弥补生命活动过程中的细胞损失。v细胞增殖受到严密的调控。v细胞增殖的生物学意义细胞增殖的生物学意义v对细胞增殖及其调控的研究具有重要的理论与实践意义。理论上，如组织和器官的形成。实践上，肿瘤的治疗。内内 容容第一节第一节第一节第一节细细细细胞周期胞周期胞周期胞周期第二节细胞分裂第二节细胞分裂第二节细胞分裂第二节细胞分裂第三节细胞增殖调控第三节细胞增殖调控第三节细胞增殖调控第三节细胞

3、增殖调控第一节第一节细胞周期细胞周期v细胞周期细胞周期（cellcycle）是指连续分裂是指连续分裂的细胞从一次分裂结束到下一次有丝的细胞从一次分裂结束到下一次有丝分裂完成所经历的整个连续过程。分裂完成所经历的整个连续过程。前期前期（prophase）早中期早中期（prometaphase）中期中期（metaphase）后期后期（anaphase）末期末期（telophase）胞质分裂胞质分裂（cytokinesis）细细胞胞周周期期G1期期（Gap1phase）S期期（Sphase）G2期期（Gap2phase）interphaseMphase间期间期分裂期分裂期v单向性：单向性：G1SG2

4、M，不能逆行，不能逆行v阶段性：各时相的细胞形态和代谢特阶段性：各时相的细胞形态和代谢特点都有明显差异点都有明显差异v不同生物细胞的细胞周期时间有差异不同生物细胞的细胞周期时间有差异v同一生物的细胞周期时间也存在很大差异同一生物的细胞周期时间也存在很大差异vG2SM的时间总和相对稳定变化小的时间总和相对稳定变化小vG1期持续时间差异大，期持续时间差异大，G1期决定细胞周期期决定细胞周期的长短的长短v从增殖的角度来看，所有真核细胞可分为从增殖的角度来看，所有真核细胞可分为周期细胞（连续分裂细胞）周期细胞（连续分裂细胞）静止期细胞（休眠细胞、静止期细胞（休眠细胞、G0期细胞）期细胞）终末分化细胞（

5、不分裂细胞）终末分化细胞（不分裂细胞）v指在细胞周期中连续运转的细胞指在细胞周期中连续运转的细胞v如小肠绒毛上皮隐窝细胞，表皮基底层细胞如小肠绒毛上皮隐窝细胞，表皮基底层细胞周期细胞（周期细胞（cyclingcell）v暂时脱离细胞周期，不进行增殖，但在暂时脱离细胞周期，不进行增殖，但在适当刺激下可重新进入细胞周期的细胞适当刺激下可重新进入细胞周期的细胞v如肝脾细胞、淋巴细胞、成纤维细胞如肝脾细胞、淋巴细胞、成纤维细胞静止期细胞（静止期细胞（quiesentcell）vG0期细胞的生成和重返细胞周期的研究期细胞的生成和重返细胞周期的研究对细胞的分化、细胞增殖调控、肿瘤发对细胞的分化、细胞增殖调

6、控、肿瘤发生和治疗、药物设计和药物筛选，具有生和治疗、药物设计和药物筛选，具有重要指导意义。重要指导意义。静止期细胞（静止期细胞（quiesentcell）v指终端分化的细胞，发生不可逆地脱离指终端分化的细胞，发生不可逆地脱离细胞周期，丧失分裂能力，但保持生理细胞周期，丧失分裂能力，但保持生理机能活动的细胞机能活动的细胞v如神经细胞、肌肉细胞如神经细胞、肌肉细胞终末分化细胞终末分化细胞细胞同步化细胞同步化（synchronizationofcells）v指在生理过程中自然发生的或经人为指在生理过程中自然发生的或经人为处理造成的使细胞处于同一细胞周期处理造成的使细胞处于同一细胞周期时相的方法时相

7、的方法v自然同步化与人工同步化自然同步化与人工同步化 人人工工同同步步化化选择同步化选择同步化诱导同步化诱导同步化有丝分裂选择法有丝分裂选择法活活细胞离心淘洗法细胞离心淘洗法DNA合成阻断法合成阻断法有丝分裂有丝分裂中期阻断法中期阻断法v适用于单层培养适用于单层培养的细胞的细胞v利用利用M期细胞呈圆球状隆起，与培养皿的期细胞呈圆球状隆起，与培养皿的附着力减弱的特点附着力减弱的特点v振荡、收集、保存在振荡、收集、保存在4、多次重复、多次重复v优点：细胞不受药物伤害，同步化程度高优点：细胞不受药物伤害，同步化程度高v缺点：分离出来的缺点：分离出来的M期细胞数量较少期细胞数量较少有丝分裂选择法有丝分

8、裂选择法v属细胞沉降分离法，适用于任何悬浮培养属细胞沉降分离法，适用于任何悬浮培养的细胞的细胞v处于细胞周期不同时相的细胞体积不同处于细胞周期不同时相的细胞体积不同v优点：同时获得大量不同周期时相的同步优点：同时获得大量不同周期时相的同步化细胞，分离效率高，对细胞活性影响小化细胞，分离效率高，对细胞活性影响小v缺点：需专门的装备、价格贵缺点：需专门的装备、价格贵活活细胞离心淘洗法细胞离心淘洗法v选用选用DNA合成的抑制剂，可逆地抑制合成的抑制剂，可逆地抑制DNA合成。常用合成。常用TdR双阻断法，细胞同步在双阻断法，细胞同步在S期期v优点：适用于任何培养体系，同步化程度优点：适用于任何培养体系

9、，同步化程度高，高，可使所有的细胞同步化可使所有的细胞同步化v缺点：细胞将可能出现非均衡生长的问题缺点：细胞将可能出现非均衡生长的问题DNA合成阻断法合成阻断法v第一次阻断：加入过量的第一次阻断：加入过量的TdR，S期细胞停期细胞停止运转，其他期细胞最后停止在止运转，其他期细胞最后停止在G1-S交界交界处处v第二次阻断：移去第二次阻断：移去TdR，释放时间大于，释放时间大于tS时，时，再次加入过量再次加入过量TdR，细胞群体阻断在，细胞群体阻断在G1-S交界处交界处DNA合成阻断法合成阻断法v药物阻断法药物阻断法有丝分裂有丝分裂中期阻断法中期阻断法利利用用某某些些药药物物（秋秋水水仙仙素素）抑

10、抑制制微微管管的的聚聚合合，抑抑制制有有丝丝分分裂裂装装置置的的形形成成，从而把细胞阻断在有丝分裂中期从而把细胞阻断在有丝分裂中期优点：操作简便、同步化效率较高优点：操作简便、同步化效率较高缺点：阻断的可逆性差缺点：阻断的可逆性差vN2O气体阻断法气体阻断法有丝分裂有丝分裂中期阻断法中期阻断法N2O暂时干扰暂时干扰M期细胞纺锤体的功能期细胞纺锤体的功能优点：同步化效率高，对细胞影响小优点：同步化效率高，对细胞影响小缺点：只适用于上皮型细胞缺点：只适用于上皮型细胞v有丝分裂完成到有丝分裂完成到DNA合成之前合成之前vtG1变化最大，控制着连续分裂细胞的变化最大，控制着连续分裂细胞的增殖率增殖率v

11、是细胞生长和是细胞生长和DNA合成准备时期合成准备时期v中心体分离，为进行中心体复制作准备中心体分离，为进行中心体复制作准备vG1/S检验点（限制点，检验点（限制点，R）v与与DNA合成起始与进行有关的酶合成起始与进行有关的酶v与细胞从与细胞从G1期到期到S期的转换有关的蛋白质期的转换有关的蛋白质蛋白质合成蛋白质合成触发蛋白触发蛋白钙调蛋白钙调蛋白细胞周期蛋白细胞周期蛋白v与细胞周期进行有关的蛋白质的磷酸化与细胞周期进行有关的蛋白质的磷酸化vH1组蛋白磷酸化增加，有利于组蛋白磷酸化增加，有利于G1晚期染晚期染色体结构成分的重排色体结构成分的重排v非组蛋白非组蛋白v某些蛋白激酶某些蛋白激酶蛋白质

12、磷酸化蛋白质磷酸化v从从DNA合成开始到合成开始到DNA合成结束的合成结束的全过程全过程v主要生化事件主要生化事件DNA复制复制组蛋白和非组蛋白合成组蛋白和非组蛋白合成核小体组装核小体组装中心体复制中心体复制vDNA复制检测点复制检测点v真核细胞真核细胞DNA复制特点复制特点DNA复制复制多个复制起点多个复制起点复制起点成簇活化复制起点成簇活化DNA复制不同步复制不同步GC含量较高的含量较高的DNA序列在早序列在早S期复制期复制AT含量较高的含量较高的DNA序列在晚序列在晚S期复制期复制常染色质先复制常染色质先复制异染色质在晚异染色质在晚S期复制期复制v组蛋白合成主要在组蛋白合成主要在S期期v

13、组蛋白与组蛋白与DNA的合成是一种联动关系的合成是一种联动关系v在细胞在细胞S期存在一个反馈机制，调节游期存在一个反馈机制，调节游离组蛋白水平，保证组蛋白形成的数量离组蛋白水平，保证组蛋白形成的数量与与DNA量相适应量相适应组蛋白合成组蛋白合成vDNA复制完成到有丝分裂开始前的时期复制完成到有丝分裂开始前的时期v细胞核内细胞核内DNA含量已增加一倍，由含量已增加一倍，由G1期期的的2n变成了变成了4n，即每个染色体含有，即每个染色体含有4个拷个拷贝的贝的DNAv活跃的活跃的RNA和蛋白质的合成，为和蛋白质的合成，为M期的期的分裂作准备分裂作准备v加速合成加速合成微管蛋白，为微管蛋白，为M期纺锤

14、体微期纺锤体微管的组装提供原料管的组装提供原料v成熟促进因子（成熟促进因子（MPF）合成合成v已复制的中心体在已复制的中心体在G2期逐渐长大，并期逐渐长大，并开始向细胞两极分离开始向细胞两极分离vG2/M检验点检验点v细胞分裂开始到分裂成两个子细胞细胞分裂开始到分裂成两个子细胞的过程的过程vRNA合成停止，蛋白质合成减少合成停止，蛋白质合成减少v染色体高度螺旋化，遗传物质均等染色体高度螺旋化，遗传物质均等分配，形成分配，形成2个子细胞个子细胞v细胞呈球形细胞呈球形v纺锤体组装检验点纺锤体组装检验点细胞分裂的概念细胞分裂的概念 一个细胞分裂成两个子代细胞的过程。在一个细胞分裂成两个子代细胞的过程

15、。在真核细胞中通常包括细胞核分裂和紧随其后的真核细胞中通常包括细胞核分裂和紧随其后的细胞质分裂。细胞质分裂。有丝分裂是体细胞分裂的主要方式，其特点是有丝分裂是体细胞分裂的主要方式，其特点是细胞通过纺锤体将遗传物质精确地等分到两个细胞通过纺锤体将遗传物质精确地等分到两个子细胞中去，以保证细胞在增殖的过程中保持子细胞中去，以保证细胞在增殖的过程中保持遗传稳定。遗传稳定。有丝分裂可分为前期、中期、后期和末期四个有丝分裂可分为前期、中期、后期和末期四个过程。过程。在有丝分裂前是分裂间期在有丝分裂前是分裂间期(interphase)，包，包括括G1期、期、S期和期和G2期，主要进行期，主要进行DNA复制

16、等准复制等准备工作。备工作。染色体凝集染色体凝集核膜裂解核膜裂解细胞内膜系统重组细胞内膜系统重组细胞骨架系统彻底重组形成纺锤体细胞骨架系统彻底重组形成纺锤体 细胞与细胞间，细胞与细胞外基质间附着减弱细胞与细胞间，细胞与细胞外基质间附着减弱v有丝分裂过程中的形态学变化：有丝分裂过程中的形态学变化：v有丝分裂过程人为划分为有丝分裂过程人为划分为前期（前期（prophase）早中期（早中期（prometaphase）中期中期（metaphase）后期后期 （anaphase）末期末期（telophase）胞质分裂胞质分裂（cytokinesis）v纺锤体（纺锤体（spindle）中中心心粒粒（cen

17、triol）、中中心心粒粒周围物质（周围物质（PCM）v星体（星体（aster）v中心体（中心体（centrosome）星体微管、动粒微管、极微管星体微管、动粒微管、极微管中心体具有微管组织中心的作用，其周围聚集大中心体具有微管组织中心的作用，其周围聚集大量的放射状排列的微管，称为星体。星体周围微量的放射状排列的微管，称为星体。星体周围微管可分为三种：管可分为三种：极间微管，是两个星体之间的微管，在赤道附极间微管，是两个星体之间的微管，在赤道附近相互重叠，形成重叠区，重叠区微管之间有动近相互重叠，形成重叠区，重叠区微管之间有动力蛋白。重叠区微管的游离端加长，在动力蛋白力蛋白。重叠区微管的游离端

18、加长，在动力蛋白的作用下相互滑动，可不断把星体推向两极。的作用下相互滑动，可不断把星体推向两极。动粒微管，是从中心体发生并与染色体动粒相动粒微管，是从中心体发生并与染色体动粒相连的微管。动粒微管与染色体动粒相连处微管可连的微管。动粒微管与染色体动粒相连处微管可缩短，将染色单体拉向两极。缩短，将染色单体拉向两极。星体微管，位于星体周围，其游离端伸向周围星体微管，位于星体周围，其游离端伸向周围胞质。胞质。由两端星体、星体微管、极间微管和动粒微管组由两端星体、星体微管、极间微管和动粒微管组合形成的纺锤形结构称为纺锤体或有丝分裂器。合形成的纺锤形结构称为纺锤体或有丝分裂器。组成纺锤体的几种微管组成纺锤

19、体的几种微管v中心体经过一系列发育过程达到成熟中心体经过一系列发育过程达到成熟并具有并具有MTOC的作用的作用v指在间期中中心体的复制至有丝分裂指在间期中中心体的复制至有丝分裂开始时两个新的中心体分离的过程开始时两个新的中心体分离的过程中心体周期（中心体周期（centrosomecycle）中心体周期中心体周期 v染色质凝集染色质凝集v开始组装有丝分裂装置开始组装有丝分裂装置v核仁解体核仁解体前期（前期（prophase）染色质凝集成染色体染色质凝集成染色体 染色质凝集是细胞进入有丝分裂前期的标志。染色质凝集是细胞进入有丝分裂前期的标志。前期开始时，染色质开始浓缩，由原来的线前期开始时，染色质

20、开始浓缩，由原来的线性染色质，经过进一步螺旋化、折叠和包装，性染色质，经过进一步螺旋化、折叠和包装，形成光镜下可辨的早期染色体结构。形成光镜下可辨的早期染色体结构。早期染色体由两条棒状的染色单体并列而早期染色体由两条棒状的染色单体并列而 成，中间有着丝粒成，中间有着丝粒(centromerecentromere)相连。着丝相连。着丝粒的外侧部附有动粒（粒的外侧部附有动粒（kinetochorekinetochore），），动粒动粒是染色体与纺锤体中的动粒微管相连的部位。是染色体与纺锤体中的动粒微管相连的部位。开始组装有丝分裂装置开始组装有丝分裂装置开始组装有丝分裂装置开始组装有丝分裂装置中心体

21、在间期也进行了复制。前期两个中心体前期两个中心体彼此分开，并分别向两极移动。彼此分开，并分别向两极移动。有丝分裂的前期有丝分裂的前期v核被膜崩解核被膜崩解v核纤层解聚核纤层解聚v纺锤体进一步装配纺锤体进一步装配v纺锤体微管与染色体接触、结合纺锤体微管与染色体接触、结合v动粒微管牵拉染色体剧烈地旋转、动粒微管牵拉染色体剧烈地旋转、振荡，往返于两极之间振荡，往返于两极之间早中期（早中期（prometaphase）有丝分裂的早中期有丝分裂的早中期v染色体排列到赤道面上染色体排列到赤道面上v染色体最大程度凝集染色体最大程度凝集v形成完整的有丝分裂器形成完整的有丝分裂器中期（中期（metaphase）有

22、丝分裂的中期有丝分裂的中期v姊妹染色单体同时分开并移向两极姊妹染色单体同时分开并移向两极v后期后期A：动粒微管缩短：动粒微管缩短v后期后期B：极微管加长：极微管加长后期后期（anaphase）v在后期A，动粒微管变短，两个染色单体向两极运动。v在后期B，极间微管长度增加，纺锤体两极之间的距离逐渐拉长。v后期可分为两个连续的阶段：后期A和后期B。AnaphaseAAnaphaseAAnaphaseBAnaphaseBMicrotubulesandMotorsinthespindle有丝分裂的后期有丝分裂的后期v子染色体到达两极子染色体到达两极v动粒微管消失动粒微管消失 v染色体开始解螺旋染色体开

23、始解螺旋v核膜碎片重组成完整核被膜核膜碎片重组成完整核被膜v核仁重新出现核仁重新出现末期（末期（telophase）有丝分裂的末期有丝分裂的末期v开始于细胞分裂后期，完成于细胞分裂末期开始于细胞分裂后期，完成于细胞分裂末期v分裂沟：赤道板周围处细胞表面下陷形成分裂沟：赤道板周围处细胞表面下陷形成v收缩环：由微丝束环绕细胞一周形成收缩环：由微丝束环绕细胞一周形成胞质分裂（胞质分裂（cytokinesis）胞胞质质分分裂裂第三节第三节细胞增殖调控细胞增殖调控一、一、细胞周期调控的关键分子细胞周期调控的关键分子v细胞增殖是一个多阶段、多因子参与，高细胞增殖是一个多阶段、多因子参与，高度精确的过程，这

24、个过程是由不同基因严度精确的过程，这个过程是由不同基因严格按照时间顺序表达的结果，也是基因与格按照时间顺序表达的结果，也是基因与环境因素相互作用的结果。环境因素相互作用的结果。v细胞周期的调控是严格有序、极其复杂的细胞周期的调控是严格有序、极其复杂的过程，涉及多个因子在多层次上的作用过程，涉及多个因子在多层次上的作用v1960s，LelandHartwell以以芽芽殖殖酵酵母母为实验材料，为实验材料，v发现发现cdc28基因基因vcdc28基基因因编编码码一一个个34KD的的蛋蛋白白激激酶，促进细胞周期的进行酶，促进细胞周期的进行研究背景研究背景budding yeastv1970s，Paul

25、Nurse以以裂裂殖殖酵酵母母为为实实验材料验材料v发现发现cdc2基因基因vcdc2基基因因编编码码一一个个34KD的的蛋蛋白白激激酶酶，促进细胞周期的进行促进细胞周期的进行研究背景研究背景Fission yeastv1980s，TimothyHunt以以海海胆胆为为实实验验材料材料v发现细胞周期蛋白（发现细胞周期蛋白（CyclinA和和B）研究背景研究背景LelandH.Hartwell R.Timothy(Tim)Hunt SirPaulM.Nurse v2001年年10月月8日日Hartwell、Nurse和和Hunt因因对对细细胞胞周周期期关关键键调调控控分分子子的的研研究究而而获获

26、诺诺贝贝尔尔生生理理学学/医学奖。医学奖。v周期蛋白周期蛋白（Cyclin）v周期蛋白依赖性蛋白激酶周期蛋白依赖性蛋白激酶（Cdk）v周周期期蛋蛋白白依依赖赖性性蛋蛋白白激激酶酶抑抑制制蛋蛋白白（CKI）细胞周期调控的关键分子细胞周期调控的关键分子v在细胞周期中呈周期性的积累和消失在细胞周期中呈周期性的积累和消失v分子结构特点：周期蛋白框（分子结构特点：周期蛋白框（cyclinbox）、）、破坏框（破坏框（destructionbox）vCyclin与与Cdk形成二聚复合物，表现出激酶形成二聚复合物，表现出激酶活性，活性，Cdk为催化亚基，为催化亚基，Cyclin为调节亚基为调节亚基v在高等真

27、核生物中，在高等真核生物中，Cyclins主要包括主要包括CyclinA-H8个成员个成员vG1-Cyclins，在在G1期结合期结合Cdk4或或Cdk6，促使细胞通过促使细胞通过Start或或R点，如点，如CyclinDvG1/S-Cyclins，在在G1期末结合期末结合Cdk2，启动，启动DNA合成，如合成，如CyclinEvS-Cyclins，在在S期进程中结合期进程中结合Cdk2，使，使DNA复制得以延续复制得以延续，如，如CyclinAvM-Cyclins，在在M期结合期结合Cdk1（Cdc2），），促进有丝分裂事件的发现，如促进有丝分裂事件的发现，如CyclinB周期蛋白周期蛋白分

28、类分类v又称细胞促分裂因子（又称细胞促分裂因子（mitosis-promotingfactor）v是一种蛋白激酶是一种蛋白激酶v是是Cdc2和和CyclinB所形成的复合物所形成的复合物v促进细胞由促进细胞由G2期进入期进入M期期成熟促进因子成熟促进因子（maturation-promotingfactor，MPF）vCdks是一类丝氨酸是一类丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶苏氨酸蛋白激酶v在高等真核生物中至少有在高等真核生物中至少有8种，即种，即Cdk1（Cdc2）Cdk8v各种各种Cdk在细胞周期内特定的时间被激活，在细胞周期内特定的时间被激活，通过磷酸化底物，驱使细胞完成细胞周期通过磷酸化底物，驱

29、使细胞完成细胞周期vCyclinv磷酸化与去磷酸化磷酸化与去磷酸化vCKICdk活性的调节因素活性的调节因素vv活化位点：第活化位点：第活化位点：第活化位点：第161161位的苏氨酸（位的苏氨酸（位的苏氨酸（位的苏氨酸（T161T161）vv抑制位点：第抑制位点：第抑制位点：第抑制位点：第1414位的苏氨酸（位的苏氨酸（位的苏氨酸（位的苏氨酸（T14T14）vv抑制位点：第抑制位点：第抑制位点：第抑制位点：第1515位的酪氨酸（位的酪氨酸（位的酪氨酸（位的酪氨酸（Y15Y15）Cdk磷酸化位点磷酸化位点细胞周期的驱动细胞周期的驱动vG1期期：CyclinD与与Cdk4、Cdk6结结合合，Rb磷

30、磷酸酸化化、释释放放出出转转录录因因子子E2F、激激活与活与DNA复制相关基因的表达复制相关基因的表达vG1-S期期：CyclinE与与Cdk2结结合合，细细胞胞进入进入S期期vS期期：Cyclin A与与Cdk2结结合合，DNA复复制延续制延续vM期期：CyclinB与与Cdk1结结合合，染染色色体体浓缩、微管蛋白磷酸化浓缩、微管蛋白磷酸化CDK激酶结合的周期蛋白以及它们激酶结合的周期蛋白以及它们在细胞周期中执行调节功能的时期在细胞周期中执行调节功能的时期v对对Cdk激酶活性起负性调控的蛋白质激酶活性起负性调控的蛋白质v与与Cdk或或Cyclin-Cdk复合物结合，拮抗复合物结合，拮抗Cyc

31、lin，抑制，抑制CDK的激活的激活vCKI分为分为CIP/KIP和和INK4两大家族两大家族vp21、p27和和p57是是CIP/KIP家族的典型代表家族的典型代表v与多种与多种Cyclin-Cdk复合物结合，抑制大多数复合物结合，抑制大多数Cdk的激酶活性的激酶活性v与与DNA复制聚合酶复制聚合酶 的功能亚基的功能亚基PCNA（增殖增殖细胞核抗原）结合，直接抑制细胞核抗原）结合，直接抑制DNA的合成的合成CIP/KIP家族家族v成员主要包括成员主要包括p16、p15、p18和和p19v与与CyclinD竞争性结合竞争性结合Cdk4和和Cdk6v抑制抑制Cdk4和和Cdk6的活性的活性v抑制

32、抑制Rb磷酸化磷酸化v阻止细胞由阻止细胞由G1期进入期进入S期期INK4家族家族二、二、细胞周期检验点（细胞周期检验点（checkpoint）v在长期进化过程中，细胞形成了一套在长期进化过程中，细胞形成了一套保证细胞周期中保证细胞周期中DNA复制和染色体分复制和染色体分配的监控机制，称为细胞周期检验点配的监控机制，称为细胞周期检验点v高等真核生物和酵母细胞中普遍存在高等真核生物和酵母细胞中普遍存在v负反馈调节机制负反馈调节机制二、二、细胞周期检验点（细胞周期检验点（checkpoint）vDNA损伤检验点（损伤检验点（DNAdamagecheckpoint）：检测）：检测DNA有无损伤、合成有

33、无有无损伤、合成有无错误，错误，DNA损伤、合成未完成，不能进损伤、合成未完成，不能进入入S期或期或M期期G1/S检验点（检验点（G1/Scheckpoint）G2/M检验点（检验点（G2/Mcheckpoint）二、二、细胞周期检验点（细胞周期检验点（checkpoint）vDNA复制检验点（复制检验点（DNAreplicationcheckpoint）：检测）：检测DNA复制的进度，复制的进度，S期期DNA合成未完成，不能进入合成未完成，不能进入M期期v纺锤体组装检验点（纺锤体组装检验点（spindleassemblycheckpoint）：纺锤体组装异常、和染）：纺锤体组装异常、和染色体

34、连接不良，不能进入后期色体连接不良，不能进入后期v在早在早G1期和晚期和晚G1之间存在一个特定的检验点之间存在一个特定的检验点v在酵母细胞中该点被称为启动点（在酵母细胞中该点被称为启动点（start）v高等真核细胞中该点被称为限制点（高等真核细胞中该点被称为限制点（R点点）限制点（限制点（R点点，restrictionpoint）v是控制细胞增殖的关键，由此细胞可是控制细胞增殖的关键，由此细胞可能有能有3种不同命运的出现种不同命运的出现限制点（限制点（R点点，restrictionpoint）继续增殖细胞继续增殖细胞暂时不增殖细胞暂时不增殖细胞细胞周期检验点细胞周期检验点习题习题细胞同步化的概念细胞同步化的概念细胞同步化的概念细胞同步化的概念，及其方法的分类。，及其方法的分类。，及其方法的分类。，及其方法的分类。