生物化学实验基本技能训练课件.ppt

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1、生物化学实用技术主讲老师：刘名江生物与生态工程学院四、生物化学实验室基础知识n（一）化学试剂及其取用n（二）化学溶液及其配制n（三）常用仪器机器操作（一）化学试剂及其取用试剂试剂等等级级等等级级名称名称等等级级缩缩写写标签颜标签颜色色用途用途一级保证试剂GR绿色纯度最高,适用于最精密的分析研究.二级分析纯AR红色纯度较高,适用于精确的微量分析,为分析实验室广泛应应用用.三级化学化学纯CP蓝色纯度略低,适用于一般的微量分析,要求不高工工业业分析和快速分析.四级实验试剂LR棕黄色纯度较低,但高于工业用试剂.适用于一般的定性检验.生化试剂生物试剂B.R.或C.R.根据试剂说明使用1、化学试剂的分类根

2、据化学试剂的纯度和杂质含量，国内将化学试剂分为五个等级，我国国家标准还规定了不同等级试剂标签的颜色和应用范围。2、化学试剂的包装n盛装固态、液态化学剂的容量一般有玻璃、塑料和金属的三类。玻璃容器可以盛装各种化学试剂，包括可燃性的高纯度的试剂。而塑料和金属容器虽不适宜于盛装各种化学试剂，但比玻璃容器不易破裂。化学试剂所采用的包装容器是根据试剂的性质和纯度来确定的。3、化学试剂的取用1.固体试剂的取用规则n（1）要用干净的药勺取用。用过的药勺必须洗净和擦干后才能使用，以免沾污试剂。n（2）取用试剂后立即盖紧瓶盖，防止药剂与空气中的氧气等起反应。n（3）称量固体试剂时，必须注意不要取多，取多的药品，

3、不能倒回原瓶。因为取出已经接触空气，有可能已经受到污染，再倒回去容易污染瓶里的其它药剂。n（4）一般的固体试剂可以放在干净的纸或表面皿上称量。具有腐蚀性、强氧化性或易潮解的固体试剂不能在纸上称量，应放在玻璃容器内称量。如氢氧化钠有腐蚀性，又易潮解，最好放在烧杯中称取，否则容易腐蚀天平。n（5）有毒的药品称取时要做好防护措施。如戴好口罩、手套等。2.液体试剂的取用规则n（1）从滴瓶中取液体试剂时，要用滴瓶中的滴管，滴管绝不能伸入所用的容器中，n以免接触器壁而玷污药品。从试剂瓶中取少量液体试剂时，则需使要专用滴管。装有药品的滴管不得横置或滴管口向上斜放，以免液体滴入滴管的胶皮帽中，腐蚀胶皮帽，再取

4、试剂时受到污染。n（2）从细口瓶中取出液体试剂时，用倾注法。先将瓶塞取下，反放在桌面上，手握住试剂瓶上贴标签的一面，逐渐倾斜瓶子，让试剂沿着洁净的管壁流入试管或沿着洁净的玻璃棒注入烧杯中。取出所需量后，将试剂瓶扣在容器上靠一下，再逐渐竖起瓶子，以免遗留在瓶口的液体滴流到瓶的外壁。n（3）在某些不需要准确体积的实验时，可以估计取出液体的量。例如用滴管取用液体时，1ml相当于多少滴，5ml液体占容器的几分之几等。倒入的溶液的量，一般不超过其容积的1/3。n（4）定量取用液体时,用量筒或移液管取。量筒用于量度一定体积的液体，可根据需要选用不同量度的量筒，而取用准确的量时就必须使用移液管。n（5）取用

5、挥发性强的试剂时要在通风橱中进行，做好安全防护措施。3、化学试剂的取用二、化学溶液及其配制1、一般溶液的配制及保存方法根据配制溶液的准确度要求来确定以下内容：（1）哪一级别的天平；（2）何种容器定容；（3）记录数据准确到哪几位有效数字；配制及保存溶液时可遵循下列原则：（1）配制溶液时，要合理选择试剂的级别，不许超规格使用试剂，以免造成浪费。（2）若经常并大量使用的溶液，可先配置浓度约大10倍的储备液，使用时取储备液稀释10倍即可。（3）若试剂溶解时有放热现象，或以加热促使其溶解的，应待其冷却后，再移至试剂瓶或容量瓶中。（4）对易水解的固体试剂如FeCl3等，配置其溶液时，可先用适量的酸或碱溶解

6、，再用蒸馏水定容。（5）配制稀硫酸溶液时，应特别注意，试剂稀释应在不断搅拌下将浓硫酸缓慢倒入盛水的容器内，切不可颠倒操作顺序。（6）配好的溶液盛装在试剂瓶中，应贴好标签，注明溶液的浓度、名称及配置日期。（7）易侵蚀或腐蚀玻璃的溶液，不能盛放在玻璃瓶中，如含氟的盐类，苛性碱等应保存在聚乙烯塑料瓶中。（8）易挥发、易分解的试剂及溶液及有机溶剂等都应存放在综合瓶中，密封好后放在暗处阴凉地方，避免光的照射。2、标准溶液的配制方法标准溶液及基准物质定标准溶液及基准物质定义义 标准溶液是指已知准确浓度的溶液，它是滴定分析中进行定量计算的依据之一。能用于直接配制标准溶液的物质，称为基准物质或基准试剂，它是用

7、来确定某一溶液准确浓度的标准物质。n作为基准物质必须符合下列要求：（1）试剂必须具有足够高的纯度，一般要求其纯度在99.9%以上，所含的杂质应不影响滴定反应的准确度。（2）物质的实际组成与它的化学式完全相符，若含有结晶水（如硼砂Na2B4O7.10H2O），其结晶水的数目也应与化学式完全相符。（3）试剂应该稳定。例如，不易吸收空气中的水分和二氧化碳，不易被空气氧化，加热干燥时不易分解等。（4）试剂最好有较大的摩尔质量，这样可以减少称量误差。常用的基准物质有纯金属和某些纯化合物，如Cu,Zn,Al,Fe和K2Cr2O7，Na2CO3,MgO,KBrO3 等，它们的含量一般在99.9%以上，甚至可

8、达99.99%。注意：注意：有些高纯试剂和光谱纯试剂虽有些高纯试剂和光谱纯试剂虽然纯度很高然纯度很高，但只能说明其中杂质，但只能说明其中杂质含量很低。由于可能含有组成不定含量很低。由于可能含有组成不定的水分和气体杂质，使其组成与化的水分和气体杂质，使其组成与化学式不一定准确相符，致使主要成学式不一定准确相符，致使主要成分的含量可能达不到分的含量可能达不到99.9%99.9%，这时就，这时就不能用作基准物质。不能用作基准物质。n标准溶液的配制与标定的一般规定：标准溶液的配制与标定的一般规定：n1配制及分析中所用的水及稀释液，在没有注明其它要求时，系指其纯度能满足分析要求的蒸馏水或离子交换水。n2

9、工作中使用的分析天平、滴定管、容量瓶及移液管等均需较正。n3标准溶液规定为20时，标定的浓度为准（否则应进行换算）。n4在标准溶液的配制中规定用“标定”和“比较”两种方法测定时，不要略去其中任何一种，而且两种方法测得的浓度值之相对误差不得大于0.2，以标定所得数字为准。n5标定时所用基准试剂应符合要求，含量为99.95-100.05%，换批号时，应做对照后再使用。基准试剂需定期的进行期间核查。n6配制标准溶液所用药品应符合化学试剂分析纯级。n7配制0.02（M）或更稀的标准溶液时，应于临用前将浓度较高的标准溶液，用煮沸并冷却水稀释。n8碘量法的反应温度在1520之间。配制标准溶液的方法配制标准

10、溶液的方法n1.直接配制法直接配制法用分析天平准确地称取一定量的物质，溶于适量水后定量转入容用分析天平准确地称取一定量的物质，溶于适量水后定量转入容量瓶中，稀释至标线，定容并摇匀。根据溶质的质量和容量瓶的体积计量瓶中，稀释至标线，定容并摇匀。根据溶质的质量和容量瓶的体积计算该溶液的准确浓度。算该溶液的准确浓度。例如：氯化钠、葡萄糖、例如：氯化钠、葡萄糖、K2Cr2O7、KBrO3等。等。很多仪器分析中用到的标准物质配制的标准溶液，如很多仪器分析中用到的标准物质配制的标准溶液，如三聚氰胺、苯三聚氰胺、苯甲酸、维生素类甲酸、维生素类，这些都是通过直接配制法进行制备相应的标准溶液。，这些都是通过直接

11、配制法进行制备相应的标准溶液。配制步骤：溶解配制步骤：溶解-转移转移-洗涤洗涤-定容定容-摇匀摇匀2.间接配制法（标定法）需要用来配制标准溶液的许多试剂不能完全符合上述基准物质必备的条件。n例如：NaOH极易吸收空气中的二氧化碳和水分，纯度不高；市售盐酸中HCl的准确含量难以确定，且易挥发；KMnO4和Na2S2O3等均不易提纯，且见光分解，在空气中不稳定等。n因此，这类试剂不能用直接法配制标准溶液，只能用间接法配制，即先配制成接近于所需浓度的溶液，然后用基准物质（或另一种物质的标准溶液）来测定其准确浓度。这种确定其准确浓度的操作称为标定。n在常量组分的测定中，标准溶液的浓度大致范围为0.01

12、mol/L至1mol/L，通常根据待测组分含量的高低来选择标准溶液浓度的大小。n例如：n配制0.1mol/LHCl标准溶液，先用一定量的浓HCl加水稀释，配制成浓度约为0.1mol/L的稀溶液，然后用该溶液滴定经准确称量的无水Na2CO3基准物质，直至两者定量反应完全，再根据滴定中消耗HCl溶液的体积和无水Na2CO3的质量，计算出HCl溶液的准确浓度。大多数无法通过直接配制的标准溶液的准确浓度是通过标定的方法确定的。间接法配制的标准溶液标定过程：基准物质基准物质干燥后的组成干燥后的组成干燥条件干燥条件标定对象举例标定对象举例名称名称化学式化学式碳酸钠碳酸钠Na2CO3Na2CO3270300

13、盐酸、硫酸盐酸、硫酸邻苯二甲邻苯二甲酸氢钾酸氢钾KHC8H4O4KHC8H4O4105110氢氧化钠氢氧化钠氢氧化钾氢氧化钾重铬酸钾重铬酸钾K2Cr2O7K2Cr2O7140150硫代硫酸钠硫代硫酸钠溴酸钾溴酸钾KBrO3KBrO3130还原剂还原剂草酸钠草酸钠Na2C2O4Na2C2O4105-110KMnO4氧化锌氧化锌ZnOZnO775-825EDTA氯化钠氯化钠NaClNaCl500600AgNO3n为了提高标定的准确度，标定时应注意以下几点：标定单人应平行测定，至少重复4次，并要求测定结果的相对偏差不大于0.2%，双人8平行测定。为了减少测量误差，称取基准物质的量不应太少，最少应称取

14、0.15以上；同样滴定到终点时消耗标准溶液的体积也不能太小，最好在30-40L之间。配制和标定溶液时使用的量器，如滴定管，容量瓶和移液管等，在必要时应校正其体积，并考虑温度的影响。标定好的标准溶液应该妥善保存，避免因水分蒸发而使溶液浓度发生变化。(5)有些不够稳定，如见光易分解的gNO3和KMnO4等标准溶液应贮存于棕色瓶中，并置于暗处保存。(6)能吸收空气中二氧化碳并对玻璃有腐蚀作用的强碱溶液，最好装在塑料瓶中，并在瓶口处装一碱石灰管，以吸收空气中的二氧化碳和水。化学常见仪器使用化学常见仪器使用化学仪器在化学中的地位化学仪器在化学中的地位化学（化学（Chemistry）是研究物质的组成、结构

15、、性质、以及变化）是研究物质的组成、结构、性质、以及变化规律的科学。世界是由物质组成的，化学则是人类用以认识和改造物质世规律的科学。世界是由物质组成的，化学则是人类用以认识和改造物质世界的主要方法和手段之一，它是一门历史悠久而又富有活力的学科，它的界的主要方法和手段之一，它是一门历史悠久而又富有活力的学科，它的成就是社会文明的重要标志。成就是社会文明的重要标志。化学是一门化学是一门以实验为基础以实验为基础的学科，的学科，实验又不得不依赖仪器实现实验又不得不依赖仪器实现，所以仪器在化学学科中具有非常重要的地位，能否正确，规范的使用各种所以仪器在化学学科中具有非常重要的地位，能否正确，规范的使用各

16、种仪器是学好化学的关键。仪器是学好化学的关键。化学仪器的简单分类化学仪器的简单分类u从功能及用途：合成仪器，分离仪器，检测仪器，联用仪器等；从功能及用途：合成仪器，分离仪器，检测仪器，联用仪器等；u从材料：玻璃仪器，非玻璃仪器（含大型仪器）从材料：玻璃仪器，非玻璃仪器（含大型仪器）u仪器来源：仪器来源：虚拟仪器虚拟仪器和现实仪器和现实仪器化学常见仪器的规范使用化学常见仪器的规范使用l（一）、容器与反应器（一）、容器与反应器l（二）、计量仪器（二）、计量仪器l（三）、干燥仪器（三）、干燥仪器l（四）、其他常用化学仪器（四）、其他常用化学仪器n（1）试管主要用途：常温或加热条件下，用作少量试剂的反

17、应容器。收集少量气体和气体的验纯。盛放少量药品。使用方法及注意事项：可直接加热，用试管夹夹住距试管口1/3处。试管的规格有大有小。不加热时，试管内盛放的液体不超过容积的1/2，加热时不超过1/3。加热前外壁应无水滴；加热后不能骤冷，以防止试管破裂。加热时，试管口不应对着任何人。给固体加热时，试管要横放，管口略向下倾斜。不能用试管加热熔融NaOH等强碱性物质。1、可直接加热、可直接加热（一）、容器与反应器（一）、容器与反应器n（2）蒸发皿主要用途：溶液的蒸发、浓缩、结晶。干燥固体物质。使用方法及注意事项：盛液量不超过容积的2/3。可直接加热，受热后不能骤冷。应使用坩埚钳取放蒸发皿。n（3）坩埚主

18、要用途：用于固体物质的高温灼烧。使用方法及注意事项：把坩埚放在三脚架上的泥三角上直接加热。取放坩埚时应用坩埚钳。加热后可放在干燥器中或石棉网上冷却。应根据加热物质的性质不同，选用不同材料的坩埚。2、垫石棉网可加热、垫石棉网可加热（1）烧杯主要用途：用作固体物质溶解、液体稀释的容器。用作较大量试剂发生反应的容器。用于过滤、渗析、喷泉等实验，用于气密性检验、尾气吸收装置、水浴加热等。冷的干燥的烧杯可用来检验气体燃烧有无水生成；涂有澄清石灰水的烧杯可用来检验CO2气体。使用方法及注意事项：常用规格有50mL、100mL、250mL等，但不用烧杯量取液体。应放在石棉网上加热，使其受热均匀；加热时，烧杯

19、外壁应无水滴。盛液体加热时，不要超过烧杯容积的2/3，一般以烧杯容积的1/2为宜。溶解或稀释过程中，用玻璃棒搅拌时，不要触及杯底或杯壁。n（2）烧瓶主要用途：可用作试剂量较大而有液体参加的反应容器，常用于各种气体的发生装置中。蒸馏烧瓶用于分离互溶的、沸点相差较大的液体。圆底烧瓶还可用于喷泉实验。使用方法及注意事项：应放在石棉网上加热，使其受热均匀；加热时，烧瓶外壁应无水滴。平底烧瓶不能长时间用来加热。不加热时，若用平底烧瓶作反应容器，无需用铁架台固定。n（3）锥形瓶主要用途：可用作滴定反应的反应器。代替试管、烧瓶等作气体发生的反应器。在蒸馏实验中，用作液体接受器，接受馏分。使用方法及注意事项：

20、滴定时，只振荡不搅拌。加热时，需垫石棉网。n（1）集气瓶（瓶口边缘磨砂）主要用途：与毛玻璃片配合，可用于收集和暂时存放气体。用作物质与气体间反应的反应容器。使用方法及注意事项：不能加热。将瓶口与毛玻璃片涂抹一层薄凡士林，以利气密。进行燃烧实验时，有时需要在瓶底放少量水或细沙。3、不能加热、不能加热n2）广口瓶、细口瓶（瓶颈内侧磨砂）主要用途：广口瓶用于存放固体药品，也可用来装配气体发生器（不需要加热）。细口瓶用于存放液体药品。使用方法及注意事项：一般不能加热。酸性药品、具有氧化性的药品、有机溶剂，要用玻璃塞；碱性试剂要用橡胶塞。对见光易变质的要用棕色瓶。n（3）滴瓶主要用途：用于存放少量液体，

21、其特点是使用方便，使用方法及注意事项：滴管不能平放或倒立，以防液体流入胶头。盛碱性溶液时改用软木塞或橡胶塞。不能长期存放碱性试剂。n（4）启普发生器主要用途：固液不加热制气体反应的反应器（氢气，硫化氢，二氧化碳）特点：随开随用、随关随停。使用方法及注意事项：不可加热，也不能用于剧烈放热的反应，使用前应先检查装置的气密性。n1、粗量仪器（1）量筒主要用途：粗略量取液体的体积（其精度可达到0.1mL）。通过量取液体的体积测量固体、气体的体积。使用方法及注意事项：有10mL、25mL、50mL、100mL、200mL、500mL等规格的，量筒规格越大，精确度越低。量筒无零刻度。量液时，量筒必须放平，

22、视线要跟量筒内液体的凹液面的最低处保持水平。（二）、计量仪器（二）、计量仪器n2、精密量度仪器（1）滴定管主要用途：准确量取一定体积的液体（可精确到0.01mL）。中和滴定时计量溶液的体积。使用方法及注意事项：酸式滴定管不能盛放碱性试剂；碱式滴定管不能盛放酸性试剂、具有氧化性的试剂、有机溶剂等。使用前要检验是否漏水。n（2）容量瓶主要用途：配制一定体积浓度准确的溶液（如物质的量浓度溶液）。使用方法及注意事项：颈部有一环形标线，瓶上标有温度和容器，常用规格有50mL、100mL、250mL、500mL等。使用前要检验是否漏水。不用来量取液体的体积。n（3）移量管主要用途：移取一准确体积的溶液。使

23、用方法及注意事项：管体上标有温度，常用规格有01ml、02ml、05ml、lml、2ml、5ml及10ml等，供量取10ml以下任意体积的液体之用。使用前要检查管口是否破损；在精密分析中使用的移液管和吸量管都不允许在烘箱崐中烘干；移液管与容量瓶常配合使用,因此使用前常作两者的崐相对体积的校准；为了减少测量误差,吸量管每次都应从最上面刻度为起始点,往下放出所需体积,而不是放出多少体积就吸取多少体积。n（4）移液管主要用途：移取一确定体积的溶液。使用方法及注意事项：管体上标有温度，常用规格有0.2mL、0.5mL、1.0mL、2.0mL等。使用前要检查管口是否破损，写着要吹就吹,没有写就不用吹；放

24、液要挨着瓶壁,液体放完15秒后才拿出。n（5）比色管n（6）移液枪n（1）托盘天平主要用途：用于粗略称量物质的质量，其精确度可达到0.1g。使用方法及注意事项：称量前调“0”点：游码移零，调节天平平衡。称量时，两盘垫纸，左物右码。易潮解、有腐蚀性的药品必须放在玻璃器皿里称量。称量后：砝码回盒，游码回零。3、计量器、计量器n（2）温度计主要用途：用于测量液体或蒸气的温度。使用方法及注意事项：应根据测量温度的高低选择适合测量范围的温度计，严禁超量程使用。测量液体的温度时，温度计的液泡要悬在液体中，不能触及容器的底部或器壁。蒸馏实验中，温度计的液泡在蒸馏烧瓶支管口略下部位。不能将温度计当搅拌棒使用。

25、n1、干燥管主要用途：内装固体干燥剂（高氯酸镁、氯化钙、五氧化二磷吸收水份；碱石灰、烧碱石棉或浸有苛性钠溶液的石棉用于吸收二氧化碳气体），用于气体的干燥或接入容器，防止物质吸收水汽或CO2等。使用方法及注意事项：球体和细管处一般要垫小棉花球或玻璃绒，以防止细孔被堵塞气体从口径大的一端进入，从口径小的一端流出用干燥管之前，务必检查一下干燥管是否是通的。（三）、干燥仪器（三）、干燥仪器n2、干燥器主要用途：用于存放干燥的物质，或使潮湿的物质干燥。使用方法及注意事项：很热的物体稍冷后放入。开闭器盖时要水平推动。不能使用液体干燥剂（如浓硫酸），一般用无水氯化钙或硅胶等。1、酒精灯主要用途：化学实验室中

26、的常用热源。使用方法及注意事项：盛酒精的量不得超过容积的3/4，也不得少于容积的1/4。绝对禁止向燃着的酒精灯中添加酒精，以免失火。熄灭时用灯帽盖灭，不能用嘴吹灭。需要获得更高的温度，可使用酒精喷灯（1000摄氏度）。（四）、其他常用化学仪器（四）、其他常用化学仪器n2、洗气瓶主要用途：用以洗涤气体，除去其中的水分或其他气体杂质。使用方法及注意事项：使用时要注意气体的流向，一般为“长进短出”。瓶内加入的液体试剂量以容积的1/3为宜，不得超过。n（3）漏斗主要用途：（1）普通漏斗向小口容器中注入液体。用于过滤装置中。用于防倒吸装置中。（2）长颈漏斗向反应器中注入液体。组装气体发生装置。（3）分液

27、漏斗分离互不相溶的液体。向反应器中滴加液体。组装气体发生装置。使用方法及注意事项：不能用火直接加热。长颈漏斗下端应插入液面以下。分液漏斗使用前需检验是否漏水（4）热漏斗：趁热分离过滤使用。n（4）玻璃棒主要用途：常用于搅拌、引流，在溶解、稀释、过滤、蒸发、物质的量浓度溶液配制等实验中应用广泛。使用方法及注意事项：搅拌时避免与器壁接触（重结晶实验例外）。结晶皿气体干燥塔干燥器布式漏斗离心试管其他常见仪器：化学仪器的现状及发展动向化学仪器的现状及发展动向n化学仪器正向智能化方向发展；n发展趋势主要表现是：基于微电子技术和计算机技术的应用实现分析仪器的自动化，通过计算机控制器和数字模型进行数据采集、

28、运算、统计、处理，提高分析仪器数据处理能力，数字图像处理，系统实现了分析仪器数字图像处理功能的发展；分析仪器的联用技术向测试速度超高速化、分析试样超微量化、分析仪器超小型化的方向发展；n仪器微型化，检测实时化，样品无损化，使用智能化要求；（实时，无损，在线的检测技术）傅里叶红外光谱仪傅里叶红外光谱仪荧光光谱仪荧光光谱仪拉曼散射光谱仪拉曼散射光谱仪原子吸收光谱仪原子吸收光谱仪原子发射光谱仪原子发射光谱仪原子荧光光谱仪原子荧光光谱仪n电化学仪器分类：电化学工作站（国产上海，美国BAS系统）；电极：常规电极，离子电极，修饰电极（纳米电极，离子液体电极）；银电极银电极玻碳电极玻碳电极pH电极电极pH复

29、合电极复合电极金电极金电极(三)常用仪器及其操作1、量筒2、移液管和吸量管3、容量瓶4、滴定管5、可调式微量移液管6、PH计量 筒 量筒是用来量取液体体积的一种玻璃仪器，一般规格以所能度量的最大容量（mL）表示，常用的有10mL，20mL，25mL，50mL，100mL，250mL、500mL，1000mL等多种规格。一、量筒的使用要点一、量筒的使用要点1、量筒的规格2、量筒的选择方法量筒外壁刻度都是以mL为单位。10mL量筒每小格表示0.1mL，而50mL量筒有每小格表示1mL或0.5mL的两种规格。可见，绝大多数的量筒每小格是量筒容量的1/100，少数为1/50。量筒越大，管径越粗，其精确

30、度越小，由视线的偏差所造成的读数误差也就越大。所以，实验中应根据所取溶液的体积，尽量选用能一次量取的最小规格的量筒。分次量取会引起较大误差。如量取70mL液体，应选用100mL量筒一次量取，而不能用10mL量筒量取7次。3、液体的注入方法向量筒里注入液体时，应用左手拿住量筒，使量筒略倾斜，右手拿试剂瓶，标签对准手心。使瓶口紧挨着量筒口，让液体缓缓流入，待注入的量比所需要的量稍少（约差1mL）时，应把量筒水平正放在桌面上，并改用胶头滴管逐滴加入到所需要的量。4、量筒的刻度 量筒没有“0”刻度，“0”刻度即为其底部。一般起始刻度为总容积的110或120。例如：10mL量筒一般从0.5mL处才开始有

31、刻度线，所以，我们使用任何规格的量筒都不能量取小于其标称体积数的120以下体积的液体，否则，误差太大。应该改用更小的合适量筒量取。在实验室做化学实验时，量筒的刻度面不能背对着自己，这样使用起来很不方便。因为视线要透过两层玻璃和液体，不容易看清。若液体是浑浊的，就更看不清刻度，而且看刻度数字也不顺眼，所以刻度面正对着自己为好。5、读取液体的体积方法 注入液体后，要等一会，使附着在内壁上的液体流下来，再读取刻度值。否则，读出的数值将偏小。读数时，应把量筒放在平整的桌面上，观察刻度时，视线、刻度线与量筒内液体的凹液面最低处三者保持水平，再读出所取液体的体积数。否则，读数会偏高或偏低。6、关于量筒仰视

32、与俯视的问题 在看量筒的容积时是看液面的中心点 仰视时视线斜向上 视线与筒壁的交点在液面下所以读到的数据偏低，实际值偏高。俯视时视线斜向下 视线与筒壁的交点在液面上所以读到的数据偏高，实际值偏低。7、注意事项 量筒面上的刻度是指室内温度在量筒面上的刻度是指室内温度在2020时的体积数。温度时的体积数。温度升高，量筒发生热膨胀，容积会增大。由此可知，量筒是不能升高，量筒发生热膨胀，容积会增大。由此可知，量筒是不能加热的，也不能用于量取过热的液体，更不能在量筒中进行化加热的，也不能用于量取过热的液体，更不能在量筒中进行化学反应或配制溶液。学反应或配制溶液。量筒一般只能用于要求不是很严格时使用，通常

33、可以应量筒一般只能用于要求不是很严格时使用，通常可以应用于定性分析和粗略的定量分析实验，精确的定量分析是不能用于定性分析和粗略的定量分析实验，精确的定量分析是不能使用量筒进行的，因为量筒的误差较大，此时可用移液管或滴使用量筒进行的，因为量筒的误差较大，此时可用移液管或滴定管来代替。定管来代替。从量筒中倒出液体后是否要用水冲洗要看具体情况而定。如果是为了使所取的液体量更准确，似乎要用水洗涤后并把洗涤液倒入所盛液体的容器中，这是不必要的。因为在制造量筒时已经考虑到有残留液体这一点；相反，如果洗涤反而使所取体积偏大。如果是用同一量筒再量别的液体，这就必须用水冲洗干净并干燥，为防止相互污染。10mL的

34、量筒一般不需读取估读值。因为量筒是粗量器，并且又是量出仪器,在倒出所量取的液体时，总会有12滴（1滴相当于0.05mL）附着在内壁上而无法倒出，其相差的体积大小已经和其最小刻度差相同，所以估读值再准确也无多大意义，只需读取到0.1mL。规格大于10mL的量筒一般需要读取估读值，若不读取，误差反而更大。因此，无论多大规格的量筒，一般读数都应保留到0.1mL。移液管和吸量管（刻度吸管）移液管和吸量管（刻度吸管）n分类：分类：10ml,5ml,2ml,1ml,0.5ml,0.2ml,0.1ml（吹（吹?）移液管移液管吸量管吸量管刻度吸管的操作方法刻度吸管的操作方法1使用前：使用前：首先要看首先要看刻

35、度吸管标记刻度吸管标记、刻度标线位置等。、刻度标线位置等。2吸液：吸液：用右手的拇指和中指捏住刻度吸管的上端，将管的下口插入用右手的拇指和中指捏住刻度吸管的上端，将管的下口插入欲吸取的溶液中；欲吸取的溶液中；左手拿洗耳球，将洗耳球内空气排出左手拿洗耳球，将洗耳球内空气排出，接在，接在管的上口把溶液慢慢吸入至刻度以上，立即用右手的食指按住管的上口把溶液慢慢吸入至刻度以上，立即用右手的食指按住管口。管口。3调节液面：调节液面：将刻度吸管向上提升离开液面，将刻度吸管向上提升离开液面，略为放松食指（有时可微微略为放松食指（有时可微微转动吸管）转动吸管）使管内溶液慢慢从下口流出，直至溶液的弯月面底使管内

36、溶液慢慢从下口流出，直至溶液的弯月面底部与标线相切为止（看刻度时，应将刻度吸管的刻度与眼睛平部与标线相切为止（看刻度时，应将刻度吸管的刻度与眼睛平行），立即用食指压紧管口。将尖端的液滴靠壁去掉，移出刻行），立即用食指压紧管口。将尖端的液滴靠壁去掉，移出刻度吸管，插入承接溶液的器皿中。度吸管，插入承接溶液的器皿中。4放出溶液：放出溶液：刻度吸管下端紧靠锥形瓶内壁刻度吸管下端紧靠锥形瓶内壁，稍松开食指，让溶液沿瓶壁，稍松开食指，让溶液沿瓶壁慢慢流下，流完后管尖端接触瓶内壁停留数秒后，再将刻度吸慢慢流下，流完后管尖端接触瓶内壁停留数秒后，再将刻度吸管移去；若刻度吸管上标有管移去；若刻度吸管上标有“吹

37、吹”，则需将管内残余液体吹出。，则需将管内残余液体吹出。法国法国GILSON 芬兰芬兰Labsystems 日本日本NICHIRYO 美国美国TOMOS 德国德国Brand 德国德国 Eppendorf 美国美国JENCONS 芬兰雷勃芬兰雷勃 Finnpipette 工工欲欲善善其其事事，必必先先利利其其器器二、微量可调式移液器（二、微量可调式移液器（micropipette,俗称俗称“加加样枪样枪”）的构造和使用方法）的构造和使用方法微量可调式微量可调式移液器的规格移液器的规格n用途用途n规格：规格：5ml移液器移液器(1000-5000ul)1ml移液器移液器(200-1000)200u

38、l移液器移液器(20-200)100ul移液器移液器(20-100ul)10ul移液器移液器(0.5-10ul)2ul移液器移液器(0.1-2ul)移液器及配套吸嘴（俗称枪头，移液器及配套吸嘴（俗称枪头，tiptip）0.5-20l20-200l100-1000l1.5ml0.2ml2ml移液器常用的盛接容器移液器常用的盛接容器酶标板酶标板离心管离心管微量可调式移液器的构造微量可调式移液器的构造扭动转轴，即可调整和改变移液器容量扭动转轴，即可调整和改变移液器容量手指把手手指把手吸头的排出器吸头的排出器容量指示容量指示吸头排出器套筒吸头排出器套筒吸头圆锥体吸头圆锥体微量可调式移液器的原理微量可调

39、式移液器的原理n1956年，由德国生理化学研究所的科学家年，由德国生理化学研究所的科学家Schnitger发明发明.活塞冲程加样活塞冲程加样活塞冲程活塞冲程(空气垫空气垫)加样器的结构是加样器的结构是空气垫、活塞空气垫、活塞。空气垫的。空气垫的作用是将吸于塑料吸头内的液体样本与加样器内的活塞分作用是将吸于塑料吸头内的液体样本与加样器内的活塞分隔开来；活塞在加样器内作弹簧样运动，通过空气垫带动隔开来；活塞在加样器内作弹簧样运动，通过空气垫带动液体进入吸头中。液体进入吸头中。移液器的操作方法移液器的操作方法-1n1.量程的调节：量程的调节：千万不要将按钮旋出量程以外（！）千万不要将按钮旋出量程以外

40、（！），否则会卡住内，否则会卡住内部机械装置而损坏了移液枪。部机械装置而损坏了移液枪。(a):P-20Model6.86m ml(b):P-200Model132.4m ml(c):P-1000Model262m m l移液器的操作方法移液器的操作方法-2n2.枪头（吸头）的装配枪头（吸头）的装配n将加样枪垂直插入枪头将加样枪垂直插入枪头（pipettetips）中，）中，稍微用稍微用力左右微微转动即可使其紧力左右微微转动即可使其紧密结合。密结合。n注意：注意：不要使劲地在枪不要使劲地在枪头盒子上敲，这样会导致移头盒子上敲，这样会导致移液枪的内部配件（如弹簧）液枪的内部配件（如弹簧）因敲击产生

41、的瞬时撞击力而因敲击产生的瞬时撞击力而变得松散，甚至会导致刻度变得松散，甚至会导致刻度调节旋钮卡住。调节旋钮卡住。Exampleoftipsizes:移液器的操作方法移液器的操作方法-3n3.吸液吸液吸取液体前，先用大拇指将按钮按下至吸取液体前，先用大拇指将按钮按下至第一停点第一停点，移液器，移液器保持竖直状态，将枪头插入液面下保持竖直状态，将枪头插入液面下23毫米毫米。然后慢慢松开。然后慢慢松开按钮回原点，取出加样枪。按钮回原点，取出加样枪。移液器的操作方法移液器的操作方法-4n4放出溶液放出溶液将加样枪加入盛接溶液的器皿中，将按钮按至第一停点排将加样枪加入盛接溶液的器皿中，将按钮按至第一停

42、点排出液体，稍停片刻继续按按钮至出液体，稍停片刻继续按按钮至第二停点（终点）第二停点（终点）吹出残余吹出残余的液体。最后松开按钮。的液体。最后松开按钮。(a)StartDispensing(b)1stStop=Dispense(c)2ndStop=Expel移液器的操作方法移液器的操作方法-5n5.弃枪头弃枪头按下加样枪上的枪头推出杆，将枪头打入指定位置。按下加样枪上的枪头推出杆，将枪头打入指定位置。Pressejectorbuttontodiscardtip.移液器的完整操作步骤移液器的完整操作步骤n1.量程的调节：量程的调节：千万不要将按钮旋出量程（！）千万不要将按钮旋出量程（！），否则会

43、卡住内部机械装置而损，否则会卡住内部机械装置而损坏了移液枪。坏了移液枪。n2.枪头（吸头）的装配枪头（吸头）的装配将加样枪垂直插入枪头（将加样枪垂直插入枪头（pipettetips）中，）中，稍微用力左右微微转动即稍微用力左右微微转动即可使其紧密结合。可使其紧密结合。不要使劲地在枪头盒子上敲，这样会导致移液枪的内不要使劲地在枪头盒子上敲，这样会导致移液枪的内部配件（如弹簧）因敲击产生的瞬时撞击力而变得松散，甚至会导致刻部配件（如弹簧）因敲击产生的瞬时撞击力而变得松散，甚至会导致刻度调节旋钮卡住。度调节旋钮卡住。n3.吸液吸液吸取液体前，先用大拇指将按钮按下至吸取液体前，先用大拇指将按钮按下至第

44、一停点第一停点，移液器保持竖直状，移液器保持竖直状态，将枪头插入液面下态，将枪头插入液面下23毫米。然后慢慢松开按钮回原点，取出加样毫米。然后慢慢松开按钮回原点，取出加样枪。枪。n4放出溶液放出溶液将加样枪加入盛接溶液的器皿中，将按钮按至第一停点排出液体，稍将加样枪加入盛接溶液的器皿中，将按钮按至第一停点排出液体，稍停片刻继续按按钮至停片刻继续按按钮至第二停点（终点）第二停点（终点）吹出残余的液体。最后松开按钮。吹出残余的液体。最后松开按钮。n5.弃枪头弃枪头按下加样枪上的枪头推出杆，将枪头打入指定位置。按下加样枪上的枪头推出杆，将枪头打入指定位置。注意事项注意事项n移液器的正确放置移液器的正

45、确放置当移液器枪头里有液体时，当移液器枪头里有液体时，切勿将移液器水平放置或倒切勿将移液器水平放置或倒置，置，以免液体倒流腐蚀活塞弹簧。以免液体倒流腐蚀活塞弹簧。n维护保养时的注意事项维护保养时的注意事项（1）如不使用，要把移液枪的量程调至最大值的刻度如不使用，要把移液枪的量程调至最大值的刻度，使弹簧处于，使弹簧处于松弛状态以保护弹簧；松弛状态以保护弹簧；（2）最好定期清洗移液枪，最好定期清洗移液枪，可以用肥皂水或可以用肥皂水或60的异丙醇，再用的异丙醇，再用蒸馏水清洗，自然晾干。蒸馏水清洗，自然晾干。（3）校准是可以在校准是可以在20-25度环境中，通过重复几次秤量蒸馏水的方度环境中，通过重

46、复几次秤量蒸馏水的方法来进行。法来进行。容量瓶上标有温度和容积，表示在所指温度下，液体的凹液面与容量瓶颈部的刻度线相切时，溶液体积恰好与瓶上标注的体积相等。常用的容量瓶有100mL、250mL、1000mL等多种。容量瓶瓶塞须用结实的细绳系在瓶颈上，以防止损坏或丢失。细细绳绳容量瓶瓶口内壁与瓶塞的质地都是磨口的。使用时，塞子塞入瓶口后，轻轻一旋，即能起到很好的密封效果磨磨口口容量瓶使用前应先检查：瓶塞是否漏水；标线位置距离瓶口是否太近。如果漏水或标线距离瓶口太近，则不宜使用。检查的方法是检查的方法是：加自来水至标线附近，盖好瓶塞后，一手用食指按住塞子，其余手指拿住瓶颈标线以上部分，另一手用指尖

47、托住瓶底边缘（图1），倒立两分钟。如不漏水，将瓶直立，将瓶塞旋转180后，再倒过来试一次。在使用中，不可将扁头的玻璃磨口塞放在桌面上，以免沾污和搞错。操作时，可用一手的食指及中指（或中指及无名指）夹住瓶塞的扁头（图2），当操作结束时，随手将瓶盖盖上。也可用橡皮圈或细绳将瓶塞系在瓶颈上，细绳应稍短于瓶颈。操作时，瓶塞系在瓶颈上，尽量不要碰到瓶颈，操作结束后立即将瓶塞盖好。图1图2容量瓶的使用1、配置溶液（1）称量）称量A.A.如果是固体试剂，如果是固体试剂，应先在台秤上称出所应先在台秤上称出所需质量的试剂。并转需质量的试剂。并转移至烧杯中，加少量移至烧杯中，加少量蒸馏水溶解蒸馏水溶解B.B.如果

48、是液体试剂，如果是液体试剂，应用量筒量出所需体应用量筒量出所需体积的液体先移入烧杯积的液体先移入烧杯中，加入适量蒸馏水中，加入适量蒸馏水稀释稀释（2）.溶解溶解注意，搅拌时玻璃棒不要与烧杯碰撞注意，搅拌时玻璃棒不要与烧杯碰撞用玻璃棒缓缓搅拌，加速溶解用玻璃棒缓缓搅拌，加速溶解2.转移转移用玻璃棒引流用玻璃棒引流A.引流时玻璃棒伸入引流时玻璃棒伸入容量瓶内的一端紧靠容容量瓶内的一端紧靠容量瓶内壁量瓶内壁B.烧杯口紧靠玻璃棒烧杯口紧靠玻璃棒倾倒。注意离容量瓶口倾倒。注意离容量瓶口不能太远不能太远3.洗涤洗涤蒸馏水蒸馏水用蒸馏水冲洗烧杯内壁及玻璃棒2-3遍，并将洗液也转移至容量瓶中4.定容定容继续向

49、容量瓶中加蒸馏水，到刻度线以下1 cm2 cm处，改用滴管滴加水到刻度（小心操作，切勿超过刻度）。5.摇匀摇匀（1）塞好瓶塞，用食指摁住瓶塞，用另一只手托住瓶底（2）把容量瓶反复倒转（约10次），使溶液混合均匀容量瓶的洗涤（1）先用自来水洗几次，倒出水后，内壁如不挂水珠，即可用蒸馏水洗好备用。否则就必须用洗液洗涤。（2）先尽量倒去瓶内残留的水，再倒入适量洗液，倾斜转动容量瓶，使洗液布满内壁，同时将洗液慢慢倒回原瓶。然后用自来水充分洗涤容量瓶及瓶塞，每次洗涤应充分振荡，并尽量使残留的水流尽。最后用蒸馏水洗三次。应根据容量瓶的大小决定用水量，如250mL容量瓶，第一次约用30mL，第二、第三次约用

50、20mL蒸馏水。滴定管n滴定管用于精确量取一定体积的溶液，由内径均匀的并带有刻度的细长玻璃管，下部有用于控制流量的玻璃活塞(或由橡皮管玻璃球组成的阀)组成。一、酸式滴定管在上部有如下的标注信息：温度容积0刻度一、酸式滴定管在下部有如下的结构：活塞玻璃尖嘴一、酸式滴定管主要规格有：25ml、50ml无色与棕色两种读数误差：0.01ml二、滴定管的正确使用1、检查是否漏液正常漏液二、滴定管的正确使用2、洗涤先用适量的蒸馏水洗涤2-3次洗液从下部放出。（见右图所示）再用3-5毫升标准溶液润洗2-3次。（见下图所示）二、滴定管的正确使用3、加标准溶液到0刻度以上2-3ml处。4、排净尖嘴内的气泡。5、