机能实验学2概述课件.ppt
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1、生理、生理、病生病生、药理药理教学实验教学实验机能实验学机能实验学背景背景机能学科教学实验室在机能学科教学实验室在20012001年由生理年由生理学、病理生理学和药理学教学实验室合并学、病理生理学和药理学教学实验室合并组成。组成。20032003年年1 1月通过了月通过了“江苏省高等学校江苏省高等学校基础课教学实验室基础课教学实验室”评估验收。评估验收。20092009年年1 1月月通过了省教育厅基础课实验通过了省教育厅基础课实验教学示范中心教学示范中心的的评估评估验收。验收。内容内容机能学实验学时分配(机能学实验学时分配(108108学时学时)机能实验学总论:机能实验学总论:5学时学时机能基
2、础性实验:机能基础性实验:40学时学时机能综合性实验:共机能综合性实验:共53学时学时机能设计性实验:机能设计性实验:10学时学时本学期本学期6363学时学时1、机能实验学简介、实验设计概述:、机能实验学简介、实验设计概述:5学时学时2、实验性肺水肿及治疗:、实验性肺水肿及治疗:5学时学时3、几种类型的缺氧及治疗:、几种类型的缺氧及治疗:4学时学时4、拟抗胆碱药对家兔离体肠管的作用、拟抗胆碱药对家兔离体肠管的作用,青霉素青霉素G钾盐毒性:钾盐毒性:5学时学时5、有机磷中毒及解救、有机磷中毒及解救,镇痛药实验:镇痛药实验:5学时学时6、家兔急性氨中毒:、家兔急性氨中毒:5学时学时7、病例讨论病例
3、讨论1:5学时学时8、普萘洛尔抗心律失常作用、普萘洛尔抗心律失常作用9、安定的抗惊厥实验、安定的抗惊厥实验,氯丙嗪降体温作用:氯丙嗪降体温作用:5学时学时10、传出神经药物对家兔血压的影响、传出神经药物对家兔血压的影响:5学时学时11、呋塞米的利尿作用:、呋塞米的利尿作用:5学时学时12、病例讨论、病例讨论2:4学时学时13、设计性实验汇报:、设计性实验汇报:5学时学时机能实验学机能实验学2考核(必修课,考核(必修课,100分)分)实验报告部分:实验报告部分:60分分(涉及药理和病生理论知识)(涉及药理和病生理论知识)实验设计及汇报:实验设计及汇报:40分分(老师评分、学生互评及自评)(老师评
4、分、学生互评及自评)机能实验学实验设计机能实验学实验设计机能实验设计机能实验设计一、概述一、概述(一)(一)实验设计概念和意义实验设计概念和意义(二)医学实验研究(二)医学实验研究(三)动物疾病模型(三)动物疾病模型二、学生自主实验设计二、学生自主实验设计三、以往实验设计案例分析三、以往实验设计案例分析一、实验设计一、实验设计实验设计:实验设计:运用有关理论知识对所建立的假说运用有关理论知识对所建立的假说进行全面考虑并作出周密的安排,这一具体的验进行全面考虑并作出周密的安排,这一具体的验证方法计划称为实验设计。证方法计划称为实验设计。实验设计是科研工作的中心环节。实验设计是科研工作的中心环节。
5、实验设计的目的实验设计的目的培养:培养:创新能力创新能力 科研思维能力科研思维能力 独立设计能力独立设计能力 动手操作能力动手操作能力 撰写科技论文的能力撰写科技论文的能力 内容完整性内容完整性参考评分标准参考评分标准 科学性科学性-具有一定的理论基础具有一定的理论基础 可行性可行性-可依据现有的实验条件可依据现有的实验条件 创新性创新性-不能重复已发表和书本上不能重复已发表和书本上 实用性实用性实验设计的总体要求实验设计的总体要求(二)医学实验研究(二)医学实验研究1医学实验研究的重要性医学实验研究的重要性医医学学的的实实践践性性很很强强,主主要要研研究究疾疾病病原原因因、发发病机制和治疗方
6、法。病机制和治疗方法。2医学研究分类医学研究分类(1)临临床床研研究究:对对病病人人进进行行。对对38063806例例尚尚无无冠冠心心病病症症状状的的原原发发性性高高胆胆固固醇醇血血症症患患者者平平均均长长达达7.4 7.4 年年的的随随访访研研究究结结果果,降降胆胆固固醇醇组组与与服服安安慰慰剂剂组组比比较较,LDL-CLDL-C下下降降20.3%,20.3%,心心绞绞痛痛减减少少20%,20%,冠冠脉脉搭搭桥桥术术减减少少21%,21%,冠冠心心病病死死亡率下降亡率下降24%24%。(2)现场调查研究:)现场调查研究:(3)实验室研究实验室研究(三)动物整体实验(三)动物整体实验1.实验方
7、法实验方法急性,慢性,动物模型急性,慢性,动物模型2.动物动物模型模型人类疾病动物模型人类疾病动物模型(Animal models of human diseases)是指在医学研究中,在动物身上建立,或是指在医学研究中,在动物身上建立,或形成类似人类疾病动物。通过动物模型直接,或间接形成类似人类疾病动物。通过动物模型直接,或间接反映疾病的发生和发展过程,在了解疾病的基础上开反映疾病的发生和发展过程,在了解疾病的基础上开创和改进、优化疾病的治疗。创和改进、优化疾病的治疗。各系统疾病动物模型各系统疾病动物模型 是是指指与与人人类类各各系系统统疾疾病病相相应应的的动动物物模模型型,如如神神经经、心
8、心血血管管、呼呼吸吸、消消化化、泌泌尿尿等等系系统统疾疾病病相相应应的动物模型。的动物模型。A.A.神经系统神经系统 1 1大鼠囊状脑动脉瘤大鼠囊状脑动脉瘤 结结扎扎大大鼠鼠颈颈总总动动脉脉,同同时时佐佐以以脱脱氧氧皮皮质质酮酮和和高高渗渗盐盐水水处处理理,饲饲喂喂含含有有氨氨基基丙丙睛睛的的饲饲料料,复复制制囊囊状状动动脉脉瘤瘤模模型型,为为研研究究人人类类脑脑动动脉脉瘤瘤与与血血液液动动力力学学的的关关系系,病变的发展及发病机理提供有益的帮助。病变的发展及发病机理提供有益的帮助。2 2结扎大鼠中动脉的大鼠卒中模型结扎大鼠中动脉的大鼠卒中模型 结结扎扎大大鼠鼠大大脑脑中中动动脉脉,复复制制中
9、中风风模模型型其其优优点点是是能能产产生生非非致致命命性性的的孤孤立立性性病病灶灶损损害害,可可提提供供长长期期的行为学和生物化学的研究。的行为学和生物化学的研究。B.B.心血管系统心血管系统 1.1.动动脉脉粥粥样样硬硬化化 长长期期以以来来用用兔兔饲饲以以高高脂脂肪肪、高高胆胆固固醇醇饲饲料料诱诱发发动动脉脉粥粥样样硬硬化化的的动动物物模模型型。给给小小型型猪猪饲饲喂喂高高脂脂肪肪、胆胆固固醇醇饲饲料料诱诱发发动动脉脉粥粥样样硬硬化化病病变变,其其解解剖剖部部位位,病病理理特特点点均均与与人人类类相相似似,有有时时还还伴伴有有心心肌肌梗梗塞塞,较较易易饲饲养养管管理理,小小型型猪猪是是一种
10、很好的模型动物。一种很好的模型动物。食饵性动脉粥样硬化动物模型食饵性动脉粥样硬化动物模型损伤动脉内膜引起损伤动脉内膜引起ASAS病灶形成病灶形成机械损伤:机械损伤:导管法导管法、空气干燥法、空气干燥法化学损伤:化学损伤:静注同型半胱氨酸静注同型半胱氨酸免疫损伤:免疫损伤:喂高胆固醇膳食同时,注射牛血清白蛋白喂高胆固醇膳食同时,注射牛血清白蛋白钙超载钙超载:VD2灌胃灌胃4天天+1.5%胆固醇胆固醇+0.5%胆酸胆酸+0.2%丙基硫氧嘧啶,丙基硫氧嘧啶,感染:感染:感染肺炎衣原体或巨细胞病毒或疱疹病毒。感染肺炎衣原体或巨细胞病毒或疱疹病毒。2、心肌梗塞动物模型、心肌梗塞动物模型 原原理理正常人心
11、脏示意图正常人心脏示意图心肌梗塞后心脏示意图心肌梗塞后心脏示意图 心肌梗塞的范围取决于阻塞动脉的大小和侧支循环的状况。一般来说,左心肌梗塞的范围取决于阻塞动脉的大小和侧支循环的状况。一般来说,左冠状动脉阻塞引起左室侧壁和近心尖的左室前壁、心室间隔前部和前外乳头肌冠状动脉阻塞引起左室侧壁和近心尖的左室前壁、心室间隔前部和前外乳头肌的梗塞;左回旋支的阻塞引起左室侧壁和近心底部左室后壁的梗塞;右冠状动的梗塞;左回旋支的阻塞引起左室侧壁和近心底部左室后壁的梗塞;右冠状动脉的阻塞引起心室后底部、心室间隔后部和房室结的梗塞。脉的阻塞引起心室后底部、心室间隔后部和房室结的梗塞。心肌梗塞动物模型心肌梗塞动物模
12、型 方法种类方法种类动物要求动物要求优缺点优缺点结扎法结扎法 成年犬成年犬家兔家兔大鼠大鼠 能确切闭塞冠脉,缺血部位和面积及其表现,与人类发病情况很类似。能确切闭塞冠脉,缺血部位和面积及其表现,与人类发病情况很类似。适用于急性心肌梗塞发展和转归,常用于心泵衰竭的发生;心源性休适用于急性心肌梗塞发展和转归,常用于心泵衰竭的发生;心源性休克的发生发展;心律失常的出现;缩小梗塞范围的药物治疗;外科手克的发生发展;心律失常的出现;缩小梗塞范围的药物治疗;外科手术治疗心肌梗塞;局部心肌的代谢、血流、心电变化和心肌力学等研术治疗心肌梗塞;局部心肌的代谢、血流、心电变化和心肌力学等研究。究。堵堵塞塞法法微珠
13、堵塞法微珠堵塞法 家犬家犬大鼠大鼠 克服开胸结扎法造成创伤大、死亡率高的缺点,方法简便,手术创伤克服开胸结扎法造成创伤大、死亡率高的缺点,方法简便,手术创伤少,定位也十分准确,动物处于较少的生理扰乱下,实验动物恢复迅少,定位也十分准确,动物处于较少的生理扰乱下,实验动物恢复迅速,死亡率少于速,死亡率少于10%10%。能在阻断冠状动脉的同时,便可根据实验要求。能在阻断冠状动脉的同时,便可根据实验要求立即进行各种实验。气囊堵塞法还可满足缺血立即进行各种实验。气囊堵塞法还可满足缺血-再灌注的要求。再灌注的要求。汞堵塞法汞堵塞法 气囊堵塞法气囊堵塞法 药物法药物法(异丙基肾上(异丙基肾上腺素腺素)家兔
14、家兔大鼠大鼠 用药量愈大病变愈明显,用药量愈大病变愈明显,10mg/kg10mg/kg体重体重iviv或或20mg/kg20mg/kg体重体重ipip可造成明显可造成明显的心肌病变,有利于物理及药物治疗后病变恢复的形态学、组织化学、的心肌病变,有利于物理及药物治疗后病变恢复的形态学、组织化学、心电图和酶学指标观察。所致家兔实验性心肌损害多为弥漫性,以心心电图和酶学指标观察。所致家兔实验性心肌损害多为弥漫性,以心内膜下病变为主,故心电图内膜下病变为主,故心电图Q Q波缺如,仅表现波缺如,仅表现R R波波幅进行性下降,波波幅进行性下降,T T波倒置但缺少急性心内膜下梗塞的深倒置,双肢对称顶点变锐并
15、呈箭波倒置但缺少急性心内膜下梗塞的深倒置,双肢对称顶点变锐并呈箭头状的头状的T T波。静脉用药较腹腔用药的动物,波。静脉用药较腹腔用药的动物,R R波波幅及波波幅及T T波改变明显。波改变明显。同样给药途径,剂量愈大,上述改变愈明显。同样给药途径,剂量愈大,上述改变愈明显。血栓形成法血栓形成法 犬犬大鼠大鼠用钢丝破坏冠脉内膜,冠脉腔内放置钢丝和使冠脉局部狭窄以形成湍用钢丝破坏冠脉内膜,冠脉腔内放置钢丝和使冠脉局部狭窄以形成湍流三种手段同时使用,使血小板激活,聚集增高,并大量合成和释放流三种手段同时使用,使血小板激活,聚集增高,并大量合成和释放血栓素血栓素A2A2(TXA2TXA2),使冠脉血栓
16、迅速形成,最后发生急性心肌梗塞。),使冠脉血栓迅速形成,最后发生急性心肌梗塞。最常用最常用同时结扎几处冠脉分支,同时结扎几处冠脉分支,避免结扎冠状动脉主干避免结扎冠状动脉主干造成死亡率增高造成死亡率增高3、高血压病动物模型(、高血压病动物模型(animalmodelofhypertension)大鼠正常收缩压波动范围不超过大鼠正常收缩压波动范围不超过2.0kPa2.0kPa种类种类机理机理特点特点肾动脉狭肾动脉狭窄性高血窄性高血压模型压模型 肾动脉狭窄肾动脉狭窄肾脏缺血肾脏缺血肾小球旁器肾小球旁器分泌肾素分泌肾素血管紧张素血管紧张素全身小全身小动脉的痉挛,血压持续增高动脉的痉挛,血压持续增高血
17、压升高明显、持久而恒定,较易反映出药物血压升高明显、持久而恒定,较易反映出药物的降压作用;形成高血压所需时间较短,工作的降压作用;形成高血压所需时间较短,工作量较小量较小.肾肾外外包包扎扎性性高高血血压压模型模型肾外异物包扎肾外异物包扎肾周围炎肾周围炎 肾外形成肾外形成纤维素性鞘膜,压迫肾实质造成肾组纤维素性鞘膜,压迫肾实质造成肾组织缺血织缺血术后术后20d20d有有70%70%以上大鼠出现高血压。大鼠收缩以上大鼠出现高血压。大鼠收缩压在压在30d30d内均比原血压值高内均比原血压值高4.0kPa4.0kPa以上时,即可以上时,即可认为引起了稳定性高血压。认为引起了稳定性高血压。听源性高听源性
18、高血压模型血压模型 听源性紧张诱发的神经源性高血压听源性紧张诱发的神经源性高血压 大灰鼠正常平均收缩压大灰鼠正常平均收缩压标准差为标准差为(15151.11.1)kPakPa,噪音刺激,噪音刺激3 3个月后升高为个月后升高为17.317.318.7kPa18.7kPa,有,有40%40%动物收缩压可高达动物收缩压可高达21.3kPa21.3kPa。神经内分神经内分泌型高血泌型高血压模型压模型 电刺激和铃声结合刺激,使动物高度电刺激和铃声结合刺激,使动物高度紧张状态,血压上升;附加垂体后叶紧张状态,血压上升;附加垂体后叶素肌肉注射,可促进动物高血压发展素肌肉注射,可促进动物高血压发展与巩固与巩固
19、 利用利用6V6V感应电极板引出的导线进行刺激;刺激感应电极板引出的导线进行刺激;刺激强度依动物反应而异,通常以引起动物颤抖、强度依动物反应而异,通常以引起动物颤抖、逃跑、跳跃、低声叫为止。垂体后叶素肌肉注逃跑、跳跃、低声叫为止。垂体后叶素肌肉注射剂量为:犬和家兔射剂量为:犬和家兔0.1u/kg0.1u/kg体重,大鼠体重,大鼠0.30.30.5u/1600.5u/160240g240g体重;每天注射体重;每天注射1 1次,每周次,每周6 6次,次,即配合电刺激进行。即配合电刺激进行。原发性高原发性高血压模型血压模型 自发性高血压大鼠自发性高血压大鼠 (SHR)(SHR)SHRSHR在在2 2
20、个月龄前几乎全部动物的血压值都在个月龄前几乎全部动物的血压值都在20kPa20kPa(150mmHg150mmHg)以上。)以上。4 45 5个月龄时达到高个月龄时达到高峰、血压为峰、血压为242428kPa28kPa(180180210mmHg210mmHg)120150g大鼠大鼠应用最广泛应用最广泛病理生理不完全病理生理不完全相同相同,根据实验根据实验要求进行选择要求进行选择C.C.呼吸系统呼吸系统 1 1用用异异性性蛋蛋白白注注射射致致豚豚鼠鼠过过敏敏症症动动物物模模型型,包包括括支支气气管管痉痉挛挛、哮哮喘喘和和过过敏敏性性休休克克。19741974年年PettersonPetters
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