实验五微生物的大小和数量的测定幻灯片.ppt

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1、实验五微生物的大小和数量的测定第1页，共14页，编辑于2022年，星期五一、实验目的与要求：一、实验目的与要求：l学习使用血球记数板测定微生物数量的方法。学习使用血球记数板测定微生物数量的方法。l学习使用目镜测微尺和镜台测微尺在显微镜学习使用目镜测微尺和镜台测微尺在显微镜下测定微生物大小的方法。下测定微生物大小的方法。第2页，共14页，编辑于2022年，星期五二、实验原理二、实验原理-血球计数板对酵母菌培养液计数：血球计数板对酵母菌培养液计数：l血球计数板的构造血球计数板的构造第3页，共14页，编辑于2022年，星期五l细胞数细胞数/ml=每中方格平均细胞数每中方格平均细胞数25（16）/10

2、-4 稀释倍数稀释倍数第4页，共14页，编辑于2022年，星期五二、实验原理二、实验原理-酵母菌大小测定酵母菌大小测定l测量工具及构造镜台测微尺镜台测微尺目镜测微尺目镜测微尺第5页，共14页，编辑于2022年，星期五l目镜测微尺的校正第6页，共14页，编辑于2022年，星期五三、实验器材三、实验器材l显微镜l血球计数板、镜台测微尺、目镜测微尺l酵母菌悬液（测数用）、酵母菌装片（测定大小用）l长颈胶头吸管、盖玻片、擦镜纸等。第7页，共14页，编辑于2022年，星期五四、实验步骤四、实验步骤-酵母菌悬液计数酵母菌悬液计数1 1、取、取清洁清洁无油的血球计数板，检查计数室，找出计数室的无油的血球计数

3、板，检查计数室，找出计数室的中方格中方格与与小方小方格格；2 2、在计数室上面加盖玻片，取酵母菌液，、在计数室上面加盖玻片，取酵母菌液，摇匀摇匀，用滴管由盖玻片边缘滴一，用滴管由盖玻片边缘滴一小滴，使菌液自行渗入，计数室内不得有气泡；小滴，使菌液自行渗入，计数室内不得有气泡；3 3、静止、静止5min5min后，用低倍镜观察并将计数室移至视野中央；后，用低倍镜观察并将计数室移至视野中央；4 4、在高倍镜下计数：按要求计数、在高倍镜下计数：按要求计数五个中方格五个中方格的菌数总值，然后求得每个的菌数总值，然后求得每个中格的平均值。乘上中格的平均值。乘上2525（或（或1616）就得出一大格中的总

4、菌数，最后再换）就得出一大格中的总菌数，最后再换算到每算到每mLmL菌液中的含菌数。菌液中的含菌数。第8页，共14页，编辑于2022年，星期五5 5、压在方格线上的菌体，以压在底线和右侧线上的菌体计入本格内；、压在方格线上的菌体，以压在底线和右侧线上的菌体计入本格内；遇到有芽体的酵母时，若芽体和母体同等大，就按单个酵母计数。遇到有芽体的酵母时，若芽体和母体同等大，就按单个酵母计数。6 6、计数完毕后，血球计数板要立即清洗干净，并用吸水纸吸干，最后用擦镜纸、计数完毕后，血球计数板要立即清洗干净，并用吸水纸吸干，最后用擦镜纸擦干净，并放回盒内。擦干净，并放回盒内。四、实验步骤四、实验步骤-酵母菌悬

5、液计数酵母菌悬液计数（X1+X2+X3+X4+X5）5 25（或（或16）10 1000 稀释倍数稀释倍数 酵母菌细胞数酵母菌细胞数/mL=第9页，共14页，编辑于2022年，星期五四、实验步骤四、实验步骤-酵母菌大小的测定酵母菌大小的测定1 1、目镜测微尺的校正：在高倍镜下，看清镜台测微尺的刻度后，转动目镜，、目镜测微尺的校正：在高倍镜下，看清镜台测微尺的刻度后，转动目镜，使目镜测微尺与镜台测微尺的刻度平行，移动推动器，使目镜测微尺的使目镜测微尺与镜台测微尺的刻度平行，移动推动器，使目镜测微尺的0 0点与镜台测微尺的某一刻度重合点与镜台测微尺的某一刻度重合2 2、仔细寻找两尺第二个完全重合的

6、刻度。计算两刻度间目镜测微尺的格数、仔细寻找两尺第二个完全重合的刻度。计算两刻度间目镜测微尺的格数和镜台测微尺的格数。镜台测微尺的刻度每格长和镜台测微尺的格数。镜台测微尺的刻度每格长1010m m，所以：，所以：目镜测微尺每格长度（目镜测微尺每格长度（m m）=（镜台测微尺格数（镜台测微尺格数1010）/目镜测微尺目镜测微尺格数格数第10页，共14页，编辑于2022年，星期五3 3、菌体大小的测定：取下镜台测微尺，将酵母菌染色标本置于载物台上，然后在、菌体大小的测定：取下镜台测微尺，将酵母菌染色标本置于载物台上，然后在高倍镜下用目镜测微尺测量菌体的大小。高倍镜下用目镜测微尺测量菌体的大小。第1

7、1页，共14页，编辑于2022年，星期五l将显微计数结果记录于下表中。T表示五个中方格中的总菌数；D表示菌液稀释倍数。各中方格中菌数TD二室平均值个/ml12345第一室第二室五、实验结果第12页，共14页，编辑于2022年，星期五l目镜测微尺标定结果：40镜下倍目镜测微尺每格长度是m。菌号酵母的直径大小测定结果目镜测微尺格数实际直径/m12345均值第13页，共14页，编辑于2022年，星期五六、问题与讨论l为什么目镜测微尺必须用镜台测微尺来校正？为什么目镜测微尺必须用镜台测微尺来校正？l在显微镜下直接测定微生物数量有什么优缺点？在显微镜下直接测定微生物数量有什么优缺点？l绘制观察到的酵母菌生物图。绘制观察到的酵母菌生物图。第14页，共14页，编辑于2022年，星期五