实验三计数测定幻灯片.ppt

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1、实验三计数测定实验三计数测定第1页，共14页，编辑于2022年，星期五要求要求通过实验熟练掌握毛细血管采血技术，通过实验熟练掌握毛细血管采血技术，细胞计数板的结构及用法掌握红细胞细胞计数板的结构及用法掌握红细胞计数的原理，方法和临床意义。掌握计数的原理，方法和临床意义。掌握HbHb测定的实验原理和操作方法测定的实验原理和操作方法 第2页，共14页，编辑于2022年，星期五一、毛细血管采血法一、毛细血管采血法v实验步骤实验步骤v1.酒精消毒无名指头酒精消毒无名指头v2.待酒精挥发（待酒精挥发（疼痛与稀释疼痛与稀释），皮肤干燥后，左手拇、食指、中），皮肤干燥后，左手拇、食指、中指固定病人无名指端，

2、右手持采血针，迅速穿刺指端。指固定病人无名指端，右手持采血针，迅速穿刺指端。v3.擦去第擦去第1d血（血（有组织液稀释与易凝有组织液稀释与易凝），用采血管采集需要血量），用采血管采集需要血量v4.擦净采血管外周的血液（擦净采血管外周的血液（量准确量准确），并尽快将采血管插入已备好），并尽快将采血管插入已备好的稀释液中，挤出血液到底部，的稀释液中，挤出血液到底部，并利用上清洗涤采血管并利用上清洗涤采血管3次次，混匀。，混匀。v4.采血完毕，以消毒干棉球压迫伤口，帮助止血。采血完毕，以消毒干棉球压迫伤口，帮助止血。Company Logo第3页，共14页，编辑于2022年，星期五（1）血红蛋白吸管

3、的使用）血红蛋白吸管的使用v1.吸管的构造吸管的构造v2.使用拇指与中指握橡皮头，食指堵住使用拇指与中指握橡皮头，食指堵住橡皮头上的小窟窿，压迫皮头吸样（吸时橡皮头上的小窟窿，压迫皮头吸样（吸时手要缓缓放开，否则血会吸入橡皮头中），手要缓缓放开，否则血会吸入橡皮头中），吸到需要量时（或稍多）时，吸到需要量时（或稍多）时，将吸管的吸将吸管的吸样端抵紧指端皮肤样端抵紧指端皮肤，放开压迫的橡皮头，放开压迫的橡皮头，将吸管擦净后放入试管底部，用上清洗将吸管擦净后放入试管底部，用上清洗涤吸管涤吸管3次）次）Company Logo第4页，共14页，编辑于2022年，星期五（2）计数板的使用vCompan

4、y Logo第5页，共14页，编辑于2022年，星期五Company Logo第6页，共14页，编辑于2022年，星期五（3）计数顺序与原则v1.按一定顺序计数v2.压线细胞数上不数下数左不数右Company Logo第7页，共14页，编辑于2022年，星期五(4)显微镜的使用显微镜的使用v1.打开光圈，低倍镜下调节光源到合适亮度，然后关闭光圈到最小。v2.将计数板放到载物台上，低倍下找到刻度线，高倍视野下计数。Company Logo第8页，共14页，编辑于2022年，星期五二、红细胞计数v原理v将红细胞稀释后高倍视野下计数，然后换算成每升血液中红细胞的数量。Company Logo第9页，

5、共14页，编辑于2022年，星期五1.操作v1.先吸取红先吸取红细胞细胞稀释液稀释液2ml.v2.末梢采血法采血末梢采血法采血10微升加入稀释液中微升加入稀释液中.v3.混匀后，静置混匀后，静置10分钟分钟v4.充池到计数板中，静置充池到计数板中，静置5分钟分钟v5.计数中间大方格四个角上和正中的五个中方格。计数中间大方格四个角上和正中的五个中方格。v6.结果计算结果计算v公式：HBC/L=数得的细胞数*5*10*200*106Company Logo第10页，共14页，编辑于2022年，星期五2.注意事项注意事项v1.采采第第一一滴滴血血要要擦擦去去，因因含含组组织织液液（稀稀释释作作用用和

6、和促凝）；促凝）；v2.吸样要准确，不能气泡，管外余血要擦掉；吸样要准确，不能气泡，管外余血要擦掉；v3.血红蛋白吸管要清洗干净；血红蛋白吸管要清洗干净；v4.充充池池要要先先混混匀匀，充充池池不不能能有有气气泡泡，否否则则要要重重新新充池；充池；Company Logo第11页，共14页，编辑于2022年，星期五二、二、Hb测定测定v原理：原理：v高铁氰化钾可将高铁氰化钾可将Hb氧化成高铁氧化成高铁Hb,然后高铁然后高铁Hb可可与与CN-络合，形成棕红色的氰化高铁血红蛋白。络合，形成棕红色的氰化高铁血红蛋白。v操作：操作：v5ml氰化试剂氰化试剂+20ul末梢血，混匀静置末梢血，混匀静置10

7、min，然后然后540nm比色。比色。vHbg/L=A/(44*1.000cm)*64458mg/1000*251 =A*367.7Company Logo第12页，共14页，编辑于2022年，星期五3.参考值与临床意义RBC成年男性（4.05.5）1012/L 成年女性（3.55.0）1012/L新生儿（6.07.0）1012/L Hb成年男性：120160g/L;成年女性：110150g/L;新生儿：170g200g/L;老年人（70岁以上）：男性：94122g/L;女性：87112g/L。Company Logo第13页，共14页，编辑于2022年，星期五v红细胞和血红蛋白增高红细胞和血红蛋白增高 生理性增高生理性增高 病理性增高病理性增高:相对性增多相对性增多 原发性红细胞增多症原发性红细胞增多症 继发性红细胞增多症继发性红细胞增多症 v红细胞和血红蛋白减低红细胞和血红蛋白减低 生理性减低生理性减低 病理性减低病理性减低:红细胞丢失过多红细胞丢失过多 红细胞破坏增加红细胞破坏增加 造血原料不足造血原料不足 骨髓造血功能减退骨髓造血功能减退 Company Logo第14页，共14页，编辑于2022年，星期五