简述用卵蛋白制作大鼠哮喘模型的要点.pdf

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1、第2 8 卷第2 期2 0 1 1 年4 月甘肃中医学院学报J G A N S UC O l。L E G EO FT C MV 0 1 2 8N o 2A p r 2 0 1 1因冒风病疟。热多寒少，头痛倦怠，食少自汗，已服参苏饮一帖。予适在彼，诊之，脉皆浮虚近驶”案中，汪机日：“此虚疟也，非参苏饮所宜。令将平日所服参、芪、归、术等药煎服五六帖而愈。且谕之日，元气素虚，不宜发散。凡遇一切外感，须以补元气为主，少加发散之药以辅佐之，庶为允当，宜永识之。”7 1 又中卷“吐血”有“一人年二十余，形瘦色脆，病咳血。医用滋阴降火及清肺之药，延及二年不减。又一医用茯苓补心汤及参苏饮，皆去人参，服之病增。

2、邀予诊之。脉细而数有五至余”案中，汪机日：“不可为也。或日：脉诀云四至五至，平和之则，何谓不可为?予日：经云五藏已衰，六府已极，九候须调犹死是也。且视形症，皆属死候。经日肉脱热甚者死，嗽而加汗者死，嗽而下泄上喘者死。嗽而左不得眠，肝胀右不得眠，肺胀，俱为死症。今皆犯之，虽饮食不为肌肤，去死近矣。越五日，果卒。凡患虚劳，犯前数症，又或嗽而喉痛声哑不能药，或嗽而肛门发瘘，皆在不救，医者不可不知。”13 7 9汪机非常重视培养后学者，将其临证知识与经验毫无保留地传授给他们，其弟子陈桷就是其中之一。汪机诸多书籍的流传，尤其是石山医案，就与陈桷的贡献密不可分。由此可见，汪机临证经验丰富，医术高超，祁门县

3、志载“行医数十年，活人数万计”，如程曾在其序中评价其“夫病之见治于石山也，如饥者得食而充，渴者得饮而解，溺者得援之而登，颠危者得扶持之而安”，甚为确当。汪机的学术思想与主张，对后世医学的发展产生了很大影响。参考文献：1 高尔鑫汪石山医学全书 M 北京：中国中医药出版社。1 9 9 9：7 1 4 3 5 2 任应秋中医各家学说讲稿 M 北京：人民卫生出版社。2 0 0 8：9 2 十 _；_ 暑 _ -_；_；_ H _；斗 _ -_ 主 _；_；_ _ -呻 _ _；_ _ _ _ i 弓 实验方法简述用卵蛋白制作大鼠哮喘模型的要点孟鹏飞吕岳(河南中医学院，河南郑州4 5 0 0 0 8)摘

4、要：根据文献及实验经验，从大鼠品系、致敏、激发和模型检验4 个方面来概述大鼠哮喘模型的制备要点，以期为大鼠哮喘模型的应用和进一步模型优化提供研究基础。关键词：卵蛋白；哮喘模型；大鼠中图分类号：R 一3 2 2 文献标识码：A 文章编号：1 0 0 3 8 4 5 0 1 2 0 1 1)0 2 一0 0 2 7 一0 3近年来关于哮喘发病机制或药物治疗的研究越提供研究基础。来越多，鉴于直接进行人体试验的局限性，在相当程1大鼠品系度上均需通过动物实验进行，建立成功的哮喘模型国际医学杂志发表的应用大鼠模型研究哮喘的是科学研究成功的关键。卵蛋白(O V A)是使用最论文多采用B N 大鼠，该品系模型

5、在特异性I g E 抗早并且在目前建立支气管哮喘动物模型中使用最广体的产生及诱发哮喘症状上优势明显，但国内此种泛的致敏原，分为单纯O V A 和复合O V A(含佐剂)品系的大鼠应用较少，目前国内研究者常用s D 大两种，在诸多文献报道中均采用O V A 制作哮喘大鼠鼠和W i s t a r 大鼠来制备哮喘模型1|。两种品系的模型，但其方法各异，尚无统一标准的制备方法。笔雌雄大鼠在急性哮喘模型及气道重塑模型中均有应者根据实验经验及文献，从大鼠品系、致敏、激发和用，但钱振福等研究国内气道藿塑模型的文献显模型检验4 个方面来阐述大鼠哮喘模型的制备要示：气道重塑模型选用的大鼠以S D 雄性大鼠为多

6、。点，以期为大鼠哮喘模型的应用和进一步模型优化S D 大鼠及W i。t a r 大鼠均为封闭群，遗传背景相似，收稿日期：2 0 1 0 一1 2 一0 9作者简介：孟鹏飞(1 9 8 6 一)，男，在读硕士研究生。研究方向：呼吸系统疾病的研究。一2 7 万方数据第2 8 卷第2 期2 0 1 1 年4 月甘肃中医学院学报J G A N S UC O U L E G EO FT C MV o L2 8N o 2A p r 2 0 1 1前者较后者生长发育快且抗病能力强，尤其是对呼吸系统疾病的抵抗力强【3J。国内气道重塑模型多用s D 雄性大鼠可能与其能耐受高浓度长时间的雾化激发有关。笔者在哮喘模

7、型的实践中观察到，在同样的致敏和激发条件下，两种大鼠在哮喘症状的诱发和肺部病理表现上未见明显差异。龙静雯等H 1 在研究不同品系的大鼠哮喘模型中，用O V A 和氢氧化铝诱导D A、E 3、D E 和S D 品系大鼠哮喘模型，比较它们的肺泡灌洗液中的白细胞数、嗜酸性粒细胞所占比例，血清中的一氧化氮、I g E 含量，肺组织病理变化等指标，指出E 3 大鼠变化最为突出。然而国内常用的S D 大鼠与W i s t a r 大鼠在哮喘实验中的差异尚未见文献报道，值得进一步研究。2 致敏与激发基本的方法是腹腔或皮下注射O V A(含或不含佐剂)致敏，O V A 生理盐水溶液连续雾化激发制作哮喘模型，亦

8、有采用鼻腔滴人或静脉注射的激发方法，但文献报道少见。在此原则下，各文献报道的具体方法各异，表现在O V A 的剂量、致敏方法与次数，激发的方式、时间、次数等方面。吕国平等1 腹腔内注射抗原液lm L(含O V A1 0 0n a g，灭活百日咳杆菌疫苗5 1 0 9 个，氢氧化铝干粉1 0 0n a g)致敏，2 周后用超声雾化器喷雾l O V A 激发2 0m i n，连续7d。朱敏敏等1 用0 1 O V A 生理盐水加氢氧化铝粉剂1 6 0m g混合液1m L 在大鼠胸部皮下分3 点注射，同时腹腔内注射灭活百日咳杆菌菌苗lm L(6 1 0 9+m L)，间隔l 周共致敏2 次，第2 次

9、致敏l 周后用l O V A 生理盐水连续雾化1 周，每次2 0m i n。迟磊等 1 于第1d、第8d 用新鲜配制的O V A(G r a d eV)1I I l g+氢氧化铝2 0 0n a g+生理盐水1m L 混悬液在大鼠两侧腹股沟、腹、前足跖共4 点做皮下注射，每点0 2m L，同时腹腔注射0 2m L 致敏，于实验第1 5d 用1 O V A(G r a d eI I)进行雾化吸人激发3 0m i n，连续6d。上述3 篇文献建立的是急性哮喘模型，而气道重塑模型往往是在急性模型方法的基础上增加激发次数和(或)提高雾化液浓度。王丽新等旧1 于第1d 及第8d 腹腔注射新鲜配制的O V

10、 A 氢氧化铝溶液lm L(内含O V A1 0l I l g 及氢氧化铝2 0 0n a g)致敏，第1 5d 起开始雾化吸入O V A 生理盐水溶液以激发哮喘，隔日1 次，激发浓度分别为第l，2 周l，第3，4 周1 5，第5，6 周2，第7，8 周2 5，每次激发时间为2 0m i n。刘中成等归1 采用组胺激发对S D 大鼠进行筛选，于第ld、第1 4d 用新鲜配制的O V A1r a g 与含1 0 氢氧化铝凝胶的生理盐水混悬液共lr I l L 在大鼠四肢内侧皮下一2 8 一注射，每点0 2m L，腹腔注射0 2m L，同时腹腔注射灭活百日咳杆菌5 1 0 9 个，第2 1d 以0

11、 1 O V A 进行雾化吸入，每次雾化3 0m i n，3 次周，连续1 2 周。在致敏和激发的过程中，需要注意O V A 的产品号和级别问题，这一点往往在文献中被忽略而未提及。国内实验常用的是美国S i g m a 公司生产的O V A(国内进口后分装)，其产品有不同的纯度，低则6 2 一6 8，高则1 9 8，分别对应不同的产品号。笔者认为正是因为其纯度的不同造成了实验中O V A 用量以及雾化激发时间等方法的差异，实验中采用较高纯度的O V A(G r a d eV)致敏、低纯度的O V A(G r a d eI I)激发较为合适。3模型成功的检验全面成功地评价一个与临床发病机制相似的

12、、稳定可靠的支气管哮喘动物模型非常重要，目前尚缺乏对模型规范化的统一标准要求。支气管哮喘是由多种细胞(如嗜酸性粒细胞、肥大细胞、T 淋巴细胞、中性粒细胞、气道上皮细胞等)和细胞组分参与的气道慢性炎症性疾病。这种慢性炎症导致气道高反应性的产生，通常出现广泛多变的可逆性气流受限，并引起反复发作的喘息、气急、胸闷或咳嗽等症状。实验所制作的哮喘模型应尽可能与人类疾病的症状及病理生理相似。刘素芝等刮认为动物模型是否成功和合格可以通过以下方面说明问题：哮喘症状、气道嗜酸性粒细胞比例、组织病理学、血清I g E 和活体肺功能。4 结语目前尚没有对哮喘模型规范化的统一标准要求，O V A 大鼠哮喘模型是最常用

13、的哮喘模型，其制作要点为早期腹腔或皮下注射O V A 抗原液(含或不含佐剂)致敏，后期用O V A 生理盐水溶液雾化激发。其方法简便、成功率高，也比较经济。但应用O V A 方法复制哮喘模型的文献中所介绍的造模方法五花A f-I，很不规范，导致实验结果之间缺乏可比性，因此哮喘模型的优化和规范化的研究迫在眉睫。在实验中应该掌握制备要点，依据实验目的选用合适的大鼠，根据O V A 的级别设定合适的用量，并选用可靠的指标验证模型的成功与否，以保证实验的可靠性以及可重复性。参考文献：1 施焕中正确认识和合理应用支气管哮喘的动物模型 J 中华结核和呼吸杂志，2 0 0 5，2 8(1 1)：7 4 9

14、7 5 0 2 钱振福，崔芳囡国内支气管哮喘气道重塑动物模型的研究进展 J 医学综述，2 0 0 9，1 5(1)：1 4 一1 8 万方数据第2 8 卷第2 期2 0 1 1 年4 月甘肃中医学院学报J G A N S UC O L L E G EO FT C MV 0 1 2 8N o 2A p r 2 0 1 1 3 胡建华，姚明，崔淑芳实验动物学教程 M 上海：上海科学技术出版社，2 0 0 9：7 1 7 3 4 龙静雯，马卓，杨旭东，等不同品系大鼠哮喘模璎的比较 J 西安交通大学学报(医学版)，2 0 0 9，3 0(5)：5 5 0 5 5 3 5 吕国平，崔德健。郭英江，等介绍

15、一种建立大鼠哮喘模型的实验方法 J 中华结核和呼吸杂志，1 9 9 5，1 8(6)：3 7 7 3 7 8 6 朱敏敏，傅诚章周钦海大鼠过敏性哮喘模型的建立 J 实用临床医药杂志，2 0 0 3，7(1)：2 6 2 7 7 迟磊，符州，戴继宏，等过敏性哮喘大鼠模型的建立 J 重庆医学，2 0 0 3，3 2(4)：4 2 9 4 3 1 8 王丽新，吴银根实验性哮喘大鼠气道重翅的形态学变化 J 中西医结合学报，2 0 0 3(1)：6 2 6 5 9 刘中成，张艳芬一种大鼠慢性哮喘模型的建立与评价 J 药学学报，2 0 1 0，4 5(6)：7 1 8 7 2 3 1 0 刘素芝，刘玉丽，

16、曹国龙，等哮喘动物模型免疫炎症反应发生验证的要点 J 中国组织工程研究与临床康复，2 0 0 7，2 8 5(2 9)：5 8 1 4 5 8 1 6 T h es u r m n a r ya b o u tt h em a i np o i n to fu s i n gt h eo v a l b u m i nt om a n u f a c t u r et h er a ta s t h n mm o d e lM e n gP e n g f e i，L uY u e(H e n a nC o l l e g eo fT r a d i t i o n a lC h i n e

17、s eM e d i c i n e，Z h e n g z h o u4 5 0 0 0 8，C h i n a)A b s t r a c t：A c c o r d i n gt ol i t e r a t u r e sa n dt h ee x p e r i m e n t a le x p e r i e n c eo ft h ea u t h o r，f r o mt h er a ts t r a i n s，s e n s i t i z a t i o n，e x c i t a t i o na n dm o d e lt e s t i n gf o u ra s

18、 p e c t ss u m m a r i z em o d e lp o i n t so fp r e p a r a t i o n，i no r d e rt oa f f o r db a s e sa-b o u ta p p l i c a t i o na n df u r t h e ro p t i m i z a t i o nr e s e a r c ho ft h er a tm o d e lo fa s t h m a K e yw o r d s：o v a l b u m i n；a s t h m am o d e l；r a t窘蠹蠹度客盍客客盒盒客

19、盍盒客套盘客客客套蠹度盒客盒客盒客盎盍盎套套盎盍蠹客客客客盍盒盒客盒客盒叠客套套客套盘盍客客套客客盎盒盒盒盒盒盘叠盍盒盒客套套客客套盘客套棠瓮盒盒盒盒临床研究与报道稳心颗粒治疗不稳定型心绞痛5 0 例疗效观察严根虎(宝鸡市康复医院，陕西宝鸡7 2 1 0 0 1)摘要：目的探讨稳心颗粒治疗不稳定型心绞痛的临床疗效。方法将1 0 0 例不稳定型心绞痛患者随机分为2 组，治疗组5 0 例采用常规药物加稳心颗粒治疗，对照组5 0 例仅采用常规药物治疗，观察2 组患者心电图、主要临床症状、血脂各项指标的改善情况。结果治疗4 周后，治疗组心电图、主要临床症状及血脂各项指标的改善程度均显著优于对照组，2

20、组比较差异有统计意义(P 0 0 5)。结论稳心颗粒治疗不稳定型心绞痛疗效显著。关键词：稳心颗粒；不稳定型心绞痛；疗效观察中图分类号：R 2 5 9 4 1 4 文献标识码：B 文章编号：1 0 0 3 8 4 5 0(2 0 1 1)0 2 0 0 2 9-0 2不稳定型心绞痛(U A P)是介于稳定型心绞痛1资料与方法与急性心肌梗死之间的一组急性心肌缺血综合征，1 1一般资料易发展为急性心肌梗死，甚至猝死。近年来笔者以1 0 0 例不稳定型心绞痛患者均为我院心内科住稳心颗粒治疗U A P5 0 例，疗效满意，现报道如下。院患者，临床诊断均符合A C C A H A 资料指南2 0 0 2收

21、稿日期：2 0 1 0 1 l 一3 0作者简介：严根虎(1 9 7 5 一)，男，住院医师，主要从事内科疾病的临床治疗。一2 9 万方数据简述用卵蛋白制作大鼠哮喘模型的要点简述用卵蛋白制作大鼠哮喘模型的要点作者：孟鹏飞，吕越，Meng Pengfei，Lu Yue作者单位：河南中医学院,河南,郑州,450008刊名：甘肃中医学院学报英文刊名：JOURNAL OF GANSU COLLEGE OF TRADITIONAL CHINESE MEDICINE年，卷(期)：2011,28(2)被引用次数：1次 参考文献(10条)参考文献(10条)1.刘中成;张艳芬 一种大鼠慢性哮喘模型的建立与评价期

22、刊论文-药学学报 2010(06)2.王丽新;吴银根 实验性哮喘大鼠气道重塑的形态学变化期刊论文-中西医结合学报 2003(01)3.迟磊;符州;戴继宏 过敏性哮喘大鼠模型的建立期刊论文-重庆医学 2003(04)4.朱敏敏;傅诚章;周钦海 大鼠过敏性哮喘模型的建立期刊论文-实用临床医药杂志 2003(01)5.吕国平;崔德健;郭英江 介绍一种建立大鼠哮喘模型的实验方法 1995(06)6.龙静雯;马卓;杨旭东 不同品系大鼠哮喘模型的比较期刊论文-西安交通大学学报（医学版）2009(05)7.胡建华;姚明;崔淑芳 实验动物学教程 20098.钱振福;崔芳囡 国内支气管哮喘气道重塑动物模型的研究

23、进展期刊论文-医学综述 2009(01)9.刘素芝;刘玉丽;曹国龙 哮喘动物模型免疫炎症反应发生验证的要点期刊论文-中国组织工程研究与临床康复2007(29)10.施焕中 正确认识和合理应用支气管哮喘的动物模型期刊论文-中华结核和呼吸杂志 2005(11)本文读者也读过(10条)本文读者也读过(10条)1.刘萍 小鼠哮喘模型中VEGF受体抑制剂减轻肺部炎症学位论文20072.崔巍 联合应用布地奈德和孟鲁司特对哮喘大鼠气道炎症的影响学位论文20013.王桂兰.鲁继荣 IL-4RA基因转染对哮喘模型过敏性炎症的干预作用会议论文-20064.李静.李玉琴 哮喘模型嗜酸粒细胞趋化因子及受体的研究会议论

24、文-20065.李良昌 哮喘模型中L-2-oxothiazolidine-4-carboxylic acid调整核因子kappa B受体激活物表达学位论文20066.朱晶文 哮喘小鼠血清IL-17的变化及布地奈德对其干预作用的研究学位论文20117.陈湘琦.林挺岩 选择卵蛋白致敏豚鼠建立哮喘模型实验研究期刊论文-福建医药杂志2005,27(1)8.吴冬意 麻黄雾化液对过敏性哮喘大鼠气道嗜酸粒细胞的影响期刊论文-徐州医学院学报2011,31(10)9.赖正清.俞景茂.周大兴 固本克喘膏抗哮喘大鼠气道重建作用的实验研究会议论文-200510.王孝养.张珍祥.熊维宁.莫碧文.丘小芬.李西融 哮喘肺组织和外周血淋巴细胞端粒酶逆转录酶表达上调及其意义期刊论文-中国免疫学杂志2002,18(1)引证文献(1条)引证文献(1条)1.罗光伟.徐玮.吴霜.黄燕玲.杨硕.毛莉娜.黄小龙.张念.徐清.孙洁民.肖宏 自拟通肺平哮汤对哮喘豚鼠Th1/Th2细胞功能调节作用的影响期刊论文-疑难病杂志 2012(4)本文链接：http:/