TRIZOL法提取植物总RNA.doc
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TRIZOL法提取植物总RNATRIZOL法提取植物总RNA所用器皿均按RNA提取的常规方法处理。具体程序为:1)取材料,加液氮研磨,在1.5ml离心管中,分别加1mlTRIZol(Tiangen)或RNAiso(TAKALA)试剂,在离心管中加5-6勺样品,约1g,用力摇15秒(也可涡旋),室温静置15分钟;2)加200ul的氯仿上下颠倒混匀,室温静置2min;3)4,12,000g离心15分钟;4)将上清液移入新的1.5ml离心管,分层,下层红色酚层,界面,上层水相(含RNA);5)加入等体积的异丙醇沉淀RNA(一般500700ul),轻微颠倒,20沉降1h(此过程可延长)6)4,12,000g离心15分钟;7)弃上清,加1ml75乙醇,轻微颠倒,清洗沉淀,在7,000g 4,离心5分钟;8)弃上清,风干(不能太干否则RNA很难溶解),加适当体积RNasefreewater溶解。
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