%8d%af桑黄酮和多酚的提取与分析研究初报.pdf

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1、试验研究北方蚕业2 0 0 8 2 9(4)总第1 1 9 期新疆药桑黄酮和多酚的提取与分析研究初报买买提依明1 2徐立2武春2米日古丽1吴丽莉1(1 新疆蚕业研究所，新疆和田8 4 8 0 0 0 2 西南大学蚕学与系统生物学研究所，重庆4 0 0 7 1 6)摘要本文采用有机溶剂提取技术和分光光度法，对新疆药桑桑果、叶片和枝条等不同器官的黄酮、多酚类化舍物进行提取和测试分析，研究结果表明：新疆药桑同一株树体桑果、叶片和枝条等不同器官间的黄酮和多酚类化合物的含量存在着显著差异其中叶片黄酮和多酚类含量最高、枝条次之、桑果中最低I 研究目的为新疆药桑桑叶。桑枝。桑椹的药用功效机理研究和开发利用提

2、供理论依据。关键词新疆药桑不同器官黄酮多酚分析新疆药桑原产于伊朗、1 6 世纪在新疆等地才有栽培，自然界极为罕见的稀贵桑树半栽培半野生资源，也是我国唯一的黑桑种(M n i g r aL i n n)1。2 ，新疆药桑是新疆阿克苏、和田、吐鲁番和喀什地区古老的果树之一。在当地，维吾尔语称药桑为“夏图土”。新疆药桑桑椹比一般桑椹(包括黑桑)大，味偏酸，但酸甜可口，一般6 月中下旬可陆续成熟食用，一直到8 月中下旬，药桑果实含有多种营养物质，是新疆乃至中东地区独特稀贵的药用果桑种质资源 3 。新疆药桑桑椹作为维吾尔族历代的民间药材，其消炎、补血和镇静等神秘的医疗功效，引起了包括日本、伊朗、埃及等国

3、内外桑树、医学、营养等生命学科专家学者的广泛关注，不少学者对药桑的起源、进化、演变和桑椹、桑叶的色素、营养成分含量，药物价值和作用机理等方面进行了大量的研究 卅，取得了可喜的研究成果。本文对新疆药桑桑果、叶片和枝条等不同器官的黄酮与多酚含量进行了测试分析和比较研究，目的为新疆药桑基因资源的高效利用和相关功能性生物制品的研制开发，提供科学依据。1 材料与方法1 1 材料和仪器供试桑叶为采自新疆和田蚕桑蚕桑科学研究所桑树种质资源库的新疆药桑桑果、叶片和枝条(2 0 0 7 年3 月、7 月采摘)，6 0。C 烘干至恒重，粉碎，过6 0 目筛，塑料薄膜包装后贮于干燥皿中备用。供试品溶液的制备：干燥桑

4、果，叶片，枝条揉碎，称取5g，置索氏提取器中，加乙醇1 0 0m l，放置1 0m i n，连续提取2 次，过滤定容于1 0 0m l 量瓶中，得供试品溶液。试验所用芦丁购自上海鼎国生物技术有限公司，甲醇、乙醇、丙酮等其它试剂均为分析纯。试验所用仪器主要有：7 2 1 型紫外分光光度计(上海精密科学仪器有限公司)；数字酸度计(上海第三分析仪器厂)；电子天平(上海第三分析仪器厂)D K S-1 2 数字式恒温水浴锅(上海第三分析仪器厂)；R 一2 0 1 旋转真空蒸发仪(上海申科机械研究所)；真空干燥箱(上海森信实验仪器有限公司)；离心机(e p p e n d o r f，h a m b u

5、r g，G e r m a n y)；S H Z-D 循环水式真空泵(河南巩义市英峪豫华仪器厂)。1 2 方法1 2 1工作曲线的制作1)芦丁标准溶液工作曲线的制作 i 川。精密称取干燥至恒重的芦丁适量，用9 5 的乙醇配成1m g m l 的芦丁标准品溶液，备用。分别精确量取芦丁标准品溶液0m l，0 1 m l，0 2m l，0 3m l，0 4m l，0 5m l，0 6m l，分别加水至3m l，加5 亚硝酸钠溶液0 5“，摇匀，静置6m i n，加l O 硝酸铝溶液0 5r 1 1 1，摇匀，静置6m i n，加5 氢氧化钠溶液2 5m l，摇匀，静置1 5m i n，蒸馏水定容至l

6、 om l。用7 2 1 紫外分光光度计5 1 0B i n 处测量吸光度(3次取平均值)，以试剂空白为对照。以吸光度(A)资助项目t 新疆科研院所改革与发展项(项目编号：G F 2 0 0 7 0 9)收稿日期；2 0 0 8 1 1 3 0作者简介；买买提依明(1 9 6 7 一)，男(维)研究员，从事新疆桑种质资源与遗传育种研究。万方数据试验研究买买提依明等：新疆药桑黄酮和多酚的提取和分析研究初报1 3为横坐标，芦丁质量浓度(C)为纵坐标绘制工作曲线。用最J b-乘法作线性回归，得芦丁浓度Y 与吸光度值x 的关系曲线的回归方程为：Y=1 1 8 3 6 x-0 0 0 7 1；相关系数为

7、：R z=O 9 9 9 62)没食子酸标准溶液工作曲线的制作 1 1 。分别精确量取没食子酸标准品溶液0m g 1、2 0m g 1，4 0m g 1，6 0m g 1，8 0r a g 1，1 0 0m g l，分别加1 m I F C 溶液，加2 9 1 0 0 m l 硫代硫酸钠溶液3m l，摇匀，蒸馏水定容至1 0 m l。室温下反应2小时，在7 6 0n m 下测定其吸光度。(3 次取平均值)，以试剂为空白参比。以吸光度(A)为横坐标，没食子酸质量浓度(C)为纵坐标绘制工作曲线。用最小二乘法作线性回归，得没食子酸浓度Y 与吸光度值X 的关系曲线的回归方程为：Y=0 0 1 1 2

8、x+0 0 1 8；相关系数为：R z=0 9 9 9 13)黄酮类化合物的测定方法吸取0 2r n l 提取液，加5 亚硝酸钠溶液0 1r n l，摇匀，静置6r a i n，加1 0 硝酸铝溶液0 1“，摇匀，静置6m i n，加5 氢氧化钠溶液1“，摇匀，静置1 5m i n，蒸馏水定容至5“。用7 2 1 紫外分光光度计于5 1 0n l n 处测量吸光度。4)多酚类化合物的测定方法吸取0 0 2m l 提取液，加1m l F C 溶液，加2g 1 0 0 m l 硫代硫酸钠溶液3玎l l，摇匀。蒸馏水定容至1 0r n l。室温下反应2h，用7 2 1 紫外分光光度计于7 6 0n

9、m 处测量吸光度。2 结果2 1 黄酮、多酚类化合物标准曲线芦丁标准溶液工作曲线结果见图1。芦丁浓度Y 与吸光度值x 的关系曲线的回归方程为：Y=1 1 8 3 6 x 一0 0 0 7 1；相关系数为：R z=0 9 9 9 6。均符合溶液配制操作条件和测试要求。恻装昏00 10 20 30 40 50 6o 7芦丁浓度(m g m 1)图l 黄酮标准曲线没食子酸标准溶液工作曲线结果见图2。得没食子酸浓度Y 与吸光度值X 的关系曲线的回归方程为：Y=0 0 1 1 2 x+0 0 1 8；相关系数为：R z=O 9 9 9 1。均符合实验操作条件和工作要求。趟呆督O2 04 06 08 01

10、 0 012 0浓度G I g L)图2 多酚标准曲线2 2 新疆药桑不同器官黄酮、多酚含量新疆药桑桑果、叶片和枝条等不同器官的黄酮、多酚类化合物含量结果见表1。表1 新疆药桑黄酮和多酚测试结果(单位：m g m 1)新疆药桑桑果、叶片和枝条等不同器官的黄酮与多酚类差异见图3，新疆药桑桑果、叶片和枝条的黄酮含量均高于多酚含量。Q 5秣帮：；0不同器官(1 桑园2 叶片3 枝条)图3 黄酮，多酚含量3 讨论1)新疆药桑叶片中总黄酮的含量高于桑枝，桑椹，可能也是桑叶、桑枝、桑椹具有不同功效的因素之一。桑叶的抑制动脉粥样硬化作用强于桑枝，桑椹。叶片和枝条的黄酮含量均高于多酚含量，黄酮类化合物指以2

11、一苯基色原酮为基核的一类化合物，以游离苷原或以与糖结合的苷类等形式存在于许多植物中，是一种生理活性物质，具有 万方数据北方蚕业2 0 0 8，2 9(4)试验研究抗氧化、降血压、防止动脉硬化、抗衰老等作用，桑叶中的黄酮类化合物是天然的抗氧化剂，具有清除人体中超氧离子自由基的生理活性，药理实验已证明桑叶中的黄酮类成分具有抑制血清脂质增加和抑制动脉粥样硬化形成的作用。本文着重研究了新疆药桑不同器官黄酮的提取和成分含量，旨在为进一步利用这一天然桑属植物资源提供有益的实验依据。新疆药桑叶片黄酮经过纯工艺纯化后，其抗氧化效果显著增加，可以作为理想的天然抗氧化剂使用，如桑叶黄酮片、桑枝黄酮片，具有广阔的开

12、发应用前景。2)新疆药桑中的酚含量以叶片最高，多酚类物质泛指一类性质各异的多羟基酚衍生而成的复杂有机混合物，具有活泼的羟基氧，能在多酚氧化酶作用下终止生物体内自由基的连锁反应，起到清除自由基和消除自由基毒性的作用。所以多酚类物质具有抗衰老、抗辐射、消除自由基、防治肿瘤及增加机体免疫力等多种功能。3)新疆药桑桑椹作为维吾尔族历代的民间药材，其抗菌消炎、补血和镇静等神秘的医疗功效。维吾尔族人无论在扁桃腺炎、喉咙肿痛时习惯服用药桑果汁来消炎止痛，新疆药桑桑椹的抗菌消炎功能作用强于叶片和枝条，这与本次实验黄酮和多酚含量之间的关系不大，其功能性物质成分含量及功效作用机理尚待研究。参考文献 1 中国农业科

13、学院蚕业研究所中国桑树品种志 M 北京中国农业出版社1 9 9 3 2 郭洪荣买买提依明新疆桑品种资源研究 J 陕西蚕业1 9 9 4(2)：7-1 1 3 买买提依明新疆药桑研究 刀北方蚕业，2 0 0 7，2 8(1)。1 3 4 买买提依明，郭洪荣，鲁成，等新疆桑种质资源随机扩增D N A 多态性(R A P D)研究 刀蚕业科学，2 0 0 4 3 0(1)1 7 6 7 9 5 宋大可买买提依明新疆药桑果汁化学成分及药物价值研究 刀蚕桑通报，1 9 9 4，2 5(4)。3 4 3 4 6 买买提依明，郭洪荣新疆果用桑种质资源研究 J 蚕学通讯2 0 0 2 2 2(3)1 1 5

14、1 7 7 买买提依明，卢红，吴丽莉，等新疆药桑营养功能性成份及药理作用的分析研究 J 北方蚕业，2 0 0 6 2 7(3)2 2 2 3 8 买买提依明，刘念，吴丽莉，等新疆药桑果酒营养成分分析与保健作用探讨口 酿酒科技2 0 0 7，1 5 8(8)：4 0 一4 4 9 买买提依明，吴丽莉，等院士谈z 1 世纪新疆蚕业的发展思路 J 蚕学通讯，2 0 0 5，2 5(4)t 1 9 2 1 1 0 王芳，励建荣，蒋跃明桑叶黄酮的提取纯化及对油脂抗氧化活性的研究 J 中国稂油学报，2 0 0 6，2 1(4)t 1 0 6-1 1 1 1 1 熊皓平，杨伟丽，张友胜等显齿蛇葡萄多酚含量测

15、定方法的比较研究 J 湖南农业大学学报(自然科学版)，2 0 0 1 2 7(5)：3 8 卜3 8 3 X i n ji a n gM u l b e r r yf l a v o n o i d sa n dp o l y p h e n o l se x t r a c t i o na n da n a l y s i so ft h eP r e l i m i n a r yR e p o r tM A IM A I T IY i M i n 9 1 2X u l i 2W u c h u n 2M ir ig ul i lW UL i L i lX I AQ i n g Y o

16、u 2(1x i n j i a n gs e r i c u h u r eI n s t i t u t eo fS c i e n c e，H e t i a n，X i n j i a n g 8 4 8 0 0 0C h i n a，2 S o u t h w e s tU n i v e r s i t y-C h o n g q i n g4 0 0 7 1 6，C h i n a)A b s t r a c tI nt h i sp a p e r，o r g a n i cs o l v e n te x t r a c t i o nt e c h n o l o g ya

17、 n ds p e c t r o p h o t o m e t r y，X i n j i a n gM u l b e r r yf r u i t，l e a v e sa n db r a n c h e si nd i f f e r e n to r g a n s，s u c ha sf l a v o n o i d s，p o l y p h e n o l se x t r a c t e da n a l y s i sa n dt e s t i n g，r e s u l t ss h o wt h a t：X i n j i a n gm e d i c i n

18、ew i t ham u l b e r r yt r e eM u l b e r r y，L e a v e sa n db r a n c h e s，s u c ha sb e t w e e nd i f f e r e n to r g a n so ff l a v o n o i d sa n dp o l y-p h e n o l sc o n t e n tt h e r ei sas i g n i f i c a n td i f f e r e n c e。w h i c hl e a v e sf l a v o n o i d sa n dp o l y p h

19、 e n o l sc o n t e n to ft h eh i g h e s t tf o l l o w e db yb r a n c h e s，t h el o w e s ti nM u l b e r r y；f o rt h ep u r p o s eo ft h eX i n j i a n gm e d i c i n eS a n g s a n gl e a v e s，m u l b e r r yB r a n c h e so ft h em u l b e r r ym e d i c i n a le f f e c t i v e n e s so

20、ft h em e c h a n i s ma n dp r o v i d eat h e o r e t i c a lb a s i sf o rt h ed e v e l o p m e n ta n du t i l i z a t i o n K e y w o r d sX i n ji a n gM u l b e r r yD i f f e r e n to r g a n sf l a v o n eP o l y p h e n o l sa n a l y z e 万方数据新疆药桑黄酮和多酚的提取与分析研究初报新疆药桑黄酮和多酚的提取与分析研究初报作者：买买提依明

21、，徐立，武春，米日古丽，吴丽莉，XIA Qing-You，MAI MAITI Yi-Ming，Xuli，Wuchun，Mi ri gu li，WU Li-Li，XIA Qing-You作者单位：买买提依明,XIA Qing-You,WU Li-Li,XIA Qing-You(新疆蚕业研究所,新疆,和田,848000;西南大学蚕学与系统生物学研究所,重庆,400716)，徐立,武春,MAI MAITI Yi-Ming,Xuli(西南大学蚕学与系统生物学研究所,重庆,400716)，米日古丽,吴丽莉,Wuchun,Mi ri guli(新疆蚕业研究所,新疆,和田,848000)刊名：北方蚕业英文刊

22、名：NORTH SERICULTURE年，卷(期)：2008,29(4)被引用次数：2次 参考文献(11条)参考文献(11条)1.熊皓平;杨伟丽;张友胜 显齿蛇葡萄多酚含量测定方法的比较研究期刊论文-湖南农业大学学报（自然科学版）2001(05)2.王芳;励建荣;蒋跃明 桑叶黄酮的提取纯化及对油脂抗氧化活性的研究期刊论文-中国粮油学报 2006(04)3.买买提依明;吴丽莉 院士谈21世纪新疆蚕业的发展思路期刊论文-蚕学通讯 2005(04)4.买买提依明;刘念;吴丽莉 新疆药桑果酒营养成分分析与保健作用探讨期刊论文-酿酒科技 2007(08)5.买买提依明;卢红;吴丽莉 新疆药桑营养功能性成

23、份及药理作用的分析研究期刊论文-北方蚕业 2006(03)6.买买提依明;郭洪荣 新疆果用桑种质资源研究期刊论文-蚕学通讯 2002(03)7.宋大可;买买提依明 新疆药桑果汁化学成分及药物价值研究 1994(04)8.买买提依明;郭洪荣;鲁成 新疆桑种质资源随机扩增DNA多态性(RAPD)研究期刊论文-蚕业科学 2004(01)9.买买提依明 新疆药桑研究期刊论文-北方蚕业 2007(01)10.郭洪荣;买买提依明 新疆桑品种资源研究 1994(02)11.中国农业科学院蚕业研究所 中国桑树品种志 1993 引证文献(2条)引证文献(2条)1.蒋昊.徐立.刘峻池.黄先智 药桑的生物活性成分及药理作用研究进展期刊论文-蚕业科学 2011(1)2.王丽玲 药桑红色素纯化工艺研究期刊论文-中国食品添加剂 2010(2)本文链接：http:/