感染性疾病及免疫学检测课件.ppt

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1、常见病毒性传染病及其免疫学检测平顶山市妇幼保健院平顶山市妇幼保健院传染病：传染病：是病原体以某种方式进入到是病原体以某种方式进入到人体后，并在人体内生长繁殖，释放人体后，并在人体内生长繁殖，释放毒素或导致机体内微生态平衡失调，毒素或导致机体内微生态平衡失调，给人体的组织和器官造成一定的损伤给人体的组织和器官造成一定的损伤而引起的疾病。而引起的疾病。病原体病原体易感人群易感人群免疫学检验主要用于：辅助诊断及鉴别诊断辅助诊断及鉴别诊断判断疗效及预后判断疗效及预后流行病学调查流行病学调查常用的免疫学检测方法常用的免疫学检测方法n n酶联免疫吸附试验（ELISA）n n金标法（试纸条、试纸板）金标法（

2、试纸条、试纸板）n n化学发光法化学发光法 1.电化学发光（罗氏）电化学发光（罗氏）2.微粒子化学发光（雅培）n n免疫印迹法(Western blotting)n n凝集反应（梅毒检测)n n酶联免疫吸附试验酶联免疫吸附试验ELISAELISA（enzyme linked enzyme linked immunosorbentimmunosorbent assay assay）是一类常用的免疫酶技术。是将已知是一类常用的免疫酶技术。是将已知的抗原或抗体吸附在固相载体表面，使的抗原或抗体吸附在固相载体表面，使抗原抗体反应在固相表面进行。抗原抗体反应在固相表面进行。常用的酶：常用的酶：辣根过氧化

3、物酶辣根过氧化物酶(HRP)(HRP)碱性磷酸酶（碱性磷酸酶（APAP）。）。基本步骤基本步骤n n包被包被n n封闭封闭n n孵育孵育n n洗涤洗涤n n显色显色n n结果测定结果测定 缺点：缺点：缺点：缺点：1 1只是诊断的辅助手段，特异性和灵敏性只是诊断的辅助手段，特异性和灵敏性有待提高。有待提高。2 2操作过程有些繁琐，反应时间过长，不能一蹴而操作过程有些繁琐，反应时间过长，不能一蹴而就。就。金标法金标法n n原理：金标层析法采用双抗原夹原理：金标层析法采用双抗原夹心法免疫测定原理，选择经纯化心法免疫测定原理，选择经纯化的基因工程制备的抗原，分别作的基因工程制备的抗原，分别作为包被抗原

4、和胶体金结合抗原。为包被抗原和胶体金结合抗原。由于由于层析层析作用反应复合物沿硝酸作用反应复合物沿硝酸纤维膜向前移动，当遇到包被抗纤维膜向前移动，当遇到包被抗原时，形成红色沉淀线。在包被原时，形成红色沉淀线。在包被膜上还有一条质控线对照，故当膜上还有一条质控线对照，故当有两条红线时判为阳性，只有一有两条红线时判为阳性，只有一条红线时，判为阴性。条红线时，判为阴性。免疫印迹法免疫印迹法n n免疫印迹法免疫印迹法 (Western blotting)(Western blotting)是一是一种将高分辨率种将高分辨率凝胶电泳凝胶电泳和免疫化学和免疫化学分析技术相结合的分析技术相结合的杂交技术杂交技

5、术。免疫。免疫印迹法具有分析容量大、敏感度高、印迹法具有分析容量大、敏感度高、特异性强等优点，是检测蛋白质特特异性强等优点，是检测蛋白质特性、表达与分布的一种最常用的方性、表达与分布的一种最常用的方法。（病毒学检测主要用于检测法。（病毒学检测主要用于检测HIVHIV抗原确证试验）抗原确证试验）凝集反应凝集反应 凝集反应是指颗粒抗原与相应抗体结合反应出现的可见性现象。颗粒抗原如完整的细菌、红细胞等与相应抗体相混合，在一定条件下出现凝集。化学发光免疫分析化学发光免疫分析chemiluminescence immunoassay（CLIA）n nCLIA是将化学发光分析和免疫反应相结合而建立的一种新

6、的免疫分析技术。n n这种方法兼有发光分析的高灵敏度和抗原抗体反应的高度特异性。CLIA优越性优越性n n高度敏感，可达pgml或pmol水平；n n特异性强，重复性好，CV5。n n测定范围宽，可达7个数量级。n n试剂稳定，无毒害，无污染，有效期长，达数月甚至数年。n n操作简单，耗时短，易于自动化。n n在对环保很重视的国家，CLIA成了取代RIA的首选方法。常见术前检测常见术前检测n甲型肝炎抗体（抗抗HAV HAV IgMIgM）n乙肝五项n丙型肝炎抗体（抗HCV)n梅毒螺旋体抗体n人类免疫缺陷病毒抗体（抗HIV）病毒性肝炎 Viral Hepatitis是由一组嗜是由一组嗜肝病毒肝病

7、毒引起的，以肝脏炎症和坏死引起的，以肝脏炎症和坏死病变病变为主的为主的一种传染病。主要表现一种传染病。主要表现为明显的消化道症状、全身疲乏无为明显的消化道症状、全身疲乏无力，肝脏肿大。肝功能异常，部分力，肝脏肿大。肝功能异常，部分病例出现黄疸。病例出现黄疸。甲型病毒性肝炎（HAV）n nHAV属小RNA病毒，为正单链RNA病毒。HAV主要经粪-口途径传播。潜伏期平均28天。n nHAV抵抗力较强，60加热10-12h后仍具有感染性，85 加热立即灭活，对乙醚、氯仿及PH为3的酸性环境有抵抗力。HAVIgM：近期感染：近期感染HAV,发病发病2周后阳性周后阳性 率为率为100%，3个月后转阴。个

8、月后转阴。早期诊断。早期诊断。IgG：急性感染后6个月达高峰，然后逐渐下降，可终身存在。既往既往感染感染HAVRNA：早期诊断的特异性指标：早期诊断的特异性指标HBV(hepatitis B virus）乙型肝炎病毒我国流行现状现有现有HBV感染者约感染者约1.6亿亿HBV颗粒l管型管型l小球型小球型l大球型大球型HBV特点HBsAg与与HBsAbHBeAg与与HBeAbHBcAg与与HBcAb有包膜双股有包膜双股DNA病毒病毒三组三组Ag-Ab系统：系统：HBs-Ag是感染的标志是感染的标志见于体液和分泌物见于体液和分泌物中，也可见于唾中，也可见于唾 液、精液、乳汁中液、精液、乳汁中介导病毒

9、结合肝细胞介导病毒结合肝细胞HBs-Ab3-6个月产生个月产生有抵抗力的标志有抵抗力的标志阻断病毒结合肝细胞阻断病毒结合肝细胞HBeAg病毒复制的标志，传病毒复制的标志，传染性强染性强病毒合成后释放到血液病毒合成后释放到血液中中治疗的参考指标治疗的参考指标HBeAb病毒复制减少的标志，病毒复制减少的标志，传染性弱传染性弱 要先于要先于HBsAb出现出现HBcAg存在于病毒核心，不存在于病毒核心，不释放至血液释放至血液抗原性强抗原性强HBcAb出现早，消退晚出现早，消退晚IgM:近期感染近期感染HBVIgG:既往感染既往感染HBV 临床组合模式模式模式模式模式HBsAgHBsAgHBsAgHBs

10、AgAnti-Anti-Anti-Anti-HBsHBsHBsHBsHBeAgHBeAgHBeAgHBeAgAnti-Anti-Anti-Anti-HBeHBeHBeHBeAnti-Anti-Anti-Anti-HBcHBcHBcHBc临临临临床意床意床意床意义义义义1 1 1 1+-+-+俗称俗称俗称俗称“大三阳大三阳大三阳大三阳”。急性或慢性乙。急性或慢性乙。急性或慢性乙。急性或慢性乙肝；病毒在复制，肝；病毒在复制，肝；病毒在复制，肝；病毒在复制，传传传传染性染性染性染性强强强强。2 2 2 2+-+俗称俗称俗称俗称“小三阳小三阳小三阳小三阳”。急性或慢性乙。急性或慢性乙。急性或慢性乙。急

11、性或慢性乙肝；肝；肝；肝；传传传传染性低。染性低。染性低。染性低。这这这这种模式在慢种模式在慢种模式在慢种模式在慢性无症状携性无症状携性无症状携性无症状携带带带带者以及急性感染者以及急性感染者以及急性感染者以及急性感染人群中人群中人群中人群中较较较较常常常常见见见见，病毒复制可能，病毒复制可能，病毒复制可能，病毒复制可能仍在仍在仍在仍在进进进进行。行。行。行。3 3 3 3+-+急性或慢性乙肝感染，有急性或慢性乙肝感染，有急性或慢性乙肝感染，有急性或慢性乙肝感染，有传传传传染染染染性性性性4 4 4 4-+既往感染既往感染既往感染既往感染5 5 5 5-+处处处处于于于于HBsAgHBsAgH

12、BsAgHBsAg和和和和HBeAgHBeAgHBeAgHBeAg消失与消失与消失与消失与Anti-Anti-Anti-Anti-HBeHBeHBeHBe和和和和Anti-Anti-Anti-Anti-HBsHBsHBsHBs出出出出现现现现之之之之间间间间的一个缺口的一个缺口的一个缺口的一个缺口时时时时期；既往感染期；既往感染期；既往感染期；既往感染6 6 6 6-+-+感染恢复期；既往感染，有免感染恢复期；既往感染，有免感染恢复期；既往感染，有免感染恢复期；既往感染，有免疫力疫力疫力疫力7 7 7 7-+-+感染恢复期；既往感染感染恢复期；既往感染感染恢复期；既往感染感染恢复期；既往感染8

13、 8 8 8-+-主主主主动动动动免疫免疫免疫免疫9 9 9 9-未感染未感染未感染未感染HBV,HBV,HBV,HBV,属易感者属易感者属易感者属易感者10101010+-+少少少少见见见见的模式的模式的模式的模式11111111+-12121212+-+-13131313-+-+14141414+-+模式模式模式模式HBsAgHBsAgHBsAgHBsAgAnti-Anti-Anti-Anti-HBsHBsHBsHBsHBeAgHBeAgHBeAgHBeAgAnti-Anti-Anti-Anti-HBeHBeHBeHBeAnti-Anti-Anti-Anti-HBcHBcHBcHBc临临临

14、临床意床意床意床意义义义义乙肝五项少见模式分析乙肝五项少见模式分析单一单一单一单一HBsAgHBsAg：主要见于急性主要见于急性主要见于急性主要见于急性HBVHBV感染的最早期，一般随之出现感染的最早期，一般随之出现感染的最早期，一般随之出现感染的最早期，一般随之出现HBeAgHBeAg和和和和IgMIgM的的的的Anti-Anti-HBcHBc。通常的慢性。通常的慢性。通常的慢性。通常的慢性HBVHBV感染中，感染中，感染中，感染中，HBsAgHBsAg和和和和Anti-Anti-HBcHBc并存者约占并存者约占并存者约占并存者约占95%95%，HBVHBV慢性慢性慢性慢性感染中不出现感染中

15、不出现感染中不出现感染中不出现Anti-Anti-HBcHBc是少是少是少是少见的。单一的见的。单一的见的。单一的见的。单一的HBsAgHBsAg的异常表现主要由于的异常表现主要由于的异常表现主要由于的异常表现主要由于Anti-Anti-HBcHBc的缺失。的缺失。的缺失。的缺失。HBsAgHBsAg和和和和Anti-Anti-HBsHBs并存：并存：并存：并存：在在在在HBVHBV感染恢复期中约有感染恢复期中约有感染恢复期中约有感染恢复期中约有3%3%的个例可同时检出的个例可同时检出的个例可同时检出的个例可同时检出HBsAgHBsAg和和和和Anti-Anti-HBsHBs,然后然后然后然后

16、HBsAgHBsAg消失而消失而消失而消失而Anti-Anti-HBsHBs水平逐渐升高。在慢性水平逐渐升高。在慢性水平逐渐升高。在慢性水平逐渐升高。在慢性HBVHBV感染者中约感染者中约感染者中约感染者中约3%-5%3%-5%两者共存，出现两者共存，出现两者共存，出现两者共存，出现Anti-Anti-HBsHBs并不表明并不表明并不表明并不表明HBsAgHBsAg的清除和感染的恢复，可能由于：的清除和感染的恢复，可能由于：的清除和感染的恢复，可能由于：的清除和感染的恢复，可能由于：1.1.前后感染两种亚型前后感染两种亚型前后感染两种亚型前后感染两种亚型HBVHBV，或，或，或，或HBsAgH

17、BsAg与其抗体之间仅有低亲和与其抗体之间仅有低亲和与其抗体之间仅有低亲和与其抗体之间仅有低亲和性反应；性反应；性反应；性反应；2.S2.S基因变异，其编码的基因变异，其编码的基因变异，其编码的基因变异，其编码的HBsAgHBsAg抗原性改变，原型抗原性改变，原型抗原性改变，原型抗原性改变，原型Anti-Anti-HBsHBs不不不不能将其清除；能将其清除；能将其清除；能将其清除；3.3.干扰素治疗中出现干扰素治疗中出现干扰素治疗中出现干扰素治疗中出现Anti-Anti-HBsHBs血清转换，也因血清转换，也因血清转换，也因血清转换，也因S S基因的变异，基因的变异，基因的变异，基因的变异，而

18、未能清除而未能清除而未能清除而未能清除HBsAgHBsAg。4.HBV4.HBV疫苗接种者中也有少数个例虽有正常的疫苗接种者中也有少数个例虽有正常的疫苗接种者中也有少数个例虽有正常的疫苗接种者中也有少数个例虽有正常的Anti-Anti-HBsHBs应答，应答，应答，应答，但仍能感染但仍能感染但仍能感染但仍能感染 决定簇变异的免疫逃逸病毒株，从而出现与决定簇变异的免疫逃逸病毒株，从而出现与决定簇变异的免疫逃逸病毒株，从而出现与决定簇变异的免疫逃逸病毒株，从而出现与HBsAgHBsAg共存的现象。共存的现象。共存的现象。共存的现象。HBeAg和和Anti-HBe并存：并存：一般是处于乙肝一般是处于

19、乙肝e抗原和抗原和e抗体转换时期，抗体转换时期，e抗原和抗原和e抗抗体以抗原抗体复合物的状态共体以抗原抗体复合物的状态共存。存。Anti-HBe试剂检测时，试剂检测时，血样中的抗原抗体复合物同样血样中的抗原抗体复合物同样可以结合至包被板上，起到了可以结合至包被板上，起到了竞争效果。竞争效果。呈世界性分布呈世界性分布极易慢性化，与肝硬化、原发性肝癌极易慢性化，与肝硬化、原发性肝癌 关系密切关系密切HCV（hepatitis C virus）丙型肝炎病毒HCV特点有包膜的单股正链有包膜的单股正链RNA病毒病毒抗抗HCV抗体非保护性抗体抗体非保护性抗体输血和非肠道途径传播输血和非肠道途径传播主要检测

20、主要检测IgG丙型病毒性肝炎(HCV)临床意义n nHCV是输血后肝炎和散发性非甲非乙型肝炎的主要病原。HCV感染后可导致慢性肝炎、肝硬化和肝细胞癌等多种肝脏疾病。抗HCV阳性而血清中没有HCV RNA提示既往感染。检测方法 常用检测方法为ELISA法，金标记免疫层析法和化学发光法。检测方法：检测方法：ELISA化学发光化学发光HIV(Human Immunodeficiency Virus)人获得性免疫缺陷病毒我国历年艾滋病病毒感染者和病人数我国历年艾滋病病毒感染者和病人数HIV的结构特点HIV-1和和HIV-2逆转录病毒逆转录病毒两股相同的正链两股相同的正链RNACD4 抗原抗原辅助受体辅

21、助受体CD4+细胞细胞HIV gp120 结合结合CD4/辅助受体辅助受体病毒经黏膜或皮肤破损进入体内病毒经黏膜或皮肤破损进入体内感染黏膜或皮肤层树突状细胞感染黏膜或皮肤层树突状细胞病毒于病毒于24小时内在树突状细胞繁殖小时内在树突状细胞繁殖病毒于病毒于24-28小时到达局部淋巴结小时到达局部淋巴结病毒于病毒于5天内出现在外周血液中天内出现在外周血液中每个感染细胞可产生每个感染细胞可产生5000个病毒颗个病毒颗粒，每人每天可产粒，每人每天可产1010病毒。病毒。HIV的检测筛选试验：敏感性高，如筛选试验：敏感性高，如ELISA，胶体金标记层析法。，胶体金标记层析法。确诊试验：特异性高，如蛋白印

22、迹试验和确诊试验：特异性高，如蛋白印迹试验和IFA抗体最早在感染后二周，最晚三个月会转为阳性抗体最早在感染后二周，最晚三个月会转为阳性初筛试验初筛试验2次阳性，再进行确认试验次阳性，再进行确认试验样品初筛检测初筛检测阳性反应阴性反应筛查试剂复查复查原有试剂加另一种筛选试剂均阳性反应一阴一阳均阴性反应送确认实验室确认报告阴性结果判断确诊试验阳性，有临床症状，诊断为确诊试验阳性，有临床症状，诊断为AIDS确诊试验阳性，无临床症状，诊断为确诊试验阳性，无临床症状，诊断为HIV感染者感染者确诊试验阴性，但初筛试验阳性或有临床症状，确诊试验阴性，但初筛试验阳性或有临床症状，3个月后复查个月后复查梅梅 毒

23、毒 syphilis 是梅毒螺旋体引起的一种慢性传染病，本病的特点是病程的长期性和潜匿性，病原体可侵犯任何器官，临床表现出各种不同的症状。三个阶段三个阶段p 一期梅毒：硬性下疳；p 二期梅毒：梅毒疹；p 三期梅毒：累及心、肝、神经系统、骨等。后天性梅毒（获得性）：95%性交 传播，少数因输血、接吻、医务人员不慎受染等直接接触传播。先天性梅毒（胎传梅毒）：梅毒螺旋体可自患病母体的血液经胎盘传给胎儿传播方式传播方式非梅毒螺旋体抗原血清试验非梅毒螺旋体抗原血清试验：是以心磷脂、卵磷脂及胆：是以心磷脂、卵磷脂及胆固醇作为抗原检查血清中的反应素，用于初筛试验及疗固醇作为抗原检查血清中的反应素，用于初筛试

24、验及疗效观察。可以分为以下四种效观察。可以分为以下四种试验试验，原理基本相同：，原理基本相同：1、性病研究实验室玻片试验（、性病研究实验室玻片试验（VDRL)：由于试剂需现配由于试剂需现配 现用，故而国内实验室很少采用。但现用，故而国内实验室很少采用。但VDRL是唯一可用是唯一可用于神经性梅毒诊断的血清学方法于神经性梅毒诊断的血清学方法 2、快速血浆反应素环状卡片试验、快速血浆反应素环状卡片试验(RPR)：在特制的纸片在特制的纸片 上进行，加入一定量特制的炭粉，可使抗原抗体出现上进行，加入一定量特制的炭粉，可使抗原抗体出现 凝集，用肉眼可观察结果。凝集，用肉眼可观察结果。3、甲苯胺红试验（、甲

25、苯胺红试验（TRUST)：在试剂中加入甲苯胺红代替在试剂中加入甲苯胺红代替炭粉炭粉 颗粒，使结果更易于观察。颗粒，使结果更易于观察。4、不加热血清反应素试验（、不加热血清反应素试验（USR)梅毒的血清学试验（一）梅毒的血清学试验（一）RPRTRUSTVDRL非梅毒螺旋体抗原血清学试验结果判断滴度：出现凝集反应的血清最高稀释倍数。非梅毒螺旋体抗原血清试验非梅毒螺旋体抗原血清试验的缺陷：的缺陷：1、特异性：由于在多种疾病，如急性病毒性感染、自身免疫、特异性：由于在多种疾病，如急性病毒性感染、自身免疫 性疾病、性疾病、结缔组织病、静脉吸毒者以及怀孕妇女中均可出现反应素，所以结缔组织病、静脉吸毒者以及

26、怀孕妇女中均可出现反应素，所以此类试验有时会出现假阳性反应此类试验有时会出现假阳性反应.2、敏感性：非梅毒螺旋体抗原血清试验有时出现弱阳性或阴性结果，、敏感性：非梅毒螺旋体抗原血清试验有时出现弱阳性或阴性结果，而临床上又像二期梅毒，此时应将此血清稀释后做定量试验，如而临床上又像二期梅毒，此时应将此血清稀释后做定量试验，如出现阳性结果，则为抗体过量引起的前带现象。出现阳性结果，则为抗体过量引起的前带现象。12二期梅毒二期梅毒病人可出现此现象而发生梅毒血清假阴性反应。此外，由于感染病人可出现此现象而发生梅毒血清假阴性反应。此外，由于感染梅毒后反应素的出现晚于特异性梅毒螺旋体抗体，晚期梅毒反应梅毒后

27、反应素的出现晚于特异性梅毒螺旋体抗体，晚期梅毒反应素又可能转阴，因此这类试验不适于一、三期梅毒，对隐性梅毒素又可能转阴，因此这类试验不适于一、三期梅毒，对隐性梅毒和神经梅毒也不敏感。因此此类试验做梅毒初筛时，存在一定数和神经梅毒也不敏感。因此此类试验做梅毒初筛时，存在一定数量的漏检量的漏检.非梅毒螺旋体抗原血清试验非梅毒螺旋体抗原血清试验的的优点：优点：1、非梅毒螺旋体抗原血清试验表现为滴度随疗程逐渐下降，故可以、非梅毒螺旋体抗原血清试验表现为滴度随疗程逐渐下降，故可以作为疗效观察的指标作为疗效观察的指标 2、此类方法价格低廉、此类方法价格低廉梅毒的血清学试验（二）梅毒的血清学试验（二）梅毒螺

28、旋体抗原血清试验梅毒螺旋体抗原血清试验：用梅毒螺旋体作为抗：用梅毒螺旋体作为抗原检测血清中的抗螺旋体原检测血清中的抗螺旋体IgMIgM和和/或或IgGIgG抗体，其敏抗体，其敏感性和特异性均较高。常用的有以下五种方法：感性和特异性均较高。常用的有以下五种方法：1 1、荧光梅毒螺旋体抗体吸收试验（、荧光梅毒螺旋体抗体吸收试验（FTA-ABS)FTA-ABS)2 2、梅毒螺旋体血球凝集试验（梅毒螺旋体血球凝集试验（TPHATPHA）3 3、梅毒螺旋体明胶凝集试验（梅毒螺旋体明胶凝集试验（TPPA)TPPA)4 4、梅毒螺旋体酶联免疫吸附试验（梅毒螺旋体酶联免疫吸附试验（TP-ELISATP-ELI

29、SA）5 5、梅毒螺旋体快速诊断试验（梅毒螺旋体快速诊断试验（TP-RTTP-RT）梅毒的血清学试验（三）梅毒的血清学试验（三）梅毒螺旋体明胶凝集试验（梅毒螺旋体明胶凝集试验（TPPA）原理：原理：TPPA的原理与的原理与TPHA基本相同，它以人工合成的基本相同，它以人工合成的 惰性明胶颗粒代替惰性明胶颗粒代替TPHA试验的红细胞作为载体，试验的红细胞作为载体，是是TPHA的升级产品的升级产品 优点：优点：1、试剂稳定，批间差小试剂稳定，批间差小 2、结果判读更为清晰明确结果判读更为清晰明确 3、敏感性和特异性较敏感性和特异性较TPHA进一步提高进一步提高 4 4、通过了国家的批批检、通过了国

30、家的批批检 不足：结果判定主观，较难实现自动化不足：结果判定主观，较难实现自动化梅毒的血清学试验（四）梅毒的血清学试验（四）赛乐迪亚（赛乐迪亚（Serodia）TPPA 梅毒螺旋体抗体明胶颗粒凝集试验梅毒螺旋体抗体明胶颗粒凝集试验梅毒螺旋体酶联免疫试验（梅毒螺旋体酶联免疫试验（TP-ELISA）原理：以梅毒螺旋体抗原包被聚丙乙烯板，再加入待检原理：以梅毒螺旋体抗原包被聚丙乙烯板，再加入待检 血清以及酶标抗原，形成双抗原夹心，同时检测血清以及酶标抗原，形成双抗原夹心，同时检测 IgG、IgM抗体。少数试剂采用间接法，检测抗体。少数试剂采用间接法，检测IgG 优点：优点：1、敏感性和特异性较高、敏

31、感性和特异性较高 2、价格较低，适合于对大量样品的筛查、价格较低，适合于对大量样品的筛查 不足：各家不足：各家ELISA试剂盒采用的抗原和工艺不同，使测试剂盒采用的抗原和工艺不同，使测 定的敏感性和特异性产生较大的差异，临床实验定的敏感性和特异性产生较大的差异，临床实验 室在选用室在选用ELISA试剂前应认真进行评估试剂前应认真进行评估 梅毒的血清学试验（五）梅毒的血清学试验（五）梅毒螺旋体快速诊断试验梅毒螺旋体快速诊断试验（TP-RT）原理：双抗原夹心免疫层析试验或间接法免疫渗滤试验，原理：双抗原夹心免疫层析试验或间接法免疫渗滤试验，多采用胶体金进行标记，同时检测多采用胶体金进行标记，同时检

32、测IgG、IgM抗体抗体 （双抗原夹心法）或单测（双抗原夹心法）或单测IgG抗体（间接法）抗体（间接法）优点：优点：1、简便、快速，不需要特殊的仪器、简便、快速，不需要特殊的仪器 2、适合于单人份操作，可用于较紧急的场合、适合于单人份操作，可用于较紧急的场合 不足：不足：1、临床评估资料不多，敏感性、特异性尚有待进、临床评估资料不多，敏感性、特异性尚有待进 一步考查一步考查 2、无法实现自动化，结果判断主观、无法实现自动化，结果判断主观 3、测定结果受温度和时间的影响较大、测定结果受温度和时间的影响较大 4、未通过国家的批批检、未通过国家的批批检梅毒的血清学试验（六）梅毒的血清学试验（六）梅毒

33、免疫层析快速检测方法梅毒免疫层析快速检测方法 结果及意义 非特异非特异 特异性特异性 意义意义 RPR TP 排除梅毒排除梅毒非特异感染，如麻风非特异感染，如麻风,SLE 梅毒感染梅毒感染 梅毒经治疗后梅毒经治疗后 梅毒抗体检测的临床意义n n1.1.TRUSTTRUST适用于筛查和治疗效果的监测，梅毒螺适用于筛查和治疗效果的监测，梅毒螺旋体抗原试验旋体抗原试验(ELISAELISA、TPPATPPA、金标记免疫层析等金标记免疫层析等)，对潜伏期和晚期梅毒敏感性更高。，对潜伏期和晚期梅毒敏感性更高。n n2.2.梅毒的血清学试验阳性，只提示所测标本中有抗梅毒的血清学试验阳性，只提示所测标本中有

34、抗类脂抗体或抗类脂抗体或抗TPTP抗体存在，不能作为患者感染梅抗体存在，不能作为患者感染梅毒的绝对依据，阴性结果也不能排除梅毒螺旋体毒的绝对依据，阴性结果也不能排除梅毒螺旋体感染，检测结果应结合临床综合分析。感染，检测结果应结合临床综合分析。n n3.3.最好每次用两种以上方法检测。最好每次用两种以上方法检测。关于梅毒血清学试验程序的探讨关于梅毒血清学试验程序的探讨 梅毒螺旋体抗原血清试验（梅毒螺旋体抗原血清试验（TPPA等）等）（-）阴性报告阴性报告（+）非梅毒螺旋体抗原血清试验（非梅毒螺旋体抗原血清试验（RPR等）等）（+）现症梅毒现症梅毒抗梅抗梅治疗，疗效观察治疗，疗效观察（-）询问梅毒既往感染和治疗史询问梅毒既往感染和治疗史（有）（有）既往感染既往感染（无）（无）随访或抗梅治疗随访或抗梅治疗Thank you!