药物分析生物碱类药物分析课件.ppt

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1、第六节 生物碱类药物的分析malkaloids）是一类重要的天然有机化合物，多数具有复杂的氮杂环结构，生理活性显著，多显碱性,绝大多数存在于植物体内，已有数十种广泛应用于临床。m中国药典收录的生物碱类化学药物主要有苯烃胺类、托烷类、喹啉类、吲哚类、黄嘌呤类等。（一）概述（一）概述（二）常见药物的结构与性质一、生物碱类药物性质与结构分析一、生物碱类药物性质与结构分析性状性状m大部分由C、H、O、N等元素组成m多为结晶或非晶型固体m无色，少数为有色物质m多具有苦味，个别味极苦而辛辣，一般无臭m固体多具有确定的熔点，部分具有挥发性或升华性。（一）概述m多具有碱性，受电效应及立体效应等影响，强弱差异较

2、大。m碱性顺序为：季铵碱 脂环胺和脂肪胺 芳香脂胺 氨 芳胺 N-芳杂胺 环酰胺（近中性）；m吗啡兼有两性；茶碱显酸性。m碱性的生物碱可利用碱性与酸成盐，如盐酸麻黄碱；m碱性极弱的生物碱，以游离状态存在，如咖啡因和利血平。碱性m游离生物碱大都不溶或难溶于水，溶于或易溶于有机溶剂m碱性生物碱在稀酸溶液中成盐而溶解。m生物碱的盐类多易溶于水，不溶或难溶于有机溶剂溶解性溶解性m多具旋光性。m中国药典中对许多生物碱都规定了旋光度测定。旋光性旋光性药典收载药物药典收载药物m中国药典（2010年版）主要收载有麻黄碱、伪麻黄碱、秋水仙碱、阿托品、山莨菪碱、硫酸奎宁、奎尼丁、吗啡、可待因、小檗碱、士的宁、长春

3、碱、长春新碱、利血平、咖啡因、茶碱、毛果芸香碱、川芎嗪等常用生物碱类药物（二）常见生物碱类药物的结构与性质1.苯烃胺类生物碱 2.托烷类生物碱3.喹啉类生物碱 4.异喹啉类生物碱 5.吲哚类生物碱 6.黄嘌呤类生物碱 其它种类 1.苯烃胺类生物碱苯烃胺类生物碱 药物结构理化性质m盐酸麻黄碱（ephedrine hydrochloride）m盐酸伪麻黄碱（pseudoephedrine hydrochloride）m秋水仙碱（colchicine）一、生物碱类药物性质与结构分析一、生物碱类药物性质与结构分析苯烃胺类药物结构盐酸麻黄碱（ephedrine hydrochloride）白色针状结晶或

4、结晶性粉末，无臭，味苦一、生物碱类药物性质与结构分析一、生物碱类药物性质与结构分析盐酸伪麻黄碱（pseudoephedrine hydrochloride）苯烃胺类药物结构白色结晶性粉末，无臭、味苦 一、生物碱类药物性质与结构分析一、生物碱类药物性质与结构分析苯烃胺类药物结构秋水仙碱（colchicine）淡黄色结晶性粉末 一、生物碱类药物性质与结构分析一、生物碱类药物性质与结构分析苯烃胺类药物理化性质苯烃胺类药物理化性质性状及溶解性 碱性 氨基醇双缩脲反应 旋光性 紫外特征吸收 一、生物碱类药物性质与结构分析一、生物碱类药物性质与结构分析m盐酸麻黄碱水中易溶，乙醇中溶解，三氯甲烷和乙醚中不溶

5、；盐酸伪麻黄碱极易溶于水，易溶于乙醇，微溶于三氯甲烷；秋水仙碱无臭，遇光色渐变深，乙醇、三氯甲烷中易溶，水中溶解，乙醚中极微溶。苯烃胺类药物理化性质苯烃胺类药物理化性质性状及溶解性 一、生物碱类药物性质与结构分析一、生物碱类药物性质与结构分析m麻黄碱和伪麻黄碱，碱性较强，易与酸成盐；m秋水仙碱碱性很弱，不与酸成盐。苯烃胺类药物理化性质苯烃胺类药物理化性质 碱性 一、生物碱类药物性质与结构分析一、生物碱类药物性质与结构分析m盐酸麻黄碱和伪麻黄碱具有氨基醇结构，可发生双缩脲反应。苯烃胺类药物理化性苯烃胺类药物理化性质质氨基醇双缩脲反应一、生物碱类药物性质与结构分析一、生物碱类药物性质与结构分析m盐

6、酸麻黄碱为左旋体，50mg/ml溶液测定比旋度为3335.5；盐酸伪麻黄碱为右旋体，50mg/ml溶液测定比旋度为61.062.5；秋水仙碱为左旋体，10mg/ml溶液比旋度为425450。苯烃胺类药物理化性质苯烃胺类药物理化性质 旋光性 一、生物碱类药物性质与结构分析一、生物碱类药物性质与结构分析苯烃胺类药物理化性质紫外特征吸收 m盐酸伪麻黄碱0.5mg/ml溶液在251、257、263nm波长处有最大吸收；m秋水仙碱在243与350nm波长处的吸光度比值为1.702.00。一、生物碱类药物性质与结构分析一、生物碱类药物性质与结构分析2.托烷类生物碱托烷类生物碱m硫酸阿托品（atropine

7、 sulfate）m消旋山莨菪碱（raceanisodamine）m氢 溴 酸 东 莨 菪 碱（scopolamine hydrobromide）药物结构理化性质一、生物碱类药物性质与结构分析一、生物碱类药物性质与结构分析硫酸阿托品（atropine sulfate）托烷类药物结构无色结晶或白色结晶性粉末，无臭 一、生物碱类药物性质与结构分析一、生物碱类药物性质与结构分析消旋山莨菪碱（raceanisodamine）托烷类药物结构白色结晶或结晶性粉末，无臭，味苦 一、生物碱类药物性质与结构分析一、生物碱类药物性质与结构分析氢溴酸东莨菪碱（scopolamine hydrobromide）托烷类

8、药物结构无色结晶或白色结晶性粉末，无臭，具有微风化性 一、生物碱类药物性质与结构分析一、生物碱类药物性质与结构分析托烷类药物理化性质托烷类药物理化性质溶解性 碱性 稳定性 旋光性 莨菪酸反应 一、生物碱类药物性质与结构分析一、生物碱类药物性质与结构分析托烷类药物理化性质溶解性 m硫酸阿托品水中极易溶解，乙醇中易溶；消旋山莨菪碱在乙醇或盐酸中易溶，水中溶解；氢溴酸东莨菪碱水中易溶，乙醇中略溶，三氯甲烷中极微溶，乙醚中不溶。一、生物碱类药物性质与结构分析一、生物碱类药物性质与结构分析托烷类药物理化性质 碱性 m托烷类生物碱氮原子位于五元环内，为叔氮m碱性较强，易与酸成盐。一、生物碱类药物性质与结构

9、分析一、生物碱类药物性质与结构分析m为莨菪醇和莨菪酸组成的酯类物质m易于发生水解。托烷类药物理化性质稳定性一、生物碱类药物性质与结构分析一、生物碱类药物性质与结构分析m氢溴酸东莨菪碱为左旋体，50mg/ml溶液比旋度为2427；硫酸阿托品和消旋山莨菪碱均为消旋体，无旋光。托烷类药物理化性质 旋光性 一、生物碱类药物性质与结构分析一、生物碱类药物性质与结构分析m水解生成莨菪酸，可为发烟硝酸硝化，在碱性醇溶液中呈现深紫色，后转暗红色，最后颜色消失（Vatili反应）；m亦可与硫酸、重铬酸钾在加热条件下，发生氧化反应而生成具有苦杏仁味的苯甲醛。托烷类药物理化性质莨菪酸反应 一、生物碱类药物性质与结构

10、分析一、生物碱类药物性质与结构分析药物结构理化性质3.喹啉类生物碱m硫酸奎宁（quinine sulfate）m硫酸奎尼丁（quinidine sulfate）一、生物碱类药物性质与结构分析一、生物碱类药物性质与结构分析硫酸奎宁（quinine sulfate）白色细微的针状结晶，轻柔，易压缩，无臭，味极苦，遇光渐变色 喹啉类药物结构喹啉类药物结构一、生物碱类药物性质与结构分析一、生物碱类药物性质与结构分析硫酸奎尼丁（quinidine sulfate）喹啉类药物结构白色细针状结晶一、生物碱类药物性质与结构分析一、生物碱类药物性质与结构分析喹啉类药物理化性质溶解性 碱性 6位含氧的喹啉衍生物

11、旋光性 荧光特性 一、生物碱类药物性质与结构分析一、生物碱类药物性质与结构分析溶解性 喹啉类药物理化喹啉类药物理化性质性质m硫酸奎宁，易溶于三氯甲烷-无水乙醇（21）的混合液，水、乙醇、三氯甲烷、乙醚中微溶。m硫酸奎尼丁，易溶于沸水，溶于三氯甲烷、乙醇，水中微溶，不溶于乙醚。一、生物碱类药物性质与结构分析一、生物碱类药物性质与结构分析 碱性 喹啉类药物理化性质喹啉类药物理化性质m均具有喹啉环和喹核碱，含有二个氮原子m喹啉氮为芳香氮，碱性较弱，不可与酸成盐；m喹核氮为脂环氮，是叔氮，碱性较强，可与酸成盐m1分子硫酸与2分子药物成盐。喹核氮喹核氮喹喹啉啉氮氮一、生物碱类药物性质与结构分析一、生物碱

12、类药物性质与结构分析喹啉类药物理化性质喹啉类药物理化性质m硫酸奎宁和硫酸奎尼丁是对映异构体，仅喹核碱部分立体结构不同，硫酸奎宁是左旋体，20mg/ml水溶液比旋度为237244；硫酸奎尼丁为右旋体，20mg/ml水溶液，比旋度为275290。旋光性 一、生物碱类药物性质与结构分析一、生物碱类药物性质与结构分析喹啉类药物理化性质喹啉类药物理化性质m与氯水、氨水发生绿奎宁反应。6位含氧的喹啉衍生物 一、生物碱类药物性质与结构分析一、生物碱类药物性质与结构分析喹啉类药物理化性质喹啉类药物理化性质m在稀酸条件下，均显蓝色荧光，可用于鉴别。荧光特性 一、生物碱类药物性质与结构分析一、生物碱类药物性质与结

13、构分析药物结构理化性质4.异喹啉类生物碱m硫酸吗啡（morphine sullfate）m盐酸吗啡（morphine hydrochloride）m磷酸可待因（codeine phosphate）m盐酸小檗碱（berberine hydrochloride）一、生物碱类药物性质与结构分析一、生物碱类药物性质与结构分析硫酸吗啡（morphine sullfate）白色针状结晶或结晶性粉末，无臭，遇光易变质异喹啉类药物结构异喹啉类药物结构一、生物碱类药物性质与结构分析一、生物碱类药物性质与结构分析盐酸吗啡（morphine hydrochloride）白色，有丝光的针状结晶或结晶性粉末，无臭，遇光

14、易变质 异喹啉类药物结构异喹啉类药物结构一、生物碱类药物性质与结构分析一、生物碱类药物性质与结构分析磷酸可待因（codeine phosphate）白色细微的针状结晶性粉末，无臭，有风化性 异喹啉类药物结构异喹啉类药物结构一、生物碱类药物性质与结构分析一、生物碱类药物性质与结构分析盐酸小檗碱（berberine hydrochloride）黄色结晶性粉末，无臭，味极苦异喹啉类药物结构异喹啉类药物结构一、生物碱类药物性质与结构分析一、生物碱类药物性质与结构分析异喹啉类生物碱理化性质异喹啉类生物碱理化性质溶解性 酸性和碱性 吗啡生物碱的特征反应 还原性 小檗碱的呈色反应 一、生物碱类药物性质与结构

15、分析一、生物碱类药物性质与结构分析溶解性 异喹啉类药物理化性质异喹啉类药物理化性质m硫酸吗啡与盐酸吗啡，在水中溶解，乙醇中略溶，三氯甲烷和乙醚中不溶；一、生物碱类药物性质与结构分析一、生物碱类药物性质与结构分析 酸性和碱性 异喹啉类药物理化性质异喹啉类药物理化性质m吗啡结构中具有酚羟基和叔氮基团，具有酸碱两性，可溶于氢氧化钠溶液和盐酸溶液，但碱性略强；m可待因分子中酚羟基被甲氧化，仅有叔氮基团，碱性较强，不溶于氢氧化钠溶液；m小檗碱具有-羟胺结构，能形成醇式、季铵式、醛式互变异构，季铵式最稳定，并离子化呈强碱性，可与酸成盐。一、生物碱类药物性质与结构分析一、生物碱类药物性质与结构分析异喹啉类药

16、物理化性质异喹啉类药物理化性质m吗啡A环酚羟基具有弱还原性，易被氧化；m可待因不具有酚羟基，不易氧化m此性质可用于区别吗啡和可待因。还原性 一、生物碱类药物性质与结构分析一、生物碱类药物性质与结构分析异喹啉类药物理化异喹啉类药物理化性质性质m与甲醛试液的Marquis反应m与钼硫酸试液的Frohde反应。吗啡生物碱的特征反应 一、生物碱类药物性质与结构分析一、生物碱类药物性质与结构分析异喹啉类药物理化性质异喹啉类药物理化性质m游离小檗碱可与丙酮结合为丙酮小檗碱，析出黄色沉淀；220加热可分解为红色的小檗红碱；在酸性溶液中加漂白粉（或通氯气）溶液即显樱红色；与5没食子酸水浴加热，显翠绿色。小檗碱

17、的呈色反应 一、生物碱类药物性质与结构分析一、生物碱类药物性质与结构分析药物结构理化性质5.吲哚类生物碱m硝酸士的宁（strychnine nitrate）m利血平（reserpine）m硫酸长春碱（vinblastine sulfate）m硫酸长春新碱（vincristine sulfate）一、生物碱类药物性质与结构分析一、生物碱类药物性质与结构分析硝酸士的宁（strychnine nitrate）无色针状结晶或白色结晶性粉末，无臭，味极苦吲哚类药物结构一、生物碱类药物性质与结构分析一、生物碱类药物性质与结构分析利血平（reserpine）白色或淡黄褐色的结晶或结晶性粉末，无臭，几乎无味，

18、遇光色渐变深 吲哚类药物结构一、生物碱类药物性质与结构分析一、生物碱类药物性质与结构分析硫酸长春碱（vinblastine sulfate）白色或类白色的结晶性粉末，无臭，有引湿性，遇光或热易变黄 吲哚类药物结构一、生物碱类药物性质与结构分析一、生物碱类药物性质与结构分析硫酸长春新碱（vincristine sulfate）白色或类白色结晶性粉末，无臭，有引湿性，遇光或热易变黄 吲哚类药物结构一、生物碱类药物性质与结构分析一、生物碱类药物性质与结构分析吲哚类生物碱理化性质吲哚类生物碱理化性质溶解性 碱性 士的宁 旋光性 利血平的还原性 利血平吲哚环-位氢 长春碱与长春新碱 一、生物碱类药物性质

19、与结构分析一、生物碱类药物性质与结构分析溶解性 m硝酸士的宁沸水中易溶，水中略溶，微溶于乙醇、三氯甲烷，乙醚中不溶；利血平三氯甲烷中易溶，丙酮或苯中微溶，不溶于水、甲醇、乙醇或乙醚；硫酸长春碱和长春新碱水中易溶，甲醇、三氯甲烷中溶解，乙醇中极微溶解。吲哚类生物碱理化性质吲哚类生物碱理化性质一、生物碱类药物性质与结构分析一、生物碱类药物性质与结构分析吲哚类生物碱理化性质吲哚类生物碱理化性质m结构中均具有吲哚氮和脂环氮。吲哚氮与芳环共轭，碱性较弱，不与酸成盐；m士的宁结构中脂环氮为叔氮，碱性较强，可与硝酸成盐；m利血平结构中的脂环氮由于邻近基团存在立体位阻效应，碱性较弱，不能与酸成盐，以游离药物形

20、式存在；m长春碱和长春新碱结构中的脂环氮有两个，均具有一定的碱性，故可与一分子二元酸成盐。碱 性 一、生物碱类药物性质与结构分析一、生物碱类药物性质与结构分析吲哚类生物碱理化性质吲哚类生物碱理化性质m利血平为左旋体，10mg/ml三氯甲烷液比旋度为115131。旋光性一、生物碱类药物性质与结构分析一、生物碱类药物性质与结构分析吲哚类生物碱理化性质吲哚类生物碱理化性质m用硫酸溶解后，可与重铬酸钾反应呈现紫色。士的宁 一、生物碱类药物性质与结构分析一、生物碱类药物性质与结构分析吲哚类生物碱理化性质吲哚类生物碱理化性质m易于氧化，产物为黄色的3,4-二去氢利血平，伴有黄绿色荧光，进一步可氧化为3,4

21、,5,6-四去氢利血平，具有蓝色荧光。利血平的还原性 一、生物碱类药物性质与结构分析一、生物碱类药物性质与结构分析吲哚类生物碱理化性质吲哚类生物碱理化性质m较活泼，可与芳醛发生缩合反应而显色。利血平吲哚环-位氢 一、生物碱类药物性质与结构分析一、生物碱类药物性质与结构分析药物结构理化性质6.黄嘌呤类生物碱m咖啡因（caffeine）m茶碱（theophylline）m氨茶碱（aminophylline）一、生物碱类药物性质与结构分析一、生物碱类药物性质与结构分析咖啡因（caffeine）白色或带极微黄绿色、有丝光的针状结晶，无臭，味苦，有风化性 黄嘌呤类药物结构一、生物碱类药物性质与结构分析一

22、、生物碱类药物性质与结构分析茶碱（theophylline）白色结晶性粉末，无臭、味苦黄嘌呤类药物结构一、生物碱类药物性质与结构分析一、生物碱类药物性质与结构分析氨茶碱（aminophylline）白色或微黄色的颗粒或粉末，微有氨臭，味苦 黄嘌呤类药物结构一、生物碱类药物性质与结构分析一、生物碱类药物性质与结构分析黄嘌呤类生物碱理化性质黄嘌呤类生物碱理化性质溶解性 酸性和碱性 黄嘌呤生物碱的紫脲酸铵反应 一、生物碱类药物性质与结构分析一、生物碱类药物性质与结构分析溶解性 m咖啡因在热水或三氯甲烷中易溶，在水、乙醇或丙酮中略溶，乙醚中极微溶；茶碱在乙醇、三氯甲烷中微溶，水中极微溶，氢氧化钾或氨溶

23、液中易溶；氨茶碱在水中溶解，乙醚中不溶。黄嘌呤类生物碱理化性质黄嘌呤类生物碱理化性质一、生物碱类药物性质与结构分析一、生物碱类药物性质与结构分析酸性和碱性 m咖啡因不显酸性；m茶碱7位N-H可解离显酸性，可与乙二胺成氨-茶碱；m黄嘌呤环上N-9碱性极弱，近中性，游离碱可供药用 黄嘌呤类生物碱理化性质黄嘌呤类生物碱理化性质一、生物碱类药物性质与结构分析一、生物碱类药物性质与结构分析黄嘌呤生物碱的紫脲酸铵反应m咖啡因和茶碱具有黄嘌呤结构，与盐酸和氯酸钾水浴蒸干，遇氨气生成四甲基紫脲酸铵，显紫色，加氢氧化钠紫色消失。黄嘌呤类生物碱理化性质黄嘌呤类生物碱理化性质一、生物碱类药物性质与结构分析一、生物碱

24、类药物性质与结构分析（一）生物碱一般鉴别试验（一）生物碱一般鉴别试验1.熔点测定2.生物碱显色反应3.生物碱沉淀反应4.紫外分光光度法5.红外分光光度法6.薄层色谱法二、生物碱类药物的鉴别试验二、生物碱类药物的鉴别试验m固体生物碱类药物大多具有一定的熔点，m某些生物碱药物采用测定游离生物碱熔点的鉴别方法1.熔点测定熔点测定（一）生物碱一般鉴别试验二、生物碱类药物的鉴别试验二、生物碱类药物的鉴别试验磷酸可待因的鉴别磷酸可待因的鉴别m取本品约0.2g，加水4ml溶解后，在不断搅拌下滴加20氢氧化钠溶液至出现白色沉淀，用玻璃棒摩擦器壁使沉淀完全，滤过；沉淀用水洗净，在105干燥1小时，测定熔点为15

25、4158。二、生物碱类药物的鉴别试验二、生物碱类药物的鉴别试验m常用显色试剂有浓硫酸、浓硝酸、钼硫酸、矾硫酸、甲醛-硫酸、硫酸铈铵等m显色反应的机制可能是脱水、氧化、缩合等。（一）生物碱一般鉴别试验2.生物碱显色反应二、生物碱类药物的鉴别试验二、生物碱类药物的鉴别试验中国药典（中国药典（2010年版）中硝酸士的宁鉴别年版）中硝酸士的宁鉴别 m取硝酸士的宁0.5mg，置蒸发皿中，加硫酸1滴溶解后，加重铬酸钾的结晶一小粒，周围即显紫色 二、生物碱类药物的鉴别试验二、生物碱类药物的鉴别试验常见生物碱的显色鉴别试验常见生物碱的显色鉴别试验 茶碱磷酸可待因盐酸小檗碱利血平硝酸士的宁硫酸长春新碱硫酸长春碱

26、硫酸奎宁、奎尼丁硝酸毛果芸香碱表1表2二、生物碱类药物的鉴别试验二、生物碱类药物的鉴别试验常见生物碱的显色鉴别试验表常见生物碱的显色鉴别试验表1二、生物碱类药物的鉴别试验二、生物碱类药物的鉴别试验常见生物碱的显色鉴别试验表常见生物碱的显色鉴别试验表2二、生物碱类药物的鉴别试验二、生物碱类药物的鉴别试验m常用的生物碱沉淀剂有：碘化铋钾、碘化汞钾、碘-碘试液、二氯化汞等m由于反应专属性不高，中国药典（2010年版）仅对个别生物碱类药物的鉴别使用此类反应（一）生物碱一般鉴别试验3.生物碱沉淀反应生物碱沉淀反应二、生物碱类药物的鉴别试验二、生物碱类药物的鉴别试验m生物碱类药物大都含有芳环、芳杂环以及共

27、轭双键结构，具有特征的紫外吸收，可供鉴别。（一）生物碱一般鉴别试验4.紫外分光光度法紫外分光光度法中国药典（2010年版）紫外鉴别方法 常见生物碱类药物的紫外鉴别 二、生物碱类药物的鉴别试验二、生物碱类药物的鉴别试验中国药典（中国药典（2010年版）紫外鉴别方法年版）紫外鉴别方法 m（1）对比吸收光谱的特征参数。m（2）对比吸收光谱的一致性。m（3）对比吸光度比值的一致性。二、生物碱类药物的鉴别试验二、生物碱类药物的鉴别试验常见生物碱类药物的紫外鉴别常见生物碱类药物的紫外鉴别二、生物碱类药物的鉴别试验二、生物碱类药物的鉴别试验m除硝酸士的宁、磷酸奎尼丁外均采用此法鉴别。（一）生物碱一般鉴别试验

28、5.红外分光光度法红外分光光度法 二、生物碱类药物的鉴别试验二、生物碱类药物的鉴别试验（一）生物碱一般鉴别试验6.薄层色谱法薄层色谱法【实例分析】消旋山莨菪碱的鉴别【实例分析】消旋山莨菪碱的鉴别【实例分析】消旋山莨菪碱的鉴别【实例分析】消旋山莨菪碱的鉴别分析 展开剂中添加碱性的氨溶液 显色方法 二、生物碱类药物的鉴别试验二、生物碱类药物的鉴别试验（一）生物碱一般鉴别试验6.薄层色谱法薄层色谱法【实例分析】消旋山莨菪碱的鉴别【实例分析】消旋山莨菪碱的鉴别药典方法 m取本品与消旋山莨菪碱对照品，分别加甲醇制成每1ml中含1mg的溶液，照薄层色谱法，吸取上述溶液各10l，分别点于同一硅胶GF254薄

29、层板上，用甲醇-丙酮-乙醇-浓氨液（450.60.4）为展开剂，展开后晾干，置紫外灯（254nm）下检视，供试品溶液所显主斑点的位置应与对照溶液的主斑点相同；二、生物碱类药物的鉴别试验二、生物碱类药物的鉴别试验m中和硅胶的弱酸性，防止生物碱在薄层板上吸附太牢，导致严重拖尾m除氨溶液外，还可使用乙二胺 展开剂中添加碱性的氨溶液展开剂中添加碱性的氨溶液 二、生物碱类药物的鉴别试验二、生物碱类药物的鉴别试验m采用GF254的荧光背景m普通硅胶板，可利用生物碱自身的颜色、荧光性质以及与生物碱沉淀剂的显色反应显色 显色方法显色方法二、生物碱类药物的鉴别试验二、生物碱类药物的鉴别试验（二）生物碱特征鉴别试

30、验（二）生物碱特征鉴别试验1.1.具有氨基醇结构生物碱的特征反应具有氨基醇结构生物碱的特征反应2.托烷生物碱的特征反应托烷生物碱的特征反应3.6位含氧喹啉衍生物的特征反应位含氧喹啉衍生物的特征反应4.吗啡生物碱的特征反应吗啡生物碱的特征反应5.吲哚生物碱的特征反应吲哚生物碱的特征反应6.黄嘌呤类生物碱的特征反应黄嘌呤类生物碱的特征反应二、生物碱类药物的鉴别试验二、生物碱类药物的鉴别试验（二）生物碱特征鉴别试验1.1.具有氨基醇结构生物碱的特征反应具有氨基醇结构生物碱的特征反应双缩脲反应中国药典（2010年版）盐酸麻黄碱的鉴别 反应原理 方程式 二、生物碱类药物的鉴别试验二、生物碱类药物的鉴别试

31、验反应原理反应原理mCu2+与仲胺基形成紫堇色配位化合物，溶于乙醚层显紫红色，四水配合物溶于水层呈蓝色。无水配合物及一水配合物四水配合物乙醚水层二、生物碱类药物的鉴别试验二、生物碱类药物的鉴别试验双缩脲反应方程式双缩脲反应方程式二、生物碱类药物的鉴别试验二、生物碱类药物的鉴别试验中国药典（中国药典（2010年版）盐酸麻黄碱的鉴别年版）盐酸麻黄碱的鉴别m取盐酸麻黄碱约10mg，加水1ml溶解后，加硫酸铜试液2滴与20的氢氧化钠溶液1ml，即显蓝紫色；加乙醚1ml，振摇后，放置，乙醚层即显紫红色，水层变为蓝色。二、生物碱类药物的鉴别试验二、生物碱类药物的鉴别试验2.托烷生物碱的特征反应托烷生物碱的

32、特征反应m莨菪酸，与发烟硝酸和醇制氢氧化钾发生特征维他立（Vitali）反应。m中国药典（2005年版）对氢溴酸东莨菪碱、消旋山莨菪碱、硫酸阿托品均采用此法鉴别（二）生物碱特征鉴别试验Vitali反应中国药典附录III-Vitali反应反应原理 方程式 二、生物碱类药物的鉴别试验二、生物碱类药物的鉴别试验Vitali反应原理反应原理m酸性条件下，托烷类生物碱酯键水解，生成莨菪酸，莨菪酸为硝酸硝化为三硝基衍生物，在醇制氢氧化钾碱性条件下，转变为紫色紫色的醌型物质。二、生物碱类药物的鉴别试验二、生物碱类药物的鉴别试验Vitali方程式方程式二、生物碱类药物的鉴别试验二、生物碱类药物的鉴别试验中国药

33、典中国药典附录附录III-Vitali反应反应m取供试品约10mg，加发烟硝酸5滴，置水浴上蒸干，得黄色的残渣，放冷，加乙醇23滴湿润，加固体氢氧化钾一小粒，即显深紫色。二、生物碱类药物的鉴别试验二、生物碱类药物的鉴别试验m奎宁和奎尼丁在酸性溶液中，与溴水（或氯水）及氨水发生绿奎宁反应m中国药典（2010年版）采用此法鉴别上述药物。（二）生物碱特征鉴别试验3.6位含氧喹啉衍生物的特征反应位含氧喹啉衍生物的特征反应绿奎宁（Thalleioquin）反应中国药典（2010年版）硫酸奎宁鉴别方程式 二、生物碱类药物的鉴别试验二、生物碱类药物的鉴别试验中国药典（中国药典（2010年版）硫酸奎宁鉴别年版

34、）硫酸奎宁鉴别m取本品约20mg，加水20ml溶解后，分取溶液5ml，加溴试液3滴与氨试液1ml，即显翠绿色 二、生物碱类药物的鉴别试验二、生物碱类药物的鉴别试验绿奎宁反应方程式（翠绿色）二、生物碱类药物的鉴别试验二、生物碱类药物的鉴别试验（二）生物碱特征鉴别试验4.吗啡生物碱的特征反应吗啡生物碱的特征反应（1）Marquis反应反应（2）Frohde反应反应（3）还原反应）还原反应二、生物碱类药物的鉴别试验二、生物碱类药物的鉴别试验m吗啡为含有酚羟基的异喹啉类生物碱，可与甲醛硫酸反应，产物为具有特征紫红色紫红色的醌式化合物。（1）Marquis反应反应方法：取本品约1mg，加甲醛硫酸试液1滴

35、，即显紫堇色 二、生物碱类药物的鉴别试验二、生物碱类药物的鉴别试验m吗啡与钼硫酸试液发生显色反应，呈紫色-蓝色-棕绿色的渐变。灵敏度为0.05g。（2）Frohde反应反应方法：取本品约1mg，加钼硫酸试液0.5ml，即显紫色，继变为蓝色，最后变为棕绿色。二、生物碱类药物的鉴别试验二、生物碱类药物的鉴别试验（3）还原反应）还原反应原理反应式方法二、生物碱类药物的鉴别试验二、生物碱类药物的鉴别试验原理原理m吗啡酚羟基邻位C2具有弱还原性，铁氰化钾试液可将其氧化生成伪吗啡，自身被还原为亚铁氰化钾，再与三氯化铁反应生成普鲁士蓝（亚铁氰化铁）二、生物碱类药物的鉴别试验二、生物碱类药物的鉴别试验反应式反

36、应式二、生物碱类药物的鉴别试验二、生物碱类药物的鉴别试验返返 回回方法方法m方法：取本品约1mg，加水1ml溶解后，加稀铁氰化钾试液1滴，即显蓝绿色（与可待因区别）二、生物碱类药物的鉴别试验二、生物碱类药物的鉴别试验m利血平吲哚环上的-氢原子较活泼，可与香草醛缩合显玫瑰红色，与对-二甲氨基苯甲醛缩合显绿色（二）生物碱特征鉴别试验5.吲哚生物碱的特征反应吲哚生物碱的特征反应官能团反应 二、生物碱类药物的鉴别试验二、生物碱类药物的鉴别试验m黄嘌呤生物碱与盐酸及氯酸钾加热后，咪唑环开环，遇氨气即缩合生成四甲基紫脲酸铵，显紫色（二）生物碱特征鉴别试验6.黄嘌呤类生物碱的特征反应黄嘌呤类生物碱的特征反应

37、紫脲酸铵反应方程式反应方法二、生物碱类药物的鉴别试验二、生物碱类药物的鉴别试验紫脲酸铵方程式紫脲酸铵方程式二、生物碱类药物的鉴别试验二、生物碱类药物的鉴别试验反应方法反应方法m方法：取本品约10mg，加盐酸1ml与氯酸钾0.1g，置水浴上蒸干，遗留浅红色的残渣，遇氨气即变为紫色；再加氢氧化钠试液数滴，紫色即消失 二、生物碱类药物的鉴别试验二、生物碱类药物的鉴别试验【相关链接】无机酸根鉴别试验【相关链接】无机酸根鉴别试验 药典附录药典附录III（一般鉴别实验）（一般鉴别实验）m如硝酸士的宁应显硝酸盐的鉴别反应m盐酸麻黄碱应显氯化物的鉴别反应m硫酸阿托品应显硫酸盐的鉴别反应m磷酸川芎嗪应显磷酸盐的

38、鉴别反应等 二、生物碱类药物的鉴别试验二、生物碱类药物的鉴别试验1.氯化物的鉴别反应 2.硫酸盐的鉴别反应 3.硝酸盐的鉴别反应 4.溴化物的鉴别反应 5.磷酸盐的鉴别反应 无机酸根鉴别试验 药典附录III（一般鉴别实验）二、生物碱类药物的鉴别试验二、生物碱类药物的鉴别试验m取供试品试液，加硝酸使成酸性后，加硝酸银试液，即生成白色凝乳状沉淀；分离，沉淀加氨试液即溶解，再加硝酸，沉淀复生成。如供试品为生物碱或其他有机碱的盐酸盐，须先加氨试液使成碱性，将析出的沉淀滤过除去，取滤液进行试验。m取供试品少量，置试管中，加等量的二氧化锰，混匀，加硫酸湿润，缓缓加热，即发生氯气，能使湿润的碘化钾淀粉试纸显

39、蓝色（三）无机酸根鉴别试验1.氯化物的鉴别反应氯化物的鉴别反应 二、生物碱类药物的鉴别试验二、生物碱类药物的鉴别试验m取供试品溶液，滴加氯化钡试液，即生成白色沉淀；分离，沉淀在盐酸或硝酸中均不溶解。m取供试品溶液，滴加醋酸铅试液，即生成白色沉淀；分离，沉淀在醋酸铵试液或氢氧化钠试液中溶解。取供试品溶液，加盐酸，不生成白色沉淀（与硫代硫酸盐区别）（三）无机酸根鉴别试验2.硫酸盐的鉴别反应硫酸盐的鉴别反应 二、生物碱类药物的鉴别试验二、生物碱类药物的鉴别试验m取供试品溶液，置试管中，加等量的硫酸，小心混合，冷后，沿管壁加硫酸亚铁试液，使成两液层，接界面显棕色。取供试品溶液，加硫酸与铜丝，加热，即发

40、生红棕色的蒸汽。取供试品溶液，滴加高锰酸钾试液，紫色不应褪去（与亚硝酸盐区别）（三）无机酸根鉴别试验3.硝酸盐的鉴别反应硝酸盐的鉴别反应 二、生物碱类药物的鉴别试验二、生物碱类药物的鉴别试验m取供试品溶液，加硝酸银试液，即生成淡黄色凝乳状沉淀；分离，沉淀能在氨试液中微溶，但在硝酸中几乎不溶。取供试品溶液，滴加氯试液，溴即游离，加三氯甲烷振摇，三氯甲烷层显黄色或红棕色（三）无机酸根鉴别试验4.溴化物的鉴别反应溴化物的鉴别反应 二、生物碱类药物的鉴别试验二、生物碱类药物的鉴别试验m取供试品的中性溶液，加硝酸银试液即生成浅黄色沉淀；分离，沉淀在氨试液或稀硝酸中均易溶解。取供试品溶液，加氯化铵镁试液，

41、即生成白色结晶性沉淀。取供试品溶液，加钼酸铵试液与硝酸后，加热即生成黄色沉淀；分离，沉淀能在氨试液中溶解。（三）无机酸根鉴别试验5.磷酸盐的鉴别反应磷酸盐的鉴别反应 二、生物碱类药物的鉴别试验二、生物碱类药物的鉴别试验双缩脲反应蓝紫色盐酸麻黄碱Vitali反应紫色硫酸阿托品硫酸奎宁翠绿色绿奎宁反应盐酸吗啡Marquis反应紫红色硝酸士的宁硫酸，重铬酸钾紫色二、生物碱类药物的鉴别试验二、生物碱类药物的鉴别试验 1.利用旋光性差异利用旋光性差异m检查硫酸阿托品中的莨菪碱莨菪碱m莨菪碱为左旋体，而阿托品无旋光性，要求硫酸阿托品供试品溶液（50mg/ml）的旋光度不得超过0.40 三、生物碱类药物的特

42、殊杂质检查m检查硫酸阿托品中的其其它它生生物物碱碱（东东莨莨菪菪碱碱、山山莨莨菪菪碱和樟柳碱等）碱和樟柳碱等）m碱性较阿托品弱，盐酸盐可为氨试液置换为游离生物碱，不溶于水，盐酸阿托品不游离，仍溶解于水。m取供试品溶液，加氨试液2ml，振摇，不得立即发生浑浊。2.利用溶解性差异利用溶解性差异三、生物碱类药物的特殊杂质检查 3.利用光学性质差异利用光学性质差异m检查利血平中的氧化产物氧化产物。m利血平氧化变质，产物具有荧光。m将供试品置紫外光灯（365nm）下检视,不得显明显的荧光。三、生物碱类药物的特殊杂质检查（二）利用杂质和药物化学性质区别进行检（二）利用杂质和药物化学性质区别进行检查查1.1

43、.中国药典（中国药典（20102010年版）盐酸吗啡中特殊杂质检查年版）盐酸吗啡中特殊杂质检查2.中国药典（中国药典（2010年版）硝酸士的宁中马钱子碱的检查年版）硝酸士的宁中马钱子碱的检查三、生物碱类药物的特殊杂质检查1.中国药典（中国药典（2005年版）盐酸吗啡中特殊杂质检查年版）盐酸吗啡中特殊杂质检查阿扑吗啡罂粟酸三、生物碱类药物的特殊杂质检查阿扑吗啡阿扑吗啡m利用阿扑吗啡具有还原性，产物在水溶液中为绿色，乙醚中为宝石红色，而药物没有此性质m检查时，规定乙醚层不得显红色，水层不得显绿色，以此控制阿朴吗啡限量；三、生物碱类药物的特殊杂质检查罂粟酸罂粟酸m利用罂粟酸可与三氯化铁在微酸性条件下

44、生成红色的罂粟酸铁，吗啡没有此现象m要求在加入2滴三氯化铁试液后，溶液不得显红色。三、生物碱类药物的特殊杂质检查（三）利用杂质和药物色谱学行为差异进（三）利用杂质和药物色谱学行为差异进行检查行检查1.薄层色谱法 2.高效液相色谱法3.【实例分析】三、生物碱类药物的特殊杂质检查1.薄层色谱法检查薄层色谱法检查“特殊杂质特殊杂质”中国药典（2010年版）对药物中“其他生物碱”的检查 m杂质对照品法，如氢溴酸山莨菪碱中其它生物碱的检查。m供试品溶液的自身稀释对照法，如硫酸奎宁中其它金鸡钠碱的检查。m杂质对照品法与供试品溶液自身稀释对照法并用，如盐酸吗啡中其它生物碱的检查。三、生物碱类药物的特殊杂质检

45、查m高效液相色谱法具有分离效能高、专属性强、检测灵敏等特点，其在杂质检查上的应用，在近版药典中有逐渐增加的趋势，m如中国药典（2010年版）对长春新碱中其他生物碱、磷酸川芎嗪中有关物质的检查。2.高效液相色谱法检查特殊杂质高效液相色谱法检查特殊杂质 三、生物碱类药物的特殊杂质检查3.3.【实例分析】【实例分析】生物碱中特殊杂质色谱法检查生物碱中特殊杂质色谱法检查薄层色谱检查薄层色谱检查 高效液相色谱法检查高效液相色谱法检查 硫酸奎宁其它金鸡纳碱硫酸奎宁其它金鸡纳碱 盐酸吗啡其它生物碱盐酸吗啡其它生物碱 薄层色谱法讨论 硫酸长春新碱中有关物质的检查硫酸长春新碱中有关物质的检查 磷酸川芎嗪中有关物

46、质检查磷酸川芎嗪中有关物质检查 三、生物碱类药物的特殊杂质检查附表附表-药典中常见生物碱特殊杂质及检查方法药典中常见生物碱特殊杂质及检查方法m硫酸阿托品m氢溴酸东莨菪碱m盐酸伪麻黄碱m硫酸奎宁m硫酸奎尼丁表1表2表3盐酸吗啡硫酸吗啡磷酸可待因盐酸小檗碱硝酸士的宁利血平硫酸长春新碱硫酸长春碱咖啡因茶碱氨茶碱硝酸毛果芸香碱磷酸川芎嗪三、生物碱类药物的特殊杂质检查药典中常见生物碱特殊杂质及检查方法药典中常见生物碱特殊杂质及检查方法 表表1三、生物碱类药物的特殊杂质检查药典中常见生物碱特殊杂质及检查方法药典中常见生物碱特殊杂质及检查方法 表表2三、生物碱类药物的特殊杂质检查药典中常见生物碱特殊杂质及检

47、查方法药典中常见生物碱特殊杂质及检查方法 表表3三、生物碱类药物的特殊杂质检查 （一）非水滴定法（二）提取酸碱滴定法中国药典(2010年版)常用生物碱药物含量测定方法一览表（三）酸性染料比色法（四）紫外分光光度法（五）高效液相色谱法四、生物碱类药物的含量测定（一）非水滴定法（一）非水滴定法1.高氯酸法基本原理2.一般方法3.滴定注意事项【实例分析】【相关链接】四、生物碱类药物的含量测定1.高氯酸滴定法基本原理高氯酸滴定法基本原理 m高氯酸置换出与生物碱结合的较弱的酸的反应。BH+A-：表示生物碱盐类；HA：表示被置换出的弱酸；四、生物碱类药物的含量测定不同HA在醋酸中的酸性情况如示：HClO4

48、 HBr H2SO4 HCl HSO4 HNO3 H3PO4及其它弱酸 四、生物碱类药物的含量测定2.一般方法一般方法m除另有规定外，精密称取供试品适量消耗高氯酸滴定液（0.1mol/L）约8ml，加冰醋酸1030ml使溶解，加各品种 项 下 规 定 的 指 示 液 1 2滴，用 高 氯 酸 滴 定 液（0.1mol/L）滴定。终点颜色应以电位滴定时的突跃点为准，并将滴定结果用空白试验校正。四、生物碱类药物的含量测定3.滴定注意事项（1）方法的适用对象（2）不同酸根的影响 硝酸盐 磷酸盐及有机酸盐 氢卤酸盐 硫酸盐（3）滴定终点的指示方法（4）滴定剂的注意事项 四、生物碱类药物的含量测定（1

49、1）方法的适用对象）方法的适用对象 m适于Kb10-8的有机碱、有机酸的碱金属盐的含量测定。mKb为10-810-10，宜选冰醋酸冰醋酸作溶剂；mKb为10-1010-12时，选用冰醋酸与醋酐冰醋酸与醋酐的混合溶剂；mKb10-12，选择醋酐醋酐作溶剂。m如咖啡因（Kb10-14.15）的含量测定选择醋酸和醋酐的混合溶剂。四、生物碱类药物的含量测定（2）不同酸根的影响）不同酸根的影响磷酸盐及有机酸盐 m在冰醋酸中酸性极弱，不干扰高氯酸滴定，故可直接滴定可直接滴定 四、生物碱类药物的含量测定（2）不同酸根的影响）不同酸根的影响氢卤酸盐 m在醋酸中酸性较强，反应不能完全m药典规定生物碱的氢卤酸盐不

50、可直接滴定不可直接滴定m需加入5醋酸汞冰醋酸试液35ml后，使其生成在醋酸溶剂中难解离的卤化汞，再进行滴定，此时可反应完全 mHg(Ac)2 2BH+X-HgX2 +2BHX 四、生物碱类药物的含量测定（2）不同酸根的影响）不同酸根的影响硝酸盐 m可直接滴定可直接滴定m硝酸有较强的氧化性，可氧化指示剂结晶紫m硝酸盐不宜用结晶紫作指示剂，改用电位法电位法指示终点。m电位滴定时用玻璃电极作为指示电极，饱和甘汞电极（玻璃套管内装氯化钾的饱和无水甲醇溶液）为参比电极 四、生物碱类药物的含量测定（2）不同酸根的影响）不同酸根的影响硫酸盐 m硫酸在醋酸中酸性较弱，是一元酸m只能被置换为HSO4，仅滴定至硫