实验一 细菌形态与结构观察.ppt

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1、实验室规则 1.1.微生物无处不在：微生物无处不在：故要树立有菌观念，实验过故要树立有菌观念，实验过程要无菌操作程要无菌操作 2.2.实验材料为病原微生物，具有感染性实验材料为病原微生物，具有感染性 1 1）穿好白大衣，除必要的书籍及文具外，其）穿好白大衣，除必要的书籍及文具外，其他个人用品不得带入实验室；白大衣不能穿或带他个人用品不得带入实验室；白大衣不能穿或带进食堂！进食堂！2 2）实验室禁止饮食，未经许可严禁将实验材）实验室禁止饮食，未经许可严禁将实验材料带出实验室料带出实验室2013/3/713.按照实验要求，认真积极的完成实验，有些实验按照实验要求，认真积极的完成实验，有些实验需第二

2、天观察结果，要求同学们亲自观察，并详需第二天观察结果，要求同学们亲自观察，并详细记录结果，完成实验报告细记录结果，完成实验报告4.爱护实验器材，实验用过的器材放置指定位置，爱护实验器材，实验用过的器材放置指定位置，实验室仪器不得乱摸乱碰；实验示教玻片标本损实验室仪器不得乱摸乱碰；实验示教玻片标本损坏需赔偿坏需赔偿5.实验完毕后，整理实验台，值日生负责室内卫生，实验完毕后，整理实验台，值日生负责室内卫生，并负责关门、关窗、关水、关电并负责关门、关窗、关水、关电2013/3/72实验一 细菌的形态与结构观察一、细菌的形态和特殊结构观察一、细菌的形态和特殊结构观察(示教片、示教片、观察、绘图观察、绘

3、图)二、革兰染色法（独立操作）二、革兰染色法（独立操作）三、显微镜的使用操作及注意事项三、显微镜的使用操作及注意事项要求：独立观察或操作并完成实验报告要求：独立观察或操作并完成实验报告 2013/3/73（一）（一）细菌的基本形态（示教）细菌的基本形态（示教）2.2.杆菌杆菌霍乱弧菌霍乱弧菌1.1.球菌球菌葡萄球菌葡萄球菌大肠杆菌大肠杆菌3.3.螺形菌螺形菌一、细菌的形态和特殊结构观察一、细菌的形态和特殊结构观察边台示教边台示教观察绘图观察绘图勿动显微镜勿动显微镜2013/3/74（二）细菌的特殊结构（示教）（二）细菌的特殊结构（示教）1.1.荚膜荚膜肺炎链球菌肺炎链球菌2.2.芽孢芽孢破伤风

4、梭菌破伤风梭菌3.3.鞭毛鞭毛伤寒沙门菌伤寒沙门菌一、细菌的形态和特殊结构观察一、细菌的形态和特殊结构观察2013/3/75【材料材料】1.葡萄球菌、大肠肝菌培养物葡萄球菌、大肠肝菌培养物2.革兰染色液：结晶紫、卢戈氏碘液、革兰染色液：结晶紫、卢戈氏碘液、95乙醇、石炭酸复红。乙醇、石炭酸复红。3.生理盐水、二甲苯、载玻片、试管夹、生理盐水、二甲苯、载玻片、试管夹、接种环、酒精灯、火柴、消毒缸、显微接种环、酒精灯、火柴、消毒缸、显微镜、香柏油镜、香柏油(镜油镜油)、拭镜纸等。、拭镜纸等。二、革兰染色法二、革兰染色法（操作）（操作）2013/3/76涂片涂片载玻片中央加半滴生理盐水载玻片中央加半

5、滴生理盐水 分别将二种细菌涂布于盐水中分别将二种细菌涂布于盐水中干燥（用试管夹夹住玻片干燥（用试管夹夹住玻片）自然干燥或于火焰高处烘干自然干燥或于火焰高处烘干固定固定将标本以钟表摆动的速度通过火焰三次将标本以钟表摆动的速度通过火焰三次2013/3/7【步骤步骤】7染色：染色：初染：结晶紫，初染：结晶紫，1分钟，水洗分钟，水洗媒染：碘液，媒染：碘液，1分钟，水洗分钟，水洗脱色：脱色：95%酒精，酒精，0.51分钟，水洗分钟，水洗复染：石炭酸复红，复染：石炭酸复红，11.5分钟，水洗分钟，水洗显微镜观察（油镜）显微镜观察（油镜）2013/3/7【步骤步骤】8三、显微镜的使用操作及注意事项三、显微镜

6、的使用操作及注意事项打开光源放置好显微镜标本片放在载物台上调节粗调螺旋、上升载物台低倍镜（10）观察、找好视野（看见颜色）2013/3/79三、显微镜的使用操作及注意事项三、显微镜的使用操作及注意事项载玻片上滴一滴香柏油调节粗调螺旋、下降载物台将油镜（100,oil）移至正中调节粗调螺旋、使油镜头浸没在油中调节细调螺旋、油镜观察眼睛在侧方眼睛在侧方注视物镜注视物镜防止载玻片防止载玻片碎裂碎裂2013/3/7101 1.玻片放入消毒缸玻片放入消毒缸2.2.擦拭镜头：限取擦拭镜头：限取1 1张擦镜纸张擦镜纸 把油镜转离光轴把油镜转离光轴 用二甲苯滴湿的擦镜纸擦用二甲苯滴湿的擦镜纸擦1 1次次3.3.显微镜载物台下降到最低显微镜载物台下降到最低 ，镜头呈八，镜头呈八字形、罩上防尘罩、放回原处字形、罩上防尘罩、放回原处 观察后注意观察后注意顺镜头直顺镜头直径方向擦，径方向擦，不要旋转不要旋转和来回擦和来回擦2013/3/711葡萄球菌（葡萄球菌（紫色）紫色）革兰阳性菌（革兰阳性菌（G+）大肠杆菌（大肠杆菌（红色红色）革兰阴性菌（革兰阴性菌（G-）2013/3/7【结果结果】12