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1、主讲人:主讲人:中中 华华 医医 学学 检检 验验 全全 书书 主主 编编 北华大学临床微生物学北华大学临床微生物学 教教 授授 李影林李影林 2010年年10月月一、掌握掌握幽门螺杆菌的生物学性状、致病性。二、熟悉二、熟悉幽门螺杆菌的微生物学检查法。三、了解三、了解幽门螺杆菌的防治原则 幽门幽门螺杆菌螺杆菌螺杆菌属约有螺杆菌属约有17种。其中引起人类疾病的有种。其中引起人类疾病的有3个种,即幽门螺杆个种,即幽门螺杆菌菌(H.pylori)、H.fennelliae和和H.cinaedi。代表菌为幽门螺杆代表菌为幽门螺杆菌菌(H.pylori)。一、生物学性状一、生物学性状(一)形态与染色(一
2、)形态与染色1G-菌体细长,弯曲呈菌体细长,弯曲呈 螺形、螺形、S形或海鸥形陈旧形或海鸥形陈旧 培养物可呈球形。培养物可呈球形。2菌体一端或两端可有菌体一端或两端可有 多根带鞘的鞭毛。多根带鞘的鞭毛。运动活运动活 泼泼。(二)培养特点(二)培养特点1微需氧,在在需氧或厌氧条件下均不长。微需氧,在在需氧或厌氧条件下均不长。2 2最适生长温度最适生长温度3737,2525不长,不长,4242少数生长。此为少数生长。此为和弯曲菌属区别点之一。和弯曲菌属区别点之一。3 3对湿度要求高,相对湿度对湿度要求高,相对湿度98%98%以上为宜。以上为宜。4 4营养要求较高。普通培养基不生长,须加入血液或血营养
3、要求较高。普通培养基不生长,须加入血液或血清才能生长。清才能生长。5生长缓慢。分离培养生长缓慢。分离培养72h,传代传代48h才可见到菌落。才可见到菌落。6显现两种形态菌落:显现两种形态菌落:(1)圆形、)圆形、0.51.0mm,无色半透明弧立的小菌落。无色半透明弧立的小菌落。在血平板上有轻度溶血。在血平板上有轻度溶血。(2)扁平、无色、半透明,沿接种线扩散生长,融合成)扁平、无色、半透明,沿接种线扩散生长,融合成片。片。幽门螺杆菌在血平板上菌落 (三)生化反应(三)生化反应 不活泼与弯曲菌属相似。但其突出特点不活泼与弯曲菌属相似。但其突出特点为脲酶迅速强阳性(鉴定的要点和快速为脲酶迅速强阳性
4、(鉴定的要点和快速诊断的依据)。硝酸盐还原阴性。诊断的依据)。硝酸盐还原阴性。二、致病性和免疫性二、致病性和免疫性(一)(一)HPHP与疾病的关系与疾病的关系1现现已已证证实实,HP是是非非自自身身免免疫疫性性慢慢性性浅浅表性胃炎或萎缩性胃炎的致病菌。表性胃炎或萎缩性胃炎的致病菌。2 2有有活活动动性性炎炎症症的的十十二二指指肠肠粘粘膜膜HPHP阳阳性性率率可可达达100%100%,表表明明HPHP感感染染与与十十二二指指肠肠炎炎密密切相关。切相关。3 3胃胃癌癌发发病病率率在在一一些些HPHP感感染染率率高高的的人人群群中中较高。较高。(二)传染源与传播方式(二)传染源与传播方式1传染源传染
5、源(1)人类是)人类是HP的主要传染源的主要传染源(2)动物源性传染学说)动物源性传染学说 2传播途径传播途径 推测经口感染。推测经口感染。(三)发病机制(三)发病机制尚不明了。很可能与下列因素有关。尚不明了。很可能与下列因素有关。1HP具具有有特特殊殊的的螺螺旋旋状状菌菌形形和和端端鞭鞭毛毛推推进进式式的的运运动动方方式式有有助助于于HP穿穿过过胃胃粘粘膜膜表表面面的的粘粘液液层层,与与胃胃粘粘膜膜上上皮细胞接触。皮细胞接触。2HP具有高活性胞外酶具有高活性胞外酶脲酶分解尿素,产生氨。脲酶分解尿素,产生氨。(1)中和胃酸,有助于细菌定植。)中和胃酸,有助于细菌定植。(2)氨氨的的产产生生使使
6、粘粘液液层层离离子子发发生生变变化化,最最后后导导致致粘粘膜膜中的氢离子反向扩散。中的氢离子反向扩散。3HP产产生生细细胞胞毒毒素素相相关关蛋蛋白白(CagA)和和空空泡泡毒毒素素(VaeA)。)。4HP细细胞胞壁壁中中的的LPS为为内内毒毒素素成成分分,但但其其毒毒性性作作用用明显低于肠道菌的明显低于肠道菌的LPS。(四四)免疫性免疫性 幽门螺杆菌刺激机体产生幽门螺杆菌刺激机体产生IgM、IgG、IgA型抗体型抗体,但是否对机体有保护作用尚不清但是否对机体有保护作用尚不清楚。楚。三、微生物学检查法三、微生物学检查法(一)标本的采集(一)标本的采集经经胃胃镜镜用用活活检检钳钳在在近近幽幽门门、
7、胃胃窦窦部部或或病病变变邻邻近近处处等等多多部部位位取取材材。每每处处两两块块,一一份份送送病病理理检检查查,一份作细菌学及快速诊断检查。一份作细菌学及快速诊断检查。要求:要求:(1)受检者术前一周停服铋剂及抗生素;)受检者术前一周停服铋剂及抗生素;(2)尽尽量量不不作作咽咽喉喉麻麻醉醉,活活检检钳钳清清毒毒后后用用清清水冲洗干净。水冲洗干净。(3)立立即即床床边边接接种种或或置置200g/L葡葡萄萄糖糖运运送送液液内内4冰箱保存不得超过冰箱保存不得超过5h。(二二)标本的直接检查标本的直接检查 (三三)快速脲酶试验快速脲酶试验活活组组织织快快 Chris+ensen尿尿素素培培养养基基的的瓶瓶内内,如培养基由黄变为红色为阳性如培养基由黄变为红色为阳性.。(四四)核酸检测核酸检测从从克克隆隆的的幽幽门门螺螺杆杆菌菌(HP)染染色色体体DNA的的特特异异性性片片段段中中构构建建引引物物;从从HP脲脲酶酶A基基因因序序列列中中构构建建引引物物。用用PCR扩扩增增结结合合限限制制性性内内切切酶酶多多态态性分析技术鉴别性分析技术鉴别HP。(五五)分离培养分离培养活体组织活体组织 磨碎 接种于鉴别培养基 进行鉴定放入放入27d四、防治原则四、防治原则 目前目前,尚无有效的预防措施尚无有效的预防措施,疫苗正疫苗正在研制中。在研制中。治疗治疗:抗菌疗法。抗菌疗法。
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