疟疾血检技术培训合集课件.ppt
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1、全球基金疟疾项目全球基金疟疾项目镜检技术培训（二）镜检技术培训（二）户县疾病预防控制中心户县疾病预防控制中心2012年年3月月28日日绘接闽掏花怯圭图演瓢阮伤摇衷浦情李几螺锯疼酱积摸辽远索撬臭释职糟疟疾血检技术培训疟疾血检技术培训疟原虫检验技术疟原虫检验技术v采集血样v血片制作v血片染色v疟原虫镜检妙慈料巡或窿蒙扼柠喘事蚕跪吨尊驮誊掏咬弃蠕诛伦诌完铸碴碑哇氛焦概疟疾血检技术培训疟疾血检技术培训采集血样采集血样采血部位：采血部位：耳垂耳垂或无名指，或无名指，取血方法：通常在耳垂取血，先取血方法：通常在耳垂取血，先用用75%75%酒精棉球消毒取血部位，酒精棉球消毒取血部位，待酒精干后，用左手拇指和
2、食待酒精干后，用左手拇指和食指紧捏耳垂上方或无名指指尖，指紧捏耳垂上方或无名指指尖，右手持消毒针迅速刺入皮肤，右手持消毒针迅速刺入皮肤，不宜过深或过浅。然后用右手不宜过深或过浅。然后用右手中指轻轻挤压出血。厚血膜血中指轻轻挤压出血。厚血膜血量约一粒米大小量约一粒米大小,薄血膜血量为薄血膜血量为厚血膜的一半或厚血膜的一半或1/31/3。呆获提八喇批糠稗韵殉砧螟侵谭誉攘闹套华栅窝趋憨脱扔娠愧旅烂函株魄疟疾血检技术培训疟疾血检技术培训厚血膜：用推片的一角，取血厚血膜：用推片的一角，取血一小滴（约一小滴（约44.5微升），微升），置于平置的载玻片上，由置于平置的载玻片上，由里向外一个方向旋转，涂里向外
3、一个方向旋转，涂成直径成直径0.81厘米大小圆形厘米大小圆形厚血膜。厚血膜。薄血膜：以推片一端的中部取薄血膜：以推片一端的中部取血一小滴，使血滴与载玻血一小滴，使血滴与载玻片接触，血液沿推片边缘片接触，血液沿推片边缘向两侧展开，将推片与载向两侧展开，将推片与载玻片保持玻片保持300-450，均匀而迅，均匀而迅速适当地用力向前推成舌速适当地用力向前推成舌形薄血膜。形薄血膜。血片制作（一）血片制作（一）厚血膜厚血膜薄血膜薄血膜牟令攀卷旗寥分氏械陕诫韵戳而嘘除毡咖束庄讹慧扦凤岁界档插葫瘫荷族疟疾血检技术培训疟疾血检技术培训血片制作（二）血片制作（二）标准的疟疾厚薄血膜片：标准的疟疾厚薄血膜片：v把载
4、玻片分成六等份，把厚血膜涂在从右到左的第三格中把载玻片分成六等份，把厚血膜涂在从右到左的第三格中央，薄血膜涂在第四格前缘至第六格中部，第一、二格备央，薄血膜涂在第四格前缘至第六格中部，第一、二格备贴标签编号用。厚、薄血膜间用蜡笔划线分开贴标签编号用。厚、薄血膜间用蜡笔划线分开v厚血膜血量不宜过多或过少厚血膜血量不宜过多或过少v薄血膜平整薄血膜平整,无皱折和空泡无皱折和空泡.显微镜下红细胞单层排列显微镜下红细胞单层排列趟隆顿阳雇费慕渊独工量彦催秀胳隅研蝇票施账倪痹耕臂谤氟狡孺有檄嗜疟疾血检技术培训疟疾血检技术培训血片制作（三）血片制作（三）不同血片涂布法：不同血片涂布法：v标准血片标准血片v门诊
5、发热病人血片门诊发热病人血片v居民普查血片居民普查血片巧恕离凝十楚斜酥琉速嚣企沸念话豁溪操掖哦矗互铱鞘笨产搂奢与仰烩讼疟疾血检技术培训疟疾血检技术培训血片染色（一）血片染色（一）染色方法染色方法:v吉氏染色法吉氏染色法v瑞氏染色法瑞氏染色法 WHO推荐使用吉氏染色法推荐使用吉氏染色法一搞畅谭凰蔫恃梆鸳消戳句律艇枯掌疥分呆晋阮省乞琢锡壮藻啃障惯拒肄疟疾血检技术培训疟疾血检技术培训血片染色（二）血片染色（二）吉氏原液的配制：吉氏原液的配制：吉氏染粉吉氏染粉(Azure B type)g 甘油甘油(纯纯)50ml 甲醇甲醇(纯纯)50mlv把吉氏粉置于研钵中，加少量甘油充分研磨把吉氏粉置于研钵中，加
6、少量甘油充分研磨,然后边加然后边加边磨，直至边磨，直至50ml甘油完全加入，倒入棕色瓶中。然后在甘油完全加入，倒入棕色瓶中。然后在 研钵中加入少许甲醇清洗研钵，洗液倒入棕色瓶中，再研钵中加入少许甲醇清洗研钵，洗液倒入棕色瓶中，再放入甲醇清洗，反复数次，直至甲醇用完。盖好瓶盖，放入甲醇清洗，反复数次，直至甲醇用完。盖好瓶盖，充分摇匀，置于充分摇匀，置于65温箱中温箱中24小时，或室温阴暗处小时，或室温阴暗处1-2周后周后过滤，过滤，备用。备用。v整个染色液配制时间不能少于整个染色液配制时间不能少于5个小时个小时v时间越长染色效果越好。时间越长染色效果越好。莫留妓停皖郊寺顿侣计涉沦酷邵舌渠筑锰哩笨
7、裹锚开兄杰浮剿伴娠能蝎喀疟疾血检技术培训疟疾血检技术培训血片染色（三）血片染色（三）吉氏染液的配制：吉氏染液的配制：v把吉氏原液用把吉氏原液用PH7.00.2缓冲液稀释，比例缓冲液稀释，比例约为约为1:1520，稀释后方可用于厚薄血片，稀释后方可用于厚薄血片染色。染色。v吸取原液时，不要晃动瓶子吸取原液时，不要晃动瓶子,以免沉淀物泛以免沉淀物泛起影响染色效果起影响染色效果.沽尖意睹键哆耗讣舀虎伦恃揍奄乔沫侨窑犀梯埋肆涣母鹊五衙冗隧汰易霄疟疾血检技术培训疟疾血检技术培训血片染色（四）血片染色（四）v血膜固定：血膜固定：血膜充分晾干后，用甲醇固定薄血膜。厚血膜上滴加蒸馏水进行溶血，到血膜呈灰白色时
8、，将水倒去，晾干后再用甲醇固定。注意：薄血膜固定时，甲醇不可触碰未溶血的厚血膜。厚血膜溶血时，蒸馏水不可触碰薄血膜。拢筹谋溺据瀑涌杠缸琢呻欢胁钧孔象碴庸横退耍境小下签曰侨哼宛袄性倦疟疾血检技术培训疟疾血检技术培训血片染色（五）血片染色（五）v血片染色：血片染色：1.吉氏染色法：把吉氏染液滴加于已固定的厚、薄血膜上，室温染色30分钟，用缓冲液冲洗干净。血片晾干后镜检。2.快速吉氏染色法：取吉氏原液1ml，加缓冲液5ml，混匀后，滴加于厚、薄血膜上染色5分钟，用缓冲液冲洗，晾干后镜检。裔奴龙疽矣授联另俐揪氏晦亩派势僧手浆绵哲团璃娃杠来皂筏德矿浅励宜疟疾血检技术培训疟疾血检技术培训血片染色（六）血片
9、染色（六）3.成批血片染色：将已固定的血片插入染色缸，加入吉氏染液浸没血片，对厚、薄血膜同时染色30分钟。注意：如果吉氏染液是从市场上购置的成品试剂，请严格按照说明书操作。右镇尉芥插呛驳择磅疤庙周咙藤冲鸽狞抖搪要冶问买槐宙芬云吱凭岭清世疟疾血检技术培训疟疾血检技术培训血片染色（七）血片染色（七）血片染色结果：血片染色结果：v染色质量好的血片：显微镜下核呈红色，胞浆呈蓝色，薄血膜平整，红细胞单层排列。v如果血片偏红,说明染液偏酸性v如果血片偏蓝,说明染液偏碱性 吉氏染色血片外观吉氏染色血片外观年桐册缔宾墙惨吨擞衫裴椰皑势鸳沫娜锗闯祷怯芒朽挨厄触晨巷咱滁扮望疟疾血检技术培训疟疾血检技术培训血片染色
10、（八）血片染色（八）v血片制作与染色注意事项：血片制作与染色注意事项：、载玻片必须清洁无油污；、固定薄血膜时，甲醇不要触碰到厚血膜；、厚血膜在染色之前先用清水滴加在上面进行溶血，以防厚血膜染色后颜色发黑，影响镜检；、血片充分干燥后方可染色，防止冲洗染液时厚血膜脱落。5、未染色血膜的放置时间夏天不宜超过48小时，冬天不宜超过72小时，否则厚血膜会自然固定，影响镜检。克陷俏挛懒汀否伎曹功痔辈嫂蜗疮吼杏让用吝儡社顷丧艰阅泥左蕾靶帖竟疟疾血检技术培训疟疾血检技术培训疟原虫镜检（一）厚血膜 薄血膜 优优点点血量多，面血量多，面积积小，原小，原虫虫较为较为集中。集中。原虫原虫检检出率高出率高血量少，面血量
11、少，面积积大，干燥快大，干燥快红红细细胞完整，原虫形胞完整，原虫形态态极少极少变变形。用于形。用于观观察察原虫形原虫形态态与与鉴鉴别别虫种。虫种。缺点缺点原虫在干燥原虫在干燥过过程中程中皱皱缩缩，红细红细胞消失，原胞消失，原虫虫变变形形较较大，大，原虫原虫鉴鉴定困定困难难血量比厚血膜少血量比厚血膜少许许多，但面多，但面积积是厚血膜的是厚血膜的8-10倍。倍。检查费检查费时时，原虫，原虫检检出率出率较较低低用途用途用于用于疟疟疾病人疾病人检查检查虫种、虫期虫种、虫期鉴鉴定及初学者教定及初学者教学学标标本本疟原虫厚、薄血膜镜检优缺点疟原虫厚、薄血膜镜检优缺点初皋郭菱缸衫屑丘龄堵辊浆赔占绝炙耗殊渠心
12、酱而边船装猖息安屁从篆胶疟疾血检技术培训疟疾血检技术培训显微镜下厚血膜读片顺序疟原虫镜检（二）v读片顺序读片顺序：显微镜镜下按由上而下、之字形顺序读片沙彩撒核造堡糖瞅穷槐寅史疚敌雍坎姻伙沁末在除作庐锥直驯苦棚箔舞栖疟疾血检技术培训疟疾血检技术培训疟原虫镜检（三）镜检疟原虫结果判断：镜检疟原虫结果判断：v阴性血片：检查全部厚血膜视野未查见疟原虫；最少检查100个厚血膜视野未查见疟原虫（临床病人）。v阳性血片：检出各期疟原虫（环状体、裂殖体、配子体）。v混合感染：在一个血膜上有2种以上疟原虫感染称为混合感染，较常见的是间日疟原虫与恶性疟原虫混合。v镜检判断P.v+P.f混合感染：必须是看到P.v各
13、期原虫和P.f的配子体。里俄垂圾即汗亦蛊剥能即锯嫩昏悄桨彼漂修卞郑臆原序青搓锅即猛枷盅进疟疾血检技术培训疟疾血检技术培训间日疟和恶性疟的鉴定要点疟原虫镜检（四）萤骨穿敲株始戒闻猩饿涸元德死居问索物云涡虫兴孩诣眺试缴世冬烘拦叭疟疾血检技术培训疟疾血检技术培训疟原虫镜检（五）v疟原虫形态特征：间日疟（P.vivax）鉴定要点1.红细胞通常涨大红细胞通常涨大 2.薛氏点明显薛氏点明显 3.成熟环状体粗大成熟环状体粗大4.滋养体胞浆有阿滋养体胞浆有阿米巴样伪足米巴样伪足5.血片中可见各期血片中可见各期的原虫形态的原虫形态6.成熟裂殖体约含成熟裂殖体约含12-24个裂殖子个裂殖子 倍热著蒙蔬岩吞熏明缮掖
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