微生物的培养技术及应用课件.pptx

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1、尿素CO(NH2)21.2 微生物的培养技术及应用（二）微生物的选择培养及应用一.选择培养基1973年，科学家从美国黄石国家公园的热泉中筛选出水生栖热菌，进而从这种菌中提取出耐高温的DNA聚合酶。为什么这种菌能从热泉中被筛选出来？因为它能在70-80的高温条件下生存，而绝大多数微生物在此条件下不能生存。一.选择培养基1实验室中微生物筛选的原理人为提供有利于目的菌生长的条件(包括等)，同时抑制或阻止其他微生物的生长。2选择培养基在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基，称为选择培养基。思考讨论 P16尿素CO(NH2)2尿素的利用尿素是一种重要的农业氮肥

2、，尿素不能直接被农作物吸收，土壤中的细菌将尿素分解成氨之后才能被植物利用。细菌利用尿素的原因土壤中的细菌分解尿素是因为他们能合成脲酶。思考讨论 P16尿素CO(NH2)21.如果让你配制一种培养基，将土壤稀释液中能分解尿素的细菌分离出来，培养基的配方该如何设计？【答案】设计一种选择培养基,用尿素作为唯一氮源,可以将分解尿素的细菌分离出来。2.该培养基与普通培养基有哪些共同点和不同点？【答案】这种培养基与普通培养基相比，只是用尿素作为唯一氮源，培养基的其他营养成分基本相同。选择培养基与鉴别培养基的比较项目选择培养基鉴别培养基原理用途举例图示选择培养基与鉴别培养基的比较项目选择培养基鉴别培养基原理

3、加入不影响甚至促进目标微生物生长，而抑制或阻止其他种类微生物生长的化学物质加入某种指示剂或化学药品(不影响微生物正常生长)，使微生物的某种代谢产物与培养基中的特定指示剂或化学药品发生反应用途培养、分离出目标微生物鉴别目标微生物举例培养酵母菌和霉菌时，可在培养基中加入青霉素，抑制细菌的生长；利用以尿素为唯一氮源的培养基来培养可分解尿素的细菌可用伊红美蓝培养基鉴定饮用水或乳制品中是否含有大肠杆菌(若有，则菌落呈黑色)图示二.微生物的选择培养1g土壤中有多少能分解尿素的细菌?原理：通过对土样进行充分稀释，再将菌液涂布到制备好的培养基上，即可得到能分解尿素的细菌的纯培养物。二.微生物的选择培养1.操作

4、过程稀释涂布平板法二.微生物的选择培养1.操作过程稀释涂布平板法常用微生物分离方法比较比较比较平板划线法平板划线法稀释涂布平板法稀释涂布平板法工具工具原理原理特点特点结果结果共同点共同点常用微生物分离方法比较比较比较平板划线法平板划线法稀释涂布平板法稀释涂布平板法工具工具接种环涂布器原理原理在数次划线后培养，可以分离到由一个细菌细胞繁殖而来的肉眼可见的细胞群体，即菌落在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的微生物将被分散成单个细菌细胞，从而能在培养基表面形成单个的菌落特点特点方法简单，但不适宜计数单菌落更易分开，可以计数，但操作复杂结果结果共同点共同点使培养基上形成由单个细菌细胞繁殖而来的子细胞群

5、体菌落二.微生物的选择培养2菌种培养待涂布的菌液被培养基吸收后，将平板倒置，放入3037 的恒温培养箱中培养12 d。培养时要将一个未接种的培养基和一个已接种的培养基放在一起培养，为什么？未接种的培养基表面是否有菌落生长很关键，如果无菌落生长，说明了什么？培养未接种的培养基的作用是对照。未接种的培养基在恒温箱中保温一段时间后，如果无菌落生长，说明培养基制备成功、合格，未受到污染。二.微生物的选择培养3菌种观察在涂布有合适浓度菌液的平板上就可以观察到分离的单菌落。三.微生物的数量测定1测定依据(1)当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个单菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。(2)通过统计平

6、板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。三.微生物的数量测定2操作过程(1)选用一定稀释范围的样品液进行培养，以保证获得菌落数为30300、适于计数的平板。(2)在同一稀释度下，应至少对3个平板进行重复计数，然后求出平均值。三.微生物的数量测定下图为“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数”实验中样品稀释示意图。据图分析，每克土壤中的菌株数约为多少？【提示】每克土壤中的菌株数约为1.7109个。三.微生物的数量测定3计数方法(1)稀释涂布平板法：统计结果一般用菌落数而不是用活菌数来表示。一般统计的菌落数比活菌的实际数目低，为什么？因为当两个或多个细菌连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落。三

7、.微生物的数量测定3计数方法(2)显微镜直接计数法：是一种常用的、快速直观的测定微生物数量的方法。统计的结果一般是活菌数和死菌数的总和。微生物的计数方法比较内容直接计数法间接计数法主要用具计数依据优点缺点计算公式微生物的计数方法比较内容直接计数法间接计数法主要用具显微镜、细菌计数板或血细胞计数板涂布器计数依据细菌个数培养基上菌落数优点计数方便、操作简单计数的是活菌缺点不能区分死菌与活菌操作较复杂且有一定误差计算公式每毫升原液含菌株数4001 000每小格平均菌株数稀释倍数每毫升原液含菌株数平均菌落数/所用涂布液体积稀释倍数探究实践 P191.结合对照组，分析培养物中是否有杂菌污染以及选择培养基

8、是否筛选出一些菌落。【答案】如果没有接种的培养基上没有菌落生长，说明培养基没有被杂菌污染。如果接种后的完全培养基上的菌落数明显多于选择培养基上的菌落数，说明选择培养基筛选出了一些尿素分解菌。2.你是否获得了某一稀释度下菌落数 为30300的平板？在这一稀释度下，是否至少有2个平板的菌落数接近？【提示】如果得到了两个或多个菌落数为30-300的平板，说明稀释度合适，操作比较成功，能够进行菌落的计数。探究实践 P193.你统计的每克土样中能分解尿素的细菌的菌落数是多少？与其他同学统计的结果接近吗？如果差异很大，可能是什么原因引起的？【提示】如果是用同一土样进行的操作，数据应该比较接近。如果差异很大，就需要从操作是否规范、培养基配制是否合理等方面查找原因。尿素CO(NH2)2谢谢观看！