【教学课件】第十八章体液免疫球蛋白测定.ppt

《【教学课件】第十八章体液免疫球蛋白测定.ppt》由会员分享，可在线阅读，更多相关《【教学课件】第十八章体液免疫球蛋白测定.ppt（28页珍藏版）》请在淘文阁 - 分享文档赚钱的网站上搜索。

1、第十八章第十八章 体液免疫球蛋白测体液免疫球蛋白测定定 第一节第一节 血清血清IgGIgG、IgAIgA、IgM IgM 测定测定 一、血清一、血清IgGIgG、IgAIgA、IgMIgM测定测定 二、血清二、血清IgGIgG、IgAIgA、IgMIgM测定的临床意义测定的临床意义 第二节第二节 血清血清IgDIgD和和IgEIgE测定测定 一、一、IgDIgD测定及临床意义测定及临床意义 二、二、IgEIgE测定及临床意义测定及临床意义 第三节第三节 尿液及脑脊液尿液及脑脊液IgIg测定测定 一、尿液一、尿液IgIg测定及临床意义测定及临床意义 二、脑脊液二、脑脊液IgIg测定及临床意义测定

2、及临床意义 第四节第四节 血清血清IgGIgG亚类测定及临床意义亚类测定及临床意义 第五节第五节 M M蛋白测定及临床意义蛋白测定及临床意义 第六节第六节 轻链测定及临床意义轻链测定及临床意义 第七节第七节 冷球蛋白的检测冷球蛋白的检测 思考题思考题小结小结v免疫球蛋白（免疫球蛋白（Ig）：）：抗体活性、化学结构与抗体相似抗体活性、化学结构与抗体相似v重重 链链 性性 质质，I g分分 5类类：IgG()、IgA()、IgM()、IgD()、IgE()v轻链性质，轻链性质，Ig分分2型：型：、vIg占血浆蛋白总量：占血浆蛋白总量：20%v检测意义：反应机体的免疫功能、诊断疾病检测意义：反应机体

3、的免疫功能、诊断疾病vIg含量：血清含量：血清 IgG、IgA、IgM：g/L、IgD、IgE：mg/L 体液体液 IgG、IgA、IgM：mg/L 第一节第一节 血清血清IgGIgG、IgAIgA、IgM IgM 测定测定 IgGIgG是血清中含量最高的免疫球蛋白，是血液和细胞是血清中含量最高的免疫球蛋白，是血液和细胞外液中的主要抗体，也是机体再次免疫的主要抗体。外液中的主要抗体，也是机体再次免疫的主要抗体。IgA IgA分为血清型和分泌型，是参与黏膜局部免疫的主分为血清型和分泌型，是参与黏膜局部免疫的主要抗体，主要存在于胃肠道和支气管分泌液、初乳、要抗体，主要存在于胃肠道和支气管分泌液、初

4、乳、唾液和泪液中。唾液和泪液中。IgM IgM是分子量最大的免疫球蛋白，是个体发育过程中是分子量最大的免疫球蛋白，是个体发育过程中最早合成和分泌的抗体，也是抗原刺激诱导的体液免最早合成和分泌的抗体，也是抗原刺激诱导的体液免疫应答中最早出现的抗体。疫应答中最早出现的抗体。一、血清一、血清IgGIgG、IgAIgA、IgMIgM测定测定测定方法测定方法 单向环状免疫扩散法单向环状免疫扩散法 免疫浊度法免疫浊度法原理原理误差主要原因误差主要原因评价评价 单向环状免疫扩散法示意图单向环状免疫扩散法示意图 原理原理 误差主要原因误差主要原因 评价评价 单向环状免疫扩散法单向环状免疫扩散法免疫浊度法免疫浊

5、度法 直接透射比浊法直接透射比浊法 速率散射比浊法速率散射比浊法 注意点注意点 评价评价二、血清二、血清IgGIgG、IgAIgA、IgMIgM测定的临床意义测定的临床意义低低IgIg血症血症:先天性低Ig血症（免疫缺陷病）；获得性低Ig血症(蛋白丢失).高高IgIg血症血症:多克隆Ig增高（感染）；单克隆Ig增高（免疫增殖病）.第二节第二节 血清血清IgDIgD、IgEIgE测定测定 正常人血清中正常人血清中IgD含量很低，膜结合型含量很低，膜结合型IgD(mIgD)构成构成BCR，是，是B细胞分化发育成熟细胞分化发育成熟的标志。的标志。IgE是正常人血清中含量最少的免疫球蛋白，是正常人血清

6、中含量最少的免疫球蛋白，主要由黏膜下淋巴组织中的浆细胞分泌，为主要由黏膜下淋巴组织中的浆细胞分泌，为亲细胞抗体，引起亲细胞抗体，引起I型超敏反应；与机体抗寄型超敏反应；与机体抗寄生虫免疫也可能有关。生虫免疫也可能有关。一、一、血清血清IgDIgD测定及临床意义测定及临床意义 测定方法：测定方法：放射免疫分析法放射免疫分析法 化学发光免疫分析法化学发光免疫分析法 免疫比浊法免疫比浊法 酶联免疫吸附法酶联免疫吸附法 IgD IgD：生物功能不详：生物功能不详 增高：增高：类风湿性关节炎、变态反应性疾病、类风湿性关节炎、变态反应性疾病、败血症、新生儿溶血病败血症、新生儿溶血病 降低：降低：意义不大意

7、义不大二、二、血清血清IgEIgE测定及临床意义测定及临床意义测定方法测定方法总总IgEIgE测定：测定：放射免疫分析法 化学发光免疫分析法 免疫比浊法 酶联免疫吸附法特异性特异性IgEIgE测定：测定：免疫斑点法 酶联免疫吸附法IgEIgE临床意义：临床意义：增高：增高：变态反应性疾病、寄生虫变态反应性疾病、寄生虫感染、病毒感染、自身免疫性疾病。感染、病毒感染、自身免疫性疾病。降低：降低：意义不大意义不大第三节第三节 尿液及脑脊液尿液及脑脊液IgIg测定测定 正常人尿液中的正常人尿液中的IgIg含量甚微，当机体的免疫含量甚微，当机体的免疫功能异常或炎症反应引起肾脏疾病时，可导致功能异常或炎症

8、反应引起肾脏疾病时，可导致肾小球滤过膜分子屏障破坏或电荷屏障受损，肾小球滤过膜分子屏障破坏或电荷屏障受损，从而引起球蛋白及其他大分子蛋白质漏出增多。从而引起球蛋白及其他大分子蛋白质漏出增多。生理情况下，生理情况下，IgIg根据其分子量大小，通过血根据其分子量大小，通过血脑屏障的难易度不同，脑屏障的难易度不同，IgGIgG、IgAIgA、IgMIgM在脑脊液在脑脊液中的浓度递减。病理状态时，脑脊液组分发生中的浓度递减。病理状态时，脑脊液组分发生改变。改变。一、尿液一、尿液IgIg测定及临床意义测定及临床意义尿液：尿液：肾小球滤膜受损程度：肾小球滤膜受损程度：选择性蛋白尿指数选择性蛋白尿指数 增高

9、有临床意义：增高有临床意义：肾病、免疫增殖病肾病、免疫增殖病 可根据尿内可根据尿内IgIg增高的类型帮助鉴别诊增高的类型帮助鉴别诊 断肾小球疾病的种类断肾小球疾病的种类二、脑脊液二、脑脊液IgIg测定及临床意义测定及临床意义脑脊液：脑脊液：血脑屏障受损程度：血脑屏障受损程度：白蛋白商值、白蛋白商值、CSF-IgGCSF-IgG指数指数 增高有临床意义：增高有临床意义：多发性硬化症、中枢神经系多发性硬化症、中枢神经系 统感染统感染第四节第四节 血清血清IgGIgG亚类测定及临床意义亚类测定及临床意义IgIg亚类：亚类：IgG1IgG1、IgG2IgG2、IgG3IgG3、IgG4IgG4，其含量

10、依次下降，其含量依次下降测定方法：测定方法：单向免疫扩散法单向免疫扩散法 免疫比浊法（常用）免疫比浊法（常用）放射免疫分析法放射免疫分析法 酶联免疫吸附法酶联免疫吸附法临床意义：临床意义：IgGIgG亚类的含量随年龄的不同而变化亚类的含量随年龄的不同而变化 免疫缺陷病降低明显免疫缺陷病降低明显 第五节第五节 M蛋白测定及临床意义蛋白测定及临床意义 M蛋白：蛋白：B淋巴细胞或浆细胞单克隆异常增殖产生的淋巴细胞或浆细胞单克隆异常增殖产生的异常单克隆免疫球蛋白异常单克隆免疫球蛋白 临床上多见于多发性骨髓瘤、高丙种球蛋白临床上多见于多发性骨髓瘤、高丙种球蛋白血症、恶性淋巴瘤、重链病、轻链病等血症、恶性

11、淋巴瘤、重链病、轻链病等 M M蛋白测定蛋白测定蛋白区带电泳：经典方法蛋白区带电泳：经典方法 计算蛋白含量和百分比计算蛋白含量和百分比免疫比浊法：免疫比浊法：免疫球蛋白定量免疫球蛋白定量 准确性高、快速准确性高、快速免疫电泳：免疫电泳：M M蛋白分型蛋白分型免疫固定电泳：免疫固定电泳：M M蛋白分型及鉴定，分辨蛋白分型及鉴定，分辨 率高率高GAMIgG-型M蛋白Marker 免疫固定电泳模式图免疫固定电泳模式图第六节第六节 轻链测定及临床意义轻链测定及临床意义本周蛋白的检测本周蛋白的检测 样本：尿液 方法：免疫电泳、加热沉淀（简便易行）IgIg和和-Ig-Ig定量检测定量检测 样本：尿液、血液

12、 方法：单向免疫扩散法、免疫比浊法（常用，准确、快速）应用：应用：M M蛋白血症的分型及鉴定蛋白血症的分型及鉴定第七节第七节 冷球蛋白的检测冷球蛋白的检测冷球蛋白：冷球蛋白：在低温下发生沉淀，加温后又复溶的免疫球蛋白在低温下发生沉淀，加温后又复溶的免疫球蛋白 在低温时产生冷沉淀的机制尚不十分明确在低温时产生冷沉淀的机制尚不十分明确 多数冷球蛋白为免疫复合物，其抗原可以是外源多数冷球蛋白为免疫复合物，其抗原可以是外源 性的，也可以是内源性的性的，也可以是内源性的冷球蛋白的类型及临床意义冷球蛋白的类型及临床意义 I I型：为单克隆冷球蛋白型，占型：为单克隆冷球蛋白型，占25%25%40%;40%;

13、多见多见于免疫增生性疾病于免疫增生性疾病 型：单克隆和多克隆混合型冷球蛋白，占型：单克隆和多克隆混合型冷球蛋白，占15%15%25%;25%;多见于自身免疫性疾病多见于自身免疫性疾病 型：多克隆混合型冷球蛋白，约占型：多克隆混合型冷球蛋白，约占50%;50%;多多见于自身免疫性疾病以及感染性疾病见于自身免疫性疾病以及感染性疾病 1.1.免疫应答主要分为哪几个阶段？免疫应答主要分为哪几个阶段？2.2.什么是免疫球蛋白什么是免疫球蛋白?其分子基本结构其分子基本结构?3.3.免疫球蛋白分类及亚类免疫球蛋白分类及亚类?4.4.血清免疫球蛋白测定方法有哪些血清免疫球蛋白测定方法有哪些?5.5.比较单向免

14、疫扩散法和速率散射比浊法优缺点。比较单向免疫扩散法和速率散射比浊法优缺点。6.6.免疫球蛋白免疫球蛋白IgGIgG、IgAIgA、IgMIgM测定有何临床意义测定有何临床意义？思考题思考题7.7.免疫球蛋白免疫球蛋白IgGIgG亚类测定有何临床意义？亚类测定有何临床意义？8.8.单向免疫扩散测定中有哪些主要影响因素？单向免疫扩散测定中有哪些主要影响因素？9.9.如何保证速率散射比浊法测定结果准确？如何保证速率散射比浊法测定结果准确？10.10.如何评估肾小球滤过膜破坏程度？如何评估肾小球滤过膜破坏程度？11.11.如何判定血脑屏障受损程度？如何判定血脑屏障受损程度？12.12.如何正确选择测定

15、如何正确选择测定M M蛋白的实验项目蛋白的实验项目?n免疫球蛋白是由浆细胞所产生能与相应抗原特免疫球蛋白是由浆细胞所产生能与相应抗原特异性结合的球蛋白异性结合的球蛋白n分为分为IgG IgG、IgAIgA、IgMIgM、IgEIgE和和IgDIgD五类，其相应五类，其相应重链分别称为重链分别称为链、链、链、链、链、链、链和链和链链n轻链分为轻链分为型和型和型，两型轻链无功能差异型，两型轻链无功能差异n免疫球蛋白定量测定方法：免疫球蛋白定量测定方法：单向环状免疫扩散法、火箭免疫电泳法、单向环状免疫扩散法、火箭免疫电泳法、ELISA ELISA、免疫比浊法、放射免疫分析法、免疫比浊法、放射免疫分析

16、法小结小结临床意义：临床意义：n选择性蛋白尿指数来评估肾小球滤过膜破选择性蛋白尿指数来评估肾小球滤过膜破坏程度及观察治疗和预后效果；测定尿液坏程度及观察治疗和预后效果；测定尿液免疫球蛋白含量，来对肾小球疾病类型鉴免疫球蛋白含量，来对肾小球疾病类型鉴别。别。n测定脑脊液蛋白质，对判断测定脑脊液蛋白质，对判断CSFCSF中蛋白质的中蛋白质的来源，区分中枢神经系统疾病类别有着重来源，区分中枢神经系统疾病类别有着重要意义。临床上常通过白蛋白商值和脑脊要意义。临床上常通过白蛋白商值和脑脊液免疫球蛋白指数来反映血脑屏障受损程液免疫球蛋白指数来反映血脑屏障受损程度。度。n血清血清IgGIgG亚类测定对研究免疫缺陷病和超敏亚类测定对研究免疫缺陷病和超敏反应性疾病有重要价值。反应性疾病有重要价值。