课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 (2)(精品).ppt
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1、课题课题课题课题2 2 2 2:土壤中分解尿素的细菌的分离与计数:土壤中分解尿素的细菌的分离与计数:土壤中分解尿素的细菌的分离与计数:土壤中分解尿素的细菌的分离与计数(一)尿素是(一)尿素是(一)尿素是(一)尿素是一种重要的农业一种重要的农业一种重要的农业一种重要的农业氮氮氮氮肥肥肥肥基础知识基础知识基础知识基础知识-解决为什么的问题解决为什么的问题解决为什么的问题解决为什么的问题一、尿素一、尿素一、尿素一、尿素不能直接被农作物吸收(不能直接被农作物吸收(不能直接被农作物吸收(不能直接被农作物吸收(理由呢?理由呢?理由呢?理由呢?)分子式为分子式为分子式为分子式为 COCOCOCO(NHNHN
2、HNH2 2 2 2)2 2 2 2(二)尿素被土壤中的细菌分解成(二)尿素被土壤中的细菌分解成(二)尿素被土壤中的细菌分解成(二)尿素被土壤中的细菌分解成氨氨氨氨之后才能被植物利用之后才能被植物利用之后才能被植物利用之后才能被植物利用 (理由呢?理由呢?理由呢?理由呢?)二、土壤中分解尿素的细菌二、土壤中分解尿素的细菌二、土壤中分解尿素的细菌二、土壤中分解尿素的细菌它们能合成它们能合成它们能合成它们能合成脲酶脲酶脲酶脲酶(一)土壤中能分解尿素的微生物有很多(一)土壤中能分解尿素的微生物有很多(一)土壤中能分解尿素的微生物有很多(一)土壤中能分解尿素的微生物有很多例如:芽孢杆菌、小球菌、假单胞
3、杆菌、克氏杆菌例如:芽孢杆菌、小球菌、假单胞杆菌、克氏杆菌例如:芽孢杆菌、小球菌、假单胞杆菌、克氏杆菌例如:芽孢杆菌、小球菌、假单胞杆菌、克氏杆菌 棒状杆菌、梭状芽孢杆菌棒状杆菌、梭状芽孢杆菌棒状杆菌、梭状芽孢杆菌棒状杆菌、梭状芽孢杆菌(不要记)(不要记)(不要记)(不要记)(一定要记)(一定要记)(一定要记)(一定要记)脲酶脲酶脲酶脲酶+H+H+H+H2 2 2 2O O O O+CO+CO+CO+CO2 2 2 22NH2NH2NH2NH3 3 3 3COCOCOCO(NHNHNHNH2 2 2 2)2 2 2 2(二)细菌能分解尿素的原理(二)细菌能分解尿素的原理(二)细菌能分解尿素的原
4、理(二)细菌能分解尿素的原理三、选择培养基三、选择培养基三、选择培养基三、选择培养基在微生物学中,将在微生物学中,将在微生物学中,将在微生物学中,将允许允许允许允许特定种类的微生物生长,同时特定种类的微生物生长,同时特定种类的微生物生长,同时特定种类的微生物生长,同时抑制或阻止抑制或阻止抑制或阻止抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基其他种类微生物生长的培养基其他种类微生物生长的培养基其他种类微生物生长的培养基即认为提供有利于目的菌株的生长条件(即认为提供有利于目的菌株的生长条件(即认为提供有利于目的菌株的生长条件(即认为提供有利于目的菌株的生长条件(营养、温度、营养、温度、营养、温度、营养、温
5、度、PHPHPHPH)同时抑制或阻止其他微生物生长同时抑制或阻止其他微生物生长同时抑制或阻止其他微生物生长同时抑制或阻止其他微生物生长(一)、概念(一)、概念(一)、概念(一)、概念(二)、配制方法(二)、配制方法(二)、配制方法(二)、配制方法1 1 1 1、在培养基全部营养成分具备的前提下加入、在培养基全部营养成分具备的前提下加入、在培养基全部营养成分具备的前提下加入、在培养基全部营养成分具备的前提下加入特殊物质特殊物质特殊物质特殊物质例如:加入青霉素、加入高浓度食盐例如:加入青霉素、加入高浓度食盐例如:加入青霉素、加入高浓度食盐例如:加入青霉素、加入高浓度食盐2 2 2 2、改变改变改变
6、改变培养基培养基培养基培养基成分成分成分成分例如:改变碳源、改变氮源例如:改变碳源、改变氮源例如:改变碳源、改变氮源例如:改变碳源、改变氮源3 3 3 3、通过、通过、通过、通过特殊环境特殊环境特殊环境特殊环境例如:高盐、高温、有氧、无氧、特定例如:高盐、高温、有氧、无氧、特定例如:高盐、高温、有氧、无氧、特定例如:高盐、高温、有氧、无氧、特定PHPHPHPH分离微生物分离微生物分离微生物分离微生物请阅读课本请阅读课本2121页,了解科学家是怎样分离获得耐高温页,了解科学家是怎样分离获得耐高温TaqDNATaqDNA聚合酶的?聚合酶的?方法一:活菌计数法方法一:活菌计数法方法一:活菌计数法方法
7、一:活菌计数法-稀释涂布平板法(稀释涂布平板法(稀释涂布平板法(稀释涂布平板法(重点重点重点重点)(1 1 1 1)原理:)原理:)原理:)原理:在稀释度足够高时,微生物在固体培养基上所形成在稀释度足够高时,微生物在固体培养基上所形成在稀释度足够高时,微生物在固体培养基上所形成在稀释度足够高时,微生物在固体培养基上所形成的一个菌落是由一个单细胞繁殖而成的,即一个菌落代表原先的的一个菌落是由一个单细胞繁殖而成的,即一个菌落代表原先的的一个菌落是由一个单细胞繁殖而成的,即一个菌落代表原先的的一个菌落是由一个单细胞繁殖而成的,即一个菌落代表原先的一个微生物(细菌)一个微生物(细菌)一个微生物(细菌)
8、一个微生物(细菌)(2 2 2 2)每克样品中的菌落数)每克样品中的菌落数)每克样品中的菌落数)每克样品中的菌落数(C(C(C(CV)V)V)V)M M M M C C C C代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数,代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数,代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数,代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数,V V V V代表涂布平板时所用的稀释液的体积代表涂布平板时所用的稀释液的体积代表涂布平板时所用的稀释液的体积代表涂布平板时所用的稀释液的体积(ml)(ml)(ml)(ml),M M M M代表稀释倍数代表稀释倍数代表稀释倍数代表稀释倍数四、微生物的计数四、微生物
9、的计数四、微生物的计数四、微生物的计数 (3 3 3 3)缺点:偏小?)缺点:偏小?)缺点:偏小?)缺点:偏小?当二个或多个细胞连在一起时,平板上观察到的是一个菌落当二个或多个细胞连在一起时,平板上观察到的是一个菌落当二个或多个细胞连在一起时,平板上观察到的是一个菌落当二个或多个细胞连在一起时,平板上观察到的是一个菌落方法二:显微镜直接计数法方法二:显微镜直接计数法方法二:显微镜直接计数法方法二:显微镜直接计数法(课本(课本(课本(课本22222222倒数第七行)倒数第七行)倒数第七行)倒数第七行)利用利用利用利用血球计数板血球计数板血球计数板血球计数板,在显微镜下计算一定容积里样品中微生物的
10、数量,在显微镜下计算一定容积里样品中微生物的数量,在显微镜下计算一定容积里样品中微生物的数量,在显微镜下计算一定容积里样品中微生物的数量缺点:缺点:缺点:缺点:不能区分死菌与活菌不能区分死菌与活菌不能区分死菌与活菌不能区分死菌与活菌不适于对运动细菌的计数不适于对运动细菌的计数不适于对运动细菌的计数不适于对运动细菌的计数需要相对高的细菌浓度需要相对高的细菌浓度需要相对高的细菌浓度需要相对高的细菌浓度个体小的细菌在显微镜下难以观察个体小的细菌在显微镜下难以观察个体小的细菌在显微镜下难以观察个体小的细菌在显微镜下难以观察四、微生物的计数四、微生物的计数四、微生物的计数四、微生物的计数合作学习合作学习
11、合作学习合作学习分析下列材料分析下列材料分析下列材料分析下列材料第一位同学只涂布一个平板,没有第一位同学只涂布一个平板,没有第一位同学只涂布一个平板,没有第一位同学只涂布一个平板,没有重复组重复组重复组重复组,结果不具有说服力,结果不具有说服力,结果不具有说服力,结果不具有说服力第二位同学设置了重复组,涂布了第二位同学设置了重复组,涂布了第二位同学设置了重复组,涂布了第二位同学设置了重复组,涂布了3 3 3 3个平板,个平板,个平板,个平板,但其中但其中但其中但其中1 1 1 1个平板的计数结果与另个平板的计数结果与另个平板的计数结果与另个平板的计数结果与另2 2 2 2个相差太远,个相差太远
12、,个相差太远,个相差太远,说明在说明在说明在说明在操作过程中可能出现了错误操作过程中可能出现了错误操作过程中可能出现了错误操作过程中可能出现了错误,因此,不能简单地将因此,不能简单地将因此,不能简单地将因此,不能简单地将3 3 3 3个平板的计数值用来求平均值个平板的计数值用来求平均值个平板的计数值用来求平均值个平板的计数值用来求平均值启示启示启示启示:在设计实验时,一定要涂布至少三个平板,作为重复组,:在设计实验时,一定要涂布至少三个平板,作为重复组,:在设计实验时,一定要涂布至少三个平板,作为重复组,:在设计实验时,一定要涂布至少三个平板,作为重复组,增强实验的说服力和可信度增强实验的说服
13、力和可信度增强实验的说服力和可信度增强实验的说服力和可信度合作学习合作学习合作学习合作学习分析下列材料分析下列材料分析下列材料分析下列材料A A A A同学同学同学同学没有设置对照组没有设置对照组没有设置对照组没有设置对照组,结果不具有说服力,结果不具有说服力,结果不具有说服力,结果不具有说服力启示启示启示启示:在设计实验时,一定要设置对照组,排除:在设计实验时,一定要设置对照组,排除:在设计实验时,一定要设置对照组,排除:在设计实验时,一定要设置对照组,排除非测试因素非测试因素非测试因素非测试因素对对对对 实验的影响,增强实验的说服力和可信度实验的影响,增强实验的说服力和可信度实验的影响,增
14、强实验的说服力和可信度实验的影响,增强实验的说服力和可信度五、设置对照与重复五、设置对照与重复五、设置对照与重复五、设置对照与重复(一)对照实验的概念(一)对照实验的概念(一)对照实验的概念(一)对照实验的概念除了被测试因素外,除了被测试因素外,除了被测试因素外,除了被测试因素外,其他条件都相同其他条件都相同其他条件都相同其他条件都相同的实验的实验的实验的实验(二)设置对照实验的目的(二)设置对照实验的目的(二)设置对照实验的目的(二)设置对照实验的目的排除排除排除排除实验组中实验组中实验组中实验组中非测试因素非测试因素非测试因素非测试因素对实验结果的影响对实验结果的影响对实验结果的影响对实验
15、结果的影响怎么解决怎么解决怎么解决怎么解决A A A A同学和其他同学之间的问题?同学和其他同学之间的问题?同学和其他同学之间的问题?同学和其他同学之间的问题?方案一方案一方案一方案一由其他同学用与由其他同学用与由其他同学用与由其他同学用与A A A A同学一样的土样进行实验,如果结果同学一样的土样进行实验,如果结果同学一样的土样进行实验,如果结果同学一样的土样进行实验,如果结果与与与与A A A A同学一致,则证明同学一致,则证明同学一致,则证明同学一致,则证明A A A A无误;如果结果不同,则证明无误;如果结果不同,则证明无误;如果结果不同,则证明无误;如果结果不同,则证明A A A A
16、同学存在操作失误或培养基的配制有问题。同学存在操作失误或培养基的配制有问题。同学存在操作失误或培养基的配制有问题。同学存在操作失误或培养基的配制有问题。方案二方案二方案二方案二将将将将A A A A同学配制的培养基在不加土样的情况下进行培养,同学配制的培养基在不加土样的情况下进行培养,同学配制的培养基在不加土样的情况下进行培养,同学配制的培养基在不加土样的情况下进行培养,作为空白对照,以证明培养基是否受到污染作为空白对照,以证明培养基是否受到污染作为空白对照,以证明培养基是否受到污染作为空白对照,以证明培养基是否受到污染设置重复组设置重复组设置重复组设置重复组设置对照组设置对照组设置对照组设置
17、对照组小结:排除其它因素影响,提高实验可信度的方案小结:排除其它因素影响,提高实验可信度的方案小结:排除其它因素影响,提高实验可信度的方案小结:排除其它因素影响,提高实验可信度的方案基础知识小结基础知识小结基础知识小结基础知识小结一、尿素一、尿素一、尿素一、尿素二、土壤中分解尿素的细菌二、土壤中分解尿素的细菌二、土壤中分解尿素的细菌二、土壤中分解尿素的细菌三、选择培养基三、选择培养基三、选择培养基三、选择培养基四、微生物的计数四、微生物的计数四、微生物的计数四、微生物的计数五、设置对照与重复五、设置对照与重复五、设置对照与重复五、设置对照与重复实验设计实验设计实验设计实验设计-解决怎么操作的问
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